非酒精性脂肪性肝炎病理改变对肝脏剪切波速度的影响

目的探讨影响非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者肝脏剪切波速度(SWV)的病理因素。方法选择上海中医药大学附属曙光医院肝病科经肝组织穿刺活检诊断的NASH患者43例,其中男性28例,女性15例;年龄38~64岁,平均年龄48.61岁;轻度脂肪肝14例(S1组),中度脂肪肝23例(S2组),重度脂肪肝6例(S3组)。所有患者超声引导下穿刺活检前,均进行肝脏常规超声检查及声触诊组织定量分析(VTQ)。根据病理结果回顾性分析纤维化、脂肪浸润程度及炎症对NASH患者肝脏SWV的影响。结果经肝组织穿刺活检诊断的NASH患者43例,其中早期NASH 26例,纤维化性NASH 13例,肝硬化4例,不同时期的NASH肝脏SWV差异有统计学意义[早期NASH组与纤维化NASH组(1.15±0.10)m/s vs(1.25±0.10)m/s。P<0.01。早期NASH组与NASH肝硬化组(1.15±0.10)m/s vs(1.44±0.21)m/s。P<0.01。纤维化性NASH组与NASH肝硬化组(1.25±0.10)m/s vs(1.44±0.21)m/s。P=0.00]。比较各组脂肪含量不同肝脏SWV,S3组与S1组、S2组SWV的差异有统计学意义[(1.34±0.06)m/s vs(1.13±0.08)m/s,(1.34±0.06)m/s vs(1.21±0.16)m/s。P均<0.05]。根据炎症程度分为小叶炎症16例(G1组)、小叶炎症合并门静脉炎症20例(G2组)和小叶炎症合并小叶间炎症(或桥接坏死)7例(G3组),不同炎症程度NASH肝脏SWV之间差异有统计学意义[G3 vs G1(1.43±0.12)m/s vs(1.15±0.09)m/s;G3 vs G2(1.43±0.12)m/s vs(1.17±0.09)m/s。P均<0.01]。结论肝脏纤维化是影响NASH患者肝脏SWV值的重要因素,其次是脂肪肝的程度,炎症对NASH患者肝脏SWV值的影响最小。以上结果可为今后临床无创性评估NASH程度提供客观依据。

非酒精性脂肪性肝炎患者血清Nrf2、AOPP水平与血脂、肝纤维化的关系

目的探讨非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者血清核因子E2相关因子2(Nrf2)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平与血脂、肝纤维化的关系。方法选择重庆医科大学附属璧山医院收治的104例NASH患者作为研究组,另选90例体检健康者作为对照组。检测并比较各组血清Nrf2、AOPP水平,采用Pearson或Spearman相关分析NASH患者血清Nrf2、AOPP水平与血脂、肝纤维化的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清Nrf2、AOPP水平对NASH的诊断价值。结果研究组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、Nrf2、AOPP水平均高于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显低于对照组(P<0.05)。重度组血清Nrf2、AOPP水平高于中度组、轻度组(P<0.05),中度组血清Nrf2、AOPP水平高于轻度组(P<0.05)。相关分析结果显示,NASH患者血清Nrf2、AOPP水平与TG、TC、LDL-C、肝纤维化程度均呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05)。血清Nrf2诊断NASH的曲线下面积(AUC)为0.830(95%CI 0.780~0.880),血清AOPP诊断NASH的AUC为0.866(95%CI 0.816~0.916),二者联合诊断NASH的AUC为0.925(95%CI 0.875~0.975)。结论NASH患者血清Nrf2、AOPP水平均升高,且二者水平与血脂、肝纤维化程度均存在密切关系,有望作为诊断NASH发生的有效指标。

