骨髓间质干细胞移植梗死心肌后细胞因子分泌及对血管新生的影响

目的 研究骨髓间质干细胞 (MSCs)移植梗死心肌后细胞因子的分泌及其对血管新生的作用。 方法 贵州香猪 2 4只 ,按照计算器随机数法随机分为对照组、实验组。抽取骨髓液 3ml,按照 Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,经 5 -氮胞苷 (5 - aza)诱导后 ,5 -溴脱氧尿苷 (Brd U)标记备用。开胸结扎左冠状动脉前降支 ,自体骨髓间质干细胞分别经局部注射和结扎的左冠状动脉前降支远端灌注移植入自体急性心肌梗死区域 ,对照组以 DMEM作对照。术后 3周、6周取标本 ,免疫组织化学法、计算机图象分析检测组织血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和 因子表达。 结果 实验组梗死区 3周、6周 b FGF、VEGF灰度值明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,微血管计数明显增多 (P<0 .0 1)。 结论 自体骨髓间质干细胞移植梗死心肌后能分泌 VEGF、b FGF,诱导血管新生。

骨髓间质干细胞移植对脑梗死大鼠神经功能的恢复作用

目的:将体外培养的大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)移植到脑梗死大鼠梗死区,观察MSCs对脑缺血损伤的修复作用,探索一种治疗脑梗死的新方法。方法:建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,将MSCs通过立体定向移植到脑梗死部位,并与假手术移植组、脑梗死对照组比较。结果:移植入脑的MSCs在正常脑组织与梗死区能存活至少4周以上,并发生迁移,至第3周移植治疗组迁移范围为(3.626±1.831)mm2,明显比假手术移植组(1.534±0.475)mm2大,差异有显著性意义(F=5.7863,P<0.05);接受MSCs移植后大鼠改良神经功能缺损量表(MNSS)得分低于另两组。结论:MSCs能在脑梗死区存活、迁移,并在一定程度上改善了脑梗死大鼠缺损的神经功能。

骨髓间质干细胞移植对自发性高血压大鼠心脏纤维化及心功能的影响

目的研究骨髓问质干细胞(MSCs)对于自发性高血压大鼠心脏纤维化的修复作用,探讨MSCs逆转心室重构的可能性。方法选用12周龄自发性高血压大鼠及同龄Wister鼠作为研究对象,采用密度梯度离心分离健康大鼠MSCs,贴壁培养14天消化传代,采用心腔内注射方法移植细胞,移植剂量为1×106个/只,注射后4周处死动物。检测干细胞移植对于心脏舒张容积、顺应性及心脏结构的影响,研究MSCs对于血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响,并对结果进行统计学分析。结果MSCs干预组大鼠心脏顺应性低于正常对照组,但明显优于未干预组(P<0.05),胶原容积分数及Ⅰ型胶原含量与未干预组相比也明显降低;同时MSCs还促进心脏局部HO-1的表达(P<0.05)。MSCs移植并不增加心室肥厚指数(LVMass),但可以增加舒张末期心脏容积/体重,改善心脏向心性肥厚。结论MSCs移植治疗可以通过调节组织局部胶原的合成与降解,改变心脏局部胶原纤维的含量,从而有效地逆转高血压心脏纤维化的过程,这种结构的变化同样伴有功能的改变。

骨髓间质干细胞移植治疗DKO鼠后肌组织的超微结构改变

目的观察Duchenne型肌营养不良症模型DKO小鼠经骨髓间质干细胞(MSC)移植治疗后肌组织的超微结构改变情况。方法用体外培养纯化的第五代SD大鼠MSC经尾静脉移植治疗DKO鼠,在移植后15 w取鼠后肢腓肠肌组织进行透射电镜超微结构的观察。结果传5代后的MSC均一性好,免疫源性低;移植治疗后DKO鼠的运动功能有所改善,生存时间也有延长。肌组织的超微结构观察发现,肌细胞膜断裂、膜下组织分离水肿、核中移、局部肌原纤维松散、炎症细胞浸润和结缔组织增生等病变情况较对照鼠有改善,并出现肌膜下多个幼稚核融合现象。结论MSC具有强大的可塑性,通过血循环可趋向病变肌组织并参与鼠肌萎缩组织的修复与再生作用。

