右美托咪定通过脊髓MrgC受体参与调控小鼠骨癌痛吗啡耐受

目的:通过骨癌痛(bone cancer pain,BCP)小鼠模型明确右美托咪定是否参与吗啡耐受并探索其机制。方法:使用Lewis肺癌细胞系制备C57BL/6小鼠股骨癌痛动物模型。对BCP小鼠进行鞘内置管,连续7天注射吗啡诱导耐受产生。von Frey纤维丝评估小鼠左后足50%机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)、热板法评估热缩足潜伏期阈值(thermal withdrawal threshold,TWL)。给药第7天后取L3~L5节段脊髓,使用免疫组化实验和Western Blotting(WB)方法检测小鼠脊髓Mas相关基因C受体(Mas-related gene C receptor,MrgC)的表达。通过对吗啡耐受的BCP小鼠鞘内注射右美托咪定,探索其可能的机制。结果:自建模后第7天起,BCP小鼠左后足50%MWT显著下降,TWL明显缩短(P<0.05)。建模后第14天起鞘内给予吗啡,给药的第1~4天,BCP小鼠左后足50%MWT明显上升,TWL明显增加(P<0.05),给药的第5天开始50%MWT逐渐下降,TWL明显缩短。但预先鞘内给予右美托咪定后,给药的第1~7天BCP小鼠左后足50%MWT持续增高,TWL持续延长(P<0.05),且免疫组化和WB结果显示MrgC表达明显增加。结论:右美托咪定可缓解BCP小鼠吗啡耐受的形成,这一作用可能与右美托咪定促进BCP小鼠脊髓MrgC表达和活化有关。

淫羊藿素联合吗啡对骨癌痛小鼠的镇痛效应研究

目的:探究淫羊藿素对骨癌痛(bone cancer pain,BCP)小鼠的镇痛效应,以及淫羊藿素与吗啡联合用药的镇痛效应;确定半效剂量淫羊藿素与吗啡联合用药,在达到吗啡最大镇痛效应时所减少的吗啡用量。方法:使用雄性C57BL/6J小鼠及路易斯(Lewis)肺癌细胞建立BCP小鼠模型。通过测定机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT),冷刺激缩足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)以及自发抬足次数和抬足保护时间以评估小鼠疼痛敏感度。结果:自造模后第7~14天起,BCP小鼠左侧(荷瘤侧)后爪MWT和PWL明显降低,自发抬足次数和抬足保护时间明显上升,并持续存在(P<0.05)。造模后第7~14天给予淫羊藿素,自第10~14天起淫羊藿素明显增加BCP小鼠左侧后爪的MWT和PWL,并减少自发抬足次数和抬足保护时间,停药后效应持续至造模后第18天(即停药后第4天)(P<0.05)。应用2倍EC50剂量淫羊藿素(200 mg/kg)与吗啡联合用药可明显延长停药后镇痛效应,停药后镇痛效应持续至造模后第21天(即停药后第7天)(P<0.05)。应用半效剂量淫羊藿素(100 mg/kg)与吗啡联合用药,达到吗啡最佳镇痛效应时最多可减少60%吗啡用量。结论:淫羊藿素对BCP小鼠有明显的镇痛效应,当与吗啡联合用药时,不仅明显延长了停药后的镇痛效应,还能够减少高达60%的吗啡用量。

