UPLC测定食用油中的3种香兰素类物质含量

为解决现有检测方法存在前处理净化不完全、不彻底的情况,建立了超高效液相色谱(UPLC)测定食用油中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素含量的分析方法。用乙腈提取食用油中目标物,以乙腈饱和的正己烷萃取净化,冷冻分层后,再经OasisPRiMEHLB固相萃取柱净化,采用C18色谱柱分离,以0.5%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行UPLC测定,外标法定量。结果表明:3种香兰素类物质在0.1~100.0mg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限均为0.03 mg/kg,定量限均为0.1mg/kg;在0.1、0.2、1.0mg/kg3个添加水平的平均回收率为86.6%~108.1%,相对标准偏差(RSD)为2.0%~8.8%。同时,采用本方法与BJS201705中方法对食用油中的3种香兰素类物质进行测定,两种方法结果间无显著性差异。综上,建立的方法采用两步净化,减少了杂质对香兰素类物质的干扰,适用于食用油中香兰素类物质含量的测定。

HPLC-MS/MS法同时测定功能性饮料中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素的含量

目的建立HPLC-MS/MS同时测定功能性饮料中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素含量的方法。方法^(®)采用WatersCORTECS T3色谱柱(2.1mm×100mm,2.7μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,柱温30℃;流速0.3 ml/min,进样量为2μl。采用质谱检测器,电喷雾正离子模式(ESI^(+)),进行多反应监测(MRM)。按外标法定量。结果香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素分别在5.493~175.787,5.131~164.179,5.019~160.619ng/ml浓度范围内线性良好,相关系数(r)分别为0.9997,0.9999和0.9999;方法检出限分别为8,7,7μg/kg;定量限分别为15,14,14μg/kg;平均回收率分别为96.8%,86.7%,88.9%,RSD值分别为4.0%,2.0%,5.2%(n=6)。仪器的精密度和方法的重复性RSD均小于10%。结论该方法简单高效、重复性好,可用于检测功能性饮料中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素的含量。

乙基香兰素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗体的制备

为研究检测乙基香兰素(EV)的免疫学方法,采用活性酯(AE)和混合酸酐(MA)2种方法,将乙基香草酸(EVA)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备乙基香兰素人工免疫抗原BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA),并采用紫外扫描(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行鉴定。将BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA)分别免疫BALB/c小鼠,3免后10 d断尾采血并分离血清制备鼠源多克隆抗体。采用间接ELISA法测定血清抗体效价,间接竞争ELISA法测定血清抗体敏感性和特异性。结果显示,乙基香兰素人工抗原制备成功,BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA)的偶联比分别为1∶2.92和1∶37.95。BSA-EV(AE)免疫组3号血清效价最高为1∶51 200,对EV的半数抑制浓度(IC_(50))为173.78μg/L,线性范围为14.79~2 041.74μg/L。BSA-EV(MA)免疫组1号血清效价最高为1∶102 400,对EV的IC_(50)为617.00μg/L,线性范围为42.66~8 709.64μg/L。2个免疫组的血清抗体与香兰素、甲基香兰素、麦芽酚、乙基麦芽酚、BSA、鸡卵清蛋白(OVA)的交叉反应率均小于1%。综上,人工抗原BSA-EV合成成功,并成功制备了对EV灵敏特异的鼠源多克隆抗体。

