超高效液相色谱串联质谱法测定木香马兜铃中马兜铃酸Ⅰ及马兜铃酸Ⅱ的含量

目的:建立测定木香马兜铃中马兜铃酸Ⅰ(AA-Ⅰ)及AA-Ⅱ含量的超高效液相色谱-质谱法。方法:色谱柱为Agilent Poroshell SB-C18(100 mm×2.1 mm,2.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(含5 mmol·L^(–1)甲酸铵),梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(–1),柱温35℃,离子源为电喷雾离子源,扫描方式为正离子扫描,多反应离子监测模式。结果:AA-Ⅰ在质量浓度为1.036~207.310 ng·mL^(–1)时与峰面积线性关系良好(r=0.9995);AA-Ⅱ在质量浓度为1.1~110.0 ng·mL^(–1)时与峰面积线性关系良好(r=0.9991);AA-Ⅰ的定量限、检测限分别为0.3287、0.0986 pg;AA-Ⅱ的定量限、检测限分别为0.6506、0.1952 pg;AA-Ⅰ的精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于5.0%;AA-Ⅱ的精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于5.0%;AA-Ⅰ的平均加样回收率为92.50%,RSD为4.3%;AA-Ⅱ的平均加样回收率为104.97%,RSD为3.7%。15批木香马兜铃药材中1批未检出AA-Ⅰ,8批未检出AA-Ⅱ,其余批次的AA-Ⅰ质量分数为5.94×10^(–4)~2.86 mg·g^(–1),AA-Ⅱ质量分数为0.09~0.50 mg·g^(–1)。结论:所建立的方法专属性强、快速、灵敏,可用于木香马兜铃中AA-Ⅰ及AA-Ⅱ的含量测定。

UPLC-MS/MS测定双辛鼻窦炎颗粒中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ的含量

目的:同时测定双辛鼻窦炎颗粒中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ的含量,为其质量控制提供参考。方法:采用超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定双辛鼻窦炎颗粒中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ的含量。采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(含1 mmol·L^(–1)乙酸铵,B)为流动相梯度洗脱,电喷雾离子源,正离子扫描,多反应监测模式,以标准曲线法计算样品中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ的含量。结果:12批双辛鼻窦炎颗粒中9批样品未检出马兜铃酸Ⅰ(检出限0.13 pg),3批样品检出马兜铃酸Ⅰ,质量分数为14.62~25.82 ng·g^(–1)。所有样品均未检出马兜铃酸Ⅱ(检出限0.44 pg)。结论:建立的UPLC-MS/MS同时测定双辛鼻窦炎颗粒中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ含量的方法,专属性强、灵敏度高、重复性好,可为双辛鼻窦炎颗粒中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ的质量控制提供参考。

UPLC-MS/MS同时测定通迪胶囊中的马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ

目的:建立通迪胶囊中马兜铃酸Ⅰ(AA-Ⅰ)和AA-Ⅱ的超高效液相色谱-质谱法。方法:采用Shiseido Shim-pack velox C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(含甲酸铵,B)为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(–1),采用多反应监测,AA-Ⅰ以m/z 358.9→298.0(定量)和m/z 358.9→296.0(定性)为监测离子对;AA-Ⅱ以m/z 329.0→268.0(定量)和m/z 329.0→294.0(定性)为监测离子对,建立了液相色谱-质谱法检测方法,并对样品进行分析。结果:AA-Ⅰ在1.0524~420.9600 pg、AA-Ⅱ在1.002~100.200 ng时与峰面积线性关系良好(r>0.999),加样回收率分别为97.63%、92.34%,RSD分别为2.24%、1.49%,15批样品中AA-Ⅰ和AA-Ⅱ的质量分数分别为3.760~20.790、0.010~0.156μg·g^(–1)。结论:该方法灵敏、快速、准确、专属性强,可用于测定通迪胶囊中AA-Ⅰ和AA-Ⅱ的含量,可为通迪胶囊用药安全提供参考。

基于HPLC-MS/MS法研究马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ的大鼠肝微粒体酶S9体外代谢

