氧氟沙星饮水治疗鸡败血霉形体大肠杆菌感染的药代动力学分析

选用３２０只３３日龄石岐杂健康鸡，分成健康对照、感染对照、氧氟沙星中剂量和高剂量４组。感染鸡接种霉形体和大肠杆菌后，中剂量和高剂量组分别以１００ｍｇ／Ｌ和２００ｍｇ／Ｌ氧氟沙星饮水给药，在试验开始后２～５ｄ，每次给药后２ｈ和８ｈ剖杀，采用ＨＰＬＣ测定血药浓度。结果，血药浓度在中剂量组分别为（１．２６±０．３２），（０．７５±０．２３）ｍｇ／Ｌ，高剂量组分别为（１．６８±０．４２），（１．３５±０．０４）ｍｇ／Ｌ，中、高剂量组在给药后２～５ｄ平均血药浓度分别为（１．０１±０．２７），（１．５２±０．２１）ｍｇ／Ｌ。停药后血药消除缓慢，两组ｔ１２分别为３．１１，４．３３ｈ，ＡＵＣ为４．７６，６．４０ｍｇ·Ｌ－１·ｈ－１，Ｔｃｐ（ｔｈｅｒ）为２３．３４，２３．７２ｈ。本研究表明，氧氟沙星饮水给药对鸡霉形体和大肠杆菌合并感染具有显著的临床效果，从经济观点看，饮水给药以５０～１００ｍｇ／Ｌ，每天１次，连续４ｄ为好。

替米考星(Tilmicosin)对鸡败血霉形体感染的药效学

以试管二倍稀释法测定替米考星 (Tilmicosin)及对照药物强力霉素、红霉素、泰乐菌素对鸡败血霉形体的最小抑菌浓度分别为 0 .0 0 6 2 5、0 .0 2 5、0 .0 2 5、0 .1m g/ L ,进行了替米考星对鸡败血霉形体的体内药效学研究。结果 ,替米考星以 5 0、75、10 0 mg/ L 饮水给药 5 d,对实验性感染鸡败血霉形体有显著疗效 ,用药组增重均显著高于对照组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,并能明显减少抗体阳性反应率 ,极显著地减少气囊损伤记分 (P<0 .0 1)

鸡败血霉形体SC克隆致弱株免疫原性试验

在透明塑料隔离器中进行了鸡败血霉形体人工发病试验，结果３０日龄ＳＰＦ来航鸡在ＮＤＶ、ＩＢＶ弱毒诱导和７０／１００００００（质量分数）氨环境刺激的联合作用下，致病率可达１００％（７／７）。经鸡败血霉形体Ｓ６克隆致弱株ＳＣＦ１５６代培养物点眼、滴鼻免疫后１０，２０，３０ｄ的ＳＰＦ来航鸡再以ＭＧ强毒攻毒，结果，保护率分别达８０．０％（４／５），７５．０％（３／４）和８７．５％（７／８）。近期免疫效果证明，鸡败血霉形体Ｓ６克隆致弱株ＳＣ有良好的免疫原性。

应用PAPD方法对鸡败血霉形体DNA多态性的研究

用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法，通过筛选的５个随机引物（ＯＰＨ－０２，ＯＰＨ－０５，ＯＰＨ－０７，ＯＰＨ－１３，ＯＰＧ－１６），对１４株鸡败血霉形体（ＭＧ）国际标准株和国内分离株进行了ＤＮＡ多态性研究。结果表明，５个引物共产生２１种条带，其中有３个条带分别为２个菌株所特有，扩增产物片段的长度在１５０～４５００ｂｐ之间，所有菌株均有１条共同条带，以ＯＰＨ－０５扩增产物的多态性最丰富。根据样品ＤＮＡ所获得的菌株间相似性指数表明，Ｄ９６０３与Ｄ９６０７相似指数最高，Ｓ６，Ｋ３９１３和Ｄ９６０４三者相互间相似性指数最低。提示ＲＡＰＤ方法可用于霉形体遗传标记的分析。

