麦角甾醇酯的酶促合成及对非酒精性脂肪肝的预防作用

探究了麦角甾醇亚油酸酯(简称麦角甾醇酯)的酶促合成及对非酒精性脂肪肝的预防作用。将30只雄性昆明小鼠分为四组:空白组(n=6)、高脂组(n=8)、麦角甾醇组(n=8)和麦角甾醇亚油酸酯组(n=8),持续喂养6周。测定血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,计算LDL-C/HDL-C比值,检测肝脏和粪便脂质水平,并分析肝脏脂肪变性程度。结果显示,以Candida sp.99-125脂肪酶为催化剂可以成功合成麦角甾醇亚油酸酯。麦角甾醇酯使得肝脏总脂肪酸含量降低35.3%(P<0.05),可以有效预防高脂膳食诱导肝脏脂肪变性,并导致粪便总脂肪酸水平增加74.8%(P<0.05)。同时,麦角甾醇酯降低了血浆LDL-C水平和LDL-C/HDL-C比值分别为24.3%(P<0.05)和36.5%(P<0.05),引起血浆HDL-C水平提高52.0%(P<0.05)。以上结果表明,麦角甾醇酯能够有效预防高脂膳食诱导的非酒精性脂肪肝。该文为非酒精性脂肪肝的预防提供了一种新的干预策略。

麦角甾醇的神经元保护作用的研究进展

麦角甾醇是一种植物来源的维生素D,主要是应用于治疗心血管疾病、抗肿瘤、神经保护等。麦角甾醇主要是通过舒张心脑血管,同时降低血脂、血糖、血压等来预防并治疗心血管疾病;在抗肿瘤方面,主要是通过抗增殖、促凋亡和抑制肿瘤细胞活性来达到抗癌的效果;在神经保护方面,麦角甾醇能够保护神经细胞、减轻痛感和预防记忆力下降。麦角甾醇在脑保护作用方面起到关键作用,本文拟从麦角甾醇的脑保护作用的研究进展进行综述。

超高效液相色谱法测定食用菌及其制品中麦角甾醇

建立超高效液相色谱法(Ultra performance liquid chromatography,UPLC)测定食用菌及其制品中麦角甾醇的检测方法。以甲醇为提取溶剂,采用超声提取方式,利用C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)进行UPLC分离,以92%甲醇-水为流动相,紫外检测器于282 nm波长处检测,外标法定量。结果显示,该方法在0.50~200.00μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数(R2)为0.9998。鲜品和腌制品、干制品和即食制品中麦角甾醇的定量限分别为0.0050 mg/g和0.010 mg/g,不同品种食用菌及其制品中麦角甾醇的添加回收率为83.1%~106.5%。日内、日间变异系数范围分别为1.1%~4.4%和1.3%~6.5%;采用科克伦和格拉布斯检验法,对6家不同实验室测定的4个相同食用菌样品数据的有效性进行检验,所得数据均无歧离值或离群值,重复性、再现性相对标准偏差范围分别为1.9%~2.8%和1.7%~8.1%。将方法应用于实际样品检测,鲜品中的庆阳香菇、干制品中的灰树花麦角甾醇含量相对最高。该方法适用于食用菌及制品中麦角甾醇含量的快捷、准确检测。

香菇中麦角甾醇的提取纯化、表征及其抗氧化活性

为建立一种香菇中麦角甾醇检测的三波长分光光度法,通过单因素试验和响应面试验获得最佳提取条件,并利用溶剂提取法、重结晶法及制备型高效液相法纯化香菇麦角甾醇,对其进行表征及抗氧化活性研究。结果表明,三波长分光光度法可以有效消除杂质和其他背景因素带来的影响,精确测定香菇中麦角甾醇的含量。香菇麦角甾醇的最佳提取条件为超声时间90 min、料液比1∶59(g/mL)、提取温度69℃,麦角甾醇含量的预测值为3.868 78 mg/g,实测值为3.781 4 mg/g。纯化后单体麦角甾醇的纯度可达96%以上,清除DPPH自由基、ABTS+自由基的半数抑制浓度IC_(50)分别为(0.72±0.06)、(0.17±0.01)mg/mL。所建立的方法重复性、稳定性、精密度良好,是一种快速准确测定香菇麦角甾醇的检测方法,且纯化的麦角甾醇具有良好的抗氧化活性。

