高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉平滑肌细胞中巨噬细胞炎性蛋白1α和C-C型趋化因子受体1的表达

目的通过检测高同型半胱氨酸血症大鼠胸主动脉平滑肌细胞中巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)和C-C型趋化因子受体1(CCR1)蛋白的表达,探讨高同型半胱氨酸血症引起动脉粥样硬化(AS)的机制。方法8周龄SD雄性大鼠16只随机分为对照组和高蛋氨酸组,每组8只。对照组给予普通饲料喂养,高蛋氨酸组在普通饲料喂养的基础上加质量分数2%的蛋氨酸。喂养8周后处死大鼠,心脏采血,取胸主动脉。肉眼及光镜下观察血管形态学改变,采用高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度,S-P免疫组织化学染色法检测MIP-1α和CCR1的表达。结果(1)血浆Hcy浓度:高蛋氨酸组大鼠血浆Hcy浓度(45.74±9.65)mmol.L-1显著高于对照组(7.38±2.28)mmol.L-1(P<0.01)。(2)形态学改变:肉眼观可见对照组大鼠胸主动脉内膜光滑,高蛋氨酸组胸主动脉内膜粗糙、隆起;光镜下可见对照组大鼠主动脉内膜内皮细胞排列整齐,高蛋氨酸组内膜细胞排列紊乱,脂质沉积。(3)免疫组织化学染色结果:MIP-1α和CCR1蛋白的阳性表达表现为细胞质呈棕褐色。MIP-1α和CCR1蛋白在高蛋氨酸组的阳性表达强于对照组,二者在高蛋氨酸组的阳性表达平均灰度值明显低于对照组(P<0.01)。结论高同型半胱氨酸血症可诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞MIP-1α及其受体CCR1的表达,引起血管壁的炎症,导致AS形成。

高血压伴高同型半胱氨酸血症大鼠心肌ATF6和CHOP表达对左室肥厚的影响及依叶片干预效果

目的研究高血压伴高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠心肌内质网应激(ERS)时,激活作用转录因子6(ATF6)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达与左室肥厚的关系及依叶片对其干预效果。方法60只雄性SD大鼠行腹主动脉缩窄术(AAC),术后2周选收缩压(SBP)≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133k Pa)大鼠45只随机等分为3组。AAC组普通饲料喂养并双蒸水灌胃;对照组2.5%蛋氨酸饲料喂养并双蒸水灌胃;治疗组2.5%蛋氨酸饲料喂养并依叶片[10 mg/(kg·d)]灌胃。定期测SBP和血同型半胱氨酸(Hcy),查心脏彩超,并用免疫组化和Western blot法观察大鼠心肌ATF6和CHOP的表达。结果术后20周,对照组大鼠SBP,血Hcy,室间隔舒张厚度(IVSD)和左室厚壁舒张厚度(LVPWD),心肌ATF6和CHOP表达均高于AAC组(P<0.05);治疗组大鼠SBP,血Hcy,IVSD和LVPWD,心肌ATF6和CHOP表达均明显低于对照组(P<0.05)。结论高血压伴HHcy大鼠心肌ATF6及CHOP表达较Hcy正常的高血压大鼠明显增高,以凋亡因子CHOP表达更占优势;依叶片有效降压,降低血Hcy,减轻心肌ERS,减缓心肌肥厚的作用。