微生态制剂对非酒精性脂肪性肝炎患者临床作用的研究

目的 观察微生态制剂辅助治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者的临床效果。方法 将我院2019年1月至2020年1月门诊及住院的诊断为NASH的102例患者纳入研究,随机分为对照组和治疗组。所有患者均通过结构化方案改变生活方式,采用饮食治疗和运动治疗相结合的策略。治疗组患者另外口服微生态制剂(枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊),比较两组患者治疗前后体质量指数、腰围、脂肪肝程度、肝酶、空腹血糖(FPG)、血脂指标、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内毒素(LPS)水平。结果 治疗后两组患者体质量指数、腰围均明显降低,脂肪肝程度亦有明显好转,但治疗组与对照组无显著差异。空腹血糖、血清肝酶、血脂、TNF-α、LPS水平均低于治疗前,且治疗组与对照组亦有显著差异,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 微生态制剂枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊治疗NASH可显著改善脂肪肝程度及肝功能、血脂指标及降低内毒素、炎症因子等,值得临床推广应用。

超声联合弹性成像炎症活动度相关A指数在诊断非酒精性脂肪性肝炎中的价值

目的:探索超声联合弹性成像炎症活动度相关A指数对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的诊断效能。方法:回顾分析代谢减重中心2020年10月—2021年4月住院患者的临床基线、超声联合弹性成像A指数、实验室检查和肝脏组织病理学数据。比较NASH组和非NASH组的临床特征及实验室检查。以病理诊断为金标准,分析NASH组和非NASH组A指数的差异,绘制受试者操作特征曲线,探索A指数对于NASH的诊断效能。结果:纳入研究的53名患者中,NASH组有18例,非NASH组35例,平均年龄34.8±9.3岁。平均体重指数(BMI)为37.0±5.5kg/m^(2)。A指数的中位数为1.02,范围0.62~1.33。NASH组和非NASH组A指数比较,差异有统计学意义(P=0.000)。A指数诊断NASH的曲线下面积(AUC)为0.889。临界值为1.035时,诊断的灵敏度为0.722,特异度为0.800。结论:联合弹性成像炎症活动度相关A指数能够较好地鉴别非酒精性脂肪肝病中的单纯性脂肪肝和NASH,具有较高的临床应用价值。

泽曲明山复方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型影响

目的泽曲明山复方是辽宁省名中医卢秉久教授治疗代谢相关性脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)的经验方。研究基于PI3K/AKT/mTOR通路探讨该经验方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)模型的影响。方法适应性饲养1周后,所有SD大鼠随机分为5组:对照组,模型组,中药低、高剂量组及水林佳组。对照组给予胆碱充足高脂饲料(choline-sufficient high fat diet,CSHF饲料)。其余4组大鼠给予胆碱缺乏高脂饲料(choline-deficiency high fat diet,CDHF饲料)8周建立NASH模型,建立模型同时给予对应药物干预。观察相应药物对模型大鼠血清生化学指标、肝脏病理学检查、PI3K/AKT/mTOR信号转导通路mRNA以及蛋白表达的影响。结果(1)体质量以及肝脏系数:5组大鼠体质量比较差异无统计学意义;与对照组比较,模型组大鼠肝脏系数显著升高;与模型组比较,各药物干预组大鼠肝脏系数不同程度下降,中药高剂量组疗效最为明显。(2)肝功能以及血脂:与对照组比较,模型组大鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(cholesterol,CHOL)水平显著升高;与模型组比较,各药物干预组大鼠肝功能以及血脂指标水平不同程度降低,其中中药高剂量组疗效最为明显。(3)肝脏病理学检查:模型组大鼠肝脏HE染色可见胞质内大量脂肪空泡以及炎症细胞浸润;Sirius red染色可见中央静脉大量纤维组织沉积,证实造模成功;与模型组比较,各药物干预组大鼠肝脏HE以及Sirius red染色显示肝脏组织均有不同程度改善,中药高剂量组改善最为明显。(4)肝脏相关mRNA及蛋白表达:与对照组比较,模型组大鼠肝脏组织中PI3K、AKT以及mTOR mRNA表达明显升高;与模型组比较,各药物干预组mRNA表达有不同程度下调,其中中药高剂量组最为明显。与对照组比较,模型组大鼠肝脏组织中PI3K以及mTOR蛋白表达上调;与模型组比较,各药物干预组蛋白表达均有不同程度下降,其中中药高剂量组改善最为显著(P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠肝脏组织中PPARγ蛋白表达下降;与模型组比较,各药物干预组蛋白表达均有不同程度上调,其中水林佳组改善最为显著。免疫荧光方法检测肝脏组织中PPARγ蛋白表达,结果显示模型组荧光信号表达暗淡;中药组荧光信号表达略亮;水林佳组荧光信号表达较亮。结论泽曲明山复方通过保护肝功能、调节血脂、改善肝脏病理、抑制PI3K/AKT/mTOR通路表达、上调PPARγ表达等方面治疗NASH。

