维A及其顺反异构体的研究进展

维A是一类由β-白芷酮环和2分子2-甲基丁二烯组成的脂溶性维生素。维A多存在于动物肝脏、鱼类及乳制品中。近年来,在维A的安全性方面也进行了大量的研究。然而,很少关注在食品加工、贮藏运输及体内代谢中的异构化产物的安全性和活性。为了解维A顺反异构体,对维A顺反异构体在食物中的存在形式、体内外转化及安全性进行了系统性综述。结果表明,天然存在的维A包含多种顺反异构体,如13-顺式视黄醇、11-顺式视黄醇、9-顺式视黄醇等。全反式视黄醇虽是维生素A的主要活性形式,但是在杀菌、加热过程及在光照条件下会发生异构化。此外,维A在体内也会发生顺反异构之间的转化。由此可见,不同异构化产物所具备的生物活性和安全性各不相同,综上,维A及其顺反异构体的研究为维A在食品领域中的应用提供思路。

1,4-环己烷二甲醇顺反异构体的气相色谱分析

采用气相色谱法,使用SE-54、CP-Chirasil-Dex CB两种色谱柱对1,4-环己烷二甲醇顺反异构体进行分离,并采用SE-54和FID检测器对1,4-环己烷二甲醇顺反异构体进行定量分析。结果表明:该分析方法中反式1,4-环己烷二甲醇的R^(2)为0.9998,RSD为0.73%,平均回收率100.00%;顺式1,4-环己烷二甲醇的R^(2)为0.9993,RSD为0.85%,平均回收率100.56%。该方法对1,4-环己烷二甲醇顺反异构体的定量分析具有分离精度高、结果稳定可靠、准确度高等优点。

肽基脯氨酰顺反异构酶1在肝癌中的研究进展

肽基脯氨酰顺反异构酶1(PIN1)在肝癌中异常表达,作为肿瘤催化分子在肝癌的增殖、侵袭、凋亡和血管生成等过程中发挥着重要作用。该文从PIN1的分子结构与功能、PIN1在肝癌中的表达及其在肝癌发生、发展中的作用等几方面进行综述。

在线固相萃取/二维液相色谱法检测婴幼儿配方食品中视黄醇顺反异构体和α-生育酚手性异构体

建立了在线固相萃取/二维液相色谱分离检测婴幼儿配方食品中全反式视黄醇、13-顺式视黄醇和α-生育酚手性异构体的方法。样品经皂化,定容、离心、过滤后进样,经二乙烯基苯与N-乙烯基吡咯烷酮大孔共聚物(HLB)在线固相萃取柱在线净化后,通过切换阀将视黄醇、4种生育酚洗脱至一维色谱柱五氟苯基填料柱(PFP),在一维色谱柱中实现总视黄醇和4种生育酚异构体的分离。再通过捕集柱与中心切换阀将总视黄醇和α-生育酚切割至二维色谱柱,在3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯涂敷的手性色谱柱(CND)上实现了全反式与13-顺式视黄醇的异构体分离,以及α-生育酚的d、l手性异构体分离。采用紫外和荧光检测器检测,外标法定量。结果表明:全反式视黄醇、13-顺式视黄醇的线性范围为0.1~5.0 mg/L,d-α-生育酚、l-α-生育酚的线性范围为1.0~30.0 mg/L,相关系数均大于0.999,定量下限分别为53μg/100 g、56μg/100 g、290μg/100 g和340μg/100 g;低、中和高3个加标浓度下的回收率为90.9%~106%,相对标准偏差(RSD)不大于2.8%。该方法可用于乳基婴幼儿配方食品中视黄醇和α-生育酚的检测及其生物有效性评价。

1,4-环己烷二甲酸二甲酯顺反异构体的气相色谱分析

采用气相色谱法,使用CP-Chirasil-DexCB色谱柱和氢火焰离子化检测器对1,4-环己烷二甲酸二甲酯顺反异构体进行分离和定量分析。结果表明:该分析方法中反式1,4-环己烷二甲酸二甲酯的线性相关系数为0.9991,相对标准偏差为0.83%,平均回收率为100.66%;顺式1,4-环己烷二甲酸二甲酯的线性相关系数为0.9983,相对标准偏差为0.82%,平均回收率为100.40%。该分析方法操作简便、快速、准确,分离效果好,可以用于1,4-环己烷二甲酸二甲酯顺反异构体的定量分析。