SPF鸡人工感染鸡败血霉形体后呼吸系统的病理变化

10日龄SPF鸡气囊接种鸡败血霉形体(MG)R株,3-5天后出现的典型的MG感染症状,呼吸系统发生一系列典型的病理组织学变化。感染鸡和对照鸡的气管经固定、脱水、临界点干燥、镀金后置于扫描电镜下观察,感染鸡气管粘膜明显水肿,部分纤毛脱落或全部脱落。电镜下可见感染鸡的气管粘膜水肿增厚近2倍,粘膜下层单核细胞积聚,其间有数量不等的淋巴细胞聚集,粘液细胞显著减少或消失;气囊粘膜水肿增厚;肺组织中有淋巴细胞增生形成的结节,对照鸡呼吸系统的组织切片无变化。

复方中草药对鸡败血霉形体和大肠杆菌混合感染的治疗效果

以试管2倍稀释法测得中草药对鸡败血霉形体和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为57.6和33.5 g/L。中草药含量在4.8～421.1 g/L时,对感染具有一定的抗性,对感染鸡的治愈率分别是38.1%、66.7%;感染鸡死亡率分别为28.6%、4.8%;对感染鸡的总有效率分别是71.4%、95.2%,临床治愈率为74%,明显好于恩诺沙星对照组。

鸡败血霉形体弱毒F株对鸡的致病性和免疫效力测定

以鸡败血霉形体弱毒Ｆ５和Ｆ３６株的新鲜培养物分别点眼和鼻内接种１日龄鸡雏，比较其对鸡的致病性和免疫原性。结果，在鼻内感染时，Ｆ５可使３０只鸡中的４只出现轻度气囊损伤，而Ｆ３６只使３０只中的１只出现轻度气囊损伤；点眼接种时，Ｆ５和Ｆ３６均不使感染鸡出现气囊损伤；Ｆ５与Ｆ３６接种鸡体内的抗体产生情况无明显区别，在强毒Ｒ株攻击后，２个代次菌株的接种鸡均能产生良好的免疫力，且无明显差异，但在维护体质量增加方面，Ｆ３６株略优于Ｆ５株。

鸡败血霉形体免疫效力的研究及抗体水平监测

本项研究以内蒙古地区分离株 H3 株、BR1 株作为研究对象 ,以 S6株作为参考对象 ,以 3株鸡败血霉形体分别制成油乳剂灭活苗 ,经物理性状及安全性检验合格后 ,分别对 18d龄雏鸡进行免疫接种。免疫 42 d后 ,免疫效力分别为 75 % ( H3 株 )、70 .0 % ( BR1 株 )和 83 .3 % ( S6株 )。免疫鸡血清中 HI抗体滴度规律性变化是 ,从免疫接种的第 14 d起 ,血清中可检出 HI抗体 ,各免疫组 HI抗体滴度均在 5 3 d龄时达到最高值 。

鸡败血霉形体人工接种雏鸡免疫器官超微病理形态学研究

用鸡败血霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ）ＫＰＦ２１株对半月龄无特定病原体雏鸡进行人工接种，分别于接种后５、１２、１９、２６、３３天进行禽败血霉形体血清平板凝集试验，尸体剖检及免疫器官病理组织学和心微病理形态学观察。超微病理形态学观察主要表现为法氏囊、胸脾、脾脏、及哈德氏腺中淋巴细胞核形不规则，线粒体肿胀，空泡变性，内质网扩张，浆细胞中粗面内质网扩张，数目增多，部分脱颗粒，由于这些变化的发生，使细胞的正常功能遭到破坏，导致免疫器官功能发生变化。为禽败血霉形体病免疫学研究提供一定的病理学基础。

