高车前素对肝癌细胞增殖的抑制作用及作用机制研究

目的研究高车前素对肝癌细胞增殖的抑制作用,检测高车前素对Janus蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录活化蛋白(JAK/STAT3)信号通路的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度高车前素(1,5,10,25,50,100,200μmol/L)对Bel-7402肝癌细胞株增殖的影响。高车前素(5,25,100μmol/L)预处理Bel-7402肝癌细胞48 h,采用Transwell小室检测各组细胞的体外侵袭能力,蛋白印迹法检测p-STAT3、Twist1和Bcl-2蛋白表达差异。结果高车前素能浓度依赖性抑制Bel-7402肝癌细胞株增殖。高车前素(25,100μmol/L)预处理能显著减弱Bel-7402肝癌细胞的体外侵袭力,抑制p-STAT3、Twist1和Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论高车前素可能通过JAK/STAT3通路,抑制p-STAT3、Twist1蛋白活性表达,从而抑制抗凋亡的Bcl-2蛋白表达,来发挥有效抑制肝癌细胞增殖的作用。

高车前素药理作用研究进展

高车前素是一种黄酮类化合物,主要存在于许多传统中药中,具有抗炎、抗氧化、抗突变、抗惊厥、抗骨质疏松、抗肿瘤和神经保护等多种药理活性。近年来,通过现代药理学研究方法和技术,国内外研究人员发现高车前素具有多种生物活性和药理作用。文章就高车前素的药理活性研究进展进行综述,以期能为今后高车前素的开发和利用提供参考。

HPLC法同时测定大鼠血浆中高车前苷和高车前素的浓度

目的建立HPLC法同时测定大鼠血浆中高车前苷、高车前素浓度的方法,初步探索高车前苷口服吸收规律。方法以大豆苷元为内标,采用液-液2次萃取处理大鼠血浆样品。采用AgilentCT-C18（250mm×4.6mm,5μm）和汉邦C18预柱（10mm×4.6mm,5μm）;流动相：乙腈∶0.1%磷酸水溶液（25∶75）;检测波长：335nm;流速：1.0mL·min^-1;柱温：30℃。以150mg·kg^-1剂量灌胃给药高车前苷,测定不同时间点大鼠体内高车前苷、高车前素的血药浓度。结果内源性杂质对样品测定无干扰。高车前苷在0.0433-2.163nmol·mL^-1,高车前素在0.333-16.65nmol·mL^-1范围内线性关系良好。血浆中高车前苷和高车前素的绝对回收率分别为82.41%-84.27%、91.00%-93.41%,方法回收率分别为97.58%-104.46%和95.41%-97.60%,日内精密度（RSD）均小于5.18%,日间精密度（RSD）均小于7.84%。样品冻融稳定性良好。灌胃给药高车前苷后,药物主要以高车前素的形式被吸收,高车前素的曲线下面积（AUC）为高车前苷的5.4倍。结论该法快速、灵敏、准确,可用于同时测定大鼠血浆中高车前苷、高车前素的含量。口服给药高车前苷,主要以高车前素的形式被吸收。

高效液相色谱法同时测定荔枝草提取物中迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素含量

目的建立同时测定荔枝草提取物中迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为Phenomenex C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸水(A)-甲醇(B),梯度洗脱(0~8 min时15%B^38%B,8~17 min时38%B^56%B,17~28 min时56%B^82%B,28~35 min时82%B^95%B),检测波长为335 nm,流速为1 mL/min,柱温为35℃。结果迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素质量浓度分别在2.812 5~112.500 0,6.745~269.800,3.615~144.600,4.88~195.20 mg/L范围内与峰面积线性关系良好。荔枝草提取物中迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素含量分别为6.186,18.253,9.665,11.162 mg/g。结论该方法准确,可靠,重复性好,可用于荔枝草提取物的质量评价与控制。

