骨形成蛋白7对糖皮质激素诱导PC12细胞凋亡的作用研究

目的探究骨形成蛋白7(BMP-7)对糖皮质激素(GC)诱导PC12细胞凋亡的作用。方法采用不同浓度GC干预PC12细胞,明确不同浓度GC对PC12细胞凋亡的影响;在PC12细胞中感染BMP-7过表达/敲低慢病毒和对照病毒,然后采用DMSO或GC干预细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Bax基因表达,Western blotting法检测Cleaved-Caspase-3蛋白表达。结果不同浓度GC处理后的细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);与0μmol/L GC比较,GC浓度为10μmol/L时,PC12细胞凋亡率明显升高(P<0.05);GC浓度为50μmol/L时,PC12细胞Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05)。过表达或敲低BMP-7后4组细胞的细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);与GC-NC组比较,GC-oe BMP-7组细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达均降低(P<0.05);与DMSO-NC组比较,GC-oe BMP-7组细胞凋亡水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。与DMSO-NC组比较,DMSO-sh BMP-7组细胞凋水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达均增加(P<0.05);与GC-NC组比较,GC-sh BMP-7组细胞凋水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论高水平GC激素诱导PC12细胞凋亡增加,BMP-7可以拮抗GC诱导的细胞凋亡增加。

人转化生长因子β_1及骨形成蛋白7基因共表达载体的构建及对骨髓基质干细胞的定向诱导作用

目的构建人转化生长因子1β(transform ing grow th factor1β,TGF-1β)及骨形成蛋白7(bonem orphogenetic prote in 7,BM P-7)基因共表达腺病毒真核表达载体,并观察感染骨髓基质干细胞(m arrow strom a l stemce lls,M SC s)后目的基因的表达和对细胞生物学行为的影响。方法以复制缺陷的腺病毒A dE asy为基因载体,制备携带TGF-1β及BM P-7基因的高滴度腺病毒液感染人M SC s,通过免疫细胞化学、原位杂交、RT-PCR及己糖醛酸水平检测等方法鉴定外源基因的表达,分析外源性基因共表达对M SC s定向软骨分化的调控机制。结果腺病毒感染72 h后,TGF-1β和BM P-7免疫细胞化学染色可见大部份M SC s胞浆内均出现棕黄色粗颗粒,通过原位杂交检测出Ⅱ型胶原蛋白基因mRNA,感染10 d后细胞培养液中己糖醛酸含量为68.03±3.34μg/m l与感染前的53.20±3.70μg/m l明显升高有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了人TGF-1β及BM P-7共表达基因腺病毒表达载体,证实其在M SC s中的表达和具有向软骨细胞定向分化的诱导作用,为软骨缺损修复的局部基因治疗奠定实验基础。

单核细胞趋化蛋白1和骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达

背景:单核细胞趋化蛋白1是新近明确的对单核/巨噬细胞有趋化和激活双重作用的趋化因子,骨形成蛋白7作为一种新发现的纤维化负性调节因子逐渐成为抗组织纤维化治疗的研究热点,但两者对病理性瘢痕形成中组织纤维化作用的研究至今鲜有报道。目的:研究单核细胞趋化蛋白1,骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达水平。方法:采用免疫组织化学方法检测单核细胞趋化蛋白1、骨形成蛋白7在25例瘢痕疙瘩、30例增生性瘢痕、24例非病理瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达水平。所有标本均来自2008-07/2010-01郑州大学第一附属医院整形外科住院患者,且均无皮肤疾病、结缔组织病、传染病、恶性肿瘤和其他重要脏器疾病,术前无射线治疗、激光治疗及免疫治疗史,其中所取瘢痕组织来自于临床诊断明确的瘢痕患者。结果与结论:单核细胞趋化蛋白1在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕中的阳性表达率均高于非病理性瘢痕与正常皮肤组织(P<0.05),骨形成蛋白7阳性表达率均降低(P<0.05),两者阳性表达率在病理性瘢痕(瘢痕疙瘩和增生性瘢痕)中呈明显负相关(r=-0.639,P<0.01)。结果显示,在病理性瘢痕的形成过程中单核细胞趋化蛋白1表达上调,而骨形成蛋白7表达下调。

