血清高迁移率族蛋白B1、可溶性晚期糖基化终产物受体水平对急性失代偿性心力衰竭预后有评估价值

目的:探讨血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平对急性失代偿性心力衰竭(ADHF)患者预后的评估价值。方法:选取190例ADHF患者为研究组,另选取191例健康者为对照组,根据1年随访期是否死亡,将ADHF患者分为预后不良组(58例)和预后良好组(132例);采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清HMGB1、sRAGE水平;采用Pearson法分析血清HMGB1、sRAGE水平与心功能指标及实验室指标的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析HMGB1、sRAGE及血浆N端脑钠肽前体(NT-proBNP)对ADHF患者预后的评估价值;采用多因素Logistic回归分析影响ADHF患者预后的因素。结果:与对照组比较,研究组患者血清HMGB1、sRAGE水平更高(P均<0.05);预后良好组与不良组血清HMGB1、sRAGE水平、纽约心脏病协会(NYHA)分级、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、NT-proBNP、血清肌钙蛋白I(cTnI)、住院时间比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。经Pearson法分析,ADHF患者血清HMGB1、sRAGE分别与LVEDD、LVESD、NT-proBNP、cTnl呈正相关,与LVEF呈负相关(P均<0.05),血清HMGB1与sRAGE呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,HMGB1、sRAGE、NT-proBNP对ADHF患者预后不良评估价值均较高,AUC分别为0.869、0.852、0.844,最佳截断值分别为32.91 g/L、296.46 ng/L、3809.77 ng/L时,灵敏度分别为79.3%、82.8%、82.8%,特异性分别为83.3%、74.2%、79.5%。多因素logistic回归分析表明,NYHA分级、LVEF、NT-proBNP、HMGB1及sRAGE是ADHF患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论:血清HMGB1、sRAGE表达与ADHF的发生及预后有关,可作为ADHF患者预后的评估指标。

目标温度管理抑制猪心肺复苏后高迁移率族蛋白B1、晚期糖基化终产物受体表达

目的探讨目标温度管理(TTM)对猪心肺复苏后高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响。方法将24头猪按照随机数字表法分为假手术组(n=4)、常温组(n=10)和TTM组(n=10)。通过程控刺激法制作心脏骤停模型,室颤8 min后开始心肺复苏。TTM组动物在自主循环恢复(ROSC)后给予血管内降温,将核心体温以最快速度降至33℃,维持12 h,然后被动复温(0.5℃/h)至37℃。复苏后24 h采用神经功能缺损评分(NDS)评价神经功能,动物实施安乐死后,留取脑皮质,采用脑皮质含水量评价脑水肿。采用酶联免疫吸附方法检测基线、ROSC 0.5、6、12、24 h血清HMGB1、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的含量;采用RT-PCR法检测ROSC后24 h脑皮质HMGB1、RAGE及MCP-1 mRNA表达水平。结果TTM组ROSC后24 h时的NDS评分显著优于常温组[150.0(70.0,177.5)分vs.237.5(190.0,371.3)分],脑皮质水含量显著低于常温组[(81.2±1.1)%vs.(83.3±1.3)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组自同时间点比较,常温组ROSC后6、12、24 h的血清HMGB1、MCP-1及IL-6蛋白含量显著升高,ROSC后0.5、6、12、24 h的TNF-α蛋白含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与常温组各自同时间点相比较,TTM组ROSC后6、12、24 h的血清HMGB1、MCP-1及IL-6蛋白含量明显降低,ROSC后0.5、6、12、24 h血清TNF-α蛋白含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,常温组ROSC后24 h的脑皮质HMGB1、RAGE及MCP-1 mRNA均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与常温组相比较,TTM组ROSC后24 h的脑皮质HMGB1、RAGE及MCP-1 mRNA均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TTM可减轻复苏后脑水肿,改善神经功能,其保护机制可能部分与早期抑制HMGB1、RAGE表达有关。

