鹿鞭龟甲药对滋阴补肾缓解体力疲劳作用机制

目的研究鹿鞭龟甲药对滋阴补肾缓解肾阴虚小鼠体力疲劳作用及机制。方法将70只健康雄性昆明小鼠适应性喂养1周后随机分为空白组、模型组、阳性药组、鹿龟药对低剂量组、鹿龟药对高剂量组、鹿鞭组、龟板组,共7组,每组10只,造模与给药同时进行,共计14天。第14天给药后30分钟测定各组小鼠力竭游泳时间;在第15天摘眼球取血分离血清测定血清中乳酸、尿素氮、睾酮、皮质酮、环腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环鸟苷酸(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)含量;剖取肝脏测定肝糖原含量、肝组织中磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3β)蛋白表达。结果与模型组相比,鹿龟药对低剂量组、鹿龟药对高剂量组、鹿鞭组、龟甲组体质量显著升高(P<0.01),力竭游泳时间增加(P<0.05,P<0.01),血乳酸含量降低及血尿素氮含量显著降低(P<0.01),肝糖原含量增加(P<0.05,P<0.01),睾酮含量显著上升(P<0.01),cGMP含量显著升高(P<0.01),cAMP/cGMP值显著下降(P<0.01),肝脏Akt蛋白表达明显增加(P<0.05),肝脏GSK-3β蛋白表达明显降低(P<0.05);鹿龟药对高剂量组及鹿鞭组能显著提高PI3K蛋白表达水平(P<0.05)。结论鹿龟药对可以通过调控PI3K/Akt/GSK-3β通路增加糖原合成,以起到滋阴补肾缓解体力疲劳的作用。

梅花鹿鞭与马鹿鞭PCR-RFLP鉴别研究

目的建立一种应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)鉴别梅花鹿鞭与马鹿鞭的方法。方法根据梅花鹿与马鹿的细胞色素b基因序列的差异,设计并选取DNA限制性内切酶MseI来区分梅花鹿鞭和马鹿鞭。采用改良SDS法提取样本基因组DNA,经PCR扩增后进行RFLP分析,并优化PCR-RFLP反应体系及反应条件,用优化的PCR-RFLP体系对市售鹿鞭样本进行鉴定。结果经PCR-RFLP分析,MseI可切割梅花鹿与马鹿Cyt b片段,前者被切成2个片段,后者被切成3个片段,从而将两者进行鉴别。结论本实验建立的PCR-RFLP方法可准确鉴别梅花鹿鞭与马鹿鞭。

响应面法优化鹿鞭肽酶解工艺及体外补肾健骨活性分析

目的:确定碱性蛋白酶酶解鹿鞭肽最佳工艺条件,并探究其体外补肾健骨活性。方法:以酶解温度、pH、酶解时间和酶用量为影响因素,水解度为响应指标,在单因素实验的基础上,结合Box-Behnken方法进行响应面试验设计,获得酶解鹿鞭肽的最佳工艺;探究不同浓度的鹿鞭肽对小鼠睾丸间质细胞(TM3)的存活率以及睾酮(Testosterone,T)的分泌影响和对成骨细胞(MC3T3-E1)的存活率、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活力以及骨钙素(Osteocalcin,OCN)的分泌影响。结果:最佳酶解工艺条件为温度51℃,pH8.7,时间4.1 h,酶用量1300 U/g,此时水解度为40.36%±0.22%;体外活性实验结果表明,TM3细胞不同浓度(25、50、100、200μg/mL)给药组与模型组相比较,均可显著提高细胞存活率和睾酮的分泌(P<0.05),并在50μg/mL质量浓度下,鹿鞭酶解肽对TM3细胞的T分泌促进作用最强,其分泌量为42.47 ng/mL;MC3T3-E1细胞不同浓度(25、50、100、200μg/mL)给药组与模型组相比较,细胞存活率和ALP活力、OCN分泌都有显著提高(P<0.05),并在50μg/mL质量浓度下,ALP活力及OCN分泌作用最显著,ALP活力为6.80金氏单位/g prot,OCN分泌量为15.63 ng/mL。结论:本实验通过响应面法确定了鹿鞭肽的最佳酶解工艺,验证了鹿鞭酶解肽具有较好的体外补肾健骨活性,为以后鹿鞭的综合开发利用提供一定的理论基础。

鹿鞭精的生物效应研究

动物实验研究表明,鹿鞭精能使小白鼠体重和胸腺重量显著增加,明显延长小白鼠游泳时间.表明：鹿鞭精具有促生长,抗疲劳和提高机体免役功能 等作用.

