RNA干扰阻断COX-2基因表达对食管鳞状上皮癌EC109细胞株增生和凋亡的影响

目的研究COX-2基因与食管鳞癌细胞EC109增生和凋亡的关系,观察阿司匹林对食管鳞癌细胞EC109增生和凋亡的影响,探索基因治疗和药物抑制肿瘤的机制。方法采用RNA干扰的方法,用荧光显微镜观察RNA干扰的转染效率,用Westernblot方法分析RNA干扰的效果,用噻唑兰法定量检测RNA干扰和阿司匹林对食管鳞癌细胞增生的影响,用流式细胞仪检测RNA干扰和阿司匹林对食管鳞癌细胞凋亡的影响。结果Westernblot方法证实,RNA干扰后EC109细胞COX-2表达下降至对照组的40%。MTT法检测结果显示,用COX-2基因干扰后,EC109细胞生长抑制作用增强,COX-2基因干扰和阿司匹林联合作用后,肿瘤细胞的生长抑制作用进一步增强。流式细胞仪检测结果显示,母本细胞组和RNA干扰的阴性对照组凋亡率较低,COX-2基因干扰后,促凋亡作用增加。COX-2基因干扰后再给予阿司匹林,促凋亡作用进一步增加。结论RNA干扰特异性抑制细胞COX-2蛋白的表达后,抑制食管鳞癌细胞株EC109的生长增生,增强凋亡作用,阿司匹林和RNA干扰对肿瘤细胞的增生和凋亡可产生协同效果。

纽约食管鳞状上皮癌抗原1在原发性肝细胞肝癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨纽约食管鳞状上皮癌抗原1(NY-ESO-1)在原发性肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达及其临床意义,以期为临床治疗该疾病提供参考依据。方法回顾性分析2013年1月至2019年12月于安徽医科大学安庆医学中心接受手术治疗的71例HCC患者的临床资料,并搜集其术后石蜡包埋的肝癌组织与癌旁组织标本,分别作为HCC组、癌旁组;同期回顾性分析30例肝血管瘤或肝内胆管结石患者的临床资料,并取其术后石蜡包埋的正常肝组织标本,作为正常组。采用免疫组织化学染色法检测3组患者组织中NY-ESO-1蛋白表达情况;分析NY-ESO-1蛋白表达与HCC患者临床病理特征的关系;使用Cox比例风险回归模型分析HCC患者预后的危险因素。结果HCC组NY-ESO-1蛋白表达阳性率显著高于癌旁组、正常组;NY-ESO-1蛋白阳性表达患者中肿瘤直径≥5 cm、Ⅱa~Ⅱb分期、Edmondson分级Ⅲ/Ⅳ级、Ki-67高表达、微血管侵犯(MVI)为M1/2级患者占比均显著高于NY-ESO-1蛋白阴性表达患者;NY-ESO-1蛋白表达阳性患者的总存活率显著低于NY-ESO-1蛋白表达阴性患者;Cox比例风险回归模型单因素和多因素分析结果显示,肿瘤直径≥5 cm、Ⅱa~Ⅱb分期、Edmondson分级Ⅲ/Ⅳ级、Ki-67高表达、MVI为M1/2级、NY-ESO-1阳性均是影响HCC患者预后的危险因素(HR=4.106、2.184、5.579、13.967、3.296、2.735)(均P<0.05)。结论NY-ESO-1在HCC组织中呈高表达,且肿瘤直径≥5 cm、Ⅱa~Ⅱb分期、Edmondson分级Ⅲ/Ⅳ级、Ki-67高表达、MVI M1/2级、NY-ESO-1阳性均是影响HCC患者预后的危险因素,临床上可针对上述因素采取相应措施,改善患者预后。