骨形成蛋白7通过激活I型受体BMPR1A、BMPR1B抑制肺大细胞癌NCI-H460细胞的增殖

背景与目的已有的研究发现骨形成蛋白7(bone morphogenetic protein7,BMP7)具有抑制和促进多种肿瘤发生发展的双重作用,但其对肺癌细胞增殖的影响及其具体机制尚不明确。本实验首先检测了外源性BMP7对肺癌细胞增殖的影响,然后通过在肺癌细胞系中阻断不同的I型受体,观察其对BMP7生物学作用的影响,以探讨不同的I型受体在BMP7信号传导过程中的作用。方法应用RT-PCR及MTT方法分别检测4种非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系和人支气管上皮细胞系(HBE)中BMP7I型受体的表达情况及外源性BMP7对肺癌细胞增殖能力的影响,并联合运用抗体阻断的方法阻断NCI-H460细胞中内源性I型抗体,采用MTT法检测BMP7对NCI-H460细胞增殖的影响,分析不同的I型受体在BMP7信号传导过程中的作用。结果NCI-H460细胞系中三种I型受体均有表达。外源性BMP7抑制了肺大细胞癌NCI-H460细胞的增殖(P=0.002)。运用特异性抗体阻断NCI-H460细胞内源性BMPR1A、BMPR1B、BMPR1A+BMPR1B后BMP7对NCI-H460增殖的抑制作用明显减弱(P=0.003,P=0.014,P<0.001),而阻断ACVR1A后BMP7对NCI-H460增殖的抑制作用无明显变化(P=0.074)。结论BMP7通过激活BMPR1A、BM-PR1B两种I型受体抑制NCI-H460细胞的增殖。

骨形成蛋白7对大鼠不同部位脂肪源干细胞分化成棕色样脂肪细胞的影响

目的探讨骨形成蛋白7对大鼠不同部位脂肪组织脂肪源间充质干细胞(AD-MSCs)诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响。方法分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织(i BAT)、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织(s WAT)和附睾白色脂肪组织(e WAT),分别提取脂肪源间充质干细胞培养,用骨形成蛋白7诱导干细胞分化。细胞免疫荧光染色、油红O染色鉴定棕色样脂肪细胞,PCR法检测棕色脂肪相关基因表达。结果 i BAT和s WAT组诱导细胞中出现成簇聚集的空泡状细胞,空泡状细胞油红O染色为红色,解偶联蛋白1免疫荧光染色阳性。e WAT组仅有散在的空泡状细胞,解偶联蛋白1免疫荧光染色阴性。反转录PCR显示i BAT和s WAT组细胞高表达解偶联蛋白1基因,未检测到e WAT组细胞表达解偶联蛋白1基因。结论大鼠体内不同部位脂肪组织源干细胞的基因表达及分化潜能不同。

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子β1、骨形成蛋白7及Gremlin表达的影响

目的:观察雷公藤多苷(TW)对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形成蛋白7(BMP-7)、Gremlin表达的干预,阐明TW延缓肾间质纤维化的机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为实验组及对照组。实验组行高糖高脂饮食,并以链脲佐菌素腹腔注射建立DN大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为DN组和TW治疗组。治疗组经口灌胃TW(50mg/Kg·d),第2、4、8、16周称鼠重并查24h尿蛋白定量及尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),第16周处死大鼠抽取血液,观察血清生化指标,摘除肾脏行组织切片,观察肾间质纤维化程度,免疫组化检测肾组织内TGF-β1、BMP-7、Gremlin的表达,借助RT-PCR和Westernblotting方法检测肾组织内TGF-β1、BMP-7、Gremlin核酸及蛋白的表达。结果:TW能减轻模型鼠蛋白尿,改善血清白蛋白,降低血清肌酐、尿素氮。下调模型鼠肾组织内TGF-β1、Gremlin的核酸及蛋白表达,上调BMP-7的核酸及蛋白表达。结论:TW可延缓肾组织纤维化,其机制可能与TW抑制促纤维化TGF-β1及下游细胞因子Gremlin的表达,上调抗纤维化因子BMP-7的表达相关。