桃红四物汤对高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉死亡受体途径凋亡的干预作用

目的:观察桃红四物汤对高同型半胱氨酸大鼠主动脉死亡受体途径凋亡的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、桃红组、叶酸组,每组10只,正常组给予普通饲料,模型组、桃红组、叶酸组给予高蛋氨酸饮食(普通饲料添加2%蛋氨酸)喂养,桃红组采用桃红四物汤水煎液,按4.59 g生药/(kg.d)灌胃;叶酸组采用叶酸混悬液,按1.35 mg/(kg.d)灌胃;模型组及正常组给双蒸水2 mL/(只.d)灌胃。12周后,Elisa法检测血清hcy、TNF-α、MCP-1浓度,免疫组化检测主动脉Cleaved Caspase3表达,RT-PCR法检测主动脉TNF-α、Fas mRNA表达。免疫印迹法检测主动脉TNF-α的表达。结果:12周后,模型组大鼠血Hcy显著升高,血清TNF-α浓度升高,血清MCP-1浓度有升高趋势;主动脉内皮细胞连续性受损,受损部位下的血管平滑肌细胞Cleaved Caspase3呈片状黄褐色阳性染色。主动脉全层行RT-PCR示TNF-α、Fas mRNA表达上调,western blot示TNF-α表达上调。相对于模型组,桃红组和叶酸组大鼠血清TNF-α浓度降低,主动脉未发现片状Cleaved Caspase3阳性染色,TNF-αmRNA表达明显下调,Fas mRNA表达有下调趋势,TNF-α蛋白表达下调。但叶酸组伴有血同型半胱氨酸浓度的下降,而桃红组没有降低血同型半胱氨酸浓度的作用。结论:高同型半胱氨酸血症诱导SD大鼠主动脉死亡受体途径凋亡,桃红四物汤可降低血清TNF-α,并在基因和蛋白水平下调主动脉TNF-α表达。

高同型半胱氨酸血症大鼠冠状动脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的表达

目的观察高同型半胱氨酸血症对大鼠冠状动脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1的影响,以明了冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病机制。方法24只大鼠随机分成正常饮食对照组、高蛋氨酸饮食组、高蛋氨酸+叶酸饮食组、高半胱氨酸饮食组。每组6只,分别给予普通饲料;普通饲料加1.7%蛋氨酸;普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%叶酸;普通饲料加1.2%半胱氨酸。饲养6周,采用高效液相色谱荧光检测法测定血浆总同型半胱氨酸浓度,免疫组织化学染色法检测大鼠冠状动脉左主干和左前降支内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的表达。结果喂以高蛋氨酸饲料6周,可诱导大鼠高同型半胱氨酸血症。与正常饮食对照组比较,高蛋氨酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸浓度显著升高(P<0.01),冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平明显增强;高蛋氨酸+叶酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸水平较高蛋氨酸饮食组显著降低(P<0.01),其冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平也降低;高半胱氨酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸浓度,以及冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平与正常饮食对照组比较差异无显著性。结论高同型半胱氨酸血症促进了大鼠冠状动脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1,在冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生和发展中起着重要的作用。

番茄红素对高同型半胱氨酸血症大鼠血管内皮功能和抗氧化能力的影响

目的:研究番茄红素预防高同型半胱氨酸血症(HHcy)致大鼠动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:50只SD雄性大鼠平均分为正常对照(NC),HHcy对照(HC),HHcy+低(HL1)、中(HL2)、高剂量番茄红素组(HL3)。NC组给予美国官方分析化学师协会(AOAC)配方饲料,其余各组则给予在AOAC配方基础上添加3%L-蛋氨酸的饲料。HL1、HL2、HL3组分别给予番茄红素10、15和20 mg.kg-1.d-1,实验期12周。测定各组血清同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素-1(ET-1)、丙二醛(MDA)、羟自由基(OH.)、过氧化氢(H2O2)、总抗氧化能力(T-AOC)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和乳酸脱氢酶(LDH)含量。用HE染色和油红染色法对腹主动脉进行病理学检查。结果:除NC组外,各组HHcy大鼠血清Hcy含量均随时间延长而显著提高,为中度HHcy。HC组NO含量显著低于NC组,而ET-1含量显著高于NC组(P<0.01);HL2和HL3组NO含量显著高于HC组,而ET-1含量则明显低于HC组(P<0.01)。各组间NOS含量无明显差异。病理学检查显示,HC组和HL1组主动脉内膜有断裂,有脂肪颗粒沉着,HL2组、HL3组和NC组主动脉内膜完整,无脂肪颗粒沉着。HC组和HL1组MDA和H2O2含量显著高于NC组(P<0.01),HL2组和HL3组则明显低于HC组(P<0.05)。与HC组相比,HL2和HL3组OH.含量显著降低(P<0.01)。HC组T-AOC含量较NC组显著降低,而给予番茄红素后HHcy大鼠T-AOC含量明显提高。HC组OX-LDL含量较NC组显著升高(P<0.01),但HHcy大鼠血清OX-LDL含量随着给予番茄红素剂量的增加而显著下降(P<0.01)。HC组SOD和GSH-Px活性较NC组显著降低(P<0.01),而番茄红素各组SOD和GSH-Px活性则较HC组显著提高,CAT活性在各组间无显著性差异。结论:中、高剂量番茄红素可以预防HHcy所致AS,其作用机制可能与其直接淬灭活性氧,提高SOD和GSH-Px的活性,加速活性氧的灭活有关。