黄精霉变过程中麦角甾醇变化规律及基于电子鼻技术的快速预测模型研究

目的:麦角甾醇是霉变相关的重要指标之一,探索建立一种麦角甾醇快速检测方法。方法:采用人工模拟培养获取不同霉变程度的黄精样品;采用传统性状鉴定法开展黄精外观性状的观察、鉴定与分类;使用超高效液相色谱法进行麦角甾醇含量测定;通过电子鼻技术实现黄精气味的数字化检测。结果:共制备得到35份不同霉变程度的黄精样品;感官评价将黄精样品分为未霉变、轻微霉变和严重霉变3个阶段;35份黄精样品中麦角甾醇质量分数为0~90.4356 mg·kg^(–1),随着黄精霉变程度增加而上升;电子鼻的18根传感器中,S1~S16均表现出随着黄精霉变程度加深其最大响应值的绝对值降低,S18则相反,其最大响应值随着黄精霉变程度增加而升高。相关性分析显示,麦角甾醇含量与S1、S7~S16响应值呈极显著负相关,与S2~S6、S17、S18响应值呈极显著正相关,并且建立了回归方程Y=67.577–78.453X(r=0.634),其中Y为麦角甾醇含量、X为传感器PA/2最大响应值。结论:黄精的气味与其内在的化学成分麦角甾醇密切相关,电子鼻技术联合回归分析能为初步预测黄精中麦角甾醇的含量提供一种可行、有效的方法。

HPLC法同时测定金针菇中麦角甾醇和22,23-二氢麦角甾醇的含量

目的:建立高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法同时测定金针菇中麦角甾醇和22,23-二氢麦角甾醇含量。方法:采用Inertsil ODS-SP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱同时测定上述2种成分,流动相为甲醇,流速1.0 mL·min-1,检测波长为282 nm,柱温25℃。结果:麦角甾醇和22,23-二氢麦角甾醇的进样量在0.025~1.5μg范围内呈良好线性关系(r=0.999 9);平均回收率(n=6)分别为104.6%[相对标准偏差(RSD)=0.89%],103.5%(RSD=3.34%)。结论:该方法简便,快速,准确,适用于测定金针菇中麦角甾醇和22,23-二氢麦角甾醇的含量。

麦角甾醇及其衍生物的氢化学位移溶剂效应

首次研究了麦角甾醇及其衍生物的氢化学位移溶剂效应。发现麦角甾醇和3β,5α,6β_三羟基麦角甾醇分别以CDCl3、CD3COCD3、DMSO_d6为溶剂 ,测 1HNMR谱 ,甾醇中羟基附近的氢有明显的溶剂效应现象。麦角甾醇和3β,5α,6β_三羟基麦角甾醇中19位的甲基虽然和羟基的距离相对比较远 ,但也存在明显的位移改变。当把麦角甾醇羟基乙酰化之后 ,明显的溶剂效应现象消失 ,说明溶剂效应现象跟甾醇羟基有关。不同的溶剂有不同的介电常数 ,和甾醇羟基形成氢键的能力也不同 ,羟基氧的电子云密度不同 ,它能通过空间的相互作用 ,对19位甲基及羟基附近的氢产生不同的屏蔽作用 ,导致了不同的化学位移改变。

麦角甾醇在养猪上的应用研究进展

1麦角甾醇的介绍1.1麦角甾醇简介麦角甾醇(Ergosterol,C_(28)H_(44)O)作为一种重要的类异戊二烯化合物,为白色或无色光亮的小叶晶或白色结晶粉末。其独特的化学结构和多样的生理功能在生物学和医学领域引起了广泛关注。麦角甾醇具有类固醇的基本四环结构,并包含特定的双键位置和羟基取代基(3β-羟基),这些特征使其与其他植物甾醇和胆固醇在化学结构上相似但又有所区别。其分子式C_(28)H_(44)O表明它是一种相对复杂的有机化合物,含有较高的碳氢比例,这与其作为细胞膜组分的角色密切相关。其化学结构见图1。