骨形成蛋白7能减轻TGF-β1诱导的人足细胞损伤

目的:观察骨形成蛋白(bone morphogenie protein 7,BMP-7)抑制转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人足细胞转分化作用及其机制研究。方法:构建及鉴定pc DNA 3.1rh BMP-7质粒,体外培养人足细胞,先后予10、20、50、100、200μg/m L重组的BMP-7诱导足细胞,分别在培养24、48、72 h收集细胞,流式细胞试验检测细胞凋亡率,以此选择重组BMP-7最适的刺激浓度和最适的作用时间点。实验分为正常对照组、TGF-β诱导组(TGF-β)及质粒转染组(PEGF-BMP-7),质粒转染组加入重组BMP-7 100μg/m L预处理48 h后,而TGF-β诱导组和PEGF-BMP-7组分别予5 ng/m L TGF-β1处理足细胞后,通过免疫荧光观察足细胞Podocin、α-SMA、VIM的表达变化;收集细胞抽取总RNA和总蛋白,应用RT-PCR和Western blot观察重组BMP-7对人足细胞Podocin、α-SMA、VIM的m RNA和蛋白表达的影响。结果:(1)本实验成功构建pc DNA 3.1rh BMP-7质粒,转染的人足细胞能稳定表达BMP-7,质粒转染组BMP-7蛋白表达水平(0.487±0.012)较正常对照组(0.251±0.012)和TGF-β诱导组(0.151±0.015)明显增高(P<0.001);(2)Real-time PCR检测结果显示TGF-β诱导组足细胞Podocin的m RNA表达水平(0.285±0.013)较正常对照组(1.057±0.090)明显降低(P<0.001),而质粒转染组足细胞Podocin的m RNA表达水平(0.693±0.077)较TGF-β诱导组有升高趋势(P=0.003);TGF-β诱导组和质粒转染组足细胞的α-SMA(1.257±0.039和1.028±0.093)、VIM(1.114±0.097和0.821±0.059)的m RNA表达较正常对照组(0.357±0.089和0.403±0.020)明显升高(P<0.001),质粒转染组足细胞α-SMA和VIM的m RNA较TGF-β诱导组有下降趋势(P=0.011,P=0.002)。Western blot检测结果显示TGF-β诱导组足细胞Podocin的蛋白表达水平(32.923±5.301)较正常对照组(101.807±9.208)明显降低(P<0.001),而质粒转染组足细胞Podocin的蛋白表达水平(90.507±7.810)较TGF-β诱导组有升高趋势(P<0.001);TGF-β诱导组和质粒转染组足细胞的α-SMA(116.120±8.300和93.832±10.602)、VIM(124.016±9.702和100.801±6.801)的蛋白表达较正常对照组(35.730±4.892和43.801±2.600)明显升高(P<0.001),质粒转染组足细胞α-SMA和VIM的蛋白较TGF-β诱导组有下降趋势(P=0.017,P=0.007)。结论:TGF-β1可诱导人足细胞发生转分化,导致其α-SMA、VIM表达增高,Podocin表达减少,BMP-7能显著抑制此现象,提示BMP-7可逆转足细胞EMT,对足细胞损伤具有保护作用。