叶酸降低高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的:探讨补充叶酸对高蛋氨酸(Met)喂养所致的高同型半胱氨酸(Hcy)血症大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白(MCP-1)表达的影响。方法:SD大鼠30只随机分3组:即正常对照组(control)、高蛋氨酸组(Met)、蛋氨酸+叶酸组(Met+folate),每组10只,分别给予普通饲料、普通饲料加1.7%蛋氨酸、普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%的叶酸,饲养45 d,测定血浆总同型半胱氨酸浓度(thcy),用免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测大鼠的主动脉单核细胞趋化蛋白MCP-1表达。结果:高Met组血浆总同型半胱氨酸浓度明显高于control组(P<0.01),Met+folate组血浆总同型半胱氨酸浓度明显低于Hhcy组(P<0.01);高Met组大鼠主动脉表达的MCP-1明显多于control组(46.41±4.23vs15.73±2.74;P<0.05),而Met+folate组能抑制高同型半胱氨酸血症所致的主动脉MCP-1的表达(23.12±4.40vs46.41±4.23;P<0.05)。结论:大鼠喂以高Met饲料45 d,可充分诱导高Hcy血症。而叶酸补充治疗,在显著降低血浆tHcy水平的同时,也降低了高同型半胱氨酸大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白MCP-1的表达。

叶酸降低高同型半胱氨酸血症大鼠单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的探讨补充叶酸对高蛋氨酸喂养所致的高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠主动脉内皮及外周血单个核细胞(PBMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达和释放的影响。方法健康清洁级SD雄性大鼠30只随机分为3组:正常对照(Control)组、高同型半胱氨酸(Hhcy)组、补充叶酸(FA)组。每组10只,分别给予普通饲料;普通饲料加1.7%蛋氨酸;普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%叶酸。饲养45d,采用高效液相色谱法测定血浆总同型半胱氨酸浓度,用双抗体夹心ELISA方法测定3组大鼠氧化型低密度脂蛋白诱导后PBMC释放炎症趋化因子MCP-1的含量,免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测大鼠主动脉MCP-1的表达。结果大鼠喂以高蛋氨酸饲料45d可诱导高同型半胱氨酸血症,同时补充叶酸可显著降低血浆总同型半胱氨酸水平(P<0.01);与Control组相比,Hhcy组大鼠血浆总同型半胱氨酸升高,主动脉内皮MCP-1的表达和氧化型低密度脂蛋白诱导的PBMC释放的MCP-1水平均显著升高(P<0.05,P<0.01);FA组大鼠血浆总同型半胱氨酸水平降低,主动脉内皮MCP-1的表达及氧化型低密度脂蛋白诱导的PBMC释放的MCP-1水平较Hhcy组显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论叶酸治疗Hhcy大鼠可以降低血同型半胱氨酸水平,同时降低主动脉内皮细胞和外周血PBMC炎症趋化因子MCP-1的表达与释放。

叶酸、维生素B_(12)对高同型半胱氨酸血症大鼠ICAM-1及VCAM-1表达的影响

目的观察叶酸、维生素B12对高同型半胱氨酸血症(hyperhomecysteinemia,Hhcy)大鼠主动脉壁细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为三组:空白对照组、Hhcy模型组、叶酸、维生素B12干预组。8 w后检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平,观察主动脉壁形态学变化并检测胸主动脉血管壁ICAM-1及VCAM-1的表达。结果 Hhcy模型组大鼠的血浆Hcy水平明显高于空白对照组(P<0.01),主动脉壁ICAM-1及VCAM-1表达较空白对照组明显上调(P<0.01)。Hhcy模型组血浆Hcy水平明显高于叶酸、维生素B12干预组(P<0.01),主动脉壁ICAM-1及VCAM-1的表达较空白对照组明显上调(P<0.01)。结论高蛋氨酸饮食可诱发Hhcy,主动脉壁ICAM-1及VCAM-1表达上调。叶酸、维生素B12可以下调血浆Hcy水平及主动脉壁ICAM-1及VCAM-1的表达,对Hhcy致AS具有明显预防作用。

