脑预缺血引起大鼠海马细胞膜腺苷受体数量和亲和力升高及其对神经元的保护作用

采用放射性配基结合法 ,测定大鼠全脑缺血后海马细胞膜腺苷 (adenosine,ADO)受体数量及亲和力的变化 ,以探讨其与脑缺血耐受形成之间的关系。发现缺血 6min即可导致海马组织明显的神经元延迟性死亡 (de layedneurondeath ,DND) ,缺血 3min不足以引起海马组织明显的DND ;而经过 3min预缺血处理 ,可明显减轻间隔1d后 6min缺血引起的海马DND (P <0 0 1)。与此相对应 ,缺血 3min再灌 1和 3d时 ,ADO受体数量及亲和力明显高于sham组 (P <0 0 5 ) ,而缺血 6min再灌 1和 3d时 ,ADO受体数量明显低于sham组 (P <0 0 5 ) ,但亲和力高于sham组 (P <0 0 5 )。与单纯 6min缺血再灌 4h、1和 3d时相比 ,3min预缺血 + 6min缺血 (间隔 1d)再灌后 ,ADO受体数量及亲和力均显著升高 (P <0 0 5 )。这些结果表明 ,脑预缺血处理可使大鼠海马细胞膜ADO受体数量增多 ,亲和力增强 ,并能对抗损伤性缺血引起的ADO受体数量减少 ,提示腺苷受体数量及亲和力的变化在脑缺血耐受形成过程中发挥了重要的作用。

局灶预缺血诱导脑缺血耐受的动物模型

目的 建立一种简便可靠的 SD大鼠局灶性脑缺血预处理模型。方法 将大鼠随机分为 3组 ,分别给予 10 m in大脑中动脉缺血 ( MCAO)预处理 ( PC) ;10 min PC后 2 h MCAO( PC+MCAO)及假手术 ( SS)后 2 hMCAO( SS+MCAO) ,再灌注 2 2 h后处死 ,观察各组神经功能缺损、梗死体积及脑含水量变化。结果 PC+MCAO组神经功能评分、梗死体积及含水量均明显低于 SS+MCAO组 ,PC组无神经功能缺损及梗死灶形成。结论 2次线栓法建立的大鼠局灶脑缺血预处理模型 ,能有效减轻 MCAO所致的神经损伤 ,操作简便 ,稳定性好 ,是一种研究局灶脑缺血耐受的有用工具。

大鼠肢体预缺血减小心肌缺血-再灌注后的梗塞范围

在氨基甲酸乙酯麻醉大鼠上观察肢体预缺血(limb ischemic preconditioning,LIP)对缺血-再灌注(ischemia—reperfusion,IR)心肌的影响,旨在探讨LIP对IR心肌有无保护效应,并明确腺苷和神经通路是否参与此效应。所得结果如下:(1)在心脏缺血30 min和再灌注120 min过程中,梗塞心肌占缺血心肌的51.48±0.82％。(2)LIP时心肌梗塞范围为35.14±0.88％,较单纯心肌缺血-再灌注时显著减小(P<0.01),表明LIP对心肌有保护作用。(3)事先切断股神经可取消LIP的保护效应。(4)股动脉内局部给予腺苷(10nmol/kg),可模拟LIP对心肌的保护作用;心肌梗塞范围是37.28±1.68％,而股静脉内注射同等剂量腺苷则无保护作用。(5)股动脉内预先应用腺苷A.受体拈抗剂8-环戊-1,3-二丙基嘌呤(DPCPX)(32 nmol/kg)可部分阻断LIP诱发的心肌保护效应。以上结果表明,肢体短暂预缺血可减小心肌缺血-再灌注后的梗塞范围,而局部释放的腺苷和由此所激活的相关的神经通路在LIP的心肌保护中起重要作用。

ATP敏感性钾通道在预缺血对麻醉家兔缺血心肌保护中的作用

在氨基甲酸乙酯和成巴比妥钠两种不同麻醉的家兔心肌缺血－再灌注（IR）模型上，观察了ATP敏感性钾通道（KATP通道）开放剂cromaklim（Cro）和预缺血（IP）对血流动力学和心肌梗塞范围的影响，旨在阐明KATP通道是否参与IP对IR心肌的保护机制。所得结果如下：（1）两种麻醉动物模型在单纯缺血30min-再灌注180min过程中，血流动力学各参数和心肌耗氧量均进行性降低。（2）在氨基甲酸乙酯麻醉的家兔，单纯IR所致的心肌梗塞范围为（32．3±0．8）％。静注Cro后再进行IR时，心肌梗塞范围为（3．3±2．2）％；IP后，心肌梗塞范围为（21．6±1．8）％；均与单纯IR组有明显差异。而KATP通道特异性阻断剂格列苯脲则可阻断IP对IR心肌的保护效应。以上结果显示KATP通道在氨基甲酸乙酯麻醉下参与IP的心肌保护机制。（3）在戊巴比妥钠麻醉的家兔，单纯IR时的心肌梗塞范围是（3．7±1．0）％。IP使IR的心肌梗塞范围减少至（19．7±1．5）％，格列苯脲未能取消IP对心肌的保护作用；Cro也未能减轻IR所致的心肌坏死。上述结果表明在戊巴比妥钠麻醉下，KATP通道并不参与IP的心肌保护过程。