高车前素通过调控Orai1介导的Ca^(2+)内流对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响

目的探讨高车前素(His)对IL^(-1)β诱导的软骨细胞凋亡的影响,并初步阐明其作用机制。方法分离大鼠膝骨关节软骨细胞,采用10 ng·mL^(-1)IL^(-1)β处理软骨细胞建立骨关节炎细胞模型,并采用不同浓度(5、10、20μmol·L^(-1))His处理24 h。采用CCK-8检测细胞增殖活性;ELISA法检测细胞培养液中炎症因子IL-6和TNF-α水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平及细胞内Ca^(2+)浓度;Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3、钙释放激活钙通道调节分子1(Orai1)及内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78表达水平。将Orai1过表达质粒(pcDNA-Orai1)转染至软骨细胞中,采用10 ng·mL^(-1)IL^(-1)β联合20μmol·L^(-1)His处理24 h后,流式细胞术检测细胞凋亡水平;Fluo-4/AM荧光探针标记法检测细胞内Ca^(2+)浓度。结果10 ng·mL^(-1)IL^(-1)β可降低大鼠软骨细胞增殖活性,诱导软骨细胞凋亡,提高细胞培养液中IL-6和TNF-α水平以及细胞内Ca^(2+)浓度,上调细胞中Bax、cleaved-Caspase-3、Orai1、CHOP和GRP78等蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平。His可提高IL^(-1)β处理的软骨细胞增殖活性,抑制IL^(-1)β诱导的软骨细胞凋亡,并降低细胞培养液中IL-6和TNF-α水平以及细胞内Ca^(2+)浓度,下调细胞中Bax、cleaved-Caspase-3、Orai1、CHOP和GRP78等蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平。Orai1过表达可逆转His对IL^(-1)β诱导的软骨细胞凋亡及胞内Ca^(2+)浓度的影响。结论His可抑制IL^(-1)β诱导的软骨细胞凋亡,其作用机制可能与下调Orai1介导Ca^(2+)内流引起的内质网应激凋亡途径有关。

高车前素通过上调IL-37影响白血病K562细胞增殖和凋亡的实验研究

目的:探讨高车前素对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法:体外培养K562细胞,分别用高车前素0、5、25、100μmol/L作用24 h,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测Bax、Bcl-2和白细胞介素(IL)-37蛋白表达。利用Ficoll-Hypaque密度梯度法提取17例慢性髓系白血病患者和21例健康体检者骨髓单个核细胞,蛋白质印迹法检测IL-37蛋白表达。构建过表达或敲减IL-37的K562细胞,再用高车前素0、100μmol/L作用24 h,上述相同方法观察细胞增殖、凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达。结果:K562细胞经高车前素干预后,细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax和IL-37蛋白表达均显著升高(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。白血病患者骨髓单个核细胞中IL-37蛋白表达量为0.24±0.03,显著低于健康体检者的0.91±0.05(P<0.05)。过表达IL-37能显著增加K562细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达(P<0.05),而降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。敲减IL-37能逆转高车前素对K562细胞增殖和凋亡的影响。结论:高车前素抑制白血病K562细胞增殖,并诱导细胞凋亡,这可能与其上调细胞中IL-37蛋白表达有关。

高车前素抗肿瘤机制的研究进展

高车前素是一种天然黄酮类化合物,生物活性广泛,抗肿瘤活性显著。大量体内外研究表明,高车前素可通过促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖、转移和侵袭及肿瘤血管生成等作用对多种恶性肿瘤发挥抗肿瘤功效。本文对高车前素的抗肿瘤作用机制进行综述,为高车前素药物的开发和应用提供参考。