鹿鞭酒的研制及功能和安全性评价研究

采用鹿鞭、鹿茸、鹿血为主要原料,合理配伍,利用现代生物技术提取、调配而成鹿鞭酒;功能评价采用纯系昆明种小鼠为实验动物,利用未成年幼鼠、去势幼鼠、正常小鼠、阳虚模型鼠等研究鹿鞭酒小鼠性功能的促进作用;利用SD大鼠评价鹿鞭酒的急性毒性、蓄积性毒性及微核率来证明饮用的安全性。结果表明鹿鞭酒可促进小鼠性器官的发育和睾酮水平的提高,而且呈量效关系,具有雄激素样作用,可促进性机能,通过检验和推测具功能作用的主要活性成分为多肽、多糖;毒理学评价证明鹿鞭酒与普通白酒毒性相同,适量饮用安全无毒。

鹿鞭的微量DNA提取及序列鉴定

采用微量ＤＮＡ提取技术，从梅花鹿血、毛、鹿鞭、鹿茸、牛鞭、驴鞭中提取ＤＮＡ，以线粒体ＤＮＡ细胞色素ｂ通用引物Ｌ１４８４１和Ｈ１５１４９扩增约３０７ｂｐＤＮＡ片段，扩增产物纯化后采用双脱氧链终止法测定其序列。结果证明：梅花鹿毛、血和鹿鞭的ＤＮＡ序列完全一致；而所谓的“鹿茸”则与其有较大的差异。用所测序列以简约法ＰＡＵＰ３１１程序构建的分子系统树与传统分类系统相吻合。说明此方法鉴定鹿鞭是科学而准确的。

中药材鹿鞭的分子鉴定研究

目的 :建立中药材鹿鞭的分子分类学鉴定试剂盒。方法 :根据对不同产地梅花鹿、马鹿、白唇鹿、水鹿线粒体DNA进行PCR扩增和序列测定 ,并与常见伪充药材来源动物线粒体DNA同位置序列比较 ,找到该 4个鹿种的特征片段 ,经过实际检验 ,筛选出合适片段作为鹿的种属特异性PCR引物。结果 :该引物与相关试剂组成试剂盒后 ,可用于中药材鹿鞭与常见伪充药材牛鞭、驴鞭等的鉴别。结论 :用分子分类学方法鉴别中药材鹿鞭 ,具有科学、稳定、准确、简便等特点 ,值得推广。

灰关联度法评价鹿鞭药材质量研究

目的:建立鹿鞭药材质量评价方法。方法:采用灰关联度法,从不同品种和产地鹿鞭药材中测定6种主要成分的含量,以定义的相对关联度为测度,构建质量评价模型。结果:通过该模型,9份鹿鞭药材样品的质量评价结果与传统鹿鞭药材的产地及目前药材市场经营的品种相符合。结论:本方法及模型可用于鹿鞭药材质量评价。

基于毛细管电泳的鹿鞭DNA指纹鉴定方法

目的研究基于毛细管电泳的鹿鞭DNA指纹鉴定方法。方法盐析法提取梅花鹿鞭、马鹿鞭、驯鹿鞭和赤鹿鞭的线粒体DNA,对序列为GAGCGTCGAA的引物进行RAPD扩增,毛细管电泳法分析其产物,再对所得指纹图谱的相似度进行分析。结果梅花鹿鞭指纹图谱中有9个共有峰,马鹿鞭指纹图谱中有21个共有峰,与驯鹿鞭和赤鹿鞭有明显差异。而且,其相似度均小于0.7。结论该方法客观、准确、方便,可有效区分梅花鹿鞭、马鹿鞭及其伪品(驯鹿鞭、赤鹿鞭)。

鹿鞭、狗鞭、牛鞭的壮阳作用实验研究

实验结果表明 :狗鞭、牛鞭、鹿鞭药材匀浆后的混悬液对肾阳虚型动物有不同程度的壮阳作用 ,能使去势雄性大鼠附性器官 (包皮腺、精液囊、前列腺 )重量明显增加 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 ) ,而对去势雌性大鼠包皮腺、子宫可增重 ,统计学处理无显著性差异。同时 ,能明显提高大鼠的交配能力 ,雄鼠扑捉雌鼠的潜伏期明显缩短 ,2 0min内扑捉次数明显高于对照组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 ) ,提示三种鞭均有一定的壮阳作用 ,其中鹿鞭作用最好。

鹿鞭商品药材中核苷类成分分析

目的:比较不同品种与商品地的鹿鞭药材中5种核苷类成分的含量,同时探讨5种核苷类成分含量对总核苷含量的影响程度。方法:采用HPLC法分别测定9个鹿鞭商品中腺苷、黄嘌呤、次黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷的含量;应用逐步回归分析方法,得到5种核苷类成分含量对总核苷含量影响程度的最优方程。结果:不同样品的5种核苷类成分及总核苷含量均有一定差异,其中以黄嘌呤含量对总核苷含量影响最为显著。结论:黄嘌呤含量为标示鹿鞭药材中总核苷含量的最佳指标,可用于该药材中总核苷类成分含量的测定指标。