轮状病毒性肠炎患儿血清晚期糖基化终末产物、高迁移率族蛋白B1、肠型脂肪酸结合蛋白水平变化及意义

目的探讨轮状病毒性肠炎(rotavirus entcritis,RE)患儿血清晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)、高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein,HMGB1)、肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty aid binding protein,I-FABP)水平变化及意义。方法回顾性选取2019年1月至2022年12月河南科技大学第一附属医院收治的118例RE患儿为观察组,同时选取同期68例体检健康儿童为对照组。检测两组血清AGEs、HMGB1、I-FABP水平,分析RE患儿血清AGEs、HMGB1、I-FABP水平与脱水程度的相关性,评估三项指标对儿童RE的诊断价值。结果观察组血清AGEs、HMGB1以及I-FABP水平显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05);随着脱水程度的加重,RE患儿血清AGEs、HMGB1、I-FABP水平呈逐渐升高趋势,差异有显著性(P<0.05);血清AGEs、HMGB1、I-FABP水平与RE患儿脱水程度呈正相关(P<0.05);血清AGEs、HMGB1及I-FABP单独检测的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积为0.798、0.813、0.792,三项指标联合诊断的ROC曲线下面积为0.893,联合诊断敏感度也显著高于单独诊断(P<0.05)。结论RE患儿血清AGEs、HMGB1及I-FABP水平明显升高,其与病情严重程度存在相关性,三者联合检测可为临床上RE的诊断提供依据。

不同剂量纳布啡对肺癌根治术患者高迁移率族蛋白B1及晚期糖基化终末产物受体表达水平的影响

目的探讨不同剂量纳布啡对肺癌根治术患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及晚期糖基化终末产物受体(RAGE)表达水平的影响。方法采用随机、对照、双盲、前瞻性的研究,选取于2017年1月至2018年12月因肺癌在广西柳州市工人医院进行胸腔镜肺癌根治术治疗的患者160例作为研究对象。随机分为A、B、C、D、E5组,每组均32例,其中A组为舒芬太尼2. 0μg/kg,B组为盐酸纳布啡注射液剂量为0. 5 mg/kg+舒芬太尼1. 5μg/kg,C组为盐酸纳布啡注射液剂量为1. 0 mg/kg+舒芬太尼1. 0μg/kg,D组盐酸纳布啡注射液剂量为1. 5 mg/kg+舒芬太尼0. 5μg/kg,E组为盐酸纳布啡注射液剂量为2. 0 mg/kg+舒芬太尼0. 5μg/kg,对比分析各组T0、T1、T2时间点的HMGB1及RAGE含量及术后3 d不良反应情况。结果 A、B、C、D、E五组T1、T2期外周血HMGB1及RAGE含量均高于T0期,差异有统计学意义(P <0. 05)。A、B、C、D、E五组T2期外周血HMGB1及RAGE含量均低于T1期,差异有统计学意义(P <0. 05)。T0期,A、B、C、D、E五组外周HMGB1及RAGE含量对比,差异无统计学意义(P> 0. 05)。T1期及T2期,D、E两组外周血HMGB1及RAGE含量低于A、B、C组,差异有统计学意义(P <0. 05)。其他组间HMGB1及RAGE含量,差异无统计学意义(P> 0. 05),B、C、D、E组的不良反应发生率显著低于A组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论应用1. 5 mg/kg纳布啡联合0. 5μg/kg舒芬太尼对非小细胞肺癌根治术后镇痛,可有效降低HMGB1及RAGE的表达量,降低炎症反应程度,同时不良反应较少,为临床工作和术后镇痛提供经验及思路。