基于JAK1/STAT3信号通路研究高车前素对肝纤维化小鼠的影响

目的基于Janus激酶1(Janus kinase 1,JAK1)和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)信号通路研究高车前素对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)小鼠的影响。方法小鼠连续6周背部sc CCl_(4)溶液制备HF模型,将HF小鼠随机分为模型组、秋水仙碱(2 mg/kg)组和高车前素高、低剂量(30、10 mg/kg)组,各给药组连续4周ip相应药物,末次给药后24 h制备血清,计算肝脏指数;采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性及总胆红素(total bilirubin,TBIL)水平;测定血清和肝组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)水平;测定肝组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;检测血清中透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(type Ⅲ procollagen,PⅢNP)、Ⅳ型胶原(type Ⅳ collagen,Col-Ⅳ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-6水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理改变;采用q RT-PCR法检测肝组织中尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator,uPA)和纤溶酶原激活物抑制因子-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)m RNA表达;采用Western blotting检测肝组织中JAK1/STAT3信号通路中相关蛋白表达。结果与模型组比较,高车前素组小鼠体质量显著增加(P<0.05、0.01),肝脏指数显著降低(P<0.05、0.01);血清中ALT、AST活性和TBIL水平显著降低(P<0.05、0.01);血清和肝组织中Hyp水平显著降低(P<0.05、0.01);肝组织中MDA水平显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.05、0.01);血清中LN、HA、PⅢNP、Col-Ⅳ、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著降低(P<0.05、0.01);光镜下可见肝组织细胞水肿、空泡样改变、炎细胞浸润明显减轻;肝组织中uPA m RNA表达水平显著升高(P<0.01),PAI-1 m RNA表达水平显著降低(P<0.01);肝组织中p-JAK1和p-STAT3蛋白表达水平显著降低(P<0.001)。结论高车前素可减轻HF小鼠的肝损伤和炎症程度,其抗HF的作用机制可能与激活uPA纤溶酶系统和干预JAK1/STAT3信号转导通路有关。

RP-HPLC法测定不同产地荔枝草药材中高车前苷和高车前素的含量

目的:建立测定不同产地荔枝草药材中高车前苷和高车前素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Discovery C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(27:73,V/V,pH2.4),流速为1.0ml/min,检测波长为335nm。结果:高车前苷和高车前素的质量浓度分别在20.44～204.40和5.04～50.40μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r分别为0.9997、0.9991);平均加样回收率分别为98.8%和98.9%,RSD分别为2.62%和2.20%(n均为9)。以山东所产荔枝草质量为佳。结论:本方法简单、准确、精密度高、重复性好,可用于荔枝草药材的质量控制。

高车前素对大肠癌细胞生长和转移的影响

高车前素是一种分离自菊科植物毛莲蒿的黄酮类化合物,具有多种生物活性。原癌基因PIM1可调节癌细胞存活、分化、增殖、凋亡和肿瘤发生。为了揭示高车前素对大肠癌细胞生长和转移的影响,及其对PIM1表达的影响,本研究应用不同浓度的高车前素处理人大肠癌细胞系SW620,并通过转染PIM1 siRNA来敲低大肠癌细胞中PIM1的表达,通过转染高表达PIM1的质粒载体再上调PIM1的表达。研究发现敲低PIM1可显著抑制大肠癌细胞的增殖和侵袭,并促进细胞凋亡;高车前素处理以浓度依赖性方式抑制大肠癌细胞系SW620的增殖和侵袭,并增加细胞凋亡。此外,高车前素处理以浓度依赖性方式抑制PIM1的表达,而上调PIM1的表达可显著抑制高车前素对大肠癌细胞系SW620的增殖、凋亡和侵袭能力的影响;高车前素以浓度依赖性方式抑制JAK2/STAT3的活化,并上调癌细胞内ROS水平;应用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理可恢复JAK2/STAT3信号传导的激活及PIM1的表达。本研究证实原癌基因PIM1在大肠癌中起着致癌基因的作用,而高车前素通过ROS/JAK2/STAT3信号通路来调节PIM1的表达,进而发挥其抗肿瘤作用。