PGC-1α介导线粒体生物发生对骨癌痛伴发镜像痛的影响

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α (peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α, PGC-1α)调控线粒体生物发生对骨癌痛伴发镜像痛的影响。方法:第一部分实验:成年雌性SD大鼠按照随机数字表法分成2组,假手术组(Sham组)与骨癌痛组(bone cancer pain, BCP组),每组10只。第二部分实验:大鼠按照随机数字表法分成3组,Sham+vehicle组、BCP+vehicle组、BCP+ZLN(ZLN005,PGC-1α激活剂组),每组25只。将MRMT-1大鼠乳腺癌细胞注入左胫骨髓腔建立BCP大鼠模型,Sham组大鼠注射等体积Hank's平衡盐溶液。第二部分实验中,BCP+ZLN组大鼠鞘内注射ZLN005(单次单剂量100μg/30μl),Sham+vehicle组与BCP+vehicle组注射等体积溶剂。Western blot用于分析大鼠脊髓中PGC-1α、Nrf1和Tfam蛋白表达量。q PCR用于分析mt DNA相对拷贝数。免疫荧光双标染色分析PGC-1α的分布与细胞定位。结果:单侧癌细胞接种诱导BCP大鼠双侧后爪出现机械性痛觉过敏。ZLN005鞘内注射可减轻BCP大鼠双侧后爪的机械性痛觉过敏。在BCP大鼠的脊髓中观察到PGC-1α、Nrf1、Tfam和mt DNA相对拷贝数水平下降。鞘内注射ZLN005后,PGC-1α、Nrf1、Tfam和mt DNA相对拷贝数的水平升高。PGC-1α在同侧和对侧脊髓背角均有分布。PGC-1α的荧光强度在BCP大鼠双侧脊髓中出现下降。PGC-1α主要与神经元共定位。结论:脊髓中的线粒体生物发生的损伤促进了骨癌痛伴发镜像痛的发生发展。PGC-1α激活介导线粒体生物发生缓解骨癌痛及其伴发的镜像痛。

Walker256乳腺癌细胞构建大鼠胫骨骨癌痛模型

目的：探讨以Walker256大鼠乳腺癌腹水瘤细胞制备大鼠胫骨骨癌痛模型，为骨癌痛机制和治疗研究提供有用的工具。方法：以Walker256乳腺癌细胞接种幼年雌性SD鼠腹腔制备腹水瘤细胞，将15μl腹水瘤细胞注入雌性成年SD鼠左侧胫骨骨髓腔制备骨癌痛模型；以注射加热灭活瘤细胞的SD鼠为假手术对照鼠，以正常鼠为正常对照鼠。造模后1-4周观察模型鼠自由行走痛评分、辐射热痛觉阈值[缩爪反应潜伏期（paw withdrawal latency，PWL）]和机械刺激诱发痛觉阈值[缩爪反应阈值（paw withdrawal threshold，PWT）]改变，并对痛觉行为改变明显的模型鼠进行影像学检测。结果：本方法制备模型的成瘤率为67．3％。模型鼠在造模后15d自由行走痛评分显著高于正常鼠和假手术鼠（P〈0．01）；模型鼠的模型后肢对热刺激痛觉阈值和对机械刺激诱发痛觉阈值分别在造模后21d和18d明显低于正常鼠和假手术鼠（P〈0．01），同时也明显低于模型肢对侧后肢（P〈0．05）。影像学结果显示，痛行为改变明显的模型鼠模型后肢胫骨骨质结构遭到明显破坏。结论：采用Walker256乳腺癌腹水瘤细胞可成功制备与人类骨癌痛体症相似的大鼠胫骨骨癌痛模型。