苦碟子对高同型半胱氨酸血症大鼠过氧化及血管平滑肌增生的影响

目的观察苦碟子对高同型半胱氨酸(HHcy)血症大鼠动脉平滑肌增生情况和过氧化指标的影响。方法将30只Wistar雌性大鼠随机分为3组:HHcy血症组、苦碟子干预组、空白对照组,每组10只,分别每天灌胃蛋氨酸0.75g/kgBid、蛋氨酸0.75g/kg+苦碟子7.5ml/kg、等容积生理盐水,其他饲料相同,饲养10w,于末次给药后4h处死动物取血及胸主动脉。采用ELISA法检测各组大鼠血浆同型半胱氨酸(Hcy),比色法检测血浆丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,测量动脉平滑肌相对厚度指数。结果①HHcy血症组大鼠灌胃蛋氨酸10w,可诱发HHcy血症。②与空白对照组比较,HHcy血症组大鼠血浆Hcy水平与MDA含量均升高(均P<0.01),GSH-Px、SOD活性降低(均P<0.01),动脉平滑肌厚度指数增加(P<0.01)。③苦碟子干预组大鼠血浆Hcy水平与HHcy血症组比较无明显变化(P>0.05),但可使大鼠血浆MDA降低、GSH-Px、SOD活性升高(P<0.01);动脉平滑肌厚度较HHcy血症组降低(P<0.01)。结论高蛋氨酸饲养可诱发HHcy血症,HHcy可引发动脉平滑肌增生及过氧化状态。苦碟子不能降低血浆Hcy水平,但对其引起的过氧化状态有改善作用,同时可改善HHcy导致的动脉平滑肌增生,阻止HHcy诱导的早期动脉粥样硬化的发生。

麦门冬多糖对高同型半胱氨酸血症大鼠心肌缺血再灌注血管紧张素和内皮素-1的影响

目的探讨菊苣多糖对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法应用腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg复制Hhcy大鼠模型,10 w后,腹腔注射戊巴比妥钠麻醉下气管插管安装呼吸机,开胸结扎冠状动脉左室降支60 min后松开结扎线再灌注60 min。标Ⅱ导联全程记录心电图,并于再灌注60 min取血。检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、血管紧张素(Ang)Ⅰ、AngⅡ、内皮素(ET)-1。结果麦门冬多糖干预组的CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1水平明显低于Hhcy模型对照组。结论麦门冬多糖通过抑制血管活性因子对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。

瑞舒伐他汀对高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉组织Bcl-2甲基化的影响

目的观察瑞舒伐他汀对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)Wistar大鼠主动脉组织Bcl-2甲基化水平及其表达的影响,探讨瑞舒伐他汀逆转Hhcy致动脉粥样硬化的可能机制。方法实验选用33只健康雄性5周龄Wist-ar大鼠,体重150±10 g,大鼠随机分为3组,对照组11只,Hhcy组11只,瑞舒伐他汀组11只;对照组给予正常饮食,Hhcy组给予正常饮食和蛋氨酸1 g/(kg.d)灌胃,瑞舒伐他汀组给予正常饮食和蛋氨酸1 g/(kg.d)加瑞舒伐他汀10 mg/(kg.d)灌胃。16周末处死大鼠,心脏取血,全自动生化仪测定血清同型半胱氨酸浓度;提取主动脉组织DNA,甲基化特异性PCR(MSP)联合巢式PCR(nested PCR)检测Bcl-2启动子区甲基化水平,实时荧光定量PCR检测Bcl-2 mRNA的表达,免疫组化和Western blot检测Bcl-2蛋白的表达。结果 16周蛋氨酸灌胃1 g/(kg.d)可以诱导Hhcy(P<0.01);瑞舒伐他汀可以降低升高的同型半胱氨酸水平(P<0.05);与对照组比较,Hhcy组主动脉组织中Bcl-2启动子区域发生去甲基化,Bcl-2 mRNA、蛋白表达上调(均P<0.05);瑞舒伐他汀组主动脉组织中Bcl-2启动子区域甲基化的水平高于Hhcy组,Bcl-2 mRNA、蛋白的表达低于Hhcy组(均P<0.05)。结论瑞舒伐他汀拮抗Hhcy大鼠主动脉组织的去甲基化,下调Bcl-2的表达,这可能是瑞舒伐他汀抗动脉粥样硬化的作用之一。