健脾理气化湿方对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝细胞损伤、氧化应激和硝化应激的影响

目的观察健脾理气化湿方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝细胞损伤、氧化应激和硝化应激的影响,探讨其治疗NASH的作用机制。方法32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和中药低、高剂量组,每组8只。对照组予普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料喂养,连续16周。第13周开始,对照组和模型组予0.4%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,中药低、高剂量组分别予相应剂量药物灌胃。生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,HE染色、油红O染色观察肝脏组织病理变化,试剂盒检测肝组织三酰甘油(TG)含量和髓过氧化物酶(MPO)活性,免疫荧光染色检测肝组织CD11b阳性表达,RT-PCR检测肝组织NADPH氧化酶1(NOX1)、中性粒细胞胞浆因子1(NCF1)mRNA表达,Western blot检测肝组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、3-硝基酪氨酸(3-NT)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠肝细胞弥漫性脂肪变性,肝细胞肿胀、有明显炎性细胞浸润,油红O染色见大量脂滴形成;血清ALT、AST含量显著升高(P<0.05),肝组织TG含量、MPO活性显著升高(P<0.05),CD11b阳性表达升高,肝组织NOX1、NCF1 mRNA表达显著升高(P<0.05),iNOS、3-NT蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,中药低、高剂量组小鼠肝脏脂肪变性、炎性细胞浸润减轻,脂滴明显减少;血清ALT、AST含量显著降低(P<0.05),肝组织TG含量、MPO活性显著降低(P<0.05),CD11b阳性表达降低,肝组织NOX1、NCF1 mRNA表达显著降低(P<0.05),3-NT蛋白表达显著降低(P<0.05),中药高剂量组小鼠肝组织i NOS蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论健脾理气化湿方可能通过减轻肝脏氧化应激和硝化应激,减轻NASH小鼠肝细胞损伤、脂质沉积和炎症反应,发挥治疗NASH作用。

清热渗湿降浊法联合水飞蓟宾葡甲胺片治疗湿热蕴结型非酒精性脂肪性肝炎临床疗效观察

【目的】探讨清热渗湿降浊法联合水飞蓟宾葡甲胺片治疗丙氨酸氨基转移酶(ALT)异常的湿热蕴结型非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者的临床疗效。【方法】采用回顾性研究方法,根据用药情况将80例ALT异常的湿热蕴结型NASH患者分为对照组和观察组,每组各40例。对照组给予水飞蓟宾葡甲胺片治疗,观察组在对照组的基础上联合清热渗湿降浊法治疗,疗程为12周。观察2组患者治疗前后肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)]、血脂指标[总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TRIG)]以及肝脂肪度的变化情况,并评价2组患者的临床疗效及安全性。【结果】(1)经治疗12周后,观察组的总有效率为95.00%(38/40),对照组为77.50%(31/40);组间比较,观察组的疗效明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的肝功能指标ALT、AST、GGT水平均较治疗前明显下降(P<0.05),且观察组对肝功能指标ALT、AST、GGT水平的下降作用均明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后,2组患者的血脂指标CHOL、TRIG水平均较治疗前明显下降(P<0.05),且观察组对血脂指标CHOL、TRIG水平的下降作用均明显优于对照组(P<0.05)。(4)治疗后,2组患者的肝脂肪度均较治疗前明显下降(P<0.05),且观察组对肝脂肪度的下降作用明显优于对照组(P<0.05)。(5)治疗过程中,2组患者均未发生明显不良反应,具有较高的安全性。【结论】清热渗湿降浊法联合水飞蓟宾葡甲胺片治疗ALT异常的湿热蕴结型NASH患者疗效确切,联合清热渗湿降浊法治疗能显著提高临床疗效。