商品鹿鞭中多胺类组分含量比较

目的:比较不同品种与产地的鹿鞭药材中3种多胺类成分的含量。方法:采用HPLC法分别测定10个鹿鞭样品腐胺、精胺及精脒的含量。结果:不同样品的3种多胺类成份及总多胺含量均有一定差异。结论:多胺类成分含量可作为鹿鞭质量控制指标之一。

不同品种鹿鞭多糖含量比较及性质分析

目的:比较分析鹿鞭药材中粗多糖含量及性质。方法:采用脱脂、水提、醇沉等方法,分离纯化出两种鹿鞭药材中粗多糖后,用比色法测定不同品种及产地的鹿鞭药材中总多糖含量;并对两种鹿鞭药材中粗多糖的性质进行比较分析。结果:不同品种的鹿鞭药材中多糖含量明显不同,同种不同产地的鹿鞭中多糖含量差异较小;两种鹿鞭多糖的红外光谱特征稍有差异。结论:鹿鞭药材中多糖含量可用于该药材的质量控制。

鹿茸及鹿鞭对肾阳虚大鼠不育症的实验研究

【目的】观察鹿茸及鹿鞭对肾阳虚大鼠不育症的影响。【方法】选用清洁级SD大鼠,随机分为6组:正常组,模型组,鹿茸高、低剂量组(剂量分别为0.84、0.21 g.kg-1.d-1),鹿鞭高、低剂量组(剂量分别为3.76、0.94 g.kg-1.d-1);除正常组外,其他组大鼠均采用腺嘌呤(250 mg/kg)灌胃法复制肾阳虚不育症模型。造模成功后各组分别按设计剂量给药,连续5周。末次给药后,称量各组大鼠体质量及附睾、睾丸质量,计算性腺系数;取各组大鼠附睾检测精子总数、活率及顶体酶水平,采用放射免疫法检测各组大鼠血液中促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)水平。【结果】模型组精子总数,活率,顶体酶水平,附睾及睾丸质量、系数,T水平均显著下降,与正常组比较差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);鹿茸及鹿鞭高、低剂量组均可升高精子总数、活率、顶体酶水平、附睾系数,两药高剂量组均可升高睾丸系数及T水平,降低FSH水平,鹿茸高剂量组可升高附睾质量,与模型组比较差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】鹿茸及鹿鞭治疗不育症的作用与其能升高顶体酶水平,改善性激素水平有关。

鹿鞭补酒补肾壮阳作用的实验研究

目的 :研究鹿鞭补酒温肾壮阳的药理作用 ;方法 :采用氢化可的松和去势手术造成阳虚模型 ;结果 :鹿鞭补酒可提高阳虚证小鼠的自由活动频率 ,对低温下的游泳持续时间及体重增长有不同的延长和改善 ,并可对抗体温下降。可明显提高去势大鼠阴茎勃起潜伏期 ,同时明显增强雄性大鼠的交配能力 ;结论 :鹿鞭补酒具有补肾壮阳作用。

鹿鞭的药理研究与临床应用展望

综述了近年来传统中药鹿鞭的药理作用以及临床应用,资料表明鹿鞭具有抗衰老、抗疲劳、增强机体免疫、促进伤口愈合等药理作用,且临床疗效突出,是具有开发前景的中药材。

鹿鞭药材商品的显微鉴别研究

目的:根据鹿鞭药材商品的显微结构特征,建立鹿鞭药材显微鉴定的方法。方法:应用生物显微镜和显微测量软件,对鹿鞭药材商品中显微特征结构进行观察与测量。结果:梅花鹿鞭与马鹿鞭药材商品的横纹肌纤维间距、髓质指数、毛小皮间距存在一定差异性。结论:可使用鹿鞭药材粉末中的横纹肌纤维间距、髓质指数、毛小皮间距等指标,进行鹿鞭药材品种的鉴别,为鹿鞭药材商品的品种鉴定提供了新的、有效的指标。

鹿鞭的电泳鉴别

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对马鹿、梅花鹿、澳大利亚鹿、驼鹿、牛的鞭进行了比较鉴别。为鹿鞭的真伪鉴别提供了依据。

电化学发光免疫法测定鹿鞭中性激素含量

目的:比较不同品种与产地的鹿鞭药材中睾酮、雌二醇及孕酮的含量,为鹿鞭药材的质量控制提供依据。方法:采用电化学发光免疫法,测定不同品种与产地的9份鹿鞭药材中3种性激素成分的含量。结果:9份样品中均含3种性激素,且均以雄激素睾酮的含量最高;比较不同品种与产地的鹿鞭药材中睾酮含量,以梅花鹿鞭的含量较高,不同产地中以四川的含量最高。结论:鹿的生长环境及饲养条件对鹿鞭中的性激素,特别是睾酮的含量有一定的影响,其睾酮的含量可作为鹿鞭药材质量控制指标之一。

感官鉴别真伪鹿鞭

通过对真伪鹿鞭感官真伪鉴定的研究 ,找出真伪鹿鞭的不同特点 。