血清高迁移率族蛋白B1和可溶性晚期糖基化终产物受体与心力衰竭严重程度相关性研究

目的探讨心力衰竭(HF)时血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)的变化及二者与心脏功能和N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)的关联。方法选取2014年8月至2015年1月期间就诊于哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科73例左室射血分数(LVEF)小于45%的HF患者为实验组,体检人群中选择年龄、性别匹配的22例作为对照组。根据纽约心功能分级(NYHA)将HF患者分组:Ⅱ级患者为A组(18例),Ⅲ级患者为B组(22例),Ⅳ级患者为C组(33例)。测定各组血清HMGB1及sRAGE浓度。HF患者行心脏彩超检查并测定NT-proBNP浓度。结果与对照组相比,HF患者各组的血清HMGB1和sRAGE浓度显著升高(P<0.05)。且随着心功能恶化血清HMGB1和sRAGE浓度均显著升高(P<0.05)。相关性分析结果显示,血清HMGB1和sRAGE与LVEF均呈负相关(HMGB1 r=-0.4783,P<0.05;sRAGE r=-0.4071,P<0.05),与NT-proBNP浓度均呈正相关(HMGB1 r=0.4850,P<0.05;sRAGE r=0.4947,P<0.05)。结论HF患者血清HMGB1和sRAGE浓度显著升高,二者与心功能的严重程度及NT-proBNP水平呈正相关。

高级糖基化终末产物受体下调对高迁移率族蛋白B1表达及移植瘤体积的影响

目的探究高级糖基化终末产物受体(RAGE)下调对胶质瘤细胞系中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达及裸鼠移植瘤体积变化的影响。方法用免疫组织化学法,蛋白印迹观察胶质瘤LN229细胞系(分为对照组和实验组)中HMGB1的表达,对照组用生理盐水处理,实验组用RAGE受体阻断剂FPS-ZM1处理,用同样方法检测上述处理后细胞系中HMGB1蛋白的表达水平,其表达的差异采用两独立样本t检验;选取30只Nu/Nu裸鼠并随机分为2组,分别于裸鼠左侧背部相同部位注射上述2种细胞系,于注射后连续6周,共计6次测量裸鼠背部移植瘤体积大小,体积变化的差异采用重复测量资料的方差分析。结果 HMGB1主要表达于细胞核和细胞质中,与对照组细胞系相比,实验组细胞系中HMGB1蛋白表达水平下降(P<0.05),接种对照组的裸鼠移植瘤体积增长速度明显快于实验组(P<0.05),差异存在统计学意义。结论 HMGB1蛋白可能通过RAGE受体参与胶质瘤的生长与侵袭,RAGE受体阻滞剂FPS-ZM1可以明显地降低HMGB1蛋白的表达,抑制移植瘤体积的增长,有望用于胶质瘤细胞凋亡的研究。

血清高迁移率组蛋白B1、可溶性晚期糖基化终末产物受体、脱氧核糖核酸酶与TACE早期疗效相关性研究

目的探讨原发性肝癌患者血清高迁移率组蛋白B1(HMGB1)、人可溶性晚期糖基化终末产物(sRAGE)、脱氧核糖核酸酶(DNase)对TACE近期疗效的评估价值。方法对收住的42例患者(共计56次TACE治疗)分别在TACE术前、术后24 h采集外周静脉血标本,用ELISA法检测外周血清中HMGB1、sRAGE、DNase的表达水平。根据mRECIST标准进行TACE术后疗效评估,将完全缓解+部分缓解+疾病稳定的病例归为获益组,疾病进展者归为无效组。比较TACE术前、术后,获益组及无效组之间的血清HMGB1、sRAGE、Dnase的表达水平,并进行统计学分析。结果 TACE术前与术后24 h血清HMGB1、sRAGE、DNase表达水平比较差异有显著统计学意义(P=0.003,P=000,P=0.001),且术后较术前呈升高趋势。56例次TACE中,24例次为稳定(SD),2例次部分缓解(PR),30例次为肿瘤进展(PD),将SD和PR患者归为获益组(n=26),PD患者为无效组(n=30)。在TACE术前,获益组与无效组血清HMGB1、DNase表达水平比较差异无统计意义(P=0.395,P=0.091);在TACE术后24 h,血清HMGB1、DNase在获益组和无效组对比差异也无统计学意义(P=0.354,P=0.182)。而sRAGE在获益组与无效组之间的表达水平在术前差异无统计学意义(P=0.143),而在术后24 h,两组间sRAGE表达水平差异有统计学意义(P=0.030)。结论 1TACE术后血清HMGB1、sRAGE、DNase表达水平较术前升高;2中晚期肝癌患者外周血清中sRAGE与TACE疗效相关,可以作为TACE治疗肝癌疗效早期评估的指标。