黄连素通过抑制氧化应激和内质网应激减轻非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝脏炎症

目的从氧化应激和内质网应激的角度探讨黄连素(BBR)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝脏炎症的减轻作用。方法将24只C57BL/6J小鼠随机分为4组,NASH和NASH+BBR组小鼠饲喂高脂高果糖高胆固醇饲料28周以诱导NASH疾病模型,正常维持饲料(CD)和CD+BBR组小鼠给予正常维持饲料,在造模的第25周开始给予CD+BBR组和NASH+BBR组每日1次200 mg/(kg·d)的BBR灌胃,治疗共持续4周。记录小鼠每周体质量;给药第3周时进行葡萄糖耐量实验和胰岛素抵抗实验;治疗结束后检测血清ALT、AST、甘油三酯、总胆固醇、LDL-C、HDL-C含量,检测肝脏甘油三酯及总胆固醇含量;对肝脏进行HE、油红O和Masson染色;qPCR法检测肝脏组织炎症因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平;比色法检测肝脏组织氧化应激指标丙二醛、总超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力水平;蛋白免疫印迹法检测肝脏组织内质网应激相关通路蛋白表达水平。结果成功构建NASH小鼠疾病模型。与NASH组小鼠比较,经过BBR治疗,抑制NASH+BBR组小鼠体质量增加,改善糖耐量异常情况,增加胰岛素敏感性,改善肝功能及高脂血症(P均<0.05);肝脏病理切片可见脂肪变性减轻,炎性细胞浸润减少,但纤维化无改善作用;肝脏炎症因子mRNA表达水平下降(P均<0.05);肝脏组织氧化应激因子丙二醛水平下降,抗氧化因子总超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力水平升高(P均<0.05);内质网应激标志物GRP78蛋白表达量及PERK/eIF2α/ATF4/CHOP内质网应激信号通路下调(P均<0.05)。结论BBR治疗能够改善NASH小鼠的超重、糖脂代谢紊乱和肝功能异常问题,能够减轻肝脏脂肪变性及炎症情况,但对纤维化无改善。BBR减轻NASH炎症反应的可能机制是抑制肝脏的氧化应激和内质网应激。

白杨素减轻非酒精性脂肪性肝炎小鼠脂肪变性及血脂异常

目的:探究白杨素对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的治疗作用。方法:将8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组和白杨素组。除对照组给予普通饲料外,其余各组给予蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饲料喂养。造模5周后灌胃,白杨素组给予白杨素(20 mg/kg),对照组和模型组给予同体积生理盐水,连续给药6周。实验期间观察小鼠状态;处死后观察小鼠肝脏形态;检测体质量和肝脏湿重;用生化分析仪检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平;用试剂盒检测肝脏组织中TG和TC含量;采用苏木素-伊红(HE)染色和F4/80免疫组化染色探究白杨素对NASH中肝细胞损伤和炎症的影响;用油红O染色探究肝脏脂质沉积的程度;Masson和天狼星红染色检测肝纤维化;免疫组化法检测纤维化相关分子的表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠体重和肝脏湿重明显下降,肝脏体积减小,呈黄色,可见黄色脂肪斑,边缘钝;血清TG、LDL-C、ALT和AST水平,以及肝组织TG和TC水平显著升高,HDL-C水平降低;病理染色结果显示有明显的炎症细胞浸润、脂质沉积及肝脏纤维化。与模型组相比,白杨素组小鼠体重和肝重均有升高,肝脏红润,表面相对光滑,肝缘锐利;血清TG、LDL-C、AST和ALT水平,以及肝组织TG水平显著降低;白杨素可抑制炎症细胞浸润、脂质沉积及肝组织纤维化。结论:白杨素可抑制肝脏脂肪变性、炎症及纤维化,有潜力成为治疗NASH的候选药物。