香兰素下调cGAS/STING信号通路改善肝内胆汁淤积大鼠肝组织损伤

目的探讨香兰素调节环鸟苷酸腺苷酸合成酶(cyclic guanylate adenylate synthetase,cGAS)/干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon gene,STING)信号通路对肝内胆汁淤积(intrahepatic cholestasis,IC)大鼠肝组织损伤的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、IC组、香兰素组、cGAS过表达组、香兰素+cGAS过表达组,连续给药7 d。测定大鼠体质量、肝质量和肝质量/体质量比值;酶联免疫吸附法测定肝功能指标(ALT、AST、ALP、LDH),IC指标(TBIL、TBA),肝纤维化指标(HA、LN、PCⅢ);HE、Masson染色分别观察肝脏病理学、纤维沉积变化,并计算胶原容积分数;蛋白印迹法检测肝组织cGAS/STING通路相关蛋白表达。结果香兰素可改善IC大鼠肝脏病理、纤维化,升高体质量,降低肝脏质量、ALT、AST、ALP、LDH、TBIL、TBA、HA、LN、PCⅢ、胶原容积分数、cGAS、STING蛋白(P<0.05);cGAS过表达可逆转香兰素对IC大鼠上述指标的影响(P<0.05)。结论香兰素可能通过下调cGAS/STING信号通路,改善IC大鼠肝功能、IC、肝纤维化和肝组织损伤。

香兰素的合成和抑菌性的研究进展

香兰素是一种重要的调味品。由于天然香兰素的可用性来源受到限制,无法满足市场需求,因此主要通过合成方法获得。近年来,环境保护意识的提升与自然资源减少的现状,促使研究焦点转向利用微生物转化底物进行香兰素的生物合成。文章深入分析了香兰素生产中相关底物的代谢途径,并探讨了生物技术在香兰素合成领域的实际应用。

邻香兰素基稳定剂的制备及其在聚丙烯中的应用

邻香兰素(OVA)是一种天然来源的酚类化合物,具有独特的酚醛结构。以OVA、腺嘌呤(Ade)和2,6-二氨基嘌呤(26-DAPY)为原料,通过席夫碱反应合成了两种新型生物基稳定剂—OVA-嘌呤类席夫碱化合物(SB1和SB2),并通过密炼机分别将其与聚丙烯(PP)熔融共混后热压制样。采用傅里叶变换红外光谱和核磁共振氢谱表征SB1和SB2的化学结构;通过热重分析仪测试SB1和SB2的热稳定性。通过测试PP热氧稳定性、起始氧化温度(IOT)、氧化诱导时间(OIT)、光氧老化后力学性能以及PP膜紫外透过率研究了SB1和SB2对PP的耐热氧性能、光氧稳定性能和紫外屏蔽性能的影响。通过理论计算键解离能、分子最高占据轨道和最低未占据轨道之间能隙评价抗氧活性。结果表明,SB1和SB2热失重5%的温度分别为202℃和219℃,高于OVA(144℃);SB1的加入能够提高PP热氧稳定性,与纯PP相比,添加SB1后材料的IOT和OIT分别提高7~19℃和2.2~4.9 min;添加0.1%的SB1或SB2对PP均表现出光氧稳定作用;PP膜紫外透过试验表明,添加1.0%的SB1或SB2的PP膜在250~400 nm间透过率分别降至6.0%和6.2%以下。

QuEChERS/超高效液相色谱-串联质谱法同时测定大米中16种香豆素和香兰素及其衍生物

建立了大米中16种香豆素和香兰素及其衍生物的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。大米样品采用1%甲酸乙腈提取,150 mg C_(18)与450 mg无水MgSO_(4)吸附剂净化,采用Agilent SB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)分离,0.2%甲酸水溶液(含5 mmol/L甲酸铵)和乙腈为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源正负离子模式下采用多反应监测模式(MRM)进行测定,以基质匹配标准溶液内标法定量。结果显示,16种待测组分在各自质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.998),方法检出限为0.001~0.400 mg/kg,定量下限为0.004~0.600 mg/kg,平均回收率为71.3%~120%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.6%~6.5%,日内RSD(n=6)为1.0%~8.8%,日间RSD(n=3)为0.60%~14%。该法前处理简单易操作、灵敏度高、准确性好,适用于大米中香豆素与香兰素及其衍生物的同时检测。