重组2型腺相关病毒-人骨形成蛋白7转染犬髓核细胞及其对髓核细胞表型的影响

目的:观察重组2型腺相关病毒-人骨形成蛋白7(recombinant adeno-associated virus-2expressinghuman bone morphogenetic protein-7,rAAV2-hBMP7)转染犬髓核细胞情况及其对细胞表型的影响。方法:用1岁龄Beagle犬L4/5椎间盘髓核进行髓核细胞体外培养,取第2代髓核细胞进行实验,实验组以rAAV2-hBMP7(1×105v.g/细胞)转染髓核细胞,对照组以重组2型腺相关病毒-增强型绿色荧光蛋白(recombinantadeno-associated virus-2expressing enhanced green fluorescent protein,rAAV2-EGFP)转染髓核细胞。在转染后4d、7d和14d以PCR检测髓核细胞中hBMP7的mRNA表达,在转染后7d和14d以Western blot法检测髓核细胞中hBMP7蛋白表达。在转染后4d、7d和14d采用RT-PCR法检测蛋白多糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的mRNA含量,采用二甲基蓝及ELISA法分别检测蛋白多糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的蛋白含量。结果:实验组髓核细胞表达hBMP7 mRNA及蛋白,并于转染后7d时表达量最高,而对照组无表达。实验组髓核细胞蛋白多糖mRNA及蛋白含量在转染后7d和14d时较4d时明显增高,14d时较7d时亦明显升高(P<0.05),对照组各时间点无统计学差异(P>0.05);4d时实验组与对照组比较无明显差异,7d和14d时较对照组明显增加(P<0.05)。同组各时间点Ⅰ型胶原mRNA及蛋白含量均无统计学差异,两组各时间点间比较无统计学差异(P>0.05)。实验组髓核细胞Ⅱ型胶原mRNA及蛋白含量在转染后7d和14d时较4d时明显增高,14d时较7d亦明显升高(P<0.05),对照组各时间点无统计学差异(P>0.05);实验组4d时与对照组比较无明显差异,7d和14d时较对照组明显增加(P<0.05)。结论:rAAV2-hBMP7转染犬髓核细胞后能表达hBMP7蛋白,并能提高其蛋白多糖及Ⅱ型胶原含量。

骨形成蛋白7重组腺病毒转染培养兔软骨细胞的体外研究

目的:观察骨形成蛋白7重组腺病毒(Ad-BMP7)转染兔软骨细胞后BMP7的表达。方法:分离培养3周龄兔膝关节软骨细胞,将Ad-BMP7转入,RT-PCR检测BMP7在mRNA水平的表达,Western Blot和免疫组化染色检测其在蛋白水平的表达。另设空白对照组。结果:实验组在mRNA水平和蛋白水平均能有效表达BMP7基因。结论:携带BMP7基因的重组腺病毒体外转染的关节软骨细胞,可以产生BMP7。

缬沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏骨桥蛋白、骨形成蛋白7表达的影响

目的:本实验通过建立大鼠模型经病理学、免疫组化手段观察肾纤维化过程中OPN、BMP-7的表达,并用缬沙坦干预大鼠模型。研究血管紧张素II受体拮抗药物缬沙坦在肾间质纤维化(RIF)过程中的作用与机理。方法:选取Wistar雄性大鼠36只,随机平均分3组(模型组、缬沙坦组,假手术组),所有大鼠均制备单侧输尿管结扎(UUO)模型,假手术组不处理输尿管。用0.9%Nacl对假手术组、模型组每日一次等量灌胃。缬沙坦治疗组以6mg/kg缬沙坦给药量日一次灌胃。上述方法操作2w后,每组随机选取6只大鼠取血后处死取肾脏。其余大鼠继续上述方法处理至4w后同样方法取材及处死。用免疫组织化学方法检测肾组织中的OPN、BMP-7表达情况;所取血液使用我院全自动生化仪对血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)进行检测。结果:模型组和缬沙坦组在术后血肌酐及血尿素与假手术组比较都明显升高而且有统计学意义(P<0.05)。免疫组化法发现模型组OPN表达增加,BMP-7表达减少,而缬沙坦组OPN表达减少,BMP-7表达增加。Western印迹法测定OPN、BMP-7蛋白的表达。结论:缬沙坦可能在肾间质纤维化的过程中起到拮抗作用,可能对临床用药提供实验理论依据。