吡格列酮对非酒精性脂肪性肝炎小鼠NLRP3炎症小体的影响

目的通过观察吡格列酮对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝脏核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症小体信号通路的影响,探讨吡格列酮防治NASH的机制。方法18只6~7周龄SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(NC组)、NASH模型组(HFD组)及吡格列酮干预组(PIO组),每组6只。采用各自的喂食方案饲养16周,随后PIO干预组给予PIO灌胃,NC组和HFD组灌胃给予等体积生理盐水作为安慰剂,连续干预6周。检测血清空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,HE及油红O染色观察肝组织病理变化,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肝组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的mRNA水平,免疫组化和蛋白免疫印迹(Western blot)检测肝组织NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白表达。结果与NC组比较,HFD组小鼠的血清FBG、TC、TG、ALT、AST含量明显升高(均P<0.05),肝细胞脂质沉积明显,肝组织Nlrp3、Asc mRNA表达水平明显增加,NLRP3、caspase-1、IL-1β的蛋白水平亦增加(均P<0.05);经吡格列酮干预后,PIO组小鼠的血清FBG、TC、TG、ALT、AST含量较HFD组明显降低(均P<0.05),肝细胞脂质沉积显著改善,肝组织Nlrp3、Asc mRNA水平明显下降,NLRP3、caspase-1、IL-1β的蛋白表达明显下调(均P<0.05)。结论吡格列酮可有效减轻高脂饮食诱导的NASH小鼠肝脏炎症,其机制可能与抑制肝脏NLRP3炎症小体激活及IL-1β的产生有关。

大黄■虫丸治疗非酒精性脂肪性肝炎痰瘀互结证的临床疗效与安全性

目的:观察大黄■虫丸治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)痰瘀互结证的临床疗效与安全性。方法:选取2020年5月11日至2022年1月20日四川大学华西医院收治的NASH患者,均辨证为痰瘀互结证的患者216例作为研究对象,采用区组随机化方法分为对照组和观察组,每组108例,观察组脱失10例,对照组脱失9例。对照组接受健康宣教,根据病情给予降压、降糖、调脂、保肝降酶等标准化基础治疗;观察组在对照组治疗方法基础上,联用大黄■虫丸。治疗前及治疗后(治疗1年)对比2组肝活检缓解率、肝纤维化扫描仪(FibroScan)测定的肝纤维化评级缓解率、中医证候积分、体质量指数及肝功能指标[血清谷丙转氨酶(GPT)、血清总胆红素(TB)、血清谷草转氨酶(GOT)]、血脂指标[总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、临床疗效及安全性。结果:观察组患者肝活检缓解率高于对照组(χ^(2)=14.512,P=0.002),肝纤维化评级改善率高于对照组(χ^(2)=15.550,P=0.001)。观察组临床中医证候总有效率高于对照组(χ^(2)=21.438,P<0.05)。治疗后,2组患者体质量指数及肝功能、血脂指标均较治疗前改善(P<0.05);治疗后,2组体质量指数及血脂指标比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组肝功能指标(GPT、GOT、TB)低于对照组(P<0.05)。共发生不良事件37例次,均为轻微不良反应,未经处理或对症治疗后缓解,2组不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:大黄■虫丸可改善NASH痰瘀互结证患者的肝纤维化、中医证候与肝功能,安全性良好。