身痛逐瘀汤对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓星形胶质细胞活化的影响

目的探讨身痛逐瘀汤的镇痛作用及对脊髓水平胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法 将C3H/HeNCrlVr雄性小鼠100只随机分为正常组(0d,8只)、假手术组(30只)、模型组(30只)、中药1组(8只)、中药2组(8只)、中药3组(8只)和溶媒组(8只)。中药1、2、3组和溶媒组分别给予身痛逐瘀汤水煎浓缩制剂0.1、0.3、0.9g生药/0.4mL和0.4mL生理盐水灌胃,于小鼠骨癌痛造模第14天开始,每天灌胃1次,共7天。用热辐射刺激仪测定各组小鼠行为学指标热痛缩足潜伏期(PWTL)。第21天行为学测试后,取脊髓腰膨大部位,分别应用Real-time quantitative RT-PCR和Western blot检测GFAP mRNA及蛋白的表达。结果 与正常组[0d,PWTL:(15.91±1.65)s]和假手术组[PWTL:4d:(13.33±1.44)s;7d:(11.28±0.61)s;10d:(15.47±2.46)s;14d:(15.69±1.98)s;21d:(15.69±1.68)s]比较,模型组小鼠的PWTL值[4d:(13.24±1.02)s;7d:(11.30±1.09)s;10d:(9.12±0.54)s;14d:(7.79±0.77)s;21d:(6.36±0.59)s]随着时间的推移进行性下降(P<0.05),而脊髓水平GFAP mRNA及蛋白表达逐渐增加。与模型组比较,溶媒组及中药1、2、3组之间在14d时间点PWTL值差异无统计学意义(P>0.05)。在21d时间点,与模型组和溶媒组比较,中药2组、3组小鼠PWTL升高(P<0.05),脊髓组织GFAP mR-NA及蛋白表达水平降低(P<0.05),而模型组、溶媒组、中药1组之间PWTL值及GFAP表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 身痛逐瘀汤具有镇痛作用,抑制脊髓水平星形胶质细胞的增殖活化可能是其机制之一。

C57BL／6小鼠骨癌痛模型的制备与评价

目的：探讨用Lewis肺癌细胞系制备C57BL／6小鼠股骨癌痛动物模型的可行性。方法：选用体质量18～20g雄性C57BL／6小鼠60只，随机分为4组（n=15）。实验组接种Lewis肺癌细胞2×10^6个；热灭活组接种相同数目并热灭活的Lewis肺癌细胞；PBS组接种等容积的PBS液；空白对照组只做假手术，不注入任何溶液。分别于接种前及接种后第7天起隔日观察小鼠自发痛行为及测定机械触诱发痛。术后第7，15，23天，将小鼠麻醉后行双侧后肢X线摄片，评估肿瘤诱发的骨组织破坏程度。每次摄片后，取小鼠术侧后肢行HE染色，光镜下观察骨质破坏情况。结果：实验组接种后第11天左右出现明显自发痛行为，表现为自发抬足时间延长；接种后第13天左右出现明显的触诱发痛，表现为50％缩足阈值明显下降，且持续整个观察期。术后23d放射学结果显示，肿瘤细胞充满骨髓腔，且穿破骨皮质向外生长，侵犯周围肌肉组织。结论：C57BL／6小鼠股骨骨髓腔接种Lewis肺癌细胞能够成功制备小鼠骨癌痛模型，且此模型与人类骨癌痛高度相似。

电针联合西乐葆缓解大鼠胫骨癌痛

目的:建立大鼠胫骨癌痛模型,观察电针和西乐葆对大鼠胫骨癌痛的缓解作用。方法:采用经皮穿刺技术将大鼠乳腺癌细胞Walker 256接种至雌性Wistar大鼠胫骨骨髓腔内,建立大鼠胫骨癌痛模型。大鼠造模后,采用电针和西乐葆灌胃治疗,观察其对大鼠骨肿瘤引起的机械性痛觉超敏的影响。结果:模型组大鼠后肢逐渐产生机械性痛觉超敏,接种后第16天胫骨近心端可见显著的肿瘤生长。单用电针或西乐葆5 mg/(kg.d)治疗大鼠,与模型组相比其机械性疼痛阈值差异无统计学意义;治疗后第22天和第26天,西乐葆10mg/(kg·d)组大鼠后肢机械性疼痛阈值较溶剂对照组提高(P<0.05);治疗后第10、18和23天,电针合用西乐葆5mg/(kg·d)组大鼠机械性疼痛阈值高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电针与小剂量西乐葆具有协同作用,合用可以增强对大鼠胫骨癌痛的镇痛效果。

