利拉鲁肽中高分子蛋白质杂质含量方法学研究

目的:建立利拉鲁肽中高分子蛋白质检测的分子排阻色谱法并进行全面的方法学验证。方法:采用分子排阻色谱法分离利拉鲁肽单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行准确定量。结果:确定了利拉鲁肽中高分子蛋白质的主要形式为二聚体,建立的分子排阻色谱法可准确地测定利拉鲁肽中高分子蛋白质的含量,并考察了高分子蛋白质分析方法的专属性、检测限、定量限、线性与范围、进样精密度、重复性与中间精密度、稳定性和耐用性。结论:建立的方法可快速有效地对利拉鲁肽高分子蛋白质进行定性和定量分析,可作为利拉鲁肽中高分子蛋白质的质量研究和质控分析方法。

一种多肽分子P2中高分子蛋白质杂质含量方法学研究

建立多肽分子P2中高分子蛋白质检测的分子排阻色谱法并进行全面的分析方法学验证。采用分子排阻色谱法分离多肽分子P2中单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行准确定量。结果表明:本方法的检测限为3.1×10^(-4)mg/ml;定量限为9.4×10^(-4)mg/ml,仪器精密度为RSD为1.1%;多肽分子P2在0.01%-120%的浓度范围内之间存在良好的线性关系,线性方程为Y=432.39X-0.6269,R^(2)=1.00;稳定性及耐用性均符合要求。本方法可快速有效地对多肽分子P2中高分子蛋白质进行定性和定量分析。

地特胰岛素高分子蛋白质定性和定量分析

目的:探索和建立地特胰岛素高分子蛋白质的定性和定量分析测定方法。方法:采用Tricine SDS-PAGE凝胶电泳有效地分离地特胰岛素中的高分子蛋白质组分,确定高分子蛋白质的主要组成形式;采用分子排阻色谱法分离地特胰岛素单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行准确定量。结果:确定了地特胰岛素中高分子蛋白质的主要形式为二聚体和寡聚体,建立的分子排阻色谱法可准确地测定地特胰岛素中高分子蛋白质的含量,并考察了高分子蛋白质产生的主要因素以及国内外产品的高分子蛋白质含量。结论:建立的方法可快速有效地对地特胰岛素高分子蛋白质进行定性和定量分析,可作为地特胰岛素的质量研究和质控分析方法。

药用胰岛素中高分子蛋白质杂质含量过程控制方法研究

采用高效液相色谱法,以牛血清白蛋白为标准,对照品对生物提取法制备的药用胰岛素中高分子蛋白质杂质进行含量测定,高分子蛋白和胰岛素保留时间分别在7.2-9.2 min和12.0 min之间,能够达到基线分离,整个过程控制相对标准偏差RSD<10%,符合生产工艺要求.对后期生产工艺实施两种不同改进措施(1、2)得到的产品胰岛素含量>90%,符合国家生产标准.实验结果表明实施工艺改进措施2后能生产出符合国家标准的药用胰岛素.研究建立的测定方法适合原料药胰岛素企业对生产过程中高分子蛋白质杂质含量控制,并为生物提取法进行原料药胰岛素研究与开发提供相关技术信息.

荣昌猪乳中一组高分子质量蛋白质表达量与乳糖含量的关系

研究采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶不连续垂直板电泳（SDS—PAGE）对9头荣昌母猪乳中一组高分子质量蛋白质（HMWP）进行研究，分析了荣昌猪乳中一组高分子质量蛋白质的基因表达量（HMWP相对浓度）与乳糖含量的关系。结果表明，荣昌猪乳中高分子质量蛋白质基因表达量与乳糖含量呈极显著正相关（P〈0．01）。

蛋白质类医用高分子微生物合成的研究进展

蛋白质类医用高分子是一类重要的功能高分子材料,在生物医学领域有着广泛的应用。随着现代生物技术特别是分子生物学技术的发展,微生物合成医用高分子材料已成为可能。微生物合成除了大规模、低成本的特点外,还可对蛋白质高分子进行分子设计,从而赋予其新的材料性能,以满足不同的需要。该文综述了蛋白质类医用高分子(胶原与明胶、弹性蛋白、丝蛋白)微生物合成的研究进展,指出微生物合成的原理方法及应用现状,并对其发展前景进行了展望。

流动注射光度法测定黄酒中蛋白质的含量和分子量分布

将流动注射技术引入Bradford蛋白质测定法,利用Sepadex G-100凝胶层析柱分离黄酒中的蛋白质,可直接测定蛋白质的含量和分子量分布.成品酒(熟酒)为5.32 g/L(6.86 g/L);高分子蛋白质(FW>25000)占10.52%(13.08%);中分子蛋白质(FW:25000～5000)占49.12%(54.12%);小分子蛋白质(FW<5000)占40.36%(32.80%),并得到黄酒中蛋白质含量与分子量分布的曲线谱图,可监控和预测黄酒的品质.