α-玉米赤霉醇改善去卵巢高同型半胱氨酸血症大鼠的血管功能

目的探讨植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对去卵巢高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠血管功能的保护作用。方法用高蛋氨酸(Met)饮食复制HHcy大鼠模型。40只雌性Wistar大鼠随机分为5组:(1)对照组(Con);(2)2.5%蛋氨酸组(Met);(3)卵巢切除+2.5%蛋氨酸组(OVX+Met);(4)卵巢切除+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+Met+α-ZAL);(5)卵巢切除+2.5%蛋氨酸+17β-E2组(OVX+Met+17β-E2)。12周后,测定血浆雌二醇(E2)及同型半胱氨酸(Hcy)的含量;离体胸主动脉环灌流,观察胸主动脉环对不同浓度苯肾上腺素(PE)、乙酰胆碱(ACh)和硝普钠(SNP)的反应。结果高蛋氨酸饮食可明显增高血浆Hcy水平,其中OVX+Met组大鼠Hcy水平升高最显著。与其他组相比,OVX+Met组大鼠胸主动脉环对PE的收缩反应明显增强,对ACh的舒张反应明显减弱。各组大鼠胸主动脉环对SNP的舒张反应无明显差异。结论α-ZAL可抑制去卵巢HHcy大鼠血浆Hcy水平的升高,减轻血管内皮细胞的损伤,明显改善大鼠的血管功能,其作用与17β-E2相似。

螺旋藻对高同型半胱氨酸血症大鼠氧化应激水平及动脉损伤的影响

目的研究螺旋藻对高同型半胱氨酸血症（HHcy）大鼠氧化应激水平及动脉损伤的影响。方法雄性Wistar大鼠60只随机分成6组：正常对照组、HHcy模型组、螺旋藻低、中、高剂量组和叶酸组，每组10只均喂以普通鼠饲料。除正常对照组外，其余各组均给予1g／（ks·d）L-蛋氨酸灌胃，同时螺旋藻各剂量组与叶酸组以灌胃方式给予相应药物。连续喂养12周后，以高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平。以硫代巴比妥酸反应比色法测定血浆丙二醛水平，以黄嘌呤氧化酶法检测血浆超氧化物歧化酶（SOD）活力，以光镜检测腹主动脉组织学变化并以免疫组化方法检测大鼠腹主动脉增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达。结果HHcy模型组大鼠血浆Hey水平、丙二醛浓度和SOD活力均明显高于正常对照组（P〈0．05和P〈0．01）。以螺旋藻低、中、高剂量和叶酸干预后，血浆Hcy和丙二醛浓度均较HHcy模型组显著下降（P〈0．05，P〈0．01），SOD活力较正常对照组有升高趋势。组织学检测发现，HHcy模型组大鼠腹主动脉受损，PCNA阳性细胞数量与正常对照组相比明显增加（P〈0．05），而螺旋藻各剂量组腹主动脉损伤轻于HHcy模型组，PCNA阳性细胞数量亦较HHcy模型组减少（P〈0．05）。结论螺旋藻能有效降低HHcy大鼠血浆Hey浓度，降低HHcy所引起的氧化应激反应，对HHcy所致的动脉损伤具有保护作用。

