黄瓜白粉病菌对己唑醇抗性诱导及抗性菌株生物学性状的研究

室内通过紫外线照射和药剂驯化相结合的方法连续诱变7代,获得了黄瓜白粉病菌Sphaerotheca fuliginea对己唑醇的抗性菌株,该抗性菌株对己唑醇的抗性水平达到105倍,其产孢量和致病力比敏感菌株略高,但差异不显著,且对戊唑醇、腈菌唑、多抗霉素和嘧菌酯无交互抗性,对醚菌酯表现交互抗性,结果表明田间用己唑醇防治黄瓜白粉病可能存在抗性风险。

22种植物提取物对黄瓜白粉病菌的抑制作用

采用小株子叶法测试了22种植物提取物对黄瓜白粉病菌的抑制作用。其中水蓼、川黄柏、连翘等8种植物提取物对黄瓜白粉病菌具有较好抑制作用,EC50值均小于0.5%,除茵陈和马齿苋外,其他6种植物提取物对黄瓜白粉病的保护效果均高于治疗效果。8种植物提取物在1.25%浓度下对黄瓜白粉病的保护效果均高于化学药剂三唑酮100μg/mL(74.42%);1.25%的川黄柏、广藿香、马齿苋、蛇床子、南五味子提取物对黄瓜白粉病的治疗效果达到82%以上,高于三唑酮100μg/mL(78.89%),说明在黄瓜白粉病发生之前或初期使用这8种植物提取物能够达到较好的防治效果。

黄瓜白粉病菌对苯醚菌酯敏感基线的建立及室内抗药性风险评价

采用叶碟保湿培养法测定了59株黄瓜白粉病菌对苯醚菌酯的敏感性,并建立了敏感基线。结果表明:苯醚菌酯对59个菌株的平均EC50为(0.0105±0.0028)μg/mL,其敏感性频率分布呈连续性单峰曲线,没有出现敏感性下降的抗药性亚群体。因此,该敏感基线可以作为监测田间病原菌对苯醚菌酯敏感性变化的参考。室内采用药剂驯化得到4株抗药性突变体,其抗性指数均高于150,且抗药性状能够稳定遗传。室内抗药性风险评价显示,4株抗药性突变体在致病力、竞争力上与亲本菌株相比无明显差异或优于亲本菌株。综合分析表明,黄瓜白粉病菌对苯醚菌酯具有较高的室内抗药性风险。因此,在该药的使用过程中应当采取相应的抗性治理措施。

新型植物源农药0．5％大黄素甲醚水剂对黄瓜白粉病菌的毒力测定及田间药效

0．5％大黄素甲醚水剂是湖北省农科院植保土肥所和内蒙古清源保生物科技有限公司联合创制的一种新颖的植物源杀菌剂，其化学结构式为1，8-二羟基-3-甲氧基6甲基蒽醌。室内孢子萌发抑制试验结果表明，大黄素甲醚对黄瓜白粉病菌孢子萌发的抑制中浓度EC50为0．37／μg／mL田间药效试验结果表明，0．5％大黄素甲醚水剂对黄瓜白粉病菌具有良好的保护和防治效果，有效成分用量18-45g／hm^2的防治效果明显高于15％三唑酮可湿性粉剂135g／hm^2的防效。

黄瓜白粉病菌对烯肟菌胺敏感基线的建立

采用盆栽植株法测定了不同地区59个黄瓜白粉病菌菌株对烯肟菌胺的敏感性。结果表明:各菌株敏感性存在较大差异,EC50值最大为5.30mg/L,最小仅为0.19mg/L,平均值为2.59mg/L,由于菌株均采自未使用过烯肟菌胺杀菌剂的田间,敏感性频率分布呈近似正态分布,可作为黄瓜白粉病菌对烯肟菌胺的相对敏感基线。

黄瓜白粉病菌在不同抗性黄瓜材料上的侵染过程

白粉病是黄瓜生产中发生普遍,危害严重的主要病害之一。pm5.1和PM5.2是黄瓜上的2个白粉病抗性位点,本文对7份不同抗病基因型的黄瓜自交系进行了黄瓜白粉病抗性鉴定,并开展了黄瓜白粉病菌侵染过程的研究,对侵染后12、24、72 h的萌发率、菌丝形成率及菌落形成率等进行了分析。结果表明,当基因型为PM5.1PM5.1 pm5.2pm5.2时,黄瓜病情指数最高,表现为高感白粉病;当基因型为PM5.1PM5.1PM5.2 PM5.2和pm5.1pm5.1pm5.2pm5.2时,表现为中感白粉病;当基因型为pm5.1pm5.1PM5.2PM5.2时黄瓜自交系病情指数最低,表现为抗白粉病。分生孢子在抗、感黄瓜自交系植株叶片上均能萌发,但只能在感病黄瓜材料上完成整个无性生长周期,产生分生孢子。此外,黄瓜白粉病菌分生孢子在感病材料上的萌发率、菌丝形成率及菌落形成率均高于抗病材料。