预缺血对大鼠心肌缺血再灌注凋亡的影响

为观察大鼠心肌缺血再灌注的致凋亡作用和再灌注早期不同阶段中性粒细胞浸润与凋亡的关系及预缺血对凋亡的影响 ,制备在体大鼠心肌缺血再灌注模型 ,实验分为四组 :缺血 +1h再灌注组、缺血 +2h再灌注组 ,缺血 +3h再灌注组及预缺血组 ,观察分析心功能、梗死面积、中性粒细胞计数、心肌髓过氧化物酶活性及凋亡指数等指标。结果发现 ,缺血再灌注明显引起心脏功能损伤、中性粒细胞浸润和心肌细胞凋亡 ,且随再灌注时间延长而加重 ,预缺血明显减轻其损伤并抑制凋亡。心肌细胞凋亡与中性粒细胞浸润存在显著正相关关系。结果提示 ,预缺血可通过减轻凋亡对心肌发挥保护作用。

核转录因子kappa B在心肌早期预缺血中的调节作用

目的 研究核转录因子kappaB(NF kB)在心肌早期预缺血中的作用。方法 2 4只新西兰白兔随机分为预缺血组、预缺血加脯氨酸二硫氨基甲酸脂 (ProDTC ,特异性NF kB抑制剂 )组和非预缺血组。阻断和开放左冠状动脉前降支各 5min,反复 5次 ,造成局部心肌预缺血。预缺血加ProDTC组 ,ProDTC(1 5mg·kg- 1 )在预缺血前静注 ,并在预缺血中持续静滴 (1 5mg·kg- 1 ·h- 1 )。用传感探头在每次缺血末测定局部心肌的缩短率和变厚率 ,并做心肌组织病理学观察。结果 预缺血组心肌缩短率和变厚率随缺血次数增加逐渐改善 ,最终分别恢复至基础值的 85%和 82 % ,心肌结构损害轻微。预缺血加ProDTC组 ,心肌缩短率和变厚率与预缺血组相比显著减少 (P <0 .0 5) ,随缺血次数增加无改善 ,心肌损害明显。结论 核转录因子kappaB在心肌早期预缺血中起调节作用。

预缺血对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究预缺血 (IPC)对大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用 ,并探讨其机制。方法 SD大鼠 2 0只 ,随机分成实验组和对照组 ,每组 10只 ;实验组在缺血前 ,先做预缺血处理 ;对照组皮瓣形成后 ,不做预缺血处理 ;然后两组均以血管夹持续阻断血流 8h ,松夹后恢复血流。术后第7d判断皮瓣成活情况。另外 ,两组在缺血前、缺血 8h及再灌注 3 0min ,分别抽取股静脉血 0 5ml,检测血清中超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量。结果 ( 1)实验组皮瓣平均存活率80 2 1%± 15 73 % ,明显高于对照组 5 2 80 %± 18 91% (P <0 0 1)。 ( 2 )实验组和对照组血清SOD活性及MDA含量在缺血前和缺血 8h ,差异无显著性意义。但在再灌注 3 0min ,实验组SOD活性平均为 ( 91 84± 7 85 )NU/ml,对照组为 ( 83 4 5± 9 71)NU/ml,差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;实验组MDA含量平均为 ( 8 76± 1 0 4 )nmol/ml,对照组为 ( 9 71± 0 99)nmol/ml,差异也有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论 IPC能提高大鼠腹部皮瓣的存活率 ,其机制与IPC能减轻氧自由基介导的缺血再灌注损伤有关。