啤酒及其泡沫中蛋白质组分的比较分析

将数种国内知名啤酒的泡沫和酒液分离,分别测定它们的总蛋白质和高分子蛋白质(HMWP)质量浓度.结果显示,泡沫具有富集蛋白质的功能,且泡沫中HMWP含量的增加尤为明显;与啤酒原液中的HMWP相比,泡沫中的HMWP含量与泡持值具有更高的相关性;不同的啤酒样品的HMWP在泡沫中的富集能力存在明显的差异,由此从啤酒蛋白的层面提出一项啤酒的质量判定标准.

论蛋白质区分与啤酒质量

前言优质的啤酒应该在较长保质期内清亮透明,泡沫洁白细腻、持久、挂杯。啤酒是一种不十分稳定的胶体溶液,影响啤酒的非生物因素很多,如氧、钙离子、草酸根离子等。但形成啤酒混浊的主要原因是高分子蛋白质和多酚的聚合,因此减少啤酒中的高分子蛋白质可相对提高啤酒的非生物稳定性;适当增加中分子蛋白质有利于泡持性。本文重点谈一下啤酒的蛋白质区分对啤酒质量的影响及其控制。

啤酒蛋白质混浊的成因及工艺措施

在啤酒非生物混浊中,90%以上是蛋白质混浊。引起蛋白质混浊的主要因素:高分子蛋白质、多酚物质、氧。它们主要来源于麦芽、酒花以及工艺过程。蛋白质混浊分为:真正蛋白质混浊、冷混浊、永久混浊。一、啤酒蛋白质混浊的成因1.真正蛋白质混浊瓶装啤酒在杀菌后出现片状絮状物,它实际上是成品啤酒中含有多量的热凝固蛋白。是由于麦芽溶解差。

蛋白质与啤酒质量的关系

蛋白质是啤酒中泡沫物质的主要组成成分,是重要的风味物质,又是影响啤酒非生物稳定性的因素之一。良好的泡沫性能,来自以糖蛋白为主的表面活性物质,泡沫中蛋白质含量占56%。要使啤酒具有良好的泡沫性能。

蛋白质高分子结合体

蛋白质高分子结合体是蛋白质与高分子化合物以特定位置或方式结合的产物。其中,蛋白质(包括酶和多肽)分子中氨基酸残基上的氨基、巯基和羧基是常用的结合位点。本文主要对蛋白质高分子结合体的制备方法进行了综述。聚乙二醇是合成高分子中能够有效改善蛋白质性能的修饰剂,而多糖则是用于制备蛋白质高分子结合体较成功的天然高分子化合物。"点击化学"、活性聚合技术等技术已经被成功应用于蛋白质高分子结合体的制备。某些具有特异结合功能基团的化合物(如金属卟啉、生物素等)与高分子共价结合后也可制备蛋白质高分子结合体。在研究蛋白质高分子结合体制备方法的基础上,近年来开始了这类大分子的自组装行为研究,尤其是对巨型双亲性分子自组装行为的研究,这为设计和构筑先进功能材料提供了新的思路。与高分子化合物的结合是改善蛋白质性能和拓宽蛋白质应用范围的重要技术之一。蛋白质高分子结合体不但可用于生物医药领域,而且在纳米技术和材料科学等领域具有潜在的优势。

表面等离子体共振光谱研究蛋白质-高分子结合体在金表面的自组装

研究了蛋白质-高分子结合体在金片表面的自组装行为.首先制备了一种引发剂2-溴-2-甲基丙酸-2-氨氧基乙酯(ABM),该引发剂可以与5′-磷酸吡哆醛(PLP)活化的牛血清白蛋白(BSA)的氮端相连,进而得到大分子引发剂BSA-Br.最后以甲基丙烯酸寡聚乙二醇酯(OEGMA)为单体,利用原子转移自由基聚合法(ATRP)制备BSA-POEGMA结合体.利用红外光谱(FTIR)、紫外可见分光光度计(UV-Vis)、基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)对各步产物进行表征.利用表面等离子体共振光谱(SPR)研究BSA-POEGMA结合体在金片表面的自组装行为,以及金片表面吸附的BSA-POEGMA结合体对其他蛋白质包括溶菌酶(Lys)和纤维蛋白原(Fib)的吸附效果影响.