α-catenin在食管鳞状上皮细胞癌中表达的免疫组化研究

目的探讨α-catenin在食管鳞状上皮细胞癌中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法应用免疫组织化学法检查19例食管正常上皮及52例食管鳞癌中α-catenin的表达情况。结果α-catenin在19例食管正常上皮中均呈阳性表达,在52例食管鳞癌中的阳性表达率为21.2%,两者有非常显著性差异(P<0.01)。α-catenin的阳性表达率与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移呈负相关(P<0.05～0.01)。结论α-catenin是一种潜在的肿瘤抑制基因,是反映食管鳞癌生物学行为、预示食管鳞癌转移潜能的较好指标。

microRNA-195在食管鳞状上皮细胞癌中的表达及临床意义

目的检测microRNA-195(miR-195)在食管鳞状上皮细胞癌组织中的表达水平,探讨其临床病理生理学意义。方法应用实时荧光聚合酶链反应法检测94例食管鳞状上皮细胞癌组织和配对癌旁正常组织中miR-195的表达水平,并分析miR-195表达水平与食管鳞状上皮细胞癌患者临床病理学特征及预后之间的关系。结果食管鳞状上皮细胞癌组织中miR-195不同程度低表达45例(47.9%),正常表达39例(41.5%),高表达10例(10.6%)。miR-195低表达者比例在有无淋巴结转移、不同TNM分期者中的差异有统计学意义(P<0 05);miR-195表达水平与患者无瘤生存期显著相关,是食管鳞状上皮细胞癌患者预后的独立危险因素。结论miR-195下调影响食管鳞状上皮细胞癌进展和患者预后,可能起着抑癌基因功能。

ERCC1蛋白表达及其基因多态性与食管鳞状上皮细胞癌患者生存期关系

目的:研究ERCC1蛋白表达及其基因多态性与食管鳞状上皮细胞癌患者生存期关系。方法:从我院2016年1月至2017年2月时间段内肿瘤科收治的患者当中选择45例食管鳞状上皮细胞癌患者为主要研究对象,所有患者均在术后接受辅助化疗治疗,分别采用免疫组化分析和聚合酶链式反应,来研究ERCC1蛋白表达及其基因多态性与食管鳞状上皮细胞癌患者生存期关系。结果:蛋白表达阳性患者23例,生存期(29.8±2.4)个月;蛋白表达阴性22例,生存期为(30.1±2.3)个月,数据对比后分析P>0.05,不具有统计学意义。ERCC1基因在C8092A位点上时,CC、CA、AA、患者生存时间具有统计学意义(P<0.05);而在C118T位点上时,基因CC、CT和TT患者的生存时间无统计学意义(P>0.05)。结论:ERCC1蛋白表达与患者的生存期并不存在明显联系,而在分析患者的基因多态性情况之后可看出,患者C8092A位点上的基因多态性情况与其生存期存在一定程度的关系,对关键位点进行分析较为重要。

Keap1与食管鳞状上皮细胞癌淋巴结转移和浸润深度的关系

目的分析Keleh样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keleh-like ECH-associated protein 1,Keap1)的表达水平与食管鳞状上皮细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)淋巴结转移和浸润深度的关系。方法采用免疫组化SP法检测ESCC患者的癌组织和癌旁组织中Keap1的表达水平,通过单因素和多因素分析及趋势χ2检验分析其与ESCC淋巴结转移和浸润深度的关系。结果 Keap1高表达与淋巴结转移(OR=3.945,95%CI:1.485~9.147)和浸润深度(OR=4.683,95%CI:1.692~10.275)有关;Keap1高表达是ESCC淋巴结转移的危险因素(Waldχ~2=23.579,P<0.01),趋势χ~2检验结果显示,ESCC患者淋巴结转移的风险随Keap1表达水平的升高而升高(χ~2=5.173,P=0.023);Keap1的表达是ESCC侵及浆膜的危险因素(Waldχ~2=26.587,P<0.01),趋势χ2检验结果显示,ESCC侵及浆膜的风险随Keap1表达水平的升高而升高(χ~2=9.788,P=0.002)。结论 Keap1的表达与ESCC的发生、发展有关,Keap1的表达可促进ESCC的淋巴结转移和浸润。