Amycolatopsis sp.的全基因组测序及香兰素合成途径分析

拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)CCTCC NO:M2011265是一株可以转化阿魏酸生成香兰素菌株,该研究利用Illumina Hiseq测序平台对拟无枝酸菌进行全基因组测序、拼接、基因预测及功能注释,并从拟无枝酸菌的全基因组中筛选和鉴定参与香兰素合成的功能基因。结果表明,总共组装得到64个scaffolds,整个基因组组装大小约为8425551 bp,总GC含量为71.89%。通过生物信息学分析发现了香兰素合成关键基因ech、fcs和ech2基因,及香兰素分解代谢基因vdh基因,其中ech和fcs为一个基因簇,并进一步构建过表达ech-fcs-ech2菌株,其摇瓶发酵表明转化阿魏酸生成香兰素速率加快,发酵时间显著缩短。该研究获得的拟无枝酸菌的全基因组信息为解析其转化阿魏酸生成香兰素发酵过程中的代谢机理提供遗传信息基础,也为通过代谢工程获得高产香兰素菌株的研究提供理论支持。

菜籽油中内源性香兰素的形成及含量研究

为探究菜籽油中是否存在内源性香兰素,对不同产地、加工工段、炒制温度的油菜籽及菜籽油中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素进行了检测。结果表明:所有样本中均未检出甲基香兰素和乙基香兰素;不同产地油菜籽中香兰素含量差异较大,含量范围为123.55~1669.25μg/kg;加工过程中,炒制油菜籽中香兰素含量较炒制前大幅增加,且其压榨菜籽饼中的香兰素含量高于压榨菜籽原油中的;随着炒制温度的上升,炒制油菜籽、压榨菜籽原油、压榨菜籽饼中香兰素含量增加,含量范围为189.93~5080.00μg/kg。综上,油菜籽中存在内源性香兰素,不能将菜籽油及其调和油中检测出香兰素作为判定添加了外来香兰素的标准。

基于邻香兰素的席夫碱化合物的合成及晶体结构研究

以邻香兰素和水合肼作为反应物,通过缩合反应合成了双邻香兰素缩肼席夫碱。通过红外光谱、核磁共振光谱对其进行了结构表征。通过自然挥发的方法培养了化合物的单晶,并对其进行了晶体结构解析。晶体结构结果表明,该化合物属于单斜晶系,空间群为P2_(1)/n。C…C弱相互作用对晶体结构的稳定起到十分重要的作用,每个化合物分子通过四个C…C弱相互作用促使化合物分子自组装成二维网络结构。

超高效液相色谱-串联质谱法测定大米及稻谷中天然香兰素含量

目的研究大米中香兰素含量水平以及香兰素在稻谷加工过程中的变化情况。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)对209批次不同产地的大米进行香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素含量的测定;同时对16批次的稻谷分别进行砻谷、碾米或精加工,并对稻谷及其加工产品(糙米、标米或精米)进行检测。结果所有大米、稻谷及其加工产品中均未检出甲基香兰素和乙基香兰素;209批次的大米全部检出香兰素,含量值接近正态分布,主要集中在100~222μg/kg;稻谷及其加工产品(糙米、标米或精米)均检出香兰素,且含量随着加工精度依次递减。结论大米中可能存在天然香兰素,并来源于稻壳;大米中检出香兰素不能作为非法添加的判定依据,可持续研究稻谷及大米中香兰素的含量水平并科学分析,为监管部门制定合理的风险参考值提供科学依据。

二硫代氨基甲酸盐改性香兰素对铜的缓蚀行为

针对铜在NaCl溶液中腐蚀的特点,以二硫化碳、乙二胺、香兰素为原料合成了DTCV(二硫代氨基甲酸盐改性香兰素),采用电化学方法、SEM(扫描电子显微镜)和EDS(能量色散谱)评价DTCV在质量分数为3%的NaCl溶液中对铜的缓蚀性能,并探讨其在铜表面的吸附行为。结果表明:DTCV同时抑制铜电极的阳极反应过程和阴极反应过程。当添加0.30 mmol/L的DTCV时,其缓蚀效率可以达到98.34%。DTCV的吸附方式为化学吸附,且符合Langmuir吸附等温模型。DTCV可以认为是铜在氯化钠溶液中的良好缓蚀剂。