马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ广泛存在于马兜铃属植物中,具有肾损伤毒性和致癌致突变毒性。为了研究马兜铃酸类化合物的毒性产生机制,建立了马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ及其大鼠肝微粒体酶S9代谢物分离与鉴定的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。采用体外代谢法分别研究了有氧和厌氧孵育条件下,马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ在大鼠肝微粒体酶S9作用下的代谢行为,并对各代谢物进行结构表征。研究结果显示:马兜铃酸Ⅰ在有氧条件下生成的代谢产物为马兜铃酸Ⅰa,在厌氧条件下生成的代谢产物为马兜铃内酰胺Ⅰ;马兜铃酸Ⅱ只在厌氧条件下生成了马兜铃内酰胺Ⅱ。马兜铃内酰胺类化合物的生成是马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ在肝微粒体酶S9代谢过程中毒性产生的主要原因。该结果对于更好地理解马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酸Ⅱ的毒性作用机制,控制毒副反应的发生具有一定意义。

超高效液相-质谱法测定滴通鼻炎水中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的测定滴通鼻炎水中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ的含量,为其质量控制提供借鉴。方法采用超高效液相-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定滴通鼻炎水中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ的含量。色谱柱采用Waters-ACQUI UPLC HSS T3 C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm),采用乙腈为流动相A,0.1%甲酸含1 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液为流动相B,梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式,以标准曲线法计算含量。结果17批滴通鼻炎水中有9批样品未检出马兜铃酸Ⅰ(检出限0.13 pg),8批样品中检出马兜铃酸Ⅰ,含量在0.41~3.60 ng·mL^(-1)。所有样品中均未检出马兜铃酸Ⅱ(检出限0.41 pg)。结论建立了UPLC-MS/MS同时测定滴通鼻炎水中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ含量的方法,该方法专属性强、灵敏度高、重复性好,可为滴通鼻炎水中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ的质量控制提供参考。

UPLC-MS/MS同时测定京制咳嗽痰喘丸中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的:建立超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定京制咳嗽痰喘丸中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量方法。方法:采用Agilent Poroshell SB-C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm),以甲醇(A)-5 mmol/L甲酸铵(含0.1%甲酸),(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为30℃,进样量为1μL。质谱采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式下多反应监测(MRM),标准曲线法测定。结果:马兜铃酸I和马兜铃酸Ⅱ分别在1.052 4~210.48 pg(R^(2)=0.998 1,n=6)、1.002~100.2 pg(R^(2)=0.999 9,n=6)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为96.09%(RSD=2.08%)和88.05%(RSD=2.64%)。结论:该方法简便、灵敏、专属性好,可用于京制咳嗽痰喘丸马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量测定。

马兜铃酸Ⅰ,Ⅱ在大鼠体内的药动学研究

目的：建立高效液相色谱法测定血浆中马兜铃酸Ⅰ（AAⅠ）和马兜铃酸Ⅱ（AAⅡ）浓度的方法，研究其在大鼠体内的药动学。方法：HPLC测定大鼠静脉注射AAI和Ⅱ后的血药浓度，并进行药动学分析。结果：AAⅠ在0．056～56．3mg·L^-1与峰面积比呈良好的线性关系（r=0．9997），样品平均回收率为88．7％，日内日问精密度的RSD均〈8％。AAⅡ在0．192—11．52mg·L^-1与峰面积比呈良好的线性关系（r=0．9989），样品平均回收率为85．8％，日内精密度的RSD〈3％，日间精密度的RSD小于10％。按5mg·kg^-1剂量尾静脉给予AAⅠ与AAⅡ混合物后，两者在大鼠体内的处置过程符合二房室模型，AAI的主要药动学参数为：t1/2α（8．2±1．7）min，t1/2β（79．6±28．5）min，CL（0．010±0．003）L·min^-2·kg6-1；AAⅡ的主要药动学参数为：t1／2α（56．7±38．1）min，t1／2β（209±37．9）min，CL（0．003±0．001）L·min^-1·kg^-1。结论：AAⅠ和AAⅡ的HPLC简单可靠，可用于两者的血药浓度分析及药动学研究。静注给药后AAⅠ与AAⅡ的血药浓度的变化速度有较大差异，前者的分布和消除相对较快而后者相对较慢。