非酒精性脂肪性肝炎中医药及其辅助疗法防治机制研究进展

非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)是临床常见的一种慢性进行性肝病,除了造成严重肝损伤,还是诱发肥胖、糖尿病、心肌梗死、动脉粥样硬化、脑卒中等全身代谢紊乱疾病以及心脑血管疾病的独立危险因素。目前,现代医学在NASH的防治中虽取得一定进展,但西药的不良反应又不可避免地增加了肝脏负担。近年来,随着中医药干预NASH研究的不断深入,中药以其不良反应小、配伍灵活的特点,展现出极大的优势和潜力。最近的药理学研究及临床试验表明,单味中药活性成分和中药复方均可以通过抗炎、调脂、保护肝细胞等途径多层次、多靶点、多方位协同起效,对NASH的防治发挥显著疗效。该文旨在综述中医药防治NASH的作用机制,以及对相关的中药单体、中药复方和中医辅助疗法进行评述,以期为合理有效防治NASH提供理论和实验研究依据,并作为临床实践的有益参考。

米金铎从“虚、痰、瘀”治疗老年性非酒精性脂肪性肝炎经验

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是一种临床常见病、多发病,因其可能发生纤维化、进展为肝硬化甚至肝癌,日益受到人们的重视。吉林省名中医米金铎教授认为,老年性NASH的病因病机为脾虚痰凝、瘀阻肝络,病机关键是脾虚失运,痰瘀互结于肝,肝络失和而致肝病。临证采用通补结合的治法,组方在逍遥散疏肝健脾的基础上加以活血化瘀、祛风化痰的药物,以达脾健肝疏、痰化络通的临床疗效。提出从“虚、痰、瘀”的角度出发,探讨老年性NASH的病机和中医治法,为防治非酒精性脂肪性肝炎提供了新的思路。

非酒精性脂肪性肝炎防治新思路

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)主要包括非酒精性脂肪肝(NAFL)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。随着患病率的逐年上升,越来越多的试验研究了NAFL及相关疾病的治疗和预防方法,但仍没有经批准的绝对有效的措施,目前的治疗方法各有优劣,因此对该病的预防显得尤为重要。本文对NASH的最新防治措施进行讨论,为进一步减缓疾病进展提供参考。

非酒精性脂肪性肝炎患者血清前神经降压素和微小RNA-122水平变化及其诊断脂肪性肝炎的价值探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清脂肪细胞因子前神经降压素(Pro-NT)和微小RNA-122(miRNA-122)水平变化及其诊断非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的潜在价值。方法2017年1月~2022年6月我院诊治的NAFLD患者159例和同期入院体检的健康人90例,行腹部超声检查,采用ELISA法检测血清Pro-NT水平,采用RT-PCR法检测血清miRNA-122。对NAFLD患者行肝活检检查,确定NASH诊断。应用受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC)评估指标诊断的敏感度和特异度。结果在159例NAFLD患者中,经肝活检检查诊断NASH患者49例和单纯性脂肪肝110例;NASH患者BMI为(28.4±1.2)kg/m^(2),显著大于NAFLD患者【(27.3±1.4)kg/m^(2),P<0.05】;NASH患者血清ALT、AST、空腹血糖(FBG)、胰岛素、HOMA-IR和尿酸水平分别为62(48,96)U/L、56(47,85)U/L、(5.9±0.6)mmol/L、10.2(8.8,13.4)μU/mL、2.6(1.8,3.4)和496(392,515)μmol/L,均显著高于NAFLD患者38(25,53)U/L、32(21,49)U/L、(5.3±0.6)mmol/L、9.0(7.2,12.6)μU/mL、2.2(1.3,2.7)和446(351,495)μmol/L,P<0.05;血清Pro-NT和miRNA-122分别为167(148.4,186.9)pmol/L和8.2(2.0,29.3),显著高于NAFLD患者【分别为82(53.0,100.4)pmol/L和2.2(1.4,10.6),P<0.05】;NAFLD患者上述指标又显著高于健康人(P<0.05);分别以血清Pro-NT≥112 pmol/L和miRNA-122≥7.08为截断点,结果Pro-NT诊断NASH的AUC为0.824,灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为80.0%、80.0%、84.9%和82.3%,经Delong法检验,显著优于miRNA-122诊断(分别为0.637、56.0%、70.0%、76.5%和56.8%,P<0.05)。结论应用血清Pro-NT水平在NAFLD患者中初筛NASH可能有一定的临床价值,值得进一步研究。