雏鸡实验性鸡败血霉形体亚临床感染呼吸器官的组织病理学动态观察

对 18日龄 SPF鸡人工接种鸡败血霉形体 (MG) KPF2 1 株 ,分别在接种后 5、12、19、2 6、33d进行血清平板凝集试验、尸体剖检、病理组织学观察和呼吸器官的电镜观察。结果如下 :接种 MG后 ,雏鸡呈 MG血清学反应阳性 ,但无明显的临床症状 ;病理组织学观察 ,呼吸器官主要反应是淋巴细胞浸润 ,有颗粒白细胞增多。电镜观察证实了病理组织学观察的结果 ,同时还发现 ,接种后 19d MG贴附于呼吸道的粘膜上皮 ,引起细胞膜的不平整 ,继而破坏生物膜结构 ,使气管及支气管的纤毛脱落 ;气管粘膜上皮、肺毛细管壁细胞及气囊壁细胞的微绒毛脱落 ;细胞内质网和线粒体肿胀呈球状 ,线粒体嵴逐步消失 ,最终导致细胞死亡、崩解。呼吸器官的功能部分减退甚至消失。

用PCR和探针杂交法检测鸡败血霉形体

根据鸡败血霉形体 f MG-2核酸片断序列 ,设计合成了 1对 2 5bp寡核苷酸引物 ,对鸡败血霉形体基因组 DNA进行扩增 ,均获得预期的 73 2 bp扩增产物 ,检测灵敏度为 1 pg;参考菌株 DNA无扩增。回收纯化琼脂糖电泳凝胶中的扩增产物 ,DIG随机引物法合成核酸探针 ,Dot-blot杂交试验 ,鸡败血霉形体呈阳性 ,检测灵敏度为 1 0 0 pg;其他为阴性。对自然发病鸡群检测进一步表明 ,建立的 PCR和探针杂交法具有高度的灵敏性和特异性 。

父母代种鸡场防治鸡败血霉形体病方法

鸡慢性呼吸道病（CRD）是由鸡败血霉形体（MG）引起的常见传染病。临床上主要表现为咳嗽、呼吸哕音、眼炎，剖检病变包括鼻窦、气管、支气管、气囊有炎症并有黄色分泌物。病鸡生长缓慢，大批死亡，并易继发或并发其他疾病，特别是大肠杆菌病，给养鸡业带来巨大的经济损失。陆享岳1994-1995年走访浙江省16个县（市）约200多个养鸡户，调查发现，仔鸡阶段发生CRD的鸡群多达88％，有的地区高达100％；2-3日龄的雏鸡也可发病，但大多发生在2周龄的雏鸡。

鸡败血霉形体抗原基因的筛选和DNA电泳鉴定

应用鸡败血霉形体抗血清筛选鸡败血霉形体Ｓ６株基因文库，得到１７９个阳性克隆，不足重组噬菌体的１％。反复筛选后，获得５个强阳性克隆。抽提ＤＮＡ酶切鉴定，发现２个克隆的外源片段在５ｋｂ左右，另２个在２．５ｋｂ左右，一个为３．６ｋｂ，为特异抗原的制备和基因工程疫苗的研究打下良好基础。

鸡败血霉形体致病性研究

本项研究以内蒙古地区分离株 MG- H3和 MG- BR1 作为研究对象 ,以 MG- S6 作为参考对象 ,分别对2 0 d龄雏鸡进行人工感染 ,8d后以 IB- H1 2 0 作激发感染。结果试验鸡全部发病 ,呈现血清学反应阳性并伴有较明显的临床症状 ,病理剖检以呼吸道病变为主 ,心、肝、肺等器官也发生不同程度的损伤 ,攻毒 2 0 d后剖检全部鸡 ,气囊平均病变计分 H3株为 2 .9,BR1 株为 2 .3,S6 株为 2 .