食管鳞癌组织中RECK和MMP-9基因mRNA检测与分析

目的:探讨RECK和MMP-9在食管鳞状上皮细胞癌中的作用及其与临床病理因素的关系。方法:收集河南省安阳市肿瘤医院食管癌标本62例、癌旁不典型增生组织31例及正常食管粘膜组织62例。应用原位杂交方法检测每例食管标本RECK和MMP-9mRNA的表达情况。应用χ2检验,Speannan等级相关分析在SPSS13.0统计软件上作相关统计。结果:在食管鳞癌癌变过程中RECK在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管粘膜组织中mRNA的表达率依次增高,分别为45.2%(28/62)、61.3%(19/31)、82.3%(51/62),组间比较差异有统计学意义(χ2=19.186,P<0.05);不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECKmRNA阳性表达率差异均有统计学意义(χ2分别为6.799、7.862、9.121,P均<0.05)。食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中MMP-9mR-NA表达均高于正常食管粘膜组织,表达率分别为71.0%(44/62)、54.8%(17/31)、48.4%(30/62),组间比较差异有统计学意义(χ2=6.876,P<0.05);食管鳞癌组织中MMP-9mRNA表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(χ2分别为7.458,11.737,3.916,P均<0.05)。RECK和MMP-9mRNA表达率均与食管癌患者的性别、年龄无显著相关关系(P均>0.05)。RECK和MMP-9的mRNA的表达呈负相关关系(γ=-0.348,P<0.01)。结论:RECK mRNA表达率降低与MMP-9mRNA表达率升高可能与食管鳞癌的发生、发展及浸润转移有关。

5-脂氧合酶mRNA在食管鳞癌中的表达及与血管生成的关系

目的探讨5脂氧合酶(5LOX)和微血管密度(MVD)在食管鳞状上皮细胞癌(ESCC)组织中的表达及相关关系,及5LOX与肿瘤浸润和转移的关系。方法用半定量RTPCR法测定35例ESCC患者癌组织(T)和相邻癌旁组织(N)中5LOXmRNA的表达,求得T/N值。同时用免疫组织化学法测定癌组织和癌旁正常组织中微血管密度(MVD)的T/N值。结果在35例ESCC患者中,33例5LOXmRNA的T/N值>1.0,占94.3%,34例MVD的T/N值>1.0,占97.1%。5LOXmRNA和MVD与食管鳞癌的肿瘤大小、浸润深度和淋巴结转移、肿瘤分化程度有关。5LOXmRNA的T/N值与MVD的T/N值呈正相关。结论5LOX与食管鳞癌血管生成和肿瘤浸润转移密切相关,其高表达可能促进肿瘤血管生成,从而促进ESCC的浸润和转移。

青岛地区人类HPV感染亚型分布与食管鳞癌相关性的研究

目的:检测青岛地区食管鳞癌患者HPV感染阳性率及亚型分布,探讨HPV感染不同亚型与食管鳞癌发病的关系。方法:收集食管上皮鳞状细胞癌病理切片185例,应用PCR技术进行HPV基因检测。结果:在185例标本中,与对照正常食管上皮组织(10.81%)相比较,上皮鳞癌组织内(74.05%)均存在更高阳性率的HPV感染,HPV感染的亚型主要集中于HPV6、HPV16。结论:HPV感染与食管鳞状上皮细胞癌的形成密切相关。吸烟、性别、年龄及肿瘤分化程度是HPV感染的重要影响因素,低危型HPV6感染在食管鳞状上皮细胞癌发生中的作用值得进一步研究。