心力衰竭时高迁移率族蛋白(HMG)B1和可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)的变化

心力衰竭(HF)是多种心脏疾病的终末阶段,也是一种慢性炎症性疾病。高迁移率族蛋白(HMG)B1是机体非特异性炎症反应的敏感标志物,胞外的HMGB1通过与其高亲和力受体晚期糖基化终产物受体(RAGE)结合后参与心血管疾病的发生发展,而可溶性RAGE(sRAGE)可竞争性抑制全长RAGE的生物学效应,竞争结合HMGB1,从而减轻甚至抑制炎症反应,延缓HF的发生和发展,现就近年来研究发现的HMGB1、sRAGE在心血管疾病中所起的作用及其在治疗方面的进展做一综述。

晚期糖基化终末产物受体及配体高迁移率族蛋白-1在矽肺肺纤维化中的作用

本实验通过测量小鼠矽肺模型肺灌洗液中高迁移率族蛋白（HMGB）-1、TNF-α和肺组织中晚期糖基化终末产物受体（RAGE）的表达改变,进而探讨RAGE及HMGB-1在矽肺肺纤维化中的作用,现报告如下。

穿心莲内酯调节HMGB1/RAGE信号通路对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经功能损伤的影响

目的探讨穿心莲内酯调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)信号通路对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠坐骨神经功能损伤的影响。方法将84只大鼠随机分为对照组(生理盐水)、DPN组(生理盐水)、穿心莲内酯低剂量组(0.833 mg/kg)、穿心莲内酯高剂量组(3.332 mg/kg)、硫辛酸组(阳性对照,0.1 g/kg)、重组大鼠HMGB1蛋白(rHMGB1,8μg/kg)组、穿心莲内酯高剂量+rHMGB1组,每组12只。除对照组外,其余各组大鼠均采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素的方式构建DPN模型。造模成功24 h后,进行给药处理,每天1次,持续8周。给药结束后,检测大鼠空腹血糖、机械痛阈值、热痛阈值、坐骨神经传导速度的变化;观察大鼠坐骨神经病理变化;检测大鼠坐骨神经中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;检测大鼠坐骨神经中HMGB1、RAGE蛋白表达水平和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白磷酸化水平。结果与对照组比较,DPN组大鼠坐骨神经病理损伤严重,空腹血糖、热痛阈值、MDA含量及HMGB1、RAGE蛋白表达水平和NF-κB p65蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.05),机械痛阈值、感觉神经传导速度、运动神经传导速度、SOD活性显著降低/减慢(P<0.05);与DPN组比较,穿心莲内酯低、高剂量组和硫辛酸组大鼠上述指标均显著改善(P<0.05),rHMGB1组对应指标变化趋势与上述3个给药组相反(P<0.05);并且,rHMGB1可减弱高剂量穿心莲内酯对DPN大鼠血糖的降低作用及坐骨神经氧化应激损伤的改善作用(P<0.05)。结论穿心莲内酯可能通过抑制HMGB1/RAGE信号通路来降低血糖、抑制氧化应激,进而改善DPN大鼠坐骨神经损伤。