高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的建立以高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ含量的方法。方法色谱柱为C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(72∶27∶1),检测波长为250nm,流速为1.0ml/min。结果马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ检测浓度线性范围分别为0.84~13.50μg/ml(r=0.9997,n=5)、2.03~32.50μg/ml(r=0.9994,n=5),最低检测浓度分别为0.3、0.1μg/ml。结论本方法简便、易行,可为临床诊治马兜铃酸肾病提供依据。

反相高效液相色谱法测定甘露消毒丸中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定甘露消毒丸中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量。方法采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水-冰醋酸(68∶32∶1)为流动相,检测波长为250 nm,流速为1.0 mL.m in-1。用超声提取法提取甘露消毒丸中的马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ。结果马兜铃酸Ⅰ在0.135~27.000μg.mL-1(r=0.999 8,n=5),马兜铃酸Ⅱ在0.325~65.000μg.mL-1(r=0.999 9,n=5)线性关系良好。马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的最低检测浓度分别为0.081,0.065μg.mL-1,平均回收率分别为98.50%,99.12%,RSD分别为2.30%,3.50%。结论该方法简便、快速、灵敏。

UPLC-MS/MS检测伤痛宁片中5个马兜铃酸成分

目的:测定伤痛宁片中马兜铃酸类成分的含量。方法:采用超高效液相色谱-质谱法测定伤痛宁片中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲa、马兜铃酸AA-Ⅳa、马兜铃内酰胺Ⅰ的含量。采用Agilentporoshell C18(100 mm×2.1 mm,2.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱;电喷雾正离子模式,多反应监测,进样量为1μL,以基质标准曲线外标法计算伤痛宁片中5个马兜铃酸成分含量。结果:18批样品中检出马兜铃酸Ⅰ质量分数为0.01~0.05 mg·kg^(–1),马兜铃酸Ⅱ和马兜铃酸Ⅲa未检出,马兜铃酸AA-Ⅳa质量分数为0.26~1.00 mg·kg^(–1),马兜铃内酰胺Ⅰ质量分数为0.40~2.17 mg·kg^(–1)。结论:建立的含量测定方法,可为伤痛宁片及含马兜铃酸中药制剂的临床应用和安全监管提供参考。

UPLC-MS/MS测定九味羌活颗粒中7个马兜铃酸类成分

目的:采用超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定九味羌活颗粒中7个马兜铃酸类成分的含量。方法:采用Shim-pack Velox PFPP色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以1 mmol·L^(–1)甲酸铵溶液(含0.05%甲酸,A)-甲醇(B)为流动相梯度洗脱。体积流量为0.4 mL·min^(–1),柱温为40℃,进样量为1μL,电喷雾离子源,多反应监测模式。结果:7个马兜铃酸类成分线性关系良好,r均≥0.997,加样回收率为86.5%~112.2%;检出限为0.05~0.31 ng·mL^(–1),定量限为0.18~1.04 ng·mL^(–1)。对3个企业8批样品进行测定,结果检出马兜铃酸Ⅳa、马兜铃内酰胺的质量分数分别为0~0.417、0.021~0.173μg·g^(–1)。结论:该方法重复性好、灵敏度高,可用于九味羌活颗粒中马兜铃酸类成分的测定。

UPLC-MS/MS测定追风透骨丸中马兜铃酸类成分含量

目的:建立超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定追风透骨丸中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲ和马兜铃内酰胺Ⅰ的含量。方法:采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液(含5 mmol·L^(-1)甲酸铵)为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),用电喷雾离子源,在多反应监测模式下采用外标法测定。结果:4个成分在2~250 ng·mL^(-1)线性关系良好,r均大于0.999,在20 ng·mL^(-1)添加水平的平均回收率分别为104.2%、75.7%、112.0%、105.4%,RSD为2.8%~6.1%,方法定量限为0.002~0.100μg·g^(-1)。7批样品中均未检出马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲ,马兜铃酸Ⅰ检出量为0.09~0.41μg·g^(-1),马兜铃内酰胺Ⅰ检出量为0.62~1.30μg·g^(-1)。结论:该方法专属性好、灵敏度高、结果准确,可为追风透骨丸中马兜铃酸的质量控制提供参考。