通冠胶囊联合骨髓间质干细胞移植对心肌梗死后大鼠心功能的影响

目的:观察通冠胶囊联合骨髓间质干细胞移植对心肌梗死后大鼠心功能的影响。方法:通过手术结扎冠状动脉前降支的方法,建立急性心肌梗死大鼠模型,造模后相应组别经尾静脉移植骨髓间质干细胞和(或)灌喂通冠胶囊溶剂。于心肌梗死6周后,观察大鼠心脏重量指数、心脏彩超、血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达评分等。结果:干细胞组、干细胞加中药组心脏重量及心脏重量指数与模型组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。干细胞组、中药组、干细胞加中药组VEGF阳性表达评分与模型组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。干细胞组VEGF阳性表达评分与干细胞加中药组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:经静脉内移植骨髓间质干细胞,联合口服中成药通冠胶囊可减轻心肌梗死后左心室重构,增加心肌血管数量,减少心肌细胞凋亡。

转化生长因子-β_1诱导自体骨髓间质干细胞移植修复兔耳郭软骨缺损

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导自体骨髓间质干细胞(MSCs)修复兔耳郭软骨缺损的可行性。方法:取新西兰大白兔MSCs体外培养扩增,以含TGF-β1、地塞米松和维生素C的培养液做诱导培养,以诱导后的软骨细胞和高孔隙率聚乳酸(PDLLA)形成复合物为实验组修复兔自体耳郭软骨缺损,对照组仅进行单纯PDLLA移植,分别于移植后6,12,18周取材,行苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色,观察各组兔耳郭软骨缺损修复情况。结果:术后18周缺损区完全由软骨组织修复,缺损表面光滑,软骨陷窝明显,与周围正常软骨组织无明显界限,单纯PDLLA对照组为纤维软骨和纤维组织修复。结论:TGF-β1诱导自体骨髓间质干细胞可用于修复兔耳郭软骨缺损。

骨髓间质干细胞移植对心肌再生的影响

目的研究移植骨髓间质干细胞(MSCs)对梗死区心肌和血管再生的影响。方法抽取香猪骨髓,体外分离MSCs,经5-氮胞苷(5-aza)转化。结扎冠状动脉左前降支(LAD),经LAD和梗死区注射MSCs;对照组注射培养液。3周和6周后,行单光子发射型计算机断层(SPECT)心肌显像检查。结果SPECT显像,对照组心肌有明显的充盈缺损;实验组细胞移植3周后在梗死区内有岛状的灌注显像区,6周后这些区域相互之间以及与正常心肌之间发生融合。心肌灌注显像,实验组评分高于对照组(P<0.01)。结论MSC移植可再生心肌组织和血管。经LAD注射结合多点局部注射的方法可使移植细胞均匀分布于整个心梗区,促进再生的心肌组织与宿主心肌组织之间产生融合。