人骨形成蛋白7基因转染骨髓间充质干细胞对兔退变椎间盘蛋白多糖的影响

目的:观察腺病毒介导人骨形成蛋白7基因(Human bone morphogenetic protein-7,hBMP-7)转染骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cell,BMSC)后移植兔退变椎间盘,对退变椎间盘髓核组织中蛋白多糖含量的影响。方法:20只新西兰大白兔手术建立椎间盘L3/4、L4/5、L5/6退变模型,随机分为两组,每组10只:实验组L3/4、L4/5、L5/6椎间盘内注射腺病毒介导hBMP-7基因转染的BMSC;对照组L3/4、L4/5、L5/6椎间盘注射磷酸盐缓冲液(PBS)。术后连续行磁共振观测椎间盘变化;12周后取材,应用RT-PCR、免疫组化检测hBMP-7的表达情况,分光光度法测量蛋白多糖含量。结果:与对照组相比,实验组的磁共振T2信号强度以及蛋白多糖含量均明显增高(P<0.05)。hBMP-7的mRNA和蛋白水平在实验组中的表达水平也最高。结论:腺病毒介导hBMP-7转染BMSC后,移植退变椎间盘,可使髓核组织中蛋白多糖的含量增加。

人骨形成蛋白7基因的克隆及其在兔骨髓基质干细胞中的瞬时表达

目的克隆人骨形成蛋白7(BM P-7)基因,并构建其真核表达载体,观察其在兔骨髓基质干细胞(rBM SC)中的表达并探讨其应用于骨科局部基因治疗的可能性。方法用R T-PC R法从人胎肾组织中克隆人BM P-7基因全长cD N A并测序。将BM P-7基因cD N A克隆到穿梭载体pShuttle中构建表达载体pShut-tle-BM P-7,经鉴定后利用LipofectA M IN E2000瞬时转染rBM SC,用R T-PC R方法及免疫组化检测BM P-7基因的表达。结果用R T-PC R法从胎肾组织中克隆出1296bp的cD N A,测序证实为人BM P-7基因。R T-PC R方法及免疫组化检测证实其能在rBM SC中表达。结论成功克隆人BM P-7基因并证实其在rBM SC的表达,为下一步腺病毒介导的局部基因治疗打下基础。

泛影葡胺加重肾毒性及其对肾组织骨形成蛋白7表达的影响

目的 探讨高渗造影剂对甘油所致肾损害的大鼠肾毒性作用及可能机制.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组（N组）、甘油对照组（G组）、泛影葡胺对照组（LM组）、甘油＋泛影葡胺组（G＋LM组）,每组8只.G组和G＋LM组给予50%的甘油,后腿深部肌肉注射;N组和LM组以同样的方法给予等体积的生理盐水.3天后,LM组和G＋LM组再给76%泛影葡胺（10 ml/kg）尾静脉注射;N组和G组按同样方法给予等量的生理盐水.各组于5天后检测血清肌酐（SCr）水平,苏木精-伊红染色观察肾组织病理损害,免疫组织化学法检测肾组织骨形成蛋白7（BMP-7）的表达.结果 BMP-7在N组肾组织中有高度表达,G组表达减少,LM组有中度表达,而G＋LM组表达明显减少.结论 泛影葡胺能加重SD大鼠原有的急性肾毒性,骨形成蛋白7表达的下调是肾损伤的加重的重要因素之一.

食管鳞状细胞癌组织中骨形成蛋白7的表达

目的:探讨骨形成蛋白7(BMP7)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测56例ESCC及其相应远端正常食管黏膜鳞状上皮中BMP7蛋白的表达,采用RT-PCR法检测BMP7mRNA的表达。结果:ESCC组织中BMP7蛋白阳性表达率和mRNA表达率分别为73.2%(41/56)和76.8%(43/56),高于正常食管黏膜组织中的12.5%(7/56)和14.3%(8/56)(χ2=28.900,29.878,P均<0.001)。ESCC组织中BMP7mRNA与蛋白的表达差异无统计学意义(χ2=0.167,P=0.688)。BMP7蛋白表达与ESCC浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(χ2=6.330,5.547和9.143,P均<0.05),而与性别、年龄和组织学分级无关(P>0.05)。结论:BMP7可能在ESCC的发生、发展中起重要作用。