高迁移率族蛋白B1的研究进展

高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein，HMGB1，NP_002119）是35年前发现的存在于真核细胞核内的非组蛋白染色体结合蛋白，因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中迁移速度快而得名。HMGB1是一个含有215个氨基酸残基的单链多肽，高度保守，N端富含带正电荷的赖氨酸，

晚期糖基化终末产物诱导人卵巢颗粒细胞株COV434凋亡并上调促炎因子HMGB1自分泌

目的:探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)是否诱导人卵巢颗粒细胞株COV434凋亡,并探究其可能的机制。方法:采用不同浓度AGEs牛血清白蛋白与人卵巢颗粒细胞株COV434共同孵育,流式细胞术观察细胞凋亡率,Western blot观察caspase-3和cleaved caspase-3的蛋白水平,ELISA检测细胞培养液上清中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)的含量。结果:与对照组比较,100 mg/L AGEs组和200 mg/L AGEs组早、晚期凋亡率显著增加,各组caspase-3蛋白水平的差异无统计学显著性,但与对照组比较,100 mg/L AGEs组和200 mg/L AGEs组cleaved caspase-3的蛋白水平显著增加(P<0.05)。此外,与对照组比较,100 mg/L AGEs组和200 mg/L AGEs组细胞培养液上清中HMGB1促炎介质的水平显著上升(P<0.05)。结论:晚期糖基化终末产物诱导人卵巢颗粒细胞株COV434凋亡可能与促炎反应有关。

高迁移率族蛋白B1对内皮细胞通透性的影响

目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞通透性的影响,以及HMGB1受体(RAGE)和p38 MAPK通路在此病理过程中的作用。方法 HMGB1(200 ng/m L)与人脐静脉内皮细胞株分别在体外共同培养0、3、6、12和24 h,以0 h为对照检测HMGB1诱导单层内皮细胞通透性Pd改变的时间效应;用电阻法分别在0、3、6、12和24 h测量正常空白对照组(单纯培养基)和HMGB1组(200 ng/m L)的单层内皮细胞电阻值TER,比较两组间在相同时间点电阻值的差别;p38 MAPK抑制剂SB203580(25μmol/L)预先作用1 h,继以HMGB1(200 ng/m L)作用12h,比较不同组间细胞通透性的变化;以HMGB1(200 ng/m L)分别作用0、10、20、30、60 min后观察细胞内p38蛋白表达及磷酸化p38表达的时间效应;转染siRNA下调RAGE表达,或以原代培养野生型和RAGE(-/-)小鼠肺微血管内皮细胞培并继以HMGB1刺激,比较各组细胞内磷酸化p38蛋白表达的变化。通透性检测采用FITC荧光标记右旋糖酐漏出法及跨内皮电阻(TER)测定法,蛋白表达用免疫印迹法检测。结果 HMGB1以时间依赖的方式引起单层内皮细胞通透性Pd的升高,12 h与0 h相比,差异有统计学意义(P<0.05);且可使跨细胞电阻TER降低,在12 h与空白对照组相应时间点相比,差异有统计学意义(P<0.05);也可引发p38蛋白磷酸化水平的升高,与0 min相比,差异有统计学意义(P<0.05);SB203580预处理再以HMGB1刺激后细胞通透性明显降低,与HMGB1单纯刺激组相比,差异有统计学意义(P<0.05);RAGE siRNA转染后以HMGB1刺激细胞p38磷酸化水平显著下调,与HMGB1组相比,差异有统计学意义(P<0.05);HMGB1刺激野生型小鼠PMVECs可诱导p38磷酸化,而RAGE(-/-)小鼠PMVECs则无此效应(P<0.05)。结论 HMGB1通过结合RAGE来激活p38诱导血管内皮细胞通透性的增高。