HLA-Ⅰ类抗原及内质网分子伴侣表达下调与新疆哈萨克族食管鳞癌的关系

目的:探讨人类白细胞抗原Ⅰ类分子(human leukocyte antigen classⅠ,HLA-Ⅰ)类抗原及内质网分子伴侣在新疆哈萨克族食管癌中的表达水平及其与临床病理特征之间的关系.方法:用免疫组织化学法检测50例新疆哈萨克族食管鳞癌、癌旁石蜡包埋组织中HLA-Ⅰ类分子和内质网分子伴侣中的表达水平,同时分析其蛋白表达下调和缺失与临床病理特征的关系.结果:在食管癌组织中,HLA-Ⅰ类抗原和内质网分子伴侣钙连接蛋白(CNX)、TAP相关蛋白(Tapasin)、蛋白质二硫异构体(Erp57)的表达下调和缺失率分别为24%/68%、20%/48%、20%/52%、16%/32%,在癌旁组织中的表达下调和缺失率为4%/0%、10%/2%、8%/2%、16%/2%.食管癌组织中HLA-Ⅰ分子及内质网分子伴侣较癌旁组织中有明显的表达下调或缺失,其差异均有统计学意义(P<0.05).在临床病理特征中,HLA-Ⅰ与肿瘤分化、淋巴结转移、肿瘤浸润深度密切相关;CNX与肿瘤分化、血管侵袭、淋巴结转移、肿瘤浸润深度密切相关;Erp57与淋巴结转移、血管侵袭、肿瘤浸润深度密切相关;Tapasin与肿瘤分化、肿瘤浸润深度密切相关,表达差异均有统计学意义(P<0.05).结论:新疆哈萨克族食管癌中有明显的HLA-I类抗原及内质网分子伴侣的表达下调或缺失,这与哈萨克族食管癌的发生及肿瘤的临床病理特征密切相关.

多种肿瘤标志物检测对食管鳞癌的诊断及意义

目的探讨血清细胞角蛋白15(CK15)、骨形态发生蛋白2(BMP2)在食管鳞状上皮细胞癌(ESCC)患者中的表达和诊断价值。方法测定30例ESCC患者组和30例正常对照组血清中CK15、BMP2、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)、增殖细胞核抗原(PCNA)、癌胚抗原(CEA)水平。CK15、BMP2、SCC、PCNA采用酶联免疫吸附试验检测,CEA、CYFRA21-1采用全自动化学发光检测仪检测。结果 ESCC患者中血清CK15水平低于正常对照(P<0.05),SCC、CEA、CYFRA21-1水平高于正常对照(P<0.05),BMP2和PCNA的血清水平与正常对照相比无显著差异(P>0.05)。CK15对ESCC诊断的敏感性和特异性分别为33.3%和90.0%,联合检测CK15和CYFRA21-1对ESCC诊断的的敏感性和特异性分别为60.0%和90.0%,联合检测CK15、SCC、CEA和CYFRA21-1对ESCC诊断的的敏感性和特异性分别为76.7%和70.0%。结论血清CK15的变化可能与ESCC的发生有关;联合检测CK15和SCC,CEA,CYFRA21-1对ESCC具有较大诊断价值;血清BMP2和PCNA对ESCC无诊断价值。

抑癌基因PTEN在食管癌发生过程中的表达

目的:探讨PTEN基因表达在食管癌发生过程中的变化及作用.方法:采用SP免疫组织化学方法检测50例原发性食管鳞状上皮癌,19例单纯增生,18例非典型增生和41例正常组织中PTEN基因的表达,结合临床病理资料进行分析.结果:癌组织中PTEN的表达与正常组织相比差异极显著(P<0.001),与单纯增生和非典型增生组织之间差异显著(P<0.05).结论:在食管癌的发生过程中,PTEN基因起一定的作用.

双支架治疗食管癌并发症1例

病例资料患者，女，58岁。因进行性吞咽困难，咳嗽、胸闷1月，声音嘶哑1周，于2012年9月10日收治入院。初步诊断为食管占位性病变，肿块压迫气管导致狭窄（狭窄的气管直径约5mm）。2012年9月13日行胃镜食管活检，病理示：食管鳞状上皮癌。