骨髓间质干细胞移植后肝星状细胞凋亡情况及其治疗肝纤维化的机制探讨

目的探讨骨髓间质干细胞移植后肝星状细胞凋亡情况及其治疗肝纤维化的机制。方法购买中山大学动物实验中心提供的30只清洁级SD大鼠,实验研究选取20只,将提取骨髓间质干细胞的10只作为实验组,建立肝纤维化大鼠模型,骨髓干细胞动员干预大鼠肝纤维化及肝星状细胞凋亡,检测肝纤维化及星状细胞凋亡指标;将未提取骨髓间质干细胞的10只作为对照组,不对其进行干预。然后对骨髓间质干细胞的纯度鉴定结果进行分析,并对两组大鼠的肝脏羟脯氨酸含量、肝星状细胞激活及凋亡情况进行统计分析。结果 CD34、CD44、CD45、CD95阴性细胞分别为99.75%、99.51%、99.80%、95.72%。实验组大鼠CCl4皮下注射诱导8周后的肝脏羟脯氨酸含量显著高于骨髓间质干细胞移植前(P<0.05);实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝脏羟脯氨酸含量显著低于骨髓间质干细胞移植3 d后(P<0.05),对照组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝脏羟脯氨酸含量显著高于骨髓间质干细胞移植3 d后(P<0.05);实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝脏羟脯氨酸含量显著低于对照组(P<0.05)。实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝星状阳性细胞数显著少于骨髓间质干细胞移植3 d后(P<0.05);实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝星状阳性细胞数显著少于对照组(P<0.05)。实验组大鼠骨髓间质干细胞移植3 d后的肝星状凋亡细胞数显著多于骨髓间质干细胞移植前及对照组(P<0.05)。结论骨髓间质干细胞移植后诱导肝星状细胞凋亡可能是其治疗肝纤维化的一个主要机制。

髓芯减压植骨并自体骨髓间质干细胞移植治疗股骨头坏死手术配合

对5例股骨头缺血性坏死患者采用髓芯减压并自体骨髓间质干细胞移植治疗。结果5例均于术后3周后下床活动,髋关节疼痛完全消失。3个月后复查示,50%股骨头死骨成活,HHS评分≥95分。提示自体骨髓间质干细胞移植治疗股骨头缺血性坏死创伤小、疗效好,早期股骨头坏死患者可恢复髋关节功能。手术室严格执行消毒隔离制度,巡回护士和器械护士熟悉手术配合步骤,充分准备物品,严格无菌操作,控制术中感染,才能确保手术顺利完成。

骨髓间质干细胞移植对梗死心肌的影响

目的探讨自体骨髓间质干细胞移植对梗死心肌基本结构及心肌收缩力的影响。方法贵州香猪24只,随机分为对照组和实验组,每组12只。抽取骨髓3 mL,按照W ak itan i方法培养出骨髓间质干细胞,经5-氮胞苷诱导后,5-溴脱氧尿苷标记备用。开胸结扎左冠状动脉前降支后,实验组第三代自体骨髓间质干细胞分别注射至结扎的左冠状动脉前降支和远端多点注入急性心肌梗死区域;对照组以同样方法注射DMEM。术后3、6周取标本,组织切片染色,观察组织基本结构;体外药物刺激离体肌条,检测心肌收缩情况。结果VG染色显示实验组胶原纤维融合较少,组织结构排列基本处于有序状态。实验组心肌收缩力明显高于对照组(P<0.001),且随时间推移恢复程度增加(P<0.05)。结论自体骨髓间质干细胞梗死心肌移植可以增加心肌细胞的收缩力,调节组织内胶原纤维的含量和组成,防止心室重构,从而起到对心肌基本结构的保护作用。