荔枝草中乙酸乙酯层化学成分分析

目的:对荔枝草的乙酸乙酯层进行化学成分研究。方法:采用硅胶柱色谱、中压快速色谱和Sephadex-LH凝胶色谱等方法进行分离纯化,运用波谱手段、理化性质和文献对照进行各单体化合物的结构鉴定。结果:从荔枝草的乙酸乙酯层分离出2个单体化合物,分别鉴定为泽兰黄酮和高车前素。结论:采用中压色谱能从荔枝草乙酸乙酯萃取层中快速大量提取泽兰黄酮和高车前素,该方法省时、简便、高效,值得推广应用。

荔枝草抗炎质量标志物的研究

目的阐明荔枝草抗炎质量标志物,并对其含量进行测定,为荔枝草药材质量控制提供参考。方法采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)表征荔枝草的主要成分,根据二级质谱裂解碎片信息,并结合文献数据,进行分析鉴定。进一步通过SwissADME平台,从鉴定获得的化学成分中筛选出口服生物利用度(Oralbioavailability,OB)高且符合类药五原则的活性成分;运用SwissTargetPrediction数据库查找和预测荔枝草的成分靶点;通过在线人类孟德尔遗传数据库(Online MendelianInheritanceinMan,OMIM)、GeneCards数据库等筛选疾病靶点。采用String11.5数据库和Cytoscape3.7.2软件构建PPI网络,并筛选核心靶点。利用DAVID6.8进行基因本体(Gene ontology,GO)注释和KEGG通路富集分析,对富集得到的通路进行实验验证,以阐明其作用机制。对关键通路采用反向溯源分析潜在的药效物质基础进行实验验证,并建立高效液相含量测定方法。结果从荔枝草中共鉴定出36个主要成分,包括黄酮类、萜类化合物等;进一步筛选出活性成分与疾病交集靶点190个;通过网络拓扑筛选获得核心靶点18个;富集分析发现荔枝草抗炎作用主要涉及的通路为NF-κB信号通路、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路。对NF-κB信号通路进行反向溯源得到高车前苷、高车前素、木犀草素和异鼠李素4个相关成分,分子对接发现其与PTGS2的活性位点的结合能分别为-9.5、-9.7、-9.4和-9.4 kcal·mol^(-1),均具有良好的对接活性。根据质量标志物的可测性,确定高车前苷和高车前素可作为荔枝草的抗炎质量标志物。Western blot实验结果表明高车前苷和高车前素能显著降低COX-2和NF-κB p-p65的表达(P<0.05,P<0.01)。结论荔枝草抗炎质量标志物为高车前苷和高车前素,可通过NF-κB通路发挥抗炎作用。

新疆雪莲化学成分的研究(Ⅰ)

从新疆雪莲中首次得到五种结晶,经鉴定晶Ⅰ为槲皮素,晶Ⅱ为4′,5,7,-三羟基-3′,6-二甲氧基黄酮,晶Ⅲ为高车前素,晶Ⅳ结构待定,晶Ⅴ为芦丁。

荔枝草活性成分的研究

唇形科鼠尾草属植物荔枝草(Salvia plebeia R.Br.)的全草粗提物,对单纯疱疹病毒有体外抑制作用。从中分到八个单体化合物,鉴定了其中六个单体为高车前素(hispidulin,I);泽兰黄酮(nepetin,III);4-羟基苯基乳酸(4-hydroxyphenyllactic acid,IV);咖啡酸(caffeic acid,V);高车前甙(homoplanta-ginin,VII);假荆芥属甙(nepitrin,VIII)。其中咖啡酸对单纯疱疹病毒具有体外抑制作用。