基于LC-MS/MS的大米中香兰素含量测定分析

采用液相色谱-串联质谱法(Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS)对不同品种和产地的大米中香兰素含量进行了测定和分析。本实验通过比较9种大米的香兰素含量,分析品种和产地对香兰素含量的影响,并探究不同储存条件下香兰素含量的变化。结果表明,籼稻品种的香兰素含量普遍高于粳稻品种,不同产地大米的香兰素含量存在明显差异,且储存条件对香兰素含量的保持有一定影响。本研究为大米品质评估和储存管理提供了科学依据。

基于Pd/g-C_(3)N_(4)的电化学传感器同时检测木犀草素和香兰素

石墨相氮化碳(g-C_(3)N_(4))是近年来被广泛关注的非金属半导体材料,其化学性质稳定、制备简单、成本低,但比表面积小,导电性能不理想限制了它在电化学传感器中的应用。为解决这一问题本工作通过掺杂改性的方式在g-C_(3)N_(4)表面修饰金属纳米颗粒。首先,以热缩聚合成法制备管状g-C_(3)N_(4),再通过水热法制备钯(Pd)掺杂g-C_(3)N_(4)(Pd/g-C_(3)N_(4))复合材料,并构建Pd/g-C_(3)N_(4)修饰电极应用于木犀草素(LU)和香兰素(VA)的同时测定。采用扫描电镜(SEM)、能谱(EDS)、X-射线衍射(XRD)对Pd/g-C_(3)N_(4)的形貌、结构、纯度进行表征。采用循环伏安法(CV)、差分脉冲伏安法(DPV)对LU和VA在Pd/g-C_(3)N_(4)修饰电极上的电化学行为进行研究。在最优条件下,采用DPV法同时检测LU和VA,峰电流与浓度呈线性关系,线性范围均为0.5~10μmol/L,检出限均为0.1μmol/L。

高效液相色谱法测定婴幼儿羊奶粉中的香兰素

利用高效液相色谱仪建立一种快速、简便、确度高的测定方法来检测婴幼儿羊奶粉中的香兰素含量。样品经乙醇提取后,漩涡振动,快速离心后经微孔滤膜过滤,使用Supersil AQ C_(18)柱分离,并将甲醇-水溶液作为流动相进行梯度洗脱,在278 nm的波长下进行检测,通过外标法定量。结果表明,在0.5~50.0μg·mL^(-1)呈现良好的线性关系,线性系数为0.9998,加标回收率为96.44%~104.17%,相对标准偏差为3.30%~4.63%,香兰素的检出限为0.17μg·mL^(-1)、定量限为0.51μg·mL^(-1)。

市售芝麻油中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素的含量水平研究

为检测芝麻油中的香兰素类物质的含量,以为食用油品质监控提供依据,对42份市售芝麻油及调和油产品中的香兰素、乙基香兰素、甲基香兰素进行了检测。研究结果显示在42个样品中有22个样品中检出香兰素,检出率为52.4%,检测值在103~839μg/kg范围内,其中芝麻油及含芝麻油的调和油中香兰素的检出率为100%,42个样品中均无乙基香兰素和甲基香兰素的检出。为了进一步研究芝麻油中香兰素的来源,对12份初榨芝麻油中的三种香兰素类物质进行了检测,结果均检出香兰素,测定值在210~640μg/kg范围内,甲基香兰素和乙基香兰素均未检出。以上结果说明芝麻油中存在香兰素的天然本底。