5-氮胞苷与内皮素-1联合诱导大鼠骨髓间质干细胞移植治疗心肌梗死的实验研究

目的 将单纯 5 -氮胞苷 (5 -aza)诱导、5 -aza与内皮素 - 1(ET - 1)联合诱导的骨髓间质干细胞 (BM SCs)所分化的心肌样细胞移植于大鼠心肌梗死区 ,探讨其对缺血心肌的病理学及功能的影响。方法 SD大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 :组Ⅰ为对照组 ,组Ⅱ为单纯 5 -aza诱导组 (5 μmol/L) ,组Ⅲ为 5 -aza及ET - 1联合诱导组 (5 -aza 5 μmol/L +ET - 110 -10 mol/L)。组Ⅱ、组Ⅲ动物取胫骨BMSCs进行培养 ,体外诱导后行自体细胞移植。采用冷冻法建立心肌梗死模型 ,采用直接注射法将标记BrdU的待移植BMSCs移植入心肌梗死区 ,对照组注射等量无血清培养基。移植 4周后 ,测定左室血流动力学改变 ,大鼠梗死区免疫组化染色观察移植细胞存活、分化和新生血管形成特征。结果 BMSCs移植 4周后 ,梗死区内可见部分心肌样移植细胞 ,其中 ,组Ⅱ移植细胞胞质内TroponinⅠ染色较浅 ,而组Ⅲ移植细胞胞质内TroponinⅠ染色较深。血流动力学测定结果显示 ,组Ⅱ、组Ⅲ左心室舒张末压 (LVEDP)均显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;左心室压力变化速率 (+dp/dtmax、-dp/dtmax)则明显高于对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。与组Ⅱ相比 ,组Ⅲ +dp/dtmax显著增高 (P <0 .0 5 )。形态学观察显示 ,移植实验组梗死区内新生血管增多。组Ⅱ、组Ⅲ微血?

骨髓间质干细胞移植对心肌梗死后创伤修复的影响

目的:探讨骨髓间质干细胞(MSC)移植对心肌梗死后创伤修复的影响,为临床MSC移植提供理论基础.方法:制备大鼠急性心肌梗死模型,分离培养同种异体MSC.术后第7天,心肌梗死区植入20μL用BrdU标记的MSC[(0.5～1.0)×105/μL].3周后,免疫组化检测梗死区BrdU,对梗死范围、梗死区心室游离壁厚度和胶原容积分数进行图像分析,并进行统计学分析.结果:MSC移植后3周,梗死区可见大量BrdU染色阳性细胞.处理组梗死面积为(24.91±3.62)%,低于对照组的(40.41±4.55)%;梗死区心室游离壁厚度(2.45±0.39)mm,较对照组(1.65±0.41)mm增加;胶原容积分数(57.11±3.42)%,较对照组的(81.36±5.31)%减小,差别均有统计学意义.结论:MSC移植后可促进心肌梗死后创伤修复过程,改善梗死区结构,具有良好的临床应用价值.

骨髓间质干细胞移植治疗DMD的应用前景

疾病概述 假肥大型肌营养不良症(DuchenneMuscular Dystrophy,DMD)是一种X连锁隐性遗传病,其发病率为1/3 500男婴,是最常见的神经肌肉疾病[1].早在1868年由Duchenne首先详细描述,故又称Duchenne型肌营养不良症.

基于JAK2/STAT3信号通路探讨补阳还五汤联合骨髓间质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的机制

目的探讨补阳还五汤联合骨髓间质干细胞(MSCs)移植治疗脊髓损伤的作用机制。方法选择8~10周的健康清洁级成年Sprague-Dawley大鼠45只,随机分为假手术组,空白对照组、补阳还五汤组、MSCs移植组、补阳还五汤+MSCs组,每组9只。采用改良式的Allen’s打击法造模,分别于术后1、3、5周后通过改良Tarlov评分和斜板试验判断其对神经功能的影响,并且免疫组化检测脊髓组织中Brdu的水平,Western检测p-JAK2、p-STAT3、GP130、IL-6的蛋白表达水平。结果补阳还五汤和MSCs移植能够改善脊髓损伤大鼠的脊髓损伤程度,提高了脊髓损伤大鼠的Tarlov评分,倾斜平面临界角度也明显增加,与假手术组相比,模型组中p-JAK2、p-STAT3、p-AKT、GP130、IL-6的表达水平均显著上调;与模型组相比,补阳还五汤、MSCs细胞移植、补阳还五汤+MSCs组中的p-JAK2、p-STAT3、GP130、IL-6的蛋白表达水平均显著下调。脊髓损伤模型大鼠中Brdu含量与假手术组相比随着时间的增加明显降低,而补阳还五汤、MSCs细胞移植组中Brdu含量与模型组相比在不同的作用时间明显上升,MSCs细胞移植、补阳还五汤+MSCs组Brdu含量在第1周时表达最多。结论补阳还五汤和MSCs移植能够改善脊髓损伤,且能够抑制p-JAK2、p-STAT3、GP130、IL-6的蛋白表达,促进SCI后的神经再生修复功能,可能与补阳还五汤和MSCs移植能够抑制IL-6蛋白的表达,从而抑制JAK2/STAT3信号通路的表达有关。