实时组织弹性成像评估非酒精性脂肪性肝炎患者肝纤维化分期临床价值研究

目的探讨采用实时组织弹性成像(RTE)技术检测评估非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者肝纤维化分期的价值。方法2021年6月~2022年6月我院收治的159例非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者【其中单纯性脂肪肝(SFL)89例、NASH 47例和肝硬化23例】和53例健康体检者,均接受彩色超声诊断仪RTE检测肝脏有关指标,NAFLD患者接受肝活检。应用受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC)分析诊断效能。结果LC组RTE指标相对应变值为(94.3±13.5),显著低于NASH患者【(105.2±20.6),P<0.05】或SFL患者【(115.1±9.8),P<0.05】或健康人【(121.3±17.1),P<0.05】,而蓝色面积百分比、复杂度、偏度、对比度和杂乱度分别为(25.9±4.3)%、(38.5±4.2)、(0.6±0.1)、(241.0±30.5)和(0.4±0.1),均显著高于NASH患者【分别为(21.2±4.1)%、(31.9±3.7)、(0.4±0.1)、(191.3±27.9)和(0.2±0.1),P<0.05】或SFL患者【分别为(16.2±1.9)%、(25.1±3.5)、(0.3±0.1)、(153.0±19.8)和(0.1±0.1),P<0.05】或健康人【分别为(9.2±1.5)%、(19.5±2.4)、(0.2±0.0)、(113.5±20.3)和(0.1±0.0),P<0.05】;在47例NASH患者中,病理学检查发现S0/S1期肝纤维化者16例,S2期19例和S3期12例;S3和S2期患者相对应变值分别为(101.2±7.9)和(106.7±10.3),显著低于S0/S1期患者【(112.5±9.8),P<0.05】,而S3期患者蓝色面积百分比、复杂度、偏度、对比度和杂乱度分别为(23.1±3.4)%、(34.6±3.7)、(0.4±0.1)、(202.5±23.7)和(0.2±0.0),显著大于S2期患者【分别为(19.8±2.5)%、(29.3±2.9)、(0.3±0.1)、(179.1±25.9)和(0.2±0.0),P<0.05】或S0/S1期患者【分别为(16.2±3.8)%、(25.9±3.5)、(0.3±0.1)、(152.8±21.1)和(0.1±0.1),P<0.05】;ROC曲线分析显示,综合RTE指标诊断NASH患者显著性和进展期肝纤维化的AUC为0.977,其灵敏度为84.2%,特异度为66.7%,准确性为77.4%。结论采用超声RTE指标诊断NASH患者显著性和进展期肝纤维化具有一定的临床价值,值得深入研究。

基于AMPK/mTOR/ERRα信号通路探讨慈菇消脂方影响非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝细胞自噬作用机制

目的基于AMPK/mTOR/ERRα信号通路探讨慈菇消脂方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝细胞自噬的调控机制。方法小鼠随机分为空白组、模型组、慈菇消脂方组和抑制剂组,每组10只。采用蛋氨酸胆碱缺乏饲料喂养构建NASH小鼠模型,造模成功后给药组予相应药物干预,连续4周。HE染色观察小鼠肝组织形态并进行非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)活动度评分,电镜观察肝细胞超微结构,免疫组化检测肝组织Beclin1、LC3、p62蛋白表达,Western blot检测肝组织p-AMPK、p-mTOR、雌激素相关受体α(ERRα)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠肝组织出现明显脂肪变性并可见大量炎性细胞浸润,肝细胞可见大量形态较规则的单层膜脂质结构,NAFLD活动度评分升高(P<0.01),肝组织Beclin1、LC3、p-AMPK蛋白表达降低(P<0.01),p62、p-mTOR、ERRα蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠肝组织脂肪变性减少,炎性细胞浸润改善,可见少量自噬体,NAFLD活动度评分降低,肝组织Beclin1、LC3、p-AMPK蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),p62、p-mTOR、ERRα蛋白表达降低(P<0.01)。结论慈菇消脂方可能通过调控AMPK/mTOR/ERRα信号通路相关蛋白表达介导自噬,延缓NASH进展。