PKCα与NF-κBp50/p65在哈萨克族食管癌中的表达及意义

目的:探讨蛋白激酶Cα(proteinkinaseCα,PKCα)与核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)相关蛋白p50、p65在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达、临床意义以及两者之间的相关性.方法:应用组织芯片免疫组织化学检测50例食管鳞癌及配对的癌旁正常组织中PKCα、p50、p65蛋白的表达情况.结果:在新疆哈萨克族食管鳞癌组织中P K Cα、N F-κB p50/p65的高表达率高于癌旁正常组织[PKCα:23(46.0%)vs 4(8.0%);p50:41(82.0%)vs 24(48.0%);p65:28(56.0%)vs 18(36.0%),P=1.9×10-5,3.7×10-4,0.045],PKCα的表达与分化有关(P=0.030),p50与淋巴结转移有关(P=0.042),p65的表达与食管癌的分化及浸润深度有关(P=0.015,0.042).进一步分析发现PKCα与p50、p65在食管鳞癌中的表达呈正相关(p50:r=0.435,P=4.5×10-6;p65:r=0.626,P=1×10-6).结论:在新疆哈萨克族食管癌中PKCα与NF-κB的激活及其相互作用并可能通过炎症促进食管癌的浸润和转移.

ERCC1蛋白表达及其基因多态性与食管鳞状上皮细胞癌患者生存期关系

目的探讨核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)蛋白表达及其基因多态性与食管鳞状上皮细胞癌患者生存期的关系,为食管鳞状上皮细胞癌防治提供参考依据。方法于2011年1月—2012年10月在浙江省台州市立医院肿瘤外科随机抽取108例食管鳞状上皮细胞癌术后行辅助化疗患者,采用免疫组化法检测ERCC1蛋白表达水平,并采用聚合酶链反应测定ERCC1基因C8092A、C118T 2个位点的等位基因表达频率,分析ERCC1表达及其基因多态性与食管鳞状上皮细胞癌患者生存期的关系。结果 108例食管鳞状上皮细胞癌术后行辅助化疗患者中,ERCC1蛋白表达阳性者56例(51.9%),ERCC1蛋白表达阴性者52例(48.1%),ERCC1蛋白表达阳性者和阴性者的生存期中位数分别为29.7和31.4个月,差异无统计学意义(P>0.05);ERCC1基因C8092A位点上,等位基因CC患者19例(17.6%),CA患者44例(41.7%),AA患者45例(40.7%);ERCC1基因C118T位点上,等位基因CC患者65例(60.2%),CT患者30例(27.8%),TT患者13例(12.1%);C8092A位点等位基因CC和CA患者的生存时间中位数分别为31.5和32.0个月,均长于AA患者的24.5个月,差异均有统计学意义(均P<0.05);C118T位点等位基因CC、CT和TT患者的生存时间中位数分别为30.5、30.0和29.0个月,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ERCC1蛋白表达与鳞状上皮食管癌患者的生存期无明显关联,而ERCC1基因C8092A位点基因多态性与患者的生存期有一定关系。

NY-ESO-1和MAGE-A3在进展期胃印戒细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨纽约食管鳞状上皮癌抗原-1(NY-ESO-1)和黑色素瘤抗原基因-A3(MAGE-A3)在进展期胃印戒细胞癌组织中的表达和临床意义。方法收集2004年4月至2014年7月进展期胃印戒细胞癌组织81例,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中NY-ESO-1和MAGE-A3的蛋白表达水平。统计分析两者表达与临床病理特征和预后的关系。结果81例胃印戒细胞癌组织中NY-ESO-1的阳性表达率为9.9%(8/81),MAGE-A3的阳性表达率为28.4%(23/81)。NY-ESO-1和MAGE-A3的表达呈正相关(r=0.25,P=0.024)。NY-ESO-1表达与TNM分期和神经侵犯有关(P<0.05),与年龄、性别、病理类型、Lauren分型、肿瘤位置和脉管侵犯无关(P>0.05)。MAGE-A3表达与年龄有关(P=0.020),而与性别、TNM分期、病理类型、Lauren分型、肿瘤位置、神经侵犯和脉管侵犯无关(P>0.05)。NY-ESO-1阳性表达患者的中位总生存时间(OS)为13.0个月(95%CI:0~40.7个月),阴性表达者为20.5个月(95%CI:16.6~24.4个月),差异无统计学意义(P=0.605)。MAGE-A3阳性表达患者的中位OS为20.5个月(95%CI:8.0~33.0个月),阴性表达者为20.0个月(95%CI:15.1~24.9个月),差异无统计学意义(P=0.922)。结论NY-ESO-1和MAGE-A3在进展期胃印戒细胞癌组织中均有一定程度的表达,两者作为靶点的免疫治疗在胃印戒细胞癌中的潜在价值值得进一步探索。