通络散结酊对大鼠炎症痛及骨癌痛模型镇痛的疗效观察

目的:观察通络散结酊(主要组成为天南星、半夏、山慈菇及威灵仙)对大鼠炎症痛模型、骨癌痛模型的镇痛作用。方法:通过Wistar大鼠右踝部注射完全弗氏佐剂(CFA)0.1 ml建立炎症痛模型,造模24 h后应用通络散结酊及扶他林乳剂7d,动态观察大鼠体质量和进食水量、右踝周径及屈/伸踝关节疼痛试验评分的变化。通过Wistar大鼠右胫骨髓腔内注射Walker-256肿瘤细胞3×104建立骨癌痛模型,造模12 d后应用通络散结酊及扶他林乳剂14 d,动态观察大鼠体质量和进食水量、及丙酮刺激缩足反应时间的变化。结果:炎症痛大鼠造模后第2天即出现明显的右踝关节肿胀,屈/伸踝关节疼痛试验评分及右踝周径较空白组明显增加(P<0.05);与模型组相比,通络散结酊和扶他林乳剂外用均可明显减小大鼠屈/伸关节疼痛试验评分及踝周径(P<0.05),两种药物作用效果无显著差异。骨癌痛大鼠造模第12天出现缩足反应时间较空白组明显缩短(P<0.05),通络散结酊和扶他林乳剂外用7 d内均可明显延长骨癌痛大鼠缩足反应时间,较模型组有显著差异(P<0.05),用药14 d后,通络散结酊仍有很好的效果,而扶他林乳剂效果低于用药7 d时(P<0.05)。结论:通络散结酊对炎症痛及骨癌痛均有镇痛作用,且在扶他林乳剂效果不佳的骨癌痛晚期仍有镇痛作用。

P物质和降钙素基因相关肽在骨癌痛-吗啡耐受模型中的表达

背景与目的:多数晚期癌症患者会经历中重度癌痛折磨。阿片药物是癌痛治疗最常用和最有效的药物,但长时间使用容易造成耐受甚至痛觉过敏。P物质(substance P,SP)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)是疼痛信号传递中最重要的神经递质,但在癌痛-阿片耐受中的表达尚不清楚。本研究拟在骨癌痛-吗啡耐受大鼠模型上,探讨SP和CGRP在背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)水平的表达特点。方法:60只Wistar大鼠鞘内置管成功后,随机分为3组:假手术组、吗啡耐受组和骨癌痛-吗啡耐受组。吗啡耐受组和骨癌痛-吗啡耐受组分别以热灭活Walker256乳腺癌细胞和Walker256乳腺癌细胞制备胫骨癌痛模型,接种后10 d时鞘内注射吗啡20μg/kg。动物行为学测试使用Von Frey纤维丝,于不同时间点测定机械刺激引起的机械缩足阈值。研究结束时,免疫组织化学分析DGR中SP和CGRP的表达,测定积分光密度IOD值。结果:行为学证实,吗啡耐受组和骨癌痛-吗啡耐受组在吗啡治疗第5天时出现耐受,骨癌痛-吗啡耐受组缩足阈值较吗啡耐受组和对照组明显降低(P<0.001)。骨癌痛-吗啡耐受组SP和CGRP积分光密度值IOD(9 917.9±2 246.1和15 021.5±2 989.7)较吗啡耐受组(5 191.7±1 052.6和9 737.1±2 239.8)和对照组(4 821.6±843.1和8 180.3±1 242.2)明显增加(P<0.001)。结论:SP和CGRP在癌痛-吗啡耐受大鼠模型DRG中表达增强,提示这两种神经递质参与了耐受产生,这将为新药治疗癌痛-吗啡耐受提供更符合临床的科学依据。