UPLC-MS/MS法测定再造丸中的4种马兜铃酸类成分

目的采用超高效液相色谱-串联质谱法测定再造丸中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲ、马兜铃内酰胺Ⅰ的含量。方法采用WatersAcquityBEHUPLCC_(18)色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),以甲醇-0.1%甲酸溶液(含5mmol·L^(-1)甲酸铵)为流动相,梯度洗脱,流速0.3mL·min^(-1),采用电喷雾离子源,正离子模式下,多反应监测模式下,用外标法定量。结果4种马兜铃酸类成分在各自浓度范围内的线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率为88.4%~102.5%,RSD均小于5%。结论所用方法的专属性好、灵敏度高、结果准确,可为再造丸的质量控制提供参考。

以关木通为例探讨不同入药形式对中药中有毒成分含量的影响

目的:以关木通为例,探讨中药不同入药形式对其毒性成分含量的影响。方法:以3.7mmol·L-1磷酸缓冲液(pH2.55)-乙腈为流动相,260nm为检测波长,采用RP-HPLC-DAD方法测定以粉末、水煎液2种形式入药的关木通中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅳa的含量情况。结果:关木通水煎液中马兜铃酸Ⅰ,Ⅱ,Ⅳa的煎出率分别为药材粉末中含量的53.4%,75.5%,61.9%;而在水煎后的药渣中马兜铃酸Ⅰ,Ⅱ和Ⅳa的残余量分别相当于粉末中含量的22.3%,15.7%和30.3%;3种马兜铃酸其余的约10%-25%可能在水煎过程中被破坏了;马兜铃酸Ⅰ在水煎液中仍为主要的马兜铃酸类成分。结论:不同入药形式对关木通中的毒性成分含量有很大的影响;应根据毒性成分的性质而选择合适的入药形式,以此来减少中药毒性成分对人体的损害。

基于多成分含量测定结合化学计量法评价水族药材骂广瓦质量

目的:建立高效液相色谱法测定水族药材骂广瓦中甲基丁香酚、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃内酰胺Ⅰ、马兜铃酸Ⅰ和马兜铃酮的含量。方法:采用Welch C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-7.0 mmol/L磷酸缓冲溶液(pH=2.3)为流动相,梯度洗脱,流速:1.0 mL/min;检测波长:230 nm;柱温:40 ℃。采用SPSS 21.0及SIMCA 13.0软件进行综合分析评价骂广瓦药材的质量。结果:各组分在一定范围内呈线性关系,回收率在97.77%~100.16%之间,RSD在0.91%~2.19%之间;定量数据经统计学软件分析,甲基丁香酚、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃内酰胺Ⅰ可作为影响差异的主要成分,OPLS-DA图也可直观的区别不同产地的样品。结论:该方法简便、准确可靠,可为骂广瓦的质量控制提供依据。

Pharmacokinetica studies of aristolochic acid-I and-II in rats after intragastrical administration of Radix Aristolochiae and Muskone

The pharmacokinetic parameters of aristolochic acid-Ⅰ （AA-Ⅰ） and -Ⅱ （AA-Ⅱ） in rat serum after intragastrical administration of the crude drug powders of Radix Aristolochiae （RA） and Muskone containing equal amounts of RA were compared. The pharmacokinetic profiles of AA-Ⅰ and AA-Ⅱ could be fitted with a two-compartment model The elimination half time （T1/2β） of AA-Ⅰ in Muskone was 1573.2 min and that of AA-Ⅰ in RA was 475.8 min; T1/2β of AA-Ⅱ in Muskone was 2344.8 min and that of AA-Ⅱ in RA was 427.8 rain. The area under the concentration-time curve （AUC） of AA-Ⅰ in Muskone was 13.07 μg/h/mL and that of AA-Ⅰ in RA was 3.86 μg/h/mL; AUC of AA-Ⅱ in Muskone was 67.67 μg/h/mL and that of AA-Ⅱ in RA was 23.93 μg/h/mL. The bioavailabilities of AA-Ⅰ and AA-Ⅱ in Muskone were markedly increased compared with that in RA based on the elimination half-time and A UC values.