食用植物油中3种香兰素类及6种香豆素类含量检测方法的研究

通过优化前处理,探索质谱条件,建立液相色谱-串联质谱法,同时对食用植物油中3种香兰素类及6种香豆素类化合物进行含量检测的分析方法,确定方法可行性与准确性。样品经乙腈超声提取,HLB柱净化,氮吹复溶,采用多反应监测正离子模式进行定性,香兰素内标法定量,香豆素外标法定量进行分析。结果表明,9种目标化合物在20~800μg/L浓度范围内线性良好,相关系数(r^(2))为0.9955~0.9999;定量限均为20μg/kg,方法所得9种化合物回收率均在80%~120%之间。该方法灵敏度高,准确性高,可用于食用植物油中3种香兰素类和6种香豆素类化合物的同时检测。

稳定同位素内标-高效液相色谱串联质谱法测定植物油中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和乙基麦芽酚

建立同位素稀释-高效液相色谱串联质谱法测定植物油中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和乙基麦芽酚含量的方法。样品经乙腈水提取,氯化钠盐析,C18色谱柱分离后采用多反应监测模式(MRM)检测,内标法定量。香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和乙基麦芽酚在2.0~100.0 ng/mL浓度范围内线性关系良好,平均加标回收率介于97.0%~107.7%之间,相对标准偏差介于2.46%~10.1%(n=6)之间。该方法使用内标法消除基质效应、提高数据准确性,适用于植物油中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和乙基麦芽酚的测定。

食品中香兰素和乙基香兰素检测方法的研究进展

香兰素和乙基香兰素可以为食品带来独特的奶香味,已被应用于食品、饮料中,其中在乳制品、烘焙食品、饮料和食用油中的应用较多,但长期摄入香兰素和乙基香兰素可能会引起头晕、恶心等不良反应,危害人体健康。因此,对食品中香兰素和乙基香兰素的含量分析检测以及监管显得十分必要。本文综述了近年来食品中香兰素和乙基香兰素的检测方法,如液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气相色谱法、气相色谱-串联质谱法等,比较了不同方法的特点及差异,以期为今后开发简便、灵敏度高、检测速度快的香兰素和乙基香兰素的检测方法提供理论基础,对于食品行业的监督具有重要意义。

基于X射线衍射的香兰素快速检测技术研究

婴幼儿非母乳喂养时奶粉是摄取营养的主要制品,“三聚氰胺”、“香兰素”等添加剂安全事件的频频发生,引起全社会的高度关注。如何快速检测并高效识别奶粉中的不良物质,是国内外乳制品安全领域的研究热点,对保障婴幼儿成长健康具有十分重要的现实意义。由于淀粉和香兰素的红外和拉曼光谱均存在大量的吸收峰,基质与添加物的光谱信号重合区域广信噪比低,谱峰重叠干扰严重,仪器越灵敏检测筛选的难度越大。研究基于X射线衍射(XRD)建立了适用于食品添加剂香兰素的无损快速、高灵敏度检测方法,食品乳制品中的淀粉、蛋白质等基质材料在XRD下均不具有复杂的衍射花样,基于XRD的香兰素快速检测方法消除了食品乳制品中各类基质的背景干扰,结合XRD图谱的指纹特性对香兰素的掺杂进行快速鉴别和定性识别检测。结果表明,掺杂香兰素后衍射图谱13.03°出现明显尖锐的衍射峰,峰形好,响应值高,该衍射峰是快速检测香兰素是否存在的特征指纹峰。XRD法快速检测香兰素采用直接进样、精细扫描,在去除基质影响的同时,相对于气相色谱法、电泳法,该方法更加方便、快速,定性确认更准确,结果可靠,适用性强。香兰素晶体衍射峰明显,结构稳定,同时制样简单,极大地缩短了检测时间。本研究中香兰素最低掺杂量为202μg·g^(-1),可用于市售加香食品中香兰素的含量的快速检测,灵敏度可满足建议限量和超量掺加的检测需求。