身痛逐瘀汤对骨癌痛大鼠痛觉行为学的影响

目的建立大鼠Walker-256乳腺癌细胞骨癌痛模型,探讨身痛逐瘀汤对骨癌痛的镇痛作用及其安全性。方法右后肢胫骨注射Walker-256乳腺癌细胞建立骨癌痛模型。观察大鼠胫骨接种Walker-256乳腺癌细胞后右后肢机械痛觉缩足阈值、热痛觉缩足潜伏期、自发痛评分变化和骨密度变化。检测大鼠HE病理染色、血常规、肝肾功能,对安全性进行评价。结果骨癌痛+身痛逐瘀汤组的缩足阈值小于假手术+生理盐水组(P<0.05),造模后第21天,与生理盐水组比较,身痛逐瘀汤能够显著延长骨癌痛大鼠机械痛觉缩足阈值、热痛觉缩足潜伏期并减轻自发痛评分(P<0.01);身痛逐瘀汤对骨癌痛大鼠模型侧胫骨骨密度无明显影响。安全性评价提示身痛逐瘀汤内服安全、无明显毒副反应。结论中药身痛逐瘀汤能够显著改善胫骨骨癌痛,且具有良好的安全性。

抑制小胶质细胞激活对骨癌痛小鼠疼痛维持的影响

目的研究鞘内注射小胶质细胞特异性抑制剂米诺环素(minocycline,MC)抑制脊髓小胶质细胞的激活对骨癌痛维持的影响。方法采用小鼠跟骨癌痛模型,♂C3H/He小鼠42只,随机分为3组(n=14),sarcoma+PBS(phosphatebuffered saline)组和sarcoma+MC组行小鼠跟骨癌痛模型制作,跟骨内注射肿瘤细胞;sham+PBS组行假手术,跟骨内注射PBS。造模后11天(post-implantation day11,PID11),每组随机取10只小鼠,sham+PBS组和sarcoma+PBS组单次鞘内注射MC溶媒(PBS 5μl),sarcoma+MC组单次鞘内注射MC(1 nmol,5μl)。各组分别在鞘内注射前、注射后0.5、1、2、4、8、24 h测定机械性痛觉超敏、冷痛觉过敏。各组剩余4只小鼠在PID12鞘内注射后1 h行非伤害性触摸右侧足底90min,分析脊髓背角c-fos蛋白的表达。结果骨癌痛导致小鼠机械性痛阈和冷痛阈降低,脊髓背角c-fos蛋白的表达上调;单次鞘内注射MC能暂时提高小鼠疼痛阈值,并抑制脊髓背角c-fos蛋白的表达。结论小胶质细胞的激活对骨癌痛的维持具有重要作用。

应用Walker-256细胞建立大鼠骨癌痛模型

目的:应用Walker-256细胞建立大鼠骨癌痛模型。方法:将4×104个W256癌细胞注入SD大鼠胫骨上段骨髓腔内,利用大鼠热板法和足跖加压法分别测量热刺激和机械刺激痛阈的变化,X线摄片进行放射学评估骨质破坏程度,同时,组织切片HE染色观察肿瘤生长和骨结构的破坏情况。结果:造模动物在12天左右开始出现热刺激和机械刺激痛阈明显下降(痛觉过敏),并呈渐进性发展;胫骨X线摄片显示14天即有明显的骨破坏,第21天时出现病理性骨折;组织切片显示骨髓腔内肿瘤生长活跃,向外侵蚀破坏骨皮质。结论:从疼痛行为学、放射学、组织学等方面的研究结果显示,应用Walker-256细胞成功建立了大鼠骨癌痛模型。

转移性骨癌痛的新机制:癌细胞产生的内源性甲醛激活外周神经纤维上的辣椒素受体

近十年来,我们实验室从局部肿瘤细胞产生甲醛的角度(相对于环境中的甲醛污染物,我们称之为内源性甲醛),探讨转移性骨癌痛的新机制。在转移性骨癌痛模型中,侵润入骨髓中的肿瘤细胞,通过丝氨酸羟甲基转移酶1(serine hydroxymethyltransferase 1,SHMT1)、SHMT2及赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(lysine-specific histone demethylase 1,LSD1)的催化产生甲醛。此内源性甲醛能激活伤害性感觉神经纤维上的辣椒素受体(transient receptor potential vanilloid subfamily member 1,TRPV1),导致骨癌痛;另一方面,在癌细胞骨转移的情形下,骨质破坏增加的同时激活了成骨细胞,这些激活的成骨细胞释放出I型胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor-I,IGF-I),后者通过其受体介导的信号传导通路,上调外周神经纤维上的TRPV1受体。这样,升高的内源性甲醛激活TRPV1受体,导致转移性骨癌痛的发生。这为我们深入理解转移性骨癌痛的机制以及潜在的临床干预措施,提供了一个新视角。

