HPLC法同时测定驻春胶囊中4个成分的含量

目的:建立以高效液相色谱法(HPLC)同时测定驻春胶囊中异补骨脂素、补骨脂素、淫羊藿苷、蛇床子素含量的方法。方法:采用HPLC法,以异补骨脂素、补骨脂素、淫羊藿苷和蛇床子素作为指标成分,采用Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-水,梯度洗脱,体积流量为1.0 m·min^(-1);柱温为30℃,检测波长为254 nm,进样量为5μL。结果:异补骨脂素、补骨脂素、淫羊藿苷和蛇床子素质量浓度分别在0.0059~0.1770 mg/mL、0.0049~0.1470 mg/mL、0.0031~0.093 mg/mL和0.0048~0.1440 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,其相关系数分别为0.9996、0.9995、0.9997和0.9995,平均加样回收率分别为101.45%、100.95%、100.46%和101.17%;RSD分别为2.19%、1.83%、1.71%和2.01%。结论:该分析方法适用于驻春胶囊中异补骨脂素、补骨脂素、淫羊藿苷和蛇床子素的含量测定。

驻春胶囊通过TNFRSF1A调节NK细胞活性治疗肾阳虚型骨质疏松症

目的:运用网络药理学和生物信息学技术探讨驻春胶囊治疗肾阳虚型骨质疏松症的作用机制。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)筛选驻春胶囊组方中药的活性成分,并使用TCMSP和Drugbank数据库检索有效成分相关靶点。在GeneCards数据库、药物靶标数据库(therapeutic target database,TTD)和人类在线孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man,OMIM)中检索骨质疏松症致病靶点;在GEO数据库中筛选肾阳虚型骨质疏松症患者与正常人之间的差异表达基因;将两者取交集,得到肾阳虚型骨质疏松症致病靶点。将活性成分相关靶点与肾阳虚型骨质疏松症致病靶点取交集,得到驻春胶囊治疗肾阳虚型骨质疏松症的潜在靶点。利用Cytoscape 3.9.1软件构建“药物-活性成分-潜在靶点”网络。利用R软件对潜在靶点进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopediaof genes and genome,KEGG)信号通路富集分析。采用STRING数据库进行聚类关联分析,并通过CytoNCA分析筛选驻春胶囊治疗肾阳虚型骨质疏松症的关键靶基因。采用AutodockVina软件对活性成分和关键靶基因进行分子对接验证;采用CIBERSORT进行免疫细胞浸润分析。结果:本研究共筛选得到183个活性成分、2732个活性成分相关靶点、897个肾阳虚型骨质疏松症的疾病靶点。将活性成分相关靶点与疾病靶点取交集,得到34个驻春胶囊治疗肾阳虚型骨质疏松症的潜在靶点。“药物-活性成分-潜在靶点”网络分析得到木犀草素、8-异戊烯-山柰酚(8-isopentenyl-kaempferol)、黄豆黄素(glycitein)、柚皮素(naringenin)、槲皮素(quercetin)等有效活性成分和SIRT1、CDKN1B、TNFRSF1A等潜在靶基因。GO和KEGG通路富集分析显示,主要靶点富集在多个细胞组分、生物过程及信号通路上。PPI网络分析得到SIRT1、CDKN1B和TNFRSF1A为驻春胶囊治疗肾阳虚型骨质疏松症的关键靶基因。分子对接显示活性成分与关键靶点对接良好。CIBERSORT免疫浸润分析显示,与正常对照组相比,肾阳虚型骨质疏松症组中激活的NK细胞和静止的Mast细胞显著降低,NK细胞的激活与TNFRSF1A的表达呈显著的负相关。结论:驻春胶囊的多个有效活性成分可能通过多个靶点激活多条信号通路发挥改善肾阳虚型骨质疏松症的作用,其中通过TNFRSF1A调控NK细胞的激活可能是驻春胶囊治疗肾阳虚型骨质疏松症的关键环节之一。

