不同H9N2亚型鸭流感病毒NS1基因克隆和功能进化分析

[目的]为进一步研究NS1蛋白在流感病毒跨宿主传播中的作用机制奠定基础。[方法]采用常规的血清学试验和特异性RT-PCR方法,从广东不同地区的12~20日龄正常番鸭群中分离鉴定出多株H9亚型水禽禽流感病毒株,对其中4株分离于正常番鸭的禽流感病毒毒株A/duck/ZQ/303/2007（H9N2）（简称A3）、A/duck/FJ/301/2007（H9N2）（简称C1）、A/duck/NH/306/2007（H9N2）（简称D6）和A/duck/SS/402/2007（简称E2）和1株来源于病死番鸭的H9N2亚型鸭流感病毒A/duck/ZC/1/2007（H9N2）（简称L1）的NS1基因进行克隆测序,并与GenBank中收录的其他NS1序列进行比较,分析NS1基因的进化关系。[结果]4株分离于不同地区正常番鸭群的流感病毒株NS1基因与GenBank中注册的H9N2 AIVNS1基因核苷酸同源性为99%~100%,氨基酸同源性为95%~100%。而分离于病死鸭的流感病毒株与H9N2 AIVNS1基因核苷酸同源性为94%~97%,氨基酸同源性为93%~99%。遗传进化结果表明：分离于正常鸭群的4株流感病毒NS1基因独成一分支,而L1株与2003年的鸡源AY66473株亲缘关系最近。DNAstar软件分析表明：与L1、AF523514（鸭源）、AY664743（鸡源）、EF155262.1（鹌鹑）相比,A3、C1、D6、E2 4株正常鸭H9N2 AIV毒株的NS1基因核苷酸序列在21（R→Q）7、07、1（KE→EG）8、6（A→S）1、24（V→M）、225（S→N）位点处发生改变,NS1基因的双股RNA依赖性蛋白激酶（dsRNA-dependent protein kinase,PKR）结合区（1~100位氨基酸）39、70、71和86位氨基酸发生变化,导致NS1蛋白潜在的抗原决定簇及其特定区域位于蛋白表面的可能性发生明显变化。[结论]NS1蛋白PKR结合区氨基酸序列变化与病毒的致病性有一定关系。

鸭流感病毒HA基因遗传变异分析

本文根据近年来中国医学机构发表的分离自我国鸭群的流感病毒HA基因,与我国正在使用的流感疫苗等毒株的HA基因进行了遗传进化分析。结果显示,目前我国流行的鸭流感病毒与H5N1 Re-5最接近,但是也有一定程度的变异。

鸭新城疫病毒和流感病毒多重RT-PCR鉴别诊断技术的建立和应用

对同样以引起鸭产蛋下降为主要特征的鸭流感病毒(AIV)分离株和鸭新城疫病毒(NDV)YH99V分离株,通过设计特异性引物和优化体系反应条件,建立了一种早期快速鉴别诊断鸭AIV和鸭NDV的单项RT-PCR方法和多重RT-PCR方法,AIV的扩增片段大小为483bp,NDV的扩增片段为310bp,电泳快速,易于区分。敏感性试验表明,该方法比HA敏感100倍以上;对AIV、YH99V、IBV、IBDV及正常鸡胚尿囊液的混合液检测显示,多重RT-PCR法具有很强的特异性。对鸭病毒性产蛋下降征侯群送检病料的检测证明,该方法能有效鉴别AIV和/或NDV单独感染或混合感染,阳性检出率明显高于HA方法。

“禽流感”病毒解析

自2004年1月27日,我国农业部确诊了第一例"禽流感"家禽病例以来,短短十几天,"禽流感"快速波及我国十几个省市和自治区,造成所有疫区方圆3km之内活禽全部扑杀、烧毁、深埋,损失巨大.同时,对我国养禽业造成了极大的冲击,禽类产品出口和流通严重受阻.与此同时,"禽流感"在越南、泰国、老挝等东南亚国家不仅普遍暴发,而且有人类感染而死亡的严重现象,一时间使大多数人对"禽流感"极度恐慌,乃至谈禽色变.实际上,从兽医学角度来看,特别是从兽医微生物方面来分析"禽流感"病毒,并不是那么陌生和可怕.与"SARS"病毒相比,我们对"禽流感"病毒的认知和研究要更成熟.如何全面、彻底地认识"禽流感"病毒,笔者从兽医微生物学和分子生物学角度对"禽流感"病毒给以详细阐述.

一例疑似鸭低致病禽流感与沙门氏杆菌病混感的诊治

禽流感是由A型禽流感病毒引起的一种以禽类为主要侵害对象的人禽共患传染病。根据禽流感病毒的致病性和毒力的不同,将禽流感分为高致病性禽流感（H5、H7）、低致病性禽流感（H9）和无致病性禽流感三种。低致病性禽流感（H9）又叫致病性禽流感或非高致病性禽流感或温和型禽流感,它是指某些致病性低的禽流感病毒毒株感染家禽引起的低发病率、低死亡率和低临床症状的疾病。鸭低致病性禽流感（H9）一年四季均可发生，但主要多发于冬春气候变化大的季节。