骨癌痛的发生发展研究现状

癌症是威胁人类生存的首位疾病之一,2008年全球的癌症患者达到1亿2千万,其中760万人死于癌症。预计到2030年癌症患者的人数会增加到2亿2千多万人,其中1亿3千万会死于癌症及其相关疾病[1]。临床数据显示,癌症患者中约30%~50%会有中到重度疼痛,特别是癌症晚期的患者,约75%~95%会发生难以忍受的慢性疼痛[2]。

蛇毒复方制剂对W256癌细胞诱导的骨癌痛大鼠破骨细胞的影响

目的观察冰茶栓(蝮蛇毒、冰片、茶叶、桂枝)对骨癌痛大鼠破骨细胞数量和活性的影响。方法将40只雌性SD大鼠分为冰茶栓组、阳性药对照组、模型对照组及假手术组,采用骨髓腔注射W256癌细胞复制骨癌痛模型;自模型复制第13天开始,冰茶栓组给予冰茶栓101 mg/kg;阳性药对照组给予伊班膦酸注射液20μg/kg,模型对照组和假手术组给予空白栓,末次给药后,取各组大鼠患肢骨组织采用TRAP染色法计数破骨细胞数量、透射电镜观察破骨细胞结构、免疫组化法观察骨保护素表达。结果冰茶栓可明显降低W256细胞诱导的骨癌痛大鼠骨组织破骨细胞数量(P<0.01);诱导破骨细胞凋亡;明显上调骨组织骨保护素表达(P<0.01)。结论冰茶栓可抑制骨癌痛大鼠骨组织破骨细胞的数量和活性。

骨癌痛大鼠脊髓背角KCC2的表达及可能机制

目的研究骨癌痛大鼠脊髓背角钾离子-氯离子联合转运体2(potassium-chloride cotransporter2,KCC2)的表达变化及其可能机制。方法采用大鼠胫骨骨髓腔接种Walker256肿瘤细胞建立胫骨癌痛模型。观测种瘤前后大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawl thresthold,MWT)和脊髓背角KCC2表达水平的变化,观察痛敏形成前鞘内预注射酪氨酸蛋白激酶B(tyrosine protein kinase B,TrkB)中和抗体阻断脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BD-NF)-TrkB途径对KCC2表达和机械性痛觉超敏的影响。结果大鼠种瘤后6～12d,MWT明显下降(P<0.01),出现明显的机械性痛敏,脊髓背角KCC2蛋白水平进行性降低(P<0.01);鞘内预注射TrkB中和抗体的骨癌痛大鼠,其脊髓KCC2表达水平和MWT明显高于注射IgG和不作处理的骨癌痛大鼠(P<0.01)。结论脊髓背角的KCC2可能参与了骨癌痛的发生发展,而BDNF-TrkB途径可能介导了该作用。