生物提取胰岛素中高分子蛋白杂质去除工艺的优化

对猪胰脏来源的胰岛素原料药中的高分子蛋白质杂质采用超滤膜和微孔滤膜过滤方法去除并对工艺进行了优化.通过去除后的原料药活性、收率、高分子蛋白质杂质去除率等参数并与标准品的比对.确定了高分子蛋白质杂质去除最佳条件.结果表明,经50kD超滤膜过滤方法能有效去除生物提取胰岛素原料药中高分子蛋白质杂质,并且收率较高,生物活性损失较低,可用于猪胰脏来源生物提取胰岛素的生产.

分子排阻色谱法测定德谷胰岛素高分子蛋白含量

目的建立德谷胰岛素高分子蛋白质的定量分析测定方法。方法采用Insulin HMWP色谱柱(7.8 mm×300 mm,10mm),以冰醋酸-异丙醇-水(4∶3∶10)为流动相,流速为0.5 mL·min^-1,检测波长为280 nm,利用分子排阻色谱法分离德谷胰岛素单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行定量分析。结果该方法的检测限和定量限分别为0.18和0.47μg;仪器精密度RSD为0.51%,德谷胰岛素在0.125~4.0mg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=20.864 1X-0.125 9,R^2=1.000 0;德谷胰岛素主峰与高分子蛋白质峰的分离度>2.0。结论建立的方法操作简便,灵敏度高,可有效地对德谷胰岛素高分子蛋白质进行定量分析。

胶原蛋白可以额外补充吗?

胶原蛋白是一种高分子蛋白质，能使皮肤保持结实而有弹性。当前热炒的各种胶原蛋白口服胶囊和口服液，真的能起作用吗？市面出售的胶原蛋白是用动物皮肤水解提取的，胶原蛋白口服液进入人体后，只是变成一个个氨基酸“零件”，其可护肤、养颜、抗衰老的作用显然被夸大了。关于胶原蛋白的护肤品也不少，掺人一定胶原蛋白或氨基酸的化妆品，直接涂抹对皮肤有保护和抗衰老的效果，但这种作用也是暂时的，

位点特异、拓扑结构明确的蛋白质-聚氨基酸偶联物的简洁合成

发展位点特异且具有明确拓扑结构的蛋白质-高分子偶联物是高分子和化学生物学领域共同面对的挑战之一.在聚合物末端精确引入一个或多个具有特殊反应活性的生物正交官能团是实现"位点特异"生物偶联的关键前提.这一过程通常比较低效、需要多步骤的官能团转化、聚合后修饰以及保护脱保护,费时且繁琐.最近,通过在聚合过程中原位生成官能团,以一锅-两步的过程得到可直接用于蛋白质偶联的异遥爪聚合物,从而实现了多种不同拓扑结构的蛋白质-聚氨基酸偶联物的快速构筑.这一简洁的合成路线实现了以前尚未获得的头-尾相接的环状偶联物的制备,使这些偶联物表现出了很强的体外酶稳定性以及热稳定性.该工作是蛋白质-高分子偶联化学的一次创新的尝试;同时,利用该方法所制备的偶联物在蛋白质药物领域具有广阔的应用前景.

蛋白质-POEGMA结合体的合成与表征

首先利用5'-磷酸吡哆醛酯(PLP)对牛血清白蛋白(BSA)的氮端进行定位活化,之后与2-溴-2甲基丙酸-2-氨氧基乙酯(ABM)反应形成大分子引发剂(BSA-Br).最后以寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯(OEGMA)为单体,通过原子转移自由基聚合法(ATRP)制备带有2条POEGMA高分子链的蛋白质高分子结合体(BSAPOEGMA).利用红外(FTIR)、核磁共振谱(1H-NMR)、紫外分光光度计(UV-Vis)、基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)等分析技术对所合成化合物进行表征.实验结果表明各步骤的化合物及最终的蛋白质高分子结合体都具有预期结构.

微滤技术提高黄酒胶体稳定性的探讨

对黄酒酒液及沉淀物进行分析，确定高分子蛋白质在蛋白质沉淀中所起的作用。进而应用０．４５μｍ 微滤膜处理酒液，发现微滤能大量去除形成大颗粒的前驱物质——高分子蛋白质，明显改善黄酒稳定性。