系统性红斑狼疮患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1与白细胞介素-17的分析及其临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)活性的表达与细胞因子白细胞介素-17(IL-17)水平相关性及其临床意义。方法:选取98例SLE患者,其中42例为SLE初治患者,另选43例健康体检者为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验检测所有研究对象入组时及98例SLE患者治疗后3个月血清中Pin1、IL-17水平,分析98例SLE患者血清Pin1水平变化及与细胞因子IL-17、SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分、实验室指标的相关性,分析42例SLE患者初治时、治疗后3个月时其水平变化及意义。结果:①SLE稳定组外周血的Pin1表达水平明显高于健康对照组(H=28.913,P<0.05),SLE活动组外周血的Pin1表达水平明显高于SLE稳定组(H=31.738,P<0.05)。②SLE患者Pin1与IL-17、SLEDAI评分呈正相关(r=0.640,P<0.05;r=0.461,P<0.05),与抗ds-DNA抗体、C反应蛋白、红细胞沉降率无明显相关性。③SLE初治组外周血的Pin1表达水平明显高于健康对照组(H=55.568,P<0.05),SLE初治组治疗后3个月的Pin1表达水平较治疗前下降(H=28.136,P<0.05)。④血清Pin1水平在有肾脏损害的SLE患者表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SLE患者外周血Pin1过表达,IL-17增高且与其呈正相关,经过治疗能显著降低Pin1活性,降低IL-17细胞因子水平,抑制Pin1蛋白表达,可能会延缓SLE的进展,Pin1抑制剂可能成为SLE治疗的新靶点之一。

利用酰胺型手性固定相高效液相色谱法对格列美脲顺反异构体的分离与测定

利用高效液相色谱法在一种酰胺型手性固定相上直接分离了格列美脲顺反异构体。讨论了流动相组成、柱温度和流速等色谱条件对分离的影响。优化的实验条件为 :流动相组成正己烷 :1 ,2 二氯乙烷∶甲醇(88∶8∶4 ,V/V/V) ;柱温 :2 5℃ ;流速 :1 .8mL/min。得到的分离度和选择性因子分别为 1 .86和 1 .1 2。在 2 88～ 32 0mg/L的浓度范围内建立了反式格列美脲的标准曲线 ,线性系数为 0 .99998;检出限为 0 .4 7mg/L。方法简单 ,可靠 。

柠檬醛顺反异构体对黄曲霉超微结构及膜功能的影响

研究柠檬醛顺反异构体(香叶醛和橙花醛)抗菌性是阐明该醛抗菌机理核心所在.用酶转化法合成香叶醛和橙花醛后,用液态或气态的异构单体分别对黄曲霉孢子及菌丝体进行毒化.采用透射电镜、多维显微及激光拉曼散射技术对毒化的黄曲霉孢子及菌丝体进行显微结构观察和膜相关参数的测定.结果表明,无论是液体还是气体毒化方式,柠檬醛顺反异构体单独存在时均有抗黄曲霉作用;二者混合物的抗菌总活性与单体相比表现出一定程度协同性;二个异构单体的抗菌作用不仅表现为破坏黄曲霉超微结构,而且还反映在损伤其细胞膜体积调节功能及变形能力.