天南星总黄酮纳米凝胶对Walker256骨癌痛模型大鼠的镇痛作用研究

目的研究天南星总黄酮纳米凝胶外用对Walker256骨癌痛大鼠的镇痛作用及其对骨结构的影响。方法将雌性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、天南星组、唑来膦酸组,每组9只。除假手术组外,其余各组采用Walker256大鼠乳腺癌细胞制备大鼠胫骨癌痛的骨癌模型。造模后各组采取相应的干预措施。观察大鼠的机械痛、热痛觉敏感变化及四足承重变化,并取大鼠患侧胫骨行HE染色及Micro CT检测骨容积、骨小梁数目及厚度、骨皮质厚度。结果 Walker256大鼠乳腺癌细胞制备大鼠胫骨癌痛的模型成功。天南星组、唑来膦酸组机械痛阈值与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。唑来膦酸组、天南星组大鼠热痛敏感时间均较空白组延长(P<0.05)。天南星组、唑来膦酸组右后肢承重比值与空白组相比明显增加(P<0.05);天南星组骨小梁数目较空白组增多(P<0.05),但天南星组骨小梁数目较唑来膦酸组减少(P<0.05)。结论天南星总黄酮纳米凝胶有一定的镇痛作用及护骨作用。

华蟾素对骨癌痛大鼠的镇痛效应及对脊髓胶质细胞活化的影响

目的:探讨华蟾素对骨癌痛大鼠的镇痛效应及对脊髓胶质细胞活化的影响。方法:选用雌性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、假手术组(胫骨内注射20μL PBS)、模型组和华蟾素干预组,每组12只。模型组与华蟾素干预组大鼠胫骨内注射20μL Walker 256乳腺癌细胞构建骨癌痛模型。华蟾素干预组于造模第7天开始腹腔注射华蟾素注射液,其余各组每天予以等量生理盐水,各组于造模前以及造模后第2、5、7、9、13、15天分别测定热缩足阈值和机械缩足阈值,造模第7天行胫骨X线摄片观察骨质破坏程度,末次行为学检测后处死大鼠,取外周血、L4~L6节段脊髓,利用免疫组化检测星形胶质细胞标记物(GFAP)和小胶质细胞标记物(Iba-1)的表达情况,ELISA检测外周血及脊髓中相关炎性因子(TNF-α和IL-1β)的表达。结果:X线显示模型组大鼠胫骨骨皮质破坏明显、骨质连续性缺乏、骨组织肿胀明显,正常对照组、假手术组未见明显骨组织肿胀、骨连续性较好,提示造模成功。行为学检测结果表明与模型组比较,华蟾素干预可明显缓解骨癌所诱发的机械痛敏、热痛敏(P<0.01)。免疫组化结果提示与假手术组相比,模型组大鼠脊髓胶质细胞活化明显增强(P<0.05);与模型组相比,华蟾素能显著抑制脊髓胶质细胞活化(P<0.05)。ELISA检测结果显示与假手术组相比,模型组大鼠脊髓及血清中TNF-α和IL-1β表达增强(P<0.05);与模型组相比,华蟾素能降低TNF-α和IL-1β表达(P<0.05)。结论:华蟾素对骨癌痛大鼠有较好的镇痛效应,其镇痛作用可能是通过抑制脊髓星形胶质细胞及小胶质细胞活化发挥作用的。

神经生长因子对骨癌痛大鼠疼痛行为学的影响

目的观察鞘内注射神经生长因子(NGF)及抗神经生长因子抗体(anti-NGF)对骨癌痛大鼠疼痛行为学的影响,探讨NGF在骨癌痛中可能的作用。方法建立大鼠胫骨骨癌痛模型,鞘内置管,并分别注入生理盐水(cancer组)、NGF(cancer+NGF组)或anti-NGF(cancer+anti-NGF组),同时设立假手术组(sham组)。在不同时点观察疼痛行为学变化。结果与sham组比较,cancer各组大鼠体质量减轻;且cancer+anti-NGF组大鼠体质量比cancer组大鼠增加。与sham组比较,cancer组大鼠自发缩足次数增多,缩爪潜伏期(PWL)缩短,缩爪阈值(PWT)降低;与cancer组比较,cancer+anti-NGF组大鼠缩足次数明显减少,PWL延长,PWT增高;而cancer+NGF组大鼠与cancer组比较,缩足次数增多,PWL缩短,PWT降低。结论 NGF可加剧大鼠骨癌痛,而anti-NGF可显著减弱骨癌痛大鼠的痛敏。