鸡败血霉形体F-36株的稳定性测定

以试管培养基中连续继代 ３６ 次的鸡败血霉形体 Ｆ３６ 定为疫苗制造的起始代次，将其在人工培养基中再传 ４、６、８、１０、１４ 代（简称 Ｆ４０、 Ｆ４２、 Ｆ４４、 Ｆ４６、 Ｆ５０），分别制成疫苗，各接种 ８ 日龄和 ３０ 日龄雏鸡，作免疫原性和病原性测定，观察 Ｆ株的稳定性。病原性测定结果表明，各代次疫苗以 ２～３ 倍的免疫剂量接种感染，不引起鸡的呼吸道症状和气囊炎，对鸡不致病；免疫原性测定结果表明，用各代次疫苗接种鸡都能产生良好的免疫力，能有效地抵抗强毒 Ｒ 株的攻击，保护气囊不受损伤。

丽株呼泰对鸡败血霉形体和大肠杆菌混合感染的疗效试验

为了科学、客观地评价广东省信宜市丽株动物药业有限公司研制的中西药复方制剂-丽株呼泰散对败血霉形体和细菌引起鸡呼吸系统疾病的临床疗效,使治疗试验具有代表性和临床意义,采用人工诱发鸡败血霉形体与大肠杆菌混合感染为病理模型,进行丽株呼泰散内服给药的实验性治疗.现将试验情况介绍如下.

复方泰妙菌素粉对鸡败血霉形体病的药效研究

将200只试验鸡分为5组,通过饮水给药泰妙菌素粉,观察其对实验性鸡败血霉形体病的治疗效果。结果表明:复方泰妙菌素粉200mg/L饮水给药组死亡率、治愈率显著低于对照组(P<0.05)。

鸡败血霉形体病因分析及综合防制

近年来，随着规模化养鸡业的发展，鸡败血霉形体（MG）病日渐突出，鸡败血霉形体病可经蛋垂直传播，而且横向传播也非常迅速，给养鸡业带来极大的经济损失。笔者对河南安阳市各县（市、区）采集的30份鸡的血清进行了鸡MG平板凝集试验，阳性率高达62％。

中西医结合治疗肉鸡败血霉形体和大肠杆菌混合感染

鸡败血霉形体病是由鸡败血霉形体（MG）引起的一种接触性、慢性呼吸道传染病，以咳嗽、流鼻涕、呼吸困难为主要临床症状。单纯的MG感染并不严重，只有轻度呼吸道症状，死亡率较低；但当环境变化，营养不良，管理较差的鸡群常可继发大肠杆菌以及ND、IB等疾病，此时死亡率常可高达40。50％。近年来，鸡败血霉形体和大肠杆菌混合感染的情况发生较多，笔者在实践中采用中西医结合的方法进行治疗，取得了良好的效果，现介绍如下：

罗红霉素和TMP对鸡败血霉形体的联合药敏试验

本实验是为了探讨罗红霉素和 TMP对鸡败血霉形体的联合药敏作用 ,从而为在临床应用提供依据。首先通过体外抑菌实验测定了罗红霉素 (Roxithrom ycin)和 TMP对鸡败血霉形体 BG4 4 T株的最小抑菌浓度 (minim al inhibitory concentration,MIC) ,然后测定了两种药物联合用药时的 FIC指数 (fractional inhibitory concentration,FIC)。鸡败血霉形体颜色变化单位的测定是采用十倍稀释法 ,单药 MIC的测定采用试管二倍稀释法 ,罗红霉素和 TMP的联合抑菌试验的 FIC指数是采用棋盘法测定的。试验重复三次 ,以平均值作为试验结果。体外MIC结果测定表明罗红霉素对鸡败血霉形体的 BG4 4 T株高度敏感 ,其 MIC值为 0 .0 0 78μg/m l。而 TMP对鸡败血霉形体的 BG4 4 T株不敏感 ,其 MIC值为 32 μg/ m l;两种药物联合时的FIC指数为 1.5 ,结果为无关作用。