1型多聚ADP核糖聚合酶抑制剂对高同型半胱氨酸血症大鼠内皮功能的保护作用

目的:探讨1型多聚ADP核糖聚合酶(PARP1)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠内皮功能的保护作用。方法:SD大鼠30只随机分为3组:模型组、3-AB组和正常对照组,每组10只,分别给予普通饲料加1.7%蛋氨酸、普通饲料加1.7%蛋氨酸同时每天腹腔注射3-AB20mg·kg-1和普通饲料,饲养45d。观察主动脉组织形态结构的改变;测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)、内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)的水平;检测大鼠胸主动脉环对乙酰胆碱(Ach)与硝普钠(SNP)的反应;检测大鼠胸主动脉PARP1蛋白的表达。结果:大鼠喂以高蛋氨酸饲料45d可诱导Hhcy。与模型组相比3-AB组大鼠NO水平明显升高而ET-1水平明显降低(P<0.01)。病理形态学观察模型组主动脉内膜病变明显,3-AB组病变程度减轻。与正常对照组比较,模型组胸主动脉对Ach引起的最大的内皮依赖性舒张反应(EDR)明显减弱(0.26±0.03vs0.89±0.11,P<0.01);而3-AB组EDR反应较模型组显著改善(0.57±0.12vs0.26±0.03,P<0.01)。模型组较正常对照组大鼠主动脉PARP表达明显升高(P<0.05),3-AB组PARP表达较模型组明显降低(P<0.05)。结论:PARP抑制剂3-AB有效地改善高同型半胱氨酸血症大鼠血管内皮功能,并在一定程度上改善血管早期病理形态学的改变。

高同型半胱氨酸血症大鼠血清MMP-9及TIMP-1的表达

高同型半胱氨酸血症（HHcy）是动脉粥样硬化（As）的独立危险因子，目前HHcy致As的机制尚不明确。细胞外基质（ECM）是血管壁的重要成分，其沉积和降解贯穿于As和血管壁重塑的整个过程。基质金属蛋白酶（MMPs）是一组能降解ECM的蛋白酶，MMPs的组织型抑制剂（TIMPs）是MMPs的天然抑制物，其中TIMP1足MMP-9的特异性抑制剂。该研究利用蛋氨酸负荷建立大鼠HHcy模型，通过测定血清同型半胱氨酸（Hcy）、MMP-9及T1MP-1水平探讨HHcy致As的机制。

高同型半胱氨酸血症大鼠与勃起功能障碍的相关性研究

目的:分析高同型半胱氨酸血症与勃起功能障碍的相关性,勃起功能障碍的发病机制,以及叶酸、维生素B12在高同型半胱氨酸所致勃起功能障碍方面的治疗效果。方法:选用2月龄纯系雄性Wistar大鼠30只,随机分出10只为正常对照组(A),其余各组给予3%蛋氨酸喂养4周。经过检测血浆同型半胱氨酸和APO实验确认造模成功后,随机分成两组为:高同型半胱氨酸组(B模型组),叶酸、维生素B12治疗组(C)。两周后,进行APO实验,取血进行指标测定。结果:对照组、模型组、叶酸和维生素B12治疗组大鼠的血浆Hcy浓度、平均勃起次数进行相关性分析,有统计学意义(P<0.05),为负性相关。结论:叶酸和维生素B12在治疗大鼠高同型半胱氨酸血症所致勃起功能障碍中有作用,能够增加勃起次数,并降低高同型半胱氨酸血症勃起功能障碍大鼠血浆中同型半胱氨酸的浓度。

番茄红素对高同型半胱氨酸血症大鼠血管内皮功能的影响和机制研究

目的研究番茄红素(Lyc)预防高同型半胱氨酸血症(HHcy)致大鼠动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法50只SD雄性大鼠分为正常对照组(NC),HHcy对照组n(HC),HHcy+低(HL1)、中(HL2)、高剂量Lyc组(HL3)。NC组给予AOAC配方饲料,其余各组则给予在AOAC配方基础上添加3%L-蛋氨酸的饲料。HL1、HL2、HL3组按体重每日分别给予Lyc10、15、20mg/kgbw,实验期12w。分析血清Hcy、NO、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素-1(ET-1),丙二醛(MDA)、·OH、H2O2,血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白介素-8(IL-8)含量。处死动物,取腹主动脉做NF-κB测定和病理学检查。结果除了NC组外,HHcy各组大鼠血清Hcy含量均随时间延长而显著提高;HC组NO含量显著低于NC组,而ET-1含量显著高于NC组,HL2和HL3组NO含量显著高于HC组,而ET-1含量则明显低于HC组,各组间NOS含量无明显差异。病理学检查显示,HC组和HL1组主动脉内膜中有泡沫细胞聚集,有脂肪颗粒沉着,HL2组、HL3组和NC组主动脉内膜完整,无泡沫细胞和脂肪颗粒。HC和HL1组血清MDA和H2O2含量显著高于NC组,HL2和HL3组则明显低于HC组,HL2和HL3组H2O2含量还显著低于HL1组。与HC组相比,HL2和HL3组血清·OH含量显著降低;HC组VCAM-1、MCP-1和IL-8含量显著高于NC组,HL1、HL2和HL3组则明显低于HC组;HC组NF-κB的表达显著高于NC组,HL1、HL2和HL3组则明显低于HC组。结论Lyc可以通过直接淬灭活性氧,抑制NF-κB的激活,减少炎性因子的表达,来改善血管内皮功能,阻止AS的发生。