骨形成蛋白7及骨形成蛋白受体IA在脑胶质瘤中的表达

目的探讨骨形成蛋白7(BMP-7)及骨形成蛋白受体IA(BMPR-IA)在胶质瘤中的表达及其与预后的相关性。方法应用免疫组织化学方法检测60例脑胶质瘤标本(Ⅰ型8例、Ⅱ型24例、Ⅲ型16例、Ⅳ型12例)和5例正常脑组织标本BMP-7和BMPR-IA表达情况,对表达丰度进行半定量差异分析。结果BMP-7和BMPR-IA在脑胶质瘤中表达丰度均随肿瘤恶性程度增加而增加。肿瘤1年生存率与BMP-7和BMPR-IA表达呈负相关。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型组的1年生存率分别为100.0%、66.6%、43.7%和25.0%。结论BMP-7和BMPR-IA在脑胶质瘤中表达丰度随着恶性程度增加而增加,且与预后呈负相关,提示BMP-7和BMPR-IA与脑胶质瘤的形成、生物学行为相关。

人骨形成蛋白2和人骨形成蛋白7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建

目的克隆和构建人骨形成蛋白2(BMP-2)和人骨形成蛋白7(BMP-7)成熟肽真核表达载体。方法采用Trizol法从人骨肉瘤细胞中提取制备总RNA,利用RT-PCR、PCR转录、扩增BMP-2和BMP-7获得成熟肽基因,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达重组子pcDNA3.1(+)/BMP-2MP和pcDNA3.1(+)/BMP-7MP。结果总RNA提取液电泳可见在28S、18S和5S处出现明显的条带,PCR和酶切可在439bp和364bp出现条带,阳性克隆测序结果与Genebank中登录的序列一致。结论成功克隆出人BMP-2MP和BMP-7MP基因,成熟肽基因已与pcDNA3.1(+)连接,成功构建其真核表达重组子pcDNA3.1/BMP-2MP和pcDNA3.1/BMP-7MP,为进一步研究BMP-2、BMP-7的功能及其成熟肽基因在骨髓间充质细胞(hMSCs)中表达以及在骨组织工程中的应用研究奠定了基础。

人骨形成蛋白7对人牙髓细胞增殖和分化的作用研究

目的研究骨形成蛋白7 (BMP-7)对人牙髓细胞(h DPCs)增殖和分化的影响。方法原代培养h DPCs并鉴定,采用不同浓度的BMP-7处理h DPCs,检测各处理组细胞增殖活性、钙化结节量、碱性磷酸酶(ALP)活性,以及牙本质基质蛋白(DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(DSPP)等成牙本质相关基因的表达。结果 BMP-7对h DPCs增殖无明显影响,但可剂量依赖性地促进钙化结节的形成,提高细胞中ALP活性,并上调DMP-1和DSPP的基因表达水平。结论BMP-7对h DPCs增殖无促进作用,但可明显促进h DPCs向成牙本质细胞分化。