肽基脯氨酰顺反异构酶抑制剂胡桃醌对宫颈鳞癌SiHa细胞凋亡的作用

目的:探讨肽基脯氨酰顺反异构酶抑制剂胡桃醌对宫颈鳞癌Si Ha细胞增殖和凋亡的影响及其促凋亡的机制。方法:选取处于对数生长期的Si Ha细胞,将其分为空白对照组和不同剂量(10、20、50、80及100μmol/L)胡桃醌给药组,共6组。采用MTT法观察胡桃醌对Si Ha细胞的抑制作用,并计算出半数抑制浓度(IC50=20.4μmol/L),依据IC50确定胡桃醌的有效浓度;选取与IC50接近的浓度(20μmol/L)通过Hoechst 33258及流式细胞术测定胡桃醌对Si Ha细胞凋亡的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、8、9以及抑癌基因PTEN的蛋白水平。结果:MTT实验结果显示,与对照组比较,各给药组对细胞活力的抑制作用明显,差异有统计学意义(P<0.05);Hoechst 33258检测表明,20μmol/L胡桃醌处理细胞12 h后可出现明显的细胞核典型凋亡细胞形态,流式细胞术检测结果说明胡桃醌可诱导Si Ha细胞出现早期凋亡;Western blot检测显示与正常对照组相比,20μmol/L胡桃醌处理细胞12 h后,cleaved caspase-3、8、9及PTEN的蛋白水平明显增加。结论:胡桃醌可以抑制Si Ha细胞的活力,并诱导细胞凋亡,其机制主要是通过抑制caspase途径并增加抑癌基因的表达。

农药分子中顺反异构现象

在介绍了农药分子中存在的顺反异构化现象及顺反异构与农药生物活性的关系后 ,重点评述了顺反异构化过程及其机理的研究现状 ,其中包括光致异构化、热致异构化和催化异构化 ,并分析了顺反异构体分离和研究顺反异构化机理时存在的问题。

烯烃顺反异构的拓扑方法研究

在烯烃的顺式与反式异构体中,处于碳碳双键两端的顶点间的距离是不同的.可根据几何原理计算与双键相连的顶点间的空间距离,并以此构造分子图的修正距离矩阵来区分这种差异.按照我们已报导的顶点度鄄距离指数(VDI)和边度鄄距离指数(EDI)的计算方法,用修正距离矩阵(MD)代替距离矩阵(D),得到修正的顶点度鄄距离指数(MVDI)和修正的边度鄄距离指数(MEDI).这两个参数能较好地区分烯烃顺反异构体的分子结构信息.对烯烃顺反异构体的沸点(b.p.)、折光率(n20D)、密度(D20)及摩尔折光率(nM)等物化性质进行定量相关,得到模型方程的相关系数(R)分别为0.9981、0.9570、0.9884和0.9999.同时,交叉验证和随机抽样预测结果表明模型具有良好的稳定性和较强的预测能力.

脊椎动物Cyclophilin A肽基脯氨酰顺反异构酶活性及遗传变异分析

Cyclophilin A(简称CypA)由PPIA(Peptidylprolyl isomerase A)基因编码,是典型的Cyclophilin家族蛋白,具有肽基脯氨酰顺反异构酶活性,在蛋白质的折叠和转运、信号转导、炎症、免疫调节、细胞凋亡及病毒复制等生物学过程中发挥着重要作用。本研究重点探讨了不同脊椎动物CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性及其遗传变异。根据Gen Bank数据库PPIA基因的序列信息,克隆了脊椎动物的PPIA基因并构建其原核表达载体,其中鼠耳蝠(Myotis davidi)和绿头鸭(Anas platyrhynchos)的PPIA基因序列为首次报道。利用大肠杆菌表达GST-Cyp A融合蛋白并进行亲和层析,切除GST标签后再进行分子筛层析,获得纯化的CypA蛋白。利用胰糜蛋白酶偶联法测定CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性,发现12种脊椎动物CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性无显著差异。同时,通过一系列遗传变异和分子进化分析,发现12种脊椎动物CypA的酶活位点、CsA结合位点等重要功能域的氨基酸序列完全一致,而且其结构和在染色体中的基因定位也非常保守。研究结果表明,脊椎动物CypA的关键功能域高度保守,这是CypA维持其酶活及生物学功能的有力保障。