尾加压素Ⅱ、丝裂原活化蛋白激酶在预缺血联合巴曲酶处理缺血性大鼠脑损伤中的表达

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在缺血性脑损伤中的病理生理作用及巴曲酶增强缺血耐受现象的脑保护作用。方法采用预缺血大鼠局灶性脑缺血模型,将大鼠随机分为假手术组、缺血性损伤组、预缺血组、预缺血联合巴曲酶组4组,各组按大脑中动脉永久性阻断后3、6、24、72 h再分为4个亚组。应用免疫组织化学法检测各亚组UⅡ及孤儿G蛋白耦联受体14(GPR14)免疫活性,Westernblot法检测各亚组MAPK亚型ERK和JNK表达。结果各组大鼠大脑中动脉永久性阻断后24 h其大脑UⅡ和GPR14阳性细胞表达达高峰;同一时间点间比较,预缺血联合巴曲酶组可明显改善大鼠脑损伤症状,明显降低UⅡ和GPR14表达,增强磷酸化ERK表达,减弱磷酸化JNK表达。结论巴曲酶可通过抑制UⅡ的合成降低其促血管平滑肌增殖和血管收缩效应,以及促进ERK生存通路和抑制JNK死亡通路而增强内源性脑保护作用。

脑源性神经营养因子在预缺血模型神经保护中的作用

目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)在预缺血模型中的表达水平及作用,以探讨缺血耐受形成的分子信号机制。方法制备SD大鼠大脑四动脉结扎模型及预缺血模型,采用免疫印迹、免疫沉淀等技术,检测各实验组中BDNF表达、其受体酪氨酸激酶受体B(TrkB)和下游蛋白胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)磷酸化的水平变化。结果预缺血组BDNF的表达、TrkB和ERK1/2磷酸化水平较缺血/再灌注组升高(P<0.05),而TrkB受体的拮抗剂K252 a可以降低其升高的激活水平(P<0.05)。结论预缺血激活BDNF-TrkB-ERK1/2信号通路实现其神经保护作用。

预缺血对氨基甲酸乙酯麻醉家兔缺血/再灌注心肌的保护

目的探讨预缺血对长时间缺血／再灌注心肌的保护作用。方法在氨基甲酸乙酯麻醉家兔心肌模型上，观察缺血／再灌注组和预缺血组对血流动力学、心功能、心肌耗氧量、心外膜电图和心肌梗塞范围的影响，并对结果进行统计分析。结果两组在缺血／再灌注过程中，血流动力学，心功能，心肌耗氧量均明显持续性降低，且两组间心肌耗氧量存在明显差异；心外膜电图ＳＴ段在缺血过程中明显抬高；缺血／再灌注组和预缺血组的心肌梗塞范围分别为３２．３％和２１．６％，有明显差异（Ｐ＜０．０１）。结论预缺血可降低心肌耗氧率，减轻心肌损伤。

快速预缺血处理对兔脑再缺血的保护作用(英文)

目的探讨预缺血后短暂灌注(快速预缺血)对兔脑再缺血的影响.方法股动脉放血至平均动脉压35～40mmHg时,阻断双侧颈总动脉诱导脑缺血.20只兔随机分为对照组:脑缺血10min;实验组:脑缺血3min灌注30min后、脑再缺血10min,观察两组脑再缺血3、10d海马CA1区正常神经元密度.结果实验组脑缺血3d后海马CA1区正常神经元密度明显高于对照组,实验组脑缺血10d后海马CA1区正常神经元密度与对照组无明显差异.结论快速预缺血对兔脑再缺血具有保护作用,但仅出现在再灌注3d后而非10d后.

黄鼠与大鼠离体心脏预缺血处理对缺血再灌损伤的保护作用

本文用黄鼠和大鼠离体心脏比较了两种预缺血处理方案对随后缺血再灌损伤的作用。用Langendorff方法灌流秋季未入眠的达乌尔黄鼠和Wistar大鼠离体心脏，以冠脉流出液中肌酸激酶（CK）释放活性、心律失常发生率、心功能恢复等为指标，检验不同预缺血处理时间对随后缺血再灌损伤的影响。标本平衡10min后对照组的两种动物经受缺灌15min再灌15min预缺血处理，接着进行两次缺灌10min再灌10min。实验组的两种动物经受3次短阵性每阵缺灌5min和再灌5min的预缺灌处理，接着进行两次缺灌10min再灌10min。结果表明，对照组两种动物在第二次缺灌10min期内肌酸激酶（CK）释放均较预缺灌期明显增加，两种动物的增加幅度基本一致，再灌10min期内CK释放也未见明显减小，说明一次性预缺灌15min对第二次缺灌10min未表现保护作用。实验组两种动物在第二次缺灌和再灌10min期内CK释放均较预缺灌期明显下降，且两种动物的下降幅度也基本一致。此外，实验组两种动物的心律失常发生率也都明显低于对照组。两种动物间比较，实验组的黄鼠较大鼠经预缺灌处理后对随后缺血再灌损伤具有更明显的保护作用。上述结果提示，黄鼠和大鼠心脏经3次短阵预缺灌对随后较长时间缺灌和再灌损伤都有明显保护作用，且黄鼠较大鼠更突出。