骨髓间质干细胞移植与心肌再生

骨髓间质干细胞是多能细胞,在体外培养时,通过诱导可分化为肌肉细胞等。新近进行的骨髓间质干细胞移植实验,为治疗心肌梗死提供了一个潜在的、较为光明的前景。

骨髓间质干细胞移植后大鼠缺血心肌的超微结构观察

目的观察骨髓间质干细胞(MSCs)移植后大鼠缺血心肌组织的超微结构改变。方法体外培养、纯化SD大鼠的骨髓MSCs,4’6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记,经尾静脉注射移植治疗大鼠急性心肌缺血,移植后1周和8周荧光显微镜下检测心肌组织中DAPI阳性细胞,透射电镜观察心肌组织的超微结构改变。结果MSCs经传代培养至第3代后,均一性好。细胞移植后1周和8周,移植组的心肌组织中可见呈蓝色细胞核的DAPI阳性细胞,而对照组未发现阳性细胞。移植后1周,心肌组织的超微结构观察发现移植组的心肌梗死周边区域可见少量细胞,其形态类似于体外培养的骨髓MSCs;移植后8周,移植组梗死周边可见大量的毛细血管,其内皮细胞细胞“芽生”分割管腔开始形成新的血管,还可见少量“不成熟”的心肌细胞。结论骨髓MSCs通过血液循环可向缺血心肌组织归巢并促进血管和心肌组织的再生。

自体骨髓间质干细胞移植对兔心肌梗死左心室收缩功能的作用

目的：探讨超声心动图评价骨髓间质干细胞移植对心肌梗死后左心室收缩功能的作用及治疗价值．方法：24只新西兰白兔随机分为干细胞移植组和对照组．结扎左冠状动脉回旋支建立心肌梗死模型后，移植组与对照组心肌梗死区中央及周边分别注射骨髓间质干细胞和DMEM培养液．应用超声心动图对结扎前、心肌梗死后3d及注射移植后4周左室大小和收缩功能指标进行检测．结果：实验期内两组各有1只兔死亡．干细胞移植后4周，移植组左室射血分数，后壁的收缩幅度，

骨髓间质干细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响

目的 观察成人骨髓间质干细胞 (hBMSCs)移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法 Wistar大鼠 90只 ,随机分为脊髓半切 +hBMSCs组、脊髓半切 +PBS组、单纯脊髓半切组和假手术组。脊髓半切 +hBMSCs组和PBS组又分别分为头侧注射、尾侧注射和头尾两侧注射三个亚组。移植后 1、 7、 1 4、 2 1、 2 8d观察大鼠神经功能恢复情况 ,应用免疫组化和免疫荧光技术检测BrdU标记hBMSCs的胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)和神经元特异性核蛋白 (NeuN)表达情况。结果 大鼠脊髓半切损害后 ,hBMSCs组动物较PBS组死亡率下降并有明显的神经功能恢复。移植的hBMSCs在宿主脊髓中存活 ,从第 7天开始即有NeuN和GFAP表达并向损伤部位及对侧迁移 ,第 2 8天hBMSCs来源GFAP阳性细胞可见明显的树突生长。结论 hBMSCs可在宿主损伤脊髓中存活、向损伤部位迁移并向神经元和星形胶质细胞分化 ,并促进神经功能恢复 ,降低死亡率 ;