大肠杆菌肽基脯氨酰顺反异构酶slyD基因缺失株的构建及生物学特性研究

肽基脯氨酰顺反异构酶(PPIases)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是专一性催化已磷酸化的丝/苏-脯氨酞顺/反异构。为研究大肠杆菌PPIases sly D基因缺失对其生物学特性的影响,本研究利用改进的Red重组方法构建大肠杆菌BL21株的sly D缺失株,命名为BL21Δsly D;并通过突变株的形态学变化、生长特性、生化代谢特性、耐酸性、耐渗透压能力、耐温度缺氧能力对其进行鉴定。结果表明,缺失株生长速率、耐高温缺氧能力与亲本株相比差异不显著,然而突变株的耐酸性与耐渗透压能力则显著低于亲本株(p<0.01),表明大肠杆菌PPIases sly D基因可能影响双组份调控系统的调节作用。本研究构建的大肠杆菌sly D基因缺失株BL21Δsly D为进一步研究大肠杆菌sly D基因的功能奠定了基础。

取代乙烯顺反异构体键能和稳定性的密度泛函理论研究

对十四种取代乙烯 (XX′CCYY′)顺反异构体进行了DFT B3LYP/ 6 31G(d)水平的几何全优化的总能量、总键能的计算 .结果表明 ,对无共轭大π键的二取代乙烯 ,其顺式异构体的总能量比反式异构体的低 ,前沿轨道能隙、总键能和总π键能均比反式异构体的大 ,而对有共轭大π键的体系 ,其情况则刚好相反 .表明对于前者其顺式异构体比反式异构体稳定 。

顺反异构化过程及其机理

总结了分子中存在的顺反异构化过程及其机理,包括光致异构化、热致异构化和催化异构化。

色谱法分离与检测丙环唑顺反异构体

通过薄层层析分离并制备了丙环唑的cis 外消旋体与trans 外消旋体及2RS ,4S 丙环唑的 2R ,4S 体系与 2S ,4S 体。同时分别用高效液相色谱的正相柱与反相柱分离并检测了上述各异构体 ,其中正相柱对顺反异构体的分离效果好 ,定量精确 ,相对标准偏差小于 1 % ,反相柱分离效果略差 ,相对标准偏差 1～ 2 %。

椅式(8,8)单壁碳纳米管内偶氮苯的顺反异构化

采用ONIOM(B3LYP/6-31+G*:UFF)方法对偶氮苯受限于椅式单壁碳纳米管CNT(8,8)内的结构、电子光谱和热致顺反异构化势能面进行了计算.结果表明,反式偶氮苯进入CNT(8,8)碳纳米管内是一个放热过程.由于碳纳米管的限制作用,偶氮苯分子的苯环绕CN键有一定的旋转,反式偶氮苯的平面结构发生扭曲,但其它结构参数变化不明显.受限于碳纳米管内的偶氮苯的顺反异构体能量差比非受限状态下增加了8.1 kJ.mol-1,表明碳纳米管的限制作用对偶氮苯顺反异构体的相对热稳定性有一定影响.光谱计算表明,受限于碳纳米管内的偶氮苯最低的三个单线态吸收波长仅蓝移1-5 nm.异构化势能面计算发现,偶氮苯在CNT(8,8)碳纳米管内发生反式到顺式异构化的能垒增加,由顺式回复到反式异构体的能垒无明显变化,表明CNT(8,8)碳纳米管的限制作用可以抑制偶氮苯从反式到顺式异构体的热致异构化过程.此外,受限状态下的偶氮苯主要通过CNN键角反转发生热致异构化.

氟氯氰菊酯的顺反异构体分离研究

本文介绍用硅胶柱，正己烷＋四氢呋喃（１００＋１）为流动相，检测波长２５４ｎｍ的正相高效液相色谱对氟氯氰菊酯的二对顺反异构体进行了分离。

顺反异构化对偶氮类含能化合物感度的影响

采用密度泛函理论的B3LYP/6-31G*方法优化了一些偶氮类含能化合物(偶氮苯衍生物、偶氮呋咱、偶氮三嗪和偶氮四嗪)的结构,然后通过二阶微扰理论方法(MP2/6-31G*)进行单点能计算,最后获得偶氮类含能化合物顺反异构体比较精确的相对能量.结果发现,偶氮类含能化合物的感度与其顺反异构体的相对能量有对应关系,相对能量越大,感度越低.偶氮类含能化合物顺反异构体的相对能量可以作为评价其感度的指标之一.通过分析偶氮类含能化合物顺反异构化过程对感度的影响机理,提出偶氮类含能化合物具有自钝感特性.