心肌顿抑和预缺血效应

短暂心肌缺血后,可发生持久的可逆性心肌收缩功能障碍,即心肌顿抑,其原因与能量产生不足和利用障碍,功能性失交感性效应、细胞外胶原蛋白质损害、钙调节紊乱、肌质网与内皮细胞功能障碍、白细胞激活和聚集,以及氧自由基产生等有关。缺血前应用腺苷、白介素、核苷转运阻断剂等可预防和削弱心肌顿抑,及有利于其恢复。心肌预缺血后,可减少再缺血时心肌梗死面积、心律失常和超微结构损害等,并减轻缺血引起的心肌顿抑。本文主要简述了心肌顿抑和预缺血效应的发生机制。

亚致死预缺血强度及保护性时窗的研究

目的 探讨亚致死预缺血强度及保护性时窗。方法 钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型 ,应用尼氏染色观察迟发性神经元坏死。结果 3 5min前脑缺血再灌流 7d前 ,1min的预缺血强度没有保护作用 ;2min预缺血强度 ,间隔 6h脑缺血没有保护作用 ,间隔 1d、3d、5d、7d脑缺血有保护作用 ,间隔 15d脑缺血保护作用消失。结论 2min亚致死预缺血导致脑内复杂的分子生物学变化 ,间隔时窗 1d～ 7d对CA1区锥体细胞有保护作用。

预缺血处理对心肌保护的实验研究进展

预缺血处理(ischemic preconditioning)是近年提出的新观点,认为可增加心肌对缺血的耐受性,目前尚处于实验阶段。本文介绍其实验模型的制备,对心肌的保护作用及可能的机理。

预缺血通过NMDA受体抑制海马CA1区线粒体内细胞色素c向胞质释放的研究

目的探讨脑缺血/再灌注、预缺血及预缺血前给予NMDA受体特异性抑制剂MK801对大鼠海马CA1区神经元线粒体内细胞色素c(Cyt c)向胞质释放的影响。方法建立SD大鼠四动脉结扎全脑缺血及预缺血模型,给药组大鼠在预缺血前60 min给予腹腔注射MK801 3 mg/kg。将SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血/再灌注组、脑缺血/再灌注加生理盐水组、预缺血前给予MK801组、预缺血前给予生理盐水组和预缺血组。检测线粒体的标志蛋白COXⅣ在分离后的线粒体和对应胞质组分中的分布来证明实验中线粒体和胞质是否得到成功分离,利用免疫印迹法分析不同处理组大鼠海马CA1区神经元细胞线粒体组分以及对应胞质组分中的Cyt c和COXⅣ水平。结果线粒体和胞质成功分离,COXⅣ只存在于各组的线粒体组分中,各组的胞质组分中均未检测到COXⅣ的免疫活性。脑缺血/再灌注组线粒体内Cyt c向胞质的释放与假手术组比较显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。预缺血组与脑缺血/再灌注组相比,线粒体内Cyt c向胞质的释放显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。预缺血前给予MK801组与预缺血组相比,线粒体中Cyt c向胞质释放显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论预缺血通过NMDA受体的介导抑制脑缺血/再灌注诱导增加线粒体内Cyt c向胞质的释放,为临床治疗脑缺血/再灌注性损伤提供了理论依据。

预缺血处理通过增强nNOS磷酸化对缺血性脑损伤的保护作用

目的观察预缺血处理对脑缺血／再灌注后神经型一氧化氮合酶（nNOS）磷酸化的影响及其具体的分子信号机制。方法制备SD大鼠大脑四动脉结扎模型及预缺血模型，采用免疫印迹、免疫沉淀等技术，检测各实验组中nNOS与突触后致密体95（PSD95）的结合体及nNOS（Ser847）磷酸化水平的变化。结果预缺血组nNOS与PSD95的结合体及nNOS（Ser847）磷酸化水平较缺血／再灌注组明显升高（P〈0．05）。结论预缺血通过增强nNOS与PSD95的结合从而促进nNOS（Ser847）的磷酸化发挥其对神经元的保护作用。

缺血后适应干预缺血再灌注心肌相关信号通路的研究进展

再灌注治疗可挽救急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）濒临死亡的心肌，但随后的缺血再灌注（ischemic reperfusion，I／R）损伤却减弱了再灌注治疗带来的益处。作为再灌注治疗的一种辅助方法，缺血预适应可以缩小心肌梗死范围，然而必须在缺血事件发生前应用才能发挥保护心肌的作用，这就限制了其在临床中的应用。