高迁移率族蛋白B1对人脐血CD34^+细胞迁移的影响

本研究探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)对人脐血CD34+细胞迁移的影响及其机制。用流式细胞仪检测脐血CD34+细胞表面HMGB1受体:晚期糖基化终产物受体(receptor for advancedglycation end products,RAGE)、Toll样受体2(Toll-like receptors2,TLR2)及TLR4的表达。用磁珠分选法富集的新鲜人脐血CD34+细胞,经不同浓度的HMGB1(10、50、100、1000ng/ml)刺激后,应用transwell小室趋化装置观察HMGB1对人脐血CD34+细胞的迁移活性,显微镜下计数,计算趋化指数,即试验孔与对照孔细胞数的比值。以未加HMGB1的培养细胞为对照组。结果表明:人脐血CD34+细胞经免疫磁珠分选富集的纯度达98%以上。HMGB1在一定的浓度范围内随浓度递增对人脐血CD34+细胞的迁移作用逐渐增强,当HMGB1浓度为100ng/ml时迁移活性最强,与对照组比较差异显著(p<0.01)。抗-RAGE抗体可部分抑制HMGB1对脐血CD34+细胞的迁移作用。结论:一定浓度的HMGB1加强人脐血CD34+细胞迁移功能,此作用有可能通过RAGE介导。

栀子苷调节HMGB1-RAGE信号通路对子痫前期大鼠血管内皮细胞损伤的影响

目的 探究栀子苷调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)-晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路对子痫前期大鼠胎盘损伤的保护作用。方法 将妊娠大鼠分为对照组、模型组、栀子苷低剂量[25 mg/(kg·d)]组、栀子苷高剂量[100 mg/(kg·d)]组、丙酮酸乙酯[EP,HMGB1抑制剂,40 mg/(kg·d)]组,皮下注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME建立子痫前期大鼠模型。在第14、17、19天测定各组大鼠收缩压和24 h尿蛋白水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化,采用试剂盒测定胎盘组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,采用HE染色观察胎盘组织形态变化,采用Western blot检测胎盘组织HMGB1、RAGE、核转录因子-κB(NF-κB)、p-NF-κB、淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠在第14、17、19天收缩压和24 h尿蛋白水平,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平、胎盘组织MDA水平、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB、Bax蛋白水平显著升高,胎盘组织中SOD、GSH、Bcl-2蛋白水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,栀子苷低、高剂量组大鼠在第17、19天收缩压和24 h尿蛋白水平、血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平、胎盘组织中MDA水平、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB、Bax蛋白水平显著降低,胎盘组织SOD、GSH水平、Bcl-2蛋白水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 栀子苷可缓解子痫前期大鼠胎盘组织损伤,可能是通过抑制HMGB1-RAGE信号通路实现的。

鸡血藤提取物改善缺血性脑卒中大鼠免疫抑制的作用及对HMGB1/RAGE信号通路介导AQP-4和GAP-43表达的影响

目的 探究鸡血藤提取物通过高迁移率族蛋白(HMG)B1/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路介导水通道蛋白(AQP)-4、生长相关蛋白(GAP)-43表达改善缺血性脑卒中大鼠免疫抑制的机制。方法 通过栓线法构建缺血性脑卒中大鼠模型,45只模型大鼠分为模型组、鸡血藤1.5和鸡血藤3.0组(n=15)。另取15只假手术大鼠作为对照组。鸡血藤提取物灌胃剂量为1.5和3.0 g/kg。2 w后比较各组改良大鼠神经功能评分(mNSS)、脑组织损伤、神经元凋亡、HMGB1/RAGE信号通路、AQP-4、GAP-43水平及T细胞亚群水平。结果 模型组mNSS、凋亡率、HMGB1、RAGE、AQP-4、GAP-43 mRNA及蛋白水平明显优于对照组,而CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)比值均显著低于对照组(P<0.05)。鸡血藤1.5组的mNSS评分、凋亡率、HMGB1、RAGE、AQP-4、GAP-43 mRNA和蛋白水平显著低于模型组,CD3^(+)、CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)比值均显著高于模型组(P<0.05)。鸡血藤3.0组mNSS评分、凋亡率、HMGB1、RAGE、AQP-4、GAP-43 mRNA和蛋白水平显著低于鸡血藤1.5组,CD3^(+)、CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)比值均显著高于鸡血藤1.5组(P<0.05)。结论 鸡血藤提取物具有抑制HMGB1/RAGE通路、保护缺血性脑卒中大鼠神经元、解除免疫抑制的作用。