加压溶剂提取高效液相色谱法测定天然和人工虫草中的麦角甾醇、核苷及其碱基

目的 建立同时测定虫草中麦角甾醇、核苷及其碱基含量的简便方法。方法 正交法优化加压溶剂提取条件 ;HPLC法同时测定天然和人工虫草中上述成分的含量。结果 以甲醇为提取溶剂 ,提取温度 16 0℃ ,提取时间 5min ,提取压力 10MPa ,循环 1次 ,提取 1次。采用ZorbaxNH2 分析柱 (2 5 0mm× 4 6mmID ,5 μm) ,流动相为A(乙腈 ) B(10mmol·L- 1 醋酸铵溶液 )二元梯度洗脱 :0 - 5 0min ,B %为 0→ 15 % ;5 0 - 2 5 0min ,B %为 15 %→ 2 0 % ;2 5 0 - 35 0min ,B %为 2 0 %→ 4 0 % ;35 0 - 4 5 0min ,B %为 4 0 %→ 80 % ;4 5 0 - 5 0 0min ,B %为 80 %。结论 本法能够快速、简便地测定虫草中麦角甾醇、核苷及其碱基的含量。

HPLC法测定不同品种及段木栽培灵芝子实体中麦角甾醇含量

目的:以麦角甾醇为测定指标,建立灵芝子实体质量评价的HPLC方法,对不同品种及段木栽培灵芝子实体中麦角甾醇的含量进行比较研究。方法:采用HPLC法定量分析17个不同品种及14个不同段木树种的栽培灵芝子实体。色谱柱:Diamonsil C18,流动相:乙腈,流速:1.0 mL/min,柱温:40℃,检测波长:282 nm。结果:确定了灵芝子实体中麦角甾醇的提取方法和HPLC含量测定方法。不同品种麦角甾醇含量范围为0.093%～0.243%,其中韩芝-2号、圆芝、明-1、野生1号同时具有较高的麦角甾醇含量和转化率;不同段木树种麦角甾醇含量范围为0.080%～0.227%,以白栎、杨梅的麦角甾醇含量及转化率均较高。结论:本方法操作简便、结果准确,可用于灵芝子实体中麦角甾醇的含量测定和灵芝质量评价研究,为人工栽培灵芝的品种及段木树种的选择提供了参考。

高效液相色谱法研究啶菌噁唑对番茄灰霉病菌麦角甾醇生物合成的影响

啶菌噁唑是我国研制的一种新型农用杀菌剂。本实验建立了高效液相色谱法定量分析灰霉病菌麦角甾醇含量的方法,研究了该药剂对番茄灰霉病菌麦角甾醇合成的抑制作用。结果表明,此方法具有良好的准确度和精密度,回收率为98.8%;相对标准偏差为3.0%,适用于测定番茄灰霉病菌麦角甾醇含量;番茄灰霉病菌菌丝在不同浓度啶菌噁唑和对照药剂戊唑醇处理下,药剂对其麦角甾醇合成具有明显的抑制作用,其中在0.5、10.0mg/L啶菌噁唑作用下,菌丝麦角甾醇含量分别为1.59(±0.126)和0.10(±0.011)mg/g干重菌丝,与DMIs类杀菌剂戊唑醇处理相比,没有显著性差异;与空白对照相比,抑制率分别达到22.44%和95·12%;回归分析表明,药剂处理浓度对数与麦角甾醇含量抑制率的机率值表现出正相关线性关系。