几种QoIs和DMIs杀菌剂对山东不同地区黄瓜白粉病菌的毒力差异及年度间的防效变化

为明确QoIs和DMIs杀菌剂防治黄瓜白粉病的有效性,在山东省黄瓜主产区采集黄瓜白粉病菌菌株,测定不同地区及不同年份的黄瓜白粉病菌对常用QoIs和DMIs杀菌剂的敏感性,并在泰安岱岳区进行3年的田间防治试验。结果显示,除氟硅唑以外,城阳黄瓜白粉病菌对QoIs和DMIs 2类杀菌剂的敏感性最低;淄川黄瓜白粉病菌对吡唑醚菌酯、醚菌酯、嘧菌酯和苯醚甲环唑的敏感性最高,对4种药剂的相对毒力倍数分别为7.29,19.66,27.40,250.00倍。与2011年相比,2013年和2017年常用QoIs和DMIs杀菌剂对泰安黄瓜白粉病菌的毒力均不同程度降低。泰安地区的田间防效结果显示,与2011年相比,2013年除吡唑醚菌酯外2类杀菌剂对黄瓜白粉病的防效均有不同程度降低;2017年几种杀菌剂对黄瓜白粉病的防效均有较大幅度的下降,其中吡唑醚菌酯、醚菌酯和己唑醇的防效下降尤为明显。综合室内和田间试验结果表明,山东省不同地区黄瓜白粉病菌对QoIs和DMIs两类杀菌剂的敏感程度有一定的异质性,并且随着使用时间的延长,泰安岱岳区黄瓜白粉病菌对常用杀菌剂的敏感度呈显著下降趋势,药剂对黄瓜白粉病的防治效果也逐年降低。

京2B膜剂对黄瓜白粉病菌分生孢子萌发的影响

植物防病膜剂京2B由中国农科院气象研究室于1980年研制成功。据报导对黄瓜白粉病的防病效果优于托布津和福美砷。喷后,叶片上的白粉病菌分生孢子由白色变成暗灰色,分生孢子层也随着干缩。本试验目的是要了解京2B膜剂对黄瓜白粉病菌分生孢子萌发的控制效果和抑制作用的速度。

黄瓜白粉病菌接种及对杀菌剂敏感性测定方法

建立了孢子悬浮液接种黄瓜子叶测定黄瓜白粉病菌杀菌剂敏感性的简便方法。比较了白粉病菌分生孢子悬浮液涂抹法和喷雾法接种黄瓜幼苗子叶的效果，结果表明，涂抹法发病率高，均匀度更好；测定了接菌后不同时间施药，白粉病菌对己唑醇、腈菌唑、三唑酮、甲基硫菌灵和百菌清等5种杀菌剂的敏感性，结果表明，接菌后96h施药较为敏感，测得的EC50较小。最后确定接种及毒力测定方法为：接种时白粉病菌分生孢子悬浮液使用十二烷基硫酸钠水溶液分散悬浮，孢子浓度为15×10倍显微镜下每视野30～40个，接种后96h施药，发病后直接利用病斑数来计算毒力测定结果。该方法可用于黄瓜白粉病菌抗药性监测和对杀菌剂敏感性测定。

黄瓜白粉病菌对甲基硫菌灵的敏感性及室内抗性突变体生物学性状

为明确山西省黄瓜白粉病菌对甲基硫菌灵的抗药性现状,采用叶盘漂浮法测定了不同地区119株菌株对甲基硫菌灵的敏感性,用紫外线照射和药剂驯化方式诱导获得了甲基硫菌灵抗性突变体,并比较了亲本菌株与突变体的生物学性状。结果表明,119株菌株的EC50在0.48~14.37μg/m L之间,平均EC50为2.89±2.69μg/m L。不同地区菌株敏感性差异较大,采自未使用过任何杀菌剂的忻州市菌株敏感性最高,平均EC50为1.03±0.27μg/m L,可作为黄瓜白粉病菌对甲基硫菌灵的敏感基线;运城市菌株敏感性最低,平均EC50为7.02±3.12μg/m L,其中菌株YC01的EC50是敏感基线的13.98倍。3株室内诱导突变体均为高抗,突变体XZ11-2的抗性倍数达到94.96倍,抗性突变频率为1.5×10-3。无药剂处理条件下,突变体的侵染频率、病情指数、产孢量和孢子萌发率均显著低于亲本敏感菌株;抗∶感菌株分生孢子以80∶20混合培养7代后,抗性菌株频率变化不明显;以20∶80混合培养7代后,抗性频率降低甚至消失。表明黄瓜白粉病菌对甲基硫菌灵的抗性在选择压力低的情况下有可能丧失。