驻春胶囊治疗原发性骨质疏松临床疗效观察

为验证驻春胶囊治疗原发性骨质疏松的临床疗效 ,以盖天力为对照组进行临床观察 ,选择肾气虚型骨质疏松病人 10 6例 ,随机数字表法按来诊顺序进行分组 ,治疗组 75例 ,对照组 31例。试验组口服驻春胶囊 ,对照组口服盖天力 ,观察骨痛和肾气虚症状及骨密度的变化。结果显示 ,驻春胶囊对改善肾气虚症状及骨质疏松性腰背疼痛、骨痛症状疗效明显 ;对抑制女性骨质疏松、骨密度降低有明显作用。两组总疗效统计结果显示 ,试验组显效 5 2例 ,有效 17例 ,总有效率达 92 .0 0 % ;对照组显效 15例 ,有效 7例 ,总有效率达 70 .79%。经Ridit分析 ,P <0 .0 5 ,说明两组差异有显著性 ,试验药物疗效显著优于对照组药物。

高效液相色谱法测定驻春胶囊中淫羊藿苷含量

目的 :建立驻春胶囊中淫羊藿苷的含量测定方法。方法 :采用ZorboxzlipseXDB色谱柱 (2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,流动相为乙腈 水 (31∶6 9) ,流速 0 3mL min ,检测波长 :2 70nm。结果 :淫羊藿苷在 0 2 9～ 4 6 4 μg范围内线性关系良好 ,r =0 9996。回收率为 10 3 2 % ,RSD =1 2 4 % (n =5 )。结论 :本法操作简便、准确 ,可作为驻春胶囊的质量控制方法之一。

加味益气丸联合驻春胶囊预防骨质疏松性椎体压缩骨折PKP后再骨折效果观察

目的 :观察加味益气丸联合驻春胶囊预防骨质疏松性椎体压缩骨折(OVCFs)椎体后凸成形术(PKP)后再骨折的效果。方法:87例OVCFs患者按治疗方法分为A、B两组。A组口服加味益气丸与驻春胶囊,B组口服碳酸钙D3片,两组均治疗6个月。比较两组术前、术后1年骨密度变化及再骨折发生率。结果:两组术后1年骨密度值均升高,与术前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1年A组骨密度改善优于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1年邻近椎体再骨折率A组14.2%,B组21.1%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PKP术后口服加味益气丸联合驻春胶囊,可提高骨质疏松患者骨密度,一定程度上可预防再次骨折。

经皮椎体后凸成形术结合驻春胶囊治疗骨质疏松性椎体压缩骨折临床研究

目的:探讨采用经皮椎体后凸成形术(PKP)结合驻春胶囊治疗骨质疏松性椎体压缩骨折(OVCFs)的临床疗效。方法:将103例OVCFs患者分为对照组(PKP)和治疗组(PKP+驻春胶囊)。结果:两组患者术后1 d、术后1年VAS评分及ODI指数均较术前降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1年邻近椎体再骨折率对照组为24.4%(10/41),治疗组为14.5%(9/62),治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PKP术结合驻春胶囊治疗骨质疏松性椎体压缩骨折有较好临床疗效,可降低相邻节段椎体再骨折率,提高患者的生活质量。

驻春胶囊治疗绝经后骨质疏松症30例

目的观察驻春胶囊治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效。方法将60例绝经后骨质疏松症患者随机分为治疗组与对照组,每组30例。治疗组给予驻春胶囊口服;对照组给予复方氨基酸螯合钙胶囊(乐力)口服,每天1粒。两组疗程均为6个月。比较两组治疗前后桡骨远端1/3骨密度与临床疗效。结果治疗组临床疗效及止痛效果明显优于对照组(P<0.05)。两组治疗后桡骨远端1/3骨密度均显著提高,治疗组骨密度提高幅度优于对照组(P<0.05)。结论驻春胶囊对绝经后骨质疏松症具有较好的止痛效果,并能有效提高骨密度。