RP-HPLC测定天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾醇的含量

目的 :比较天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾醇的含量 ,探讨麦角甾醇作为冬虫夏草质控指标的可行性。方法 :采用HP110 0高效液相色谱仪 ,Allsphere C18色谱柱 ,甲醇 -水 (95∶ 5 )为流动相 ,检测波长为 2 75 nm,流速 1ml/ m in。结果 :不同来源的天然冬虫夏草游离麦角甾醇含量差异显著 ,但均明显高于人工虫草菌丝。结论

灵芝孢子油中麦角甾醇含量测定方法研究

目的：建立灵芝孢子油的含量控制方法。方法：采用HPLC色谱法建立了灵芝孢子油中的麦角甾醇含量测定方法。结果：能准确的测定原料及制剂中的该成分的含量，该方法操作简便，重现性高，特异性强，麦角甾醇在0．316～580mg／ml范围内呈良好的线性关系；回归方程：Y=1．08581X＋1．58888，r=0．9999；平均加样回收率在99．37％～103．80％之间，RSD为1．54％。结论：可作为控制灵芝孢子油类产品质量的有效方法和依据。

气相色谱-质谱联用法测定烟草及烟草制品中的麦角甾醇

为准确测定烟草及烟草制品中麦角甾醇的含量,建立了以7-去氢胆固醇为内标,将麦角甾醇和7-去氢胆固醇衍生后进行GC/MS同步选择离子检测/全扫描的定量检测方法,并采用该法测定了不同种类烟叶及卷烟中的麦角甾醇含量。结果表明:该方法在2.0～200.0μg/mL之间具有良好的线性关系,R2=0.9995。方法的检出限和检测限分别为0.46和1.53 mg/kg,回收率在85.6%～91.3%之间。该方法适用于烟草及烟草制品中麦角甾醇的定量检测。

高速逆流色谱法从蝙蝠蛾拟青霉中快速分离制备麦角甾醇纯品

建立了用高速逆流色谱从蝙蝠蛾拟青霉中高效、快速分离制备高纯度麦角甾醇的方法。将蝙蝠蛾拟青霉的乙酸乙酯提取物直接进行高速逆流色谱分离,考察了不同溶剂系统的分离效果。结果表明,最佳的溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为6∶1.7∶6∶0.3),以上相为固定相,下相为流动相,转速为850r/min,流速为2mL/min,检测波长为280nm。制备所得的麦角甾醇经紫外光谱(UV)和高分辨质谱(HRMS)鉴定及与标准品对照定性;纯度经高效液相色谱(HPLC)分析为99.2%(峰面积归一化法)。该方法制备麦角甾醇简便、快速,所得产物的纯度高,适合于麦角甾醇对照品的制备。

不同产地、商品规格及生长年限猪苓麦角甾醇及多糖的含量分析

目的：考察17批不同产地猪苓麦角甾醇及多糖的含量,为猪苓的质量标准及种植生产提供一定的依据。方法：分别采用HPLC法测定麦角甾醇的含量;水提醇沉法提取猪苓多糖,以葡萄糖为对照品,采用蒽酮-硫酸比色法测定猪苓多糖含量。结果：麦角甾醇以四川南江栽培猪苓样品含量较高,为0.07%~0.18%;四年生最高,达0.18%;云南云龙、陕西太白野生猪苓及河南西峡鸡爪苓的麦角甾醇含量最低,为0.04%~0.06%,低于中国药典标准。多糖含量范围为1.10%~2.30%,其中四川南江栽培三年生猪苓样品含量最高,为2.30%;南江栽培四年猪苓的多糖含量最低,为1.10%。同一产地样品,不同商品规格的猪苓麦角甾醇及多糖的含量差异很大：猪屎苓的麦角甾醇及多糖的含量均高于鸡爪苓;栽培猪苓麦角甾醇的含量高于野生猪苓,多糖含量与野生相差不大。同一产地（四川南江）猪苓麦角甾醇及多糖随着生长年限的增长而变化。结论：不同产地、不同商品规格及生长年限猪苓药材中麦角甾醇及多糖的含量存在较大差异,猪苓药材的质量受自然环境、来源、生长年限的影响。在适宜产区种植猪苓对保证猪苓药材质量和临床药效有积极的意义。