基于HPLC特征图谱、UPLC-Q-TOF/MS定性及多成分定量的黄芩酒炙前后化学成分变化研究

目的比较黄芩酒炙前后化学成分变化,为建立全面的黄芩饮片质量评价方法提供参考。方法HPLC法建立黄芩片、酒黄芩的特征图谱,并生成对照特征图谱,标定共有峰并进行相似度评价。采用UPLC-Q-TOF/MS定性分析黄芩酒炙前后化学成分,利用UPLC-TQMS对2种饮片中11种黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A、千层纸苷、野黄芩苷、芹菜素、高车前素、木犀草苷、白杨素)进行定量分析,并以含量为变量进行多元统计分析。结果建立了黄芩片、酒黄芩的特征图谱,标定9个共有峰,2种饮片相似度均在0.947以上。在黄芩饮片中,共发现50种成分,通过多级质谱数据分析,保留时间匹配,并结合对照品及数据库检索,鉴定了其中44种成分。UPLC-TQMS定量结果显示酒炙后黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷等黄酮苷类成分含量略有下降,黄芩素、汉黄芩素等黄酮苷元类成分含量稍有增加。经多元统计学分析,2种饮片有明显的分离趋势,载荷图结果表明黄芩苷、汉黄芩苷、千层纸苷的含量差异可能是引起黄芩酒炙前后化学成分变化的主要因素。结论黄芩酒炙后没有新增或消失成分,但成分含量有所变化。所建立黄芩饮片的定性、定量方法重现性好,分析快速、准确,可用于黄芩饮片酒炙前后的质量评价。

基于指纹图谱和一测多评联合化学计量学及熵权TOPSIS法对顶羽菊药材质量评价

目的建立HPLC指纹图谱与一测多评(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS)结合的方法同时检测顶羽菊Rhaponticum repens药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸C、芹菜素、高车前素的含量,并建立不同产地顶羽菊药材的综合质量评价模型,为顶羽菊药材的整体质量评价提供参考。方法采用HPLC法建立不同产地16批顶羽菊药材的指纹图谱,利用化学计量学模式聚类分析(cluster analysis,CA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA)对采集的指纹图谱信息进行分析,同时运用加权逼近理想解排序法(technique for order preference by similarity to ideal solution,TOPSIS)、加权秩和比法(rank sum ratio,RSR)及两者模糊联合的方法构建评价模型;以绿原酸为内标,确定新绿原酸、隐绿原酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸C、芹菜素、高车前素的相对校正因子并计算其含量,建立QAMS法。结果建立的顶羽菊药材指纹图谱共标定23个共有峰,指认出其中7个峰。化学计量学模式研究显示不同产地顶羽菊存在明显差异。通过OPLS-DA法筛选出10个主要的差异性成分。构建的熵权TOPSIS法、RSR法以及两者模糊联合的综合质量评价模型,对不同产地顶羽菊药材的质量评价排序结果较为一致。以绿原酸为内标建立的QAMS和外标法含量测定结果无显著性差异(P>0.05)。结论所建立的HPLC指纹图谱结合QAMS法简便可靠,重复性好;建立的综合质量评价模型的分析结果全面客观,可用于顶羽菊药材整体质量的综合评价。

半枝莲化学成分研究

目的研究半枝莲Scutellaria barbata地上部分的化学成分。方法通过AB-8大孔吸附树脂、硅胶、聚酰胺和Sephadex LH-20柱色谱等多种手段进行分离,采用核磁共振等波谱技术对化合物结构进行鉴定。结果从半枝莲95%乙醇提取物中分离鉴定了14个黄酮类化合物,分别为高车前素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(1)、芹菜素(2)、野黄芩苷(3)、野黄芩素(4)、木犀草素(5)、野黄芩苷甲酯(6)、异高山黄芩素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸-6″-甲酯(7)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷-6″-甲酯(8)、4′-羟基汉黄芩素(9)、5,4′-二羟基-6,7,3′,5′-四甲氧基黄酮(10)、异高山黄芩素(11)、6-羟基木犀草素(12)、5-羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(13)、三裂鼠尾草素(14)。结论化合物7为首次从唇形科植物中分离得到,化合物1和13为首次从黄芩属植物中分离得到,化合物6和12为首次从半枝莲中分离得到。