驻春胶囊治疗糖尿病性骨质疏松患者的40例临床观察

目的观察驻春胶囊治疗糖尿病性骨质疏松症的临床疗效。方法将2009-2016年在河南省洛阳正骨医院就诊80例2型糖尿病性骨质疏松症患者(5年以上糖尿病病史)随机分为驻春胶囊治疗组40例和阿仑膦酸钠对照组40例,两组患者首先均予以控制血糖,在继续原有降糖药治疗的基础上,驻春胶囊治疗组患者服用驻春胶囊(医院老中医经验协定方内部制剂),每日早晚各服一次,每次5粒。阿仑膦酸钠对照组患者服用阿仑膦酸钠,每周一次,每次70 mg。每3个月为一个疗程,连续服用两个疗程后观察临床疗效。患者分别在治疗前后检测骨密度值,血清钙(Ca)、骨钙素(bone glaprotein,BGP)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartra-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b)的含量,同时评价其临床症状。结果驻春胶囊能明显提高患者骨密度,升高血清钙和BGP含量,降低血清TRACP-5b的含量,改善糖尿病性骨质疏松症临床症状,同时驻春胶囊在改善临床症状及BGP含量方面明显优于阿仑膦酸钠对照组。结论驻春胶囊对糖尿病性骨质疏松症患者有较好的临床疗效,其作用机理值得进一步研究。

驻春胶囊联合骨炎膏治疗创伤性膝关节滑膜炎临床研究

目的观察驻春胶囊联合骨炎膏治疗创伤性膝关节滑膜炎的临床疗效。方法选取2016年6月—2017年12月在洛阳正骨医院骨关节二科的创伤性膝关节滑膜炎患者130例,随机分为对照组和观察组。对照组患者口服驻春胶囊,观察组患者采用口服驻春胶囊联合骨炎膏治疗。比较两组患者的临床疗效及药物起效时间。结果观察组临床总有效率为90.9%,明显高于对照组87.5%(P<0.05);治疗后观察组药物起效时间平均为(12.6±4.3)d,优于对照组(17.8±5.7)d,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论驻春胶囊联合骨炎膏治疗创伤性膝关节滑膜炎疗效显著,操作简单,安全可靠,值得推广。

基于网络药理学及分子对接技术探究驻春胶囊治疗骨质疏松症的作用机制

目的:基于网络药理学联合分子对接技术探究驻春胶囊治疗骨质疏松症的作用机制。方法:应用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)数据库筛选出本处方6味中药活性成分及作用靶点;从GeneCards,TTD和OMIM数据库查询疾病骨质疏松症靶点;利用R语言将药物活性成分相关的靶点和疾病靶点进行匹配映射取得交集靶点,运用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物活性成分-作用靶点基因”网络,运用STRING软件构建蛋白相互作用网络,对所得网络进行计算,筛选发挥治疗作用的关键靶点;同时利用R语言相关数据包进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路分析;使用AutodockVina进行分子对接,计算核心靶点和驻春胶囊重要活性成分的结合度,利用LigPlot软件绘图。结果:①筛选得出驻春胶囊治疗骨质疏松症的核心活性成分,包括槲皮素、木犀草素、山柰酚、川皮苷、柚皮素、脱水淫羊藿素等,驻春胶囊治疗骨质疏松症的关键靶点蛋白包括丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)、雌激素受体1(Estrogen Receptor 1,ESR1)、白细胞介素(Interleukin,IL)-6等,分子对接结果显示驻春胶囊核心化合物与关键靶点蛋白结合稳定;②GO和KEGG分析结果显示,驻春胶囊可能通过影响P13KAkt信号通路、HIF-1信号通路、IL-17信号通路等通路,集中于调控细胞凋亡、细胞增殖、免疫等多生物功能来发挥其治疗骨质疏松症的作用;③结果证实驻春胶囊可通过多成分-多靶点-多途径的治疗特点干预骨质疏松症。