乳腺癌组织中血管生成素样蛋白4与骨形成蛋白7的表达及临床意义

目的:研究乳腺癌组织中血管生成素样蛋白4(angiopoietin-like protein 4,ANGPTL4)与骨形成蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP7)的表达,探讨其临床意义。方法:选取2014年01月至2015年07月我院120例乳腺癌及癌旁正常组织石蜡标本,采用免疫组化检测ANGPTL4和BMP7蛋白表达水平,分析与临床病理参数间的关系。收集32例新鲜乳腺癌及癌旁正常组织,采用Western blot检测ANGPTL4和BMP7蛋白表达水平。结果:石蜡组织中,乳腺癌ANGPTL4蛋白和BMP7蛋白阳性率均高于癌旁正常组织。ANGPTL4蛋白表达水平与肿瘤大小、TNM分期有关(P<0.05)。BMP7蛋白表达水平与淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。ANGPTL4和BMP7蛋白阳性表达患者5年生存率均低于阴性表达患者(P<0.05)。ANGPTL4和BMP7蛋白是影响乳腺癌预后的独立危险因素。新鲜组织中,乳腺癌组织ANGPTL4和BMP7蛋白表达量分别为2.55±0.17和3.03±0.16,高于癌旁正常组织的2.42±0.28和2.89±0.12(P<0.05)。乳腺癌组织中,ANGPTL4和BMP7蛋白表达量呈正相关(P<0.05)。结论:ANGPTL4与BMP7蛋白可能协同促进乳腺癌的发生发展,是判断乳腺癌预后的重要指标,可能为乳腺癌的治疗提供新的分子靶点。

加减益肾化瘀方对早中期慢性肾功能衰竭患者结缔组织生长因子、骨形成蛋白7、丙二醛、总抗氧化能力及超氧化物歧化酶水平的影响

目的探讨加减益肾化瘀方对早中期慢性肾功能衰竭患者结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)、骨形成蛋白7(Bone Morphogenetic Protein-7,BMP-7)、丙二醛(Serum malondialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,TAC)及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)水平的影响。方法选取2018年1月—2020年6月期间南京中医药大学常熟附属医院/常熟市中医院肾内科收治的80例早中期慢性肾功能衰竭患者为研究对象,按随机数字表法将其分为研究组和对照组,每组各40例。对照组给予氯沙坦钾治疗,研究组在对照组治疗的基础上给予加减益肾化瘀方治疗。治疗6个月后,观察比较两组患者治疗前后中医证候(浮肿难消,腰酸膝软,畏寒肢冷,口唇色暗,腰痛,面色晦暗或黧黑,夜尿频多)积分,肾功能[肾小球滤过率(eGFR)、肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量],CTGF、BMP-7、MDA、SOD水平变化情况,临床疗效及安全性。结果治疗后研究组总稳定率95.00%(38/40)高于对照组72.50%(29/40),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者浮肿难消,腰酸膝软,畏寒肢冷,口唇色暗,腰痛,面色晦暗或黧黑,夜尿频多评分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组浮肿难消,腰酸膝软,畏寒肢冷,口唇色暗,腰痛,面色晦暗或黧黑,夜尿频多评分均较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量水平均较治疗前降低,eGFR水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量水平较对照组降低,eGFR水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者CTGF、MDA水平均较治疗前降低,BMP-7、TAC及SOD水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组CTGF、MDA水平较对照组降低,BMP-7、TAC及SOD水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗过程中,两组患者均未出现不良反应,且心电图、肝功能、粪便检查均正常。结论早中期慢性肾功能衰竭患者采用加减益肾化瘀方治疗效果显著,能够调节CTGF、BMP-7、MDA、TAC及SOD水平,值得临床推广使用。

正畸力作用下大鼠牙周组织中骨形成蛋白7(BMP-7)的表达及意义

【目的】检测正畸力作用下大鼠牙周组织中骨形成蛋白7(BMP-7)的表达和分布,探讨其在正畸移动过程中的作用和机制。【方法】建立大鼠正畸牙移动模型,分别在受力24h和168h处死,制备左侧上颌第一磨牙牙周组织及牙槽骨的石蜡标本,采用链霉亲和素生物素复合物(SABC)免疫组织化学法,检测实验性大鼠正畸牙齿移动过程中BMP-7在牙周组织中的表达。【结果】BMP-7在正畸组大鼠牙周及牙槽骨组织中的表达明显强于对照组(P<0.01),受力168h组BMP-7表达的强度高于24h组(P<0.05);同时间组中,张力侧BMP-7的表达高于压力侧(P<0.05)。【结论】正畸牙移动过程中, BMP-7参与了正畸牙移动并且主要参与了骨改建过程。