UPLC-MS/MS法同时测定木蝴蝶中10个有效成分

目的建立UPLC-MS/MS方法同时测定木蝴蝶中木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、黄芩素、白杨素、高车前素、野黄芩素、金丝桃苷、芹菜素、槲皮素10种主要成分。方法采用负离子多反应监测(MRM)模式,ESI离子源,Kinetex C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.6μm)进行分离,流动相为乙腈-甲醇-0.5%甲酸水,梯度洗脱,分析时间为7 min。结果所测10种主要成分在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9966;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为94.0%~104.5%,RSD≤3.21%。结论首次建立可同时测定木蝴蝶中10种主要成分的UPLC-MS/MS方法,该法操作简便,灵敏度高,专属性好,分析速度快,可用于中药材木蝴蝶的质量控制。

基于网络药理学和分子对接探讨痛风舒片治疗痛风的作用机制

目的采用网络药理学和分子对接探讨痛风舒片治疗痛风的潜在作用机制。方法检索中药系统药理学分析平台挖掘痛风舒片关键成分和对应靶点;检索PharmGKB、GeneCards、OMIM、TTD、DrugBank数据库,筛选痛风疾病靶点,使用R软件Venn包,获取痛风舒片与痛风的交集靶点基因。使用Cytoscape 3.8.0软件构建“中药复方成分–靶点”网络图并筛选药物核心成分;使用String平台获取交集靶点基因的蛋白互作(PPI)网络,并使用Cytoscape 3.8.0软件筛选核心靶点基因。应用R软件对交集靶点基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,应用AutoDock Vina软件进行分子对接。结果共挖掘出痛风舒片关键成分38种,对应靶点164个,痛风疾病靶点1554个,二者交集靶点基因66个。筛选出核心成分6种(槲皮素、β-谷甾醇、芦荟大黄素、高车前素、泽兰黄醇素、海波拉亭),核心靶点基因6种[V-rel网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物A(RELA)、白细胞介素-1β(IL-1β)、蛋白激酶B1(AKT1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、NF-κB抑制因子α(NFKBIA)、肿瘤蛋白p53(TP53)]。GO功能共富集1963个条目,其中生物过程1830个(涉及对脂多糖的反应等),细胞组分27个(涉及膜筏等),分子功能106个(涉及磷酸酶结合等);KEGG通路共富集154个条目,如白细胞介素(IL)-17、肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路。所有核心成分与核心靶点蛋白的结合能均<−5 kcal/mol,大部分结合能<−7 kcal/mol。结论痛风舒片中核心成分槲皮素、β-谷甾醇、芦荟大黄素等可通过作用于RELA、IL-1β、AKT1等核心靶点基因,对IL-17、TNF等信号通路进行调控,从而发挥治疗痛风的作用。

艾叶中主要化学成分的鉴定及其含量测定研究

目的鉴定艾叶Artemisiae Argyi Folium中主要化学成分的结构并建立其含量测定方法。方法利用UPLC-UVQ/TOF进行艾叶分析条件的优化,在对21批艾叶分析的基础上,确定其中紫外和质谱上主要的色谱峰,利用精确相对分子质量和碎片离子鉴定其结构后,利用对照品比对确定结构;进一步采用Waters Acquity I-ClassTM液相色谱系统,Waters Acquity HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),乙腈-0.2%磷酸水为流动相,体积流量0.5 mL/min,梯度洗脱,柱温40℃,PDA检测器,检测波长为326 nm,建立艾叶中主要化学成分的含量测定方法。结果推测鉴定了艾叶中32个主要化合物的结构,利用对照品确定了其中15个化合物的结构,并建立了其中14个化合物(绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、咖啡酸、夏佛塔苷、芹菜素、高车前素、棕矢车菊素、异泽兰黄素、5,7,3′-三羟基-6,4′,5′-三甲氧基黄酮、蔓荆子黄素)的UPLC-UV含量测定方法。14个化合物的分离度良好,稳定性和重复性良好,且线性范围宽(0.5~800.0μg/mL)、线性较好(R2>0.999),平均回收率在94.88%~103.58%。结论建立的艾叶中14个主要化合物的含量测定方法可以全面评价艾叶的质量。