高迁移率族蛋白1——新的“晚期”促炎性细胞因子

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一种高度保守的核蛋白,普遍存在于哺乳动物细胞。最近发现可由激活的单核/巨噬细胞等主动分泌或由坏死细胞被动释放到细胞外,在感染及炎症时血浆HMGB1水平显著升高,起到重要的促炎效应,包括激活单核/巨噬细胞产生多种细胞因子,诱导内皮黏附分子的表达及损伤上皮细胞屏障功能等;可引起发热和厌食,参与多种疾病尤其是脓毒症、关节炎、结肠炎等发病过程。在“早期”炎症介质释放后,给予抗HMGB1抗体,仍可对致命性内毒素血症、脓毒症及急性肺损伤动物发挥保护作用,为临床提供了更加宽广的治疗时机与新的干预途径。

血根碱调节HMGB1/RAGE信号通路对慢性心力衰竭大鼠心肌炎症及细胞凋亡的影响

目的探讨血根碱调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌炎症及细胞凋亡的影响。方法通过结扎冠状动脉的左前降支建立CHF大鼠模型,随机分为CHF组、血根碱低剂量组(血根碱-L组,1.00 mg/kg血根碱)、血根碱中剂量组(血根碱-M组,2.50 mg/kg血根碱)、血根碱高剂量组(血根碱-H组,6.25 mg/kg血根碱)以及血根碱-H+rHMGB1组(6.25 mg/kg血根碱+8μg/kg rHMGB1),并以仅开胸的正常大鼠作为假手术组,每组10只大鼠。干预结束后,进行超声心动图指标[缩短分数(FS)、左室射血分数(LVEF)、室间隔厚度(IVS)以及舒张末期左心室内径(LVIDD)]检测;称取心脏质量,计算心脏指数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;分别采用苏木精-伊红(HE)染色、缺口末端标记(TUNEL)染色观察心脏组织病理学变化及细胞凋亡变化;采用蛋白质免疫印迹技术检测心脏组织中HMGB1、RAGE蛋白表达。结果与假手术组相比,CHF组LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平明显增加(P<0.05),FS、IVS、LVEF及IL-10水平明显降低(P<0.05);与CHF组相比,血根碱不同剂量组LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平明显降低(P<0.05),FS、IVS、LVEF及IL-10水平明显增加(P<0.05);在血根碱不同剂量组中,LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平均为血根碱-L组>血根碱-M组>血根碱-H组,FS、IVS、LVEF及IL-10水平均为血根碱-L组<血根碱-M组<血根碱-H组,任意两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与血根碱-H组相比,血根碱-H+rHMGB1组LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平均明显增加(P<0.05),FS、IVS、LVEF及IL-10水平均明显降低(P<0.05)。结论血根碱可改善CHF大鼠心功能,抑制其心肌炎症及细胞凋亡,以高剂量血根碱效果最佳,可能与调节HMGB1/RAGE信号通路有关。