麦角甾醇过氧化物的抑菌活性研究

利用色谱和光谱技术从猴头菌(Hericium erinaceum)干燥子实体中分离并鉴定出麦角甾醇过氧化物,并对该化合物进行抑菌活性筛选实验。结果表明,麦角甾醇过氧化物在1 mg/mL浓度下对金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢杆菌、枯草杆菌和大肠杆菌等5种细菌有显著的抑制效果。

反相高效液相色谱法分析禾谷丝核菌菌丝中麦角甾醇和羊毛甾醇的含量

采用反相高效液相色谱法,建立了检测禾谷丝核菌中麦角甾醇和羊毛甾醇含量的方法。样品经过破碎、离心、皂化后定量测定。采用DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d,5μm i.d.),流动相为100%甲醇,流速为1 mL/min,紫外检测波长为210 nm,保留时间定性,外标法定量。麦角甾醇和羊毛甾醇的保留时间分别为21 min和27min。麦角甾醇在0.125-12.5 mg/L、羊毛甾醇在0.1-10.0 mg/L范围内,两者峰面积与浓度均呈线性关系,相关系数分别为0.9993和0.9983。添加回收率实验表明,2种甾醇的平均添加回收率为91.8%-99.7%;相对标准偏差为2.8%-7.8%;麦角甾醇和羊毛甾醇的最小检出量分别为1.0和0.8 ng,最低检出浓度分别为0.05和0.04 mg/L。本方法准确、简便、重现性好。

酿酒酵母中提取麦角甾醇的研究

以酿酒干酵母为原料,在适量甲醇和氢氧化钾溶液中,95℃水浴皂化回流2．5h,用有机溶剂乙醚萃取麦角甾醇,减压浓缩富集。4～-7℃缓慢降温结晶,获得麦角甾醇粗品,产率为1．11%。将麦角甾醇粗品溶解于乙醚溶剂中,重结晶得到纯度较高的麦角甾醇晶体,平均产率为0．69%,提取率可达62．58%。采用电子扫描显微镜对恒温结晶和降温结晶得到的晶体进行晶貌观察,利用红外光谱法进行麦角甾醇的结构表征。

巴西菇麦角甾醇抗肿瘤活性及作用机理初探

采用小鼠S180移植瘤实验研究了巴西菇子实体中麦角甾醇的体内抗肿瘤活性,并通过巨噬细胞吞噬功能测定(中性红法)、脾淋巴细胞增殖功能检测(MTT法)、体外抑杀肿瘤细胞(MTT法)以及鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)等试验初步探讨了麦角甾醇抗肿瘤活性的作用机理。结果表明,巴西菇子实体中提取的麦角甾醇在剂量10 mg.kg-1.d-1、50mg.kg-1.d-1和100 mg.kg-1.d-1时的瘤重抑制率分别为62.75%、76.61%和79.18%,说明麦角甾醇有较强的抑瘤活性。在巨噬细胞吞噬试验和脾淋巴细胞增殖试验中,麦角甾醇各剂量组与阴性对照组相比无统计学差异(p>0.05),没有剂量依赖趋势,说明其对巨噬细胞吞噬功能和脾淋巴细胞增殖均无明显促进作用,可能不是通过增强免疫来发挥抑瘤活性的;麦角甾醇体外对人胃癌细胞SGC-7901和肝癌细胞Bel-7402的抑制试验中,与对照组相比均无统计学差异(p>0.05),说明其抑瘤活性也不是通过细胞毒作用来发挥的;在CAM实验中,麦角甾醇与相同剂量(5μg.mL-1)的阳性对照地塞米松相比,表现出了更强的抑制血管生长的作用(抑制率63.46%),剂量加大(50μg.mL-1)后,其抑制作用更进一步提高到了78.78%,这说明麦角甾醇能够强烈地抑制血管生长,它的抗肿瘤活性很有可能是通过这一机理来发挥作用的。