巨噬细胞DHA代谢表型在非酒精性脂肪性肝炎发病过程中的作用

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是一种以肝细胞脂肪变、气球样变和小叶内炎症为病理学特征的慢性代谢应激性肝病。本文综述了肠道菌群来源性丁酸通过组蛋白去乙酰化酶(HDAC)/12/15-脂氧合酶(12/15-LOX)/maresin信号途径,对肝脏单核巨噬细胞系统二十二碳六烯酸(DHA)代谢表型的调控作用,以及由此恢复促炎症介质/maresin平衡并促进炎症“程序性消退”,在诱导NASH缓解中的意义。

肉桂醛调节AMPK/SREBP1c信号通路对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝损伤的影响

【目的】探讨肉桂醛通过调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/胆固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)信号通路对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝损伤的影响。【方法】实验随机分为正常组,模型组,肉桂醛低、中、高剂量组及肉桂醛高剂量+Compound C(AMPK抑制剂)组,每组15只小鼠。除正常组,其他各组给予高脂饲料喂养构建NASH模型。干预治疗后,观察肝组织病理形态变化,检测血清生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)],肝组织氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)],AMPK/SREBP1c通路蛋白[磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK、SREBP1c、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、磷酸化ACC(p-ACC)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Scd1)]表达,及CPT1α、长链酯酰辅酶A脱氢酶(Lcad)、ACC1、脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达水平。【结果】与正常组比较,模型组肝脏脂肪变性,脂质沉积和纤维化间质增多,ALT、AST、TG、TC,MDA含量,SREBP1c、Scd1蛋白表达,ACC1、FAS mRNA表达水平显著升高,SOD、GSH活性,p-AMPK、AMPK、p-ACC、ACC、CPT1蛋白表达,CPT1α、Lcad m RNA表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,肉桂醛低、中、高剂量组脂质沉积和纤维化间质减少,ALT、AST、TG、TC、MDA含量,SREBP1c、Scd1蛋白表达,ACC1、FAS mRNA表达水平显著降低,SOD、GSH活性,p-AMPK、AMPK、p-ACC、ACC、CPT1蛋白表达,CPT1α、Lcad mRNA表达水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;与肉桂醛高剂量组比较,肉桂醛高剂量+Compound C组上述指标均被逆转(P<0.05)。【结论】肉桂醛可能通过调控AMPK/SREBP1c通路,抑制氧化应激,改善肝脏脂肪变性,减轻NASH小鼠肝损伤。

综合生物信息学与机器学习筛选非酒精性脂肪性肝炎的趋化因子相关核心基因

目的综合运用生物信息学方法及机器学习算法筛选与非酒精性脂肪性肝炎相关的趋化因子核心基因。方法公共数据库GEO下载非酒精性脂肪性肝病芯片数据集GSE49541,采用R studio软件进行差异分析筛选差异基因,对差异基因进行GO功能注释和KEGG信号通路富集分析,将差异基因与趋化因子通路相关基因集取交集获取趋化因子相关差异基因,然后采用机器学习LASSO回归及SVM-RFE算法筛选核心基因,通过Genemania数据库构建核心基因互作网络图,构建核心基因列线图预测模型,并通过ROC曲线验证列线图效能。结果共筛选获取差异基因148个,GO及KEGG富集分析提示差异基因富集于脂质代谢、趋化因子、细胞外基质等。最后筛选获得核心基因CCL19、CD24、ROBO1、SLC12A2,构建核心基因互作网络图,基于核心基因建立NASH列线图预测模型,该模型ROC曲线的AUC=0.997,95%置信区间(confidence interval,CI)为0.988~1.000。结论CCL19、CD24、ROBO1、SLC12A2可能与非酒精性脂肪性肝炎发生与进展密切相关,有望成为诊断和精准治疗的潜在靶点。