卡托普利对高同型半胱氨酸血症大鼠Caspase-3、超氧化物歧化酶活性的影响

目的观察卡托普利对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠心肌再灌注无复流相关因子Caspase-3、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、Hhcy模型组、卡托普利组,每组10只,雌雄各半。于实验结束后取各组大鼠血浆检测同型半胱氨酸(Hcy)、Caspase-3、SOD、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)水平。结果与正常对照组比较,Hhcy模型组大鼠Caspase-3、LDH、CK含量明显升高、SOD活性明显降低(P<0.01)。卡托普利组大鼠血浆Hcy水平与Hhcy模型组比较无明显变化(P>0.05),但可使血浆Caspase-3、LDH、CK含量降低、SOD活性升高(P<0.01)。结论 Hhcy可使大鼠心肌缺血再灌注损伤加重,卡托普利不能降低血浆Hcy水平,但可增强对大鼠缺血再灌注损伤的抗氧化保护作用,同时可拮抗缺氧诱导的心肌细胞凋亡,从而有效地防治无复流的发生。

槲皮素对高同型半胱氨酸血症大鼠甲基代谢相关酶活性的影响

目的研究槲皮素对高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠甲基代谢相关酶活性的影响。方法 48只Wistar大鼠,按照血清Hcy水平将动物分成4组,分别为对照组(AIN-93饲料)、1%蛋氨酸组(1%Met)、0.5%槲皮素组(0.5%Q)、1%蛋氨酸+0.5%槲皮素组(1%Met+0.5%Q),每组12只,雌雄各半,单笼饲养。用相应饲料喂养6周后,乙醚麻醉,球后静脉丛采血,离心取血清,处死后取肝脏。检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、S-腺苷蛋氨酸(SAM)、S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)、血清和肝脏槲皮素及其甲基化产物含量以及肝脏儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)、蛋氨酸合成酶(MS)、5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)、二氢叶酸还原酶(DHFR)活性。采用RT-PCR法检测肝脏COMT mRNA的表达情况。结果 1%Met组血清Hcy水平显著升高;0.5%Q组血清SAM水平显著升高,肝脏COMT活性和mRNA表达显著降低;1%Met+0.5%Q组血清Hcy水平与对照组无统计学差异,MS、MTHFR和SHMT活性显著增强。结论槲皮素可增强HHcy大鼠肝脏MTHFR和SHMT的活性,这可能是槲皮素降低Hcy的重要靶点。

全自动生化仪检测高同型半胱氨酸血症大鼠血浆同型半胱氨酸及叶酸浓度

目的:研究全自动生化仪检测高同型半胱氨酸(Hcy)血症大鼠血浆Hcy及叶酸浓度,为临床诊断高Hcy血症提供有效依据。方法:选用健康断乳Wistar大鼠24只,进行1周的适应性喂养后依据随机数表法将其分为研究组与对照组,每组12只。研究组大鼠食用AIN-93饲料,含1.7%L-蛋氨酸;对照组大鼠食用AIN-93G配方饲料。采用贝克曼AU-680型全自动生化仪对两组大鼠的血浆Hcy及叶酸浓度进行测定,统计分析两组大鼠的血浆Hcy及叶酸浓度。结果:研究组大鼠的血浆Hcy浓度显著高于对照组,差异有统计学意义(t=4.303,P<0.05),但两组大鼠的血浆叶酸浓度之间差异不显著,无统计学意义(t=1.886,P>0.05)。结论:全自动生化仪检测大鼠血浆Hcy浓度提升,叶酸浓度提升不显著,临床可依据血浆Hcy浓度对高Hcy血症进行诊断。