全髋关节置换术联合驻春胶囊治疗老年股骨颈骨折临床观察

目的探讨全髋关节置换术联合驻春胶囊治疗老年股骨颈骨折的效果。方法将2015年5月—2018年1月收治的60例需行人工全髋关节置换术治疗股骨颈骨折的老年患者随机分为试验组30例,对照组30例。2组均使用生物型全髋行人工全髋关节置换术进行治疗。试验组于术后1 d给予驻春胶囊口服,对照组给予碳酸钙D_3片,2组均服药3个月。观察2组患者的骨密度及术后3个月髋关节功能恢复情况。结果 2组患者3个月后骨密度较术前比均升高,且差异有统计学意义(P<0.05);且试验组术后3个月骨密度比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组术后3个月Harris评分比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论全髋关节置换术联合驻春胶囊治疗老年股骨颈骨折效果良好,值得临床推广应用。

驻春胶囊治疗早期股骨头坏死患者疗效观察

目的:观察驻春胶囊联合功能康复训练对早期股骨头坏死患者骨密度及髋关节功能的影响。方法:选取河南省洛阳正骨医院2017年7月至2019年7月收治的66例早期股骨头坏死患者,依据随机数字表法分为两组,对照组33例行常规治疗+功能康复训练,观察组33例在对照组基础上增加药物驻春胶囊。治疗前、治疗后均需测定骨密度,评定髋关节功能。结果:治疗前,两组患者的骨密度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者的骨密度均有不同程度的改善,且观察组骨密度改善程度优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组患者的髋关节功能评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者的髋关节功能评分均有不同程度的改善,且观察组髋关节功能评分改善优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:早期股骨头坏死患者使用驻春胶囊联合功能康复训练疗效显著,骨密度显著提升,同时对髋关节功能起到明显改善作用。

驻春胶囊通过调控miR-935促进成骨细胞分化的机制

目的:探讨驻春胶囊对成骨细胞的影响及驻春胶囊通过调控miR-935促进成骨细胞分化的作用机制。方法:体外培养小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1,采用CCK-8法检测驻春胶囊的细胞毒性和半最大效应浓度(concentration for 50%of maximal effect,EC50)。将MC3T3-E1细胞分为无诱导组、诱导组、诱导+驻春胶囊组、无诱导+驻春胶囊组,诱导14 d和21 d后,茜素红染色观察细胞成骨诱导情况。miR-935转染成骨细胞,将细胞分为miR-935 inhibitor和inhibitor NC组。qRT-PCR和Western blot检测细胞miR-935、信号转导与转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)基因和蛋白表达水平。结果:驻春胶囊对MC3T3-E1细胞的EC50值为4684 mg·L^(-1)。茜素红染色结果显示,与无诱导组比较,诱导组、诱导+驻春胶囊组、无诱导+驻春胶囊组细胞均可见不同程度的红色结节和钙沉积。qRT-PCR结果显示,诱导14 d和21 d时,与无诱导组比较,诱导组细胞的ALP mRNA、RUNX2 mRNA、OCN mRNA、miR-935 mRNA水平升高,STAT1 mRNA水平降低(P<0.05),无诱导+驻春胶囊组细胞的STAT1 mRNA水平降低(P<0.05)。与诱导组比较,诱导+驻春胶囊组细胞的RUNX2 mRNA、OCN mRNA水平升高,STAT1 mRNA水平降低(P<0.05)。WB结果显示,诱导14 d和21 d时,与无诱导组比较,诱导组细胞的ALP、RUNX2、OCN水平升高,STAT1水平降低(P<0.01),无诱导+驻春胶囊组细胞的ALP、RUNX2、OCN水平升高,STAT1水平降低(P<0.05)。与诱导组比较,诱导+驻春胶囊组细胞的ALP、RUNX2、OCN水平升高,STAT1水平降低(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与正常对照组比较,驻春胶囊组细胞miR-935 mRNA水平升高(P<0.01)。与inhibitor NC组比较,miR-935 inhibitor组细胞OCN mRNA、ALP mRNA、miR-935 mRNA水平降低,STAT1 mRNA水平升高(P<0.05)。WB结果显示,与inhibitor NC组比较,miR-935 inhibitor组细胞OCN、ALP水平降低,STAT1水平升高(P<0.05)。结论:驻春胶囊通过调控miR-935促进成骨细胞分化,其机制可能与影响STAT1、RUNX2、ALP和OCN的表达有关。