瑞马唑仑调节HMGB1-RAGE信号通路对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞焦亡的影响

目的 探讨瑞马唑仑调节高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein,HMGB1)-晚期糖基化终产物受体(receptor of advanced glycation endproducts,RAGE)信号通路对心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MI/RI)大鼠心肌细胞焦亡的影响。方法 按随机数字表法将50只SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、瑞马唑仑低剂量组(5 mg/kg瑞马唑仑)、瑞马唑仑高剂量组(10 mg/kg瑞马唑仑)、瑞马唑仑高剂量+rHMGB1组(10 mg/kg瑞马唑仑及8μg/kg人重组HMGB1),每组10只。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠心肌组织病理学改变;透射电镜下观察心肌组织超微结构;免疫组织化学法检测心肌组织焦亡底物消皮素D-N端片段(N-terminal fragment of gasdermin D,GSDMD-N)表达;四氮唑红染色法检测心肌梗死面积;酶联免疫吸附法检测血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、白细胞介素1β(interleukin 1 beta,IL-1β)、白细胞介素18(interleukin 18,IL-18)、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)水平;硫代巴比妥酸法检测心肌组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;羟胺法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD);比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;蛋白免疫印迹法检测心肌组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase-1)、GSDMD-N、HMGB1、RAGE、核转录因子(nuclear factorκB,NF-κB)、磷酸化核转录因子κB(phosphorylated-nuclear factorκB,p-NF-κB)蛋白水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织有明显损伤,心肌梗死面积百分比,血清LDH、IL-1β、IL-18水平,心肌组织中MDA含量,NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达显著升高(P均<0.05),血清IL-10水平、心肌组织中SOD和GSH-Px活性显著降低(P均<0.05);与模型组比较,瑞马唑仑低剂量组和瑞马唑仑高剂量组大鼠心肌组织损伤显著减轻,心肌梗死面积百分比,血清LDH、IL-1β、IL-18水平,心肌组织中MDA含量,NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达显著降低(P均<0.05),血清IL-10水平,心肌组织中SOD和GSH-Px活性显著升高(P均<0.05);与瑞马唑仑高剂量组比较,瑞马唑仑高剂量+rHMGB1组大鼠心肌组织损伤明显加重,心肌梗死面积百分比,血清LDH、IL-1β、IL-18水平,心肌组织中MDA含量,NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达显著升高(P均<0.05),血清IL-10水平、心肌组织中SOD和GSH-Px活性显著降低(P均<0.05)。结论 瑞马唑仑可能通过抑制HMGB1-RAGE信号通路,降低炎症反应和氧化应激,减轻MI/RI大鼠心肌细胞焦亡,进而改善心肌损伤。

蓝萼甲素调节HMGB1-RAGE信号通路对阿尔茨海默病大鼠神经炎症的影响

目的探究蓝萼甲素(GLA)对阿尔茨海默病(AD)大鼠神经炎症及高迁移率族蛋白B1-晚期糖基化终末产物受体(HMGB1-RAGE)信号通路的影响。方法通过在脑室注射Aβ1-42溶液建立AD大鼠模型,并将大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组、GLA低剂量组、GLA高剂量组、GLA高+HMGB1组,每组15只。Morris水迷宫实验检测大鼠学习和记忆能力;HE染色检测海马组织病理形态学变化;ELISA检测海马组织中TNF-α、IL-6、IL-1β的含量;免疫荧光检测小胶质细胞标记蛋白Iba-1和星形胶质细胞标记蛋白GFAP的表达;Western blotting检测海马组织中HMGB1-RAGE通路相关蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量、Iba-1和GFAP蛋白阳性表达面积及HMGB1、RAGE、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达均升高(P<0.05),停留目标象限时间、穿越平台次数减少(P<0.05);与模型组相比,GLA低、高剂量组大鼠逃避潜伏期、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量、Iba-1和GFAP蛋白阳性表达面积及HMGB1、RAGE、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达均降低(P<0.05),停留目标象限时间、穿越平台次数增多(P<0.05),且GLA高剂量组和多奈哌齐组差异无统计学意义(P˃0.05);进一步使用HMGB1重组蛋白进行回补实验,发现GLA对神经炎症的抑制作用被逆转,且RAGE水平升高(P<0.05)。结论GLA可能通过抑制HMGB1-RAGE信号通路减轻AD大鼠的神经炎症。