内镜下射频消融术治疗范围广泛的0-Ⅱb型早期食管鳞状细胞癌及癌前病变的临床效果

目的探讨内镜下应用HALO射频消融系统（Radiofrequency Ablation，RFA）治疗范围广泛的早期表浅平坦型（0-Ⅱb）食管鳞状细胞癌及癌前病变的治疗效果。方法对中国医学科学院肿瘤医院自2008年10月至2011年6月应用HALO射频消融系统治疗的33例早期食管鳞状细胞癌（early esophageal squamous cell cancer，EESCC）、重度不典型增生（high grade dysplasia，HGD）及中度不典型增生（middle grade dysplasia，MGD）患者的临床资料进行分析，观察治疗后1年病变组织学上完全缓解率（CR）及并发症情况。结果33例患者中，男26例，女7例，年龄平均61岁，MGD10例，HGD17例，EESCC6例，病变长度3～12（平均7．9）cm，治疗区域长度5～14（平均9．9）cm，累及食管周径平均11／12周。33例患者首次治疗手术时间11～57（平均30）min，平均住院时间3天。首次治疗后3个月内镜随访CR达69．7％（23／33），随访期间追加治疗1—4（平均2．7）次，12个月内镜随访时CR达93．9％（31／33）。4例（12％）术后出现重度狭窄，行内镜下水囊扩张术3—12（平均7）次，扩张后均缓解。无其他并发症发生。结论RFA治疗范围广泛的0-Ⅱb型早期食管鳞状细胞癌和癌前病变是安全的、有效的且是一项对于操作者技术要求较低的技术，扩大了内镜微创治疗的适应证。

与食道鳞状上皮细胞癌发生相关的细胞骨架及相关蛋白的筛选鉴定

目的比较永生化食道上皮细胞系和食道鳞状上皮细胞癌(ESCC)细胞系的差异表达细胞骨架相关蛋白图谱,筛选并探讨与ESCC发生发展相关的细胞骨架及相关蛋白。方法采用组分蛋白分离方法提取细胞骨架相关蛋白,利用双向凝胶电泳(2DE)联合MALDI-TOF/TOF串联质谱技术,分析并鉴定永生化食道上皮细胞系NE1及ESCC细胞系HKESC-2中差异表达的细胞骨架及相关蛋白,并用Western blot验证其中感兴趣的差异蛋白在一组食道上皮来源细胞系和ESCC患者肿瘤组织中的表达情况。结果三次独立实验结果表明永生化食道上皮细胞系NE1和ESCC细胞系HKESC-2有52个蛋白点表达差异超过2倍,31个蛋白点经质谱分析鉴定为28种蛋白质,其中16种蛋白质在HKESC-2细胞中表达上调,12种表达下调。Vimentin在所有ESCC细胞系和大部分ESCC肿瘤组织中均呈现高表达,而Annexin II则呈现低表达甚至缺失。结论多种细胞骨架及相关蛋白在ESCC发生发展过程中表达发生变化,某些细胞骨架及相关蛋白的特异性表达模式可能可以作为ESCC诊断的分子标志。

胃镜下夹闭食管胃吻合口瘘1例

患者苏某，男性．49岁，因进行性吞咽困难半年来院就诊。入院查体：消瘦面容．双锁骨上淋巴结未触及肿大．心肺查体无异常。胃镜报告：距门齿20cm处见食管环壁狭窄，黏膜糜烂，触之出血，胃镜通过困难。取活检病理报告：食管鳞状上皮癌。胸部CT扫描见：第三、四胸椎水平，食管壁增厚。