黄瓜白粉病菌对己唑醇的敏感基线及实验室抗性获得

为了评价黄瓜白粉病菌对己唑醇的抗性风险,采用子叶法测定了山东地区50个黄瓜白粉病菌菌株对己唑醇的敏感性。结果表明,各菌株敏感性存在较大差异,EC50值最低为0.0017μg/mL,最高达0.16μg/mL,平均值为0.028μg/mL,由于所有菌株均采自未使用过脱甲基抑制剂类杀菌剂的黄瓜日光温室,敏感性频率呈近似正态分布,可作为黄瓜白粉病菌对己唑醇的相对敏感基线。以野生菌株为材料,以紫外线诱导和药剂驯化相结合获得了2个黄瓜白粉病菌对己唑醇的抗性菌株,比较了抗性菌株和敏感菌株的适合度和分生孢子的竞争能力。结果表明,无药情况下2个抗性菌株与野生菌株适合度无显著差异。抗性菌株和敏感菌株分生孢子以80∶20混合培养7代后,抗性菌株的频率变化不明显;50∶50混合培养7代,中抗菌株的抗性频率明显降低,而高抗菌株的抗性频率降低不明显;20∶80混合培养7代,抗性菌株的频率变低甚至消失。

大黄酚对黄瓜白粉病菌的抑制作用研究

采用子叶喷雾法分别测定了大黄酚（chrysophanol）对黄瓜白粉病菌（Sphaerotheca fuliginea）的保护和治疗生物活性。结果表明,大黄酚能有效降低黄瓜白粉病的病情指数,其保护和治疗作用的EC50分别为0.23μg/mL和25.88μg/mL,对照药剂50%硫磺悬浮剂保护作用的EC50为59.75μg/mL,10%苯咪甲环唑可湿性水分散粒剂治疗作用的EC50为13.55μg/mL。在此基础上,利用2.4μg/mL大黄酚溶液处理黄瓜子叶24h后接种白粉病菌,在不同时段对病组织进行透明染色观察白粉病菌的变化情况。结果发现,大黄酚可有效降低黄瓜白粉病菌分生孢子的萌发率和萌发芽管个数,并能抑制菌丝的生长以及降低新生分生孢子的个数。接菌后24h,清水对照萌发率为66.6%,而大黄酚处理后的孢子不萌发;接菌后48h,对照菌丝的平均长度为414.7μm,大黄酚处理的菌丝平均长度为40.1μm;接菌后144h,对照的新生分生孢子串最多为8个孢子,大部分为6-7个,而大黄酚处理后的新生分生孢子串孢子个数最多为2个,大部分为1个。接菌7d后对照的病情指数为72.2,大黄酚处理组的病情指数仅为2.1,其保护作用防治效果达到97.1%,远高于50%硫磺悬浮剂65.4%的防效。

创制杀菌剂唑胺菌酯对黄瓜白粉病菌发育阶段的影响

以黄瓜白粉病菌为靶标菌,采用活体盆栽及台盼蓝染色的方法,测定了新杀菌剂唑胺菌酯对该病原菌不同发育阶段的影响。试验结果表明:唑胺菌酯对黄瓜白粉病菌的孢子萌发具有显著的抑制作用,抑制程度与质量浓度呈正相关;同时也抑制菌丝正常生长及分生孢子梗和分生孢子的形成。说明唑胺菌酯在黄瓜白粉病菌的整个生活史中都起作用,从而表现优异的防治效果。

大黄提取液防治黄瓜白粉病的初步研究

对中草药大黄提取液防治黄瓜白粉病的保护活性、稳定性、持效期及抑菌谱等作了初步研究。结果表明,大黄提取液的100倍液防效达90%以上,优于粉锈宁(15%WP)1000倍液的防效(73.41%);其酸碱稳定性与热稳定性都非常强;保护作用的持效期至少可达6d;抑菌谱测试结果表明,它对供试的小麦根腐病菌Cochliobolussativus等20种真菌都表现出一定的抑制作用。

黄瓜霜霉病和白粉病病原菌的rDNA-ITS序列分析

为了应用分子特征确定黄瓜霜霉病和白粉病的病原菌种类,扩增、测定了上海地区黄瓜霜霉病菌和白粉病菌的核糖体DNA内转录间隔区(rDNA-ITS)序列,依据rDNA-ITS序列特征分析了两种病原菌种类,以及与近缘种的差异性。结果显示,黄瓜霜霉病菌的rDNA-ITS1和rDNA-ITS2长度分别为141和406 bp,rDNA-ITS1 GC含量为41.13%,rDNA-ITS2 GC含量为46.80%(闵行区株和金山区株)或46.55%(浦东新区株),rDNA-ITS序列在种内保守性很高,种间差异性与亲缘关系呈正相关,分子特征证实研究的黄瓜霜霉病病原菌为古巴拟霜霉菌;黄瓜白粉病菌的rDNA-ITS1和rDNA-ITS2长度分别为136和89 bp,GC含量分别为59.56%和66.29%,rDNA-ITS序列在研究材料中保守,与瓜类单囊壳(Sphaerotheca cucurbitae)完全相同,但与形态鉴别的结果Sphaerotheca fuliginea差异高达4.5%,提示黄瓜白粉病病原菌的种类需进一步澄清和确定。

大黄中防治黄瓜白粉病活性物质的提取及组分分析

大黄提取液对黄瓜白粉病菌有很强的抑制作用,对其活性物质进行提取及分析研究。结果表明,振荡提取2 d活性明显增强,但随时间延长,其防效与振荡2 d的无显著差异,说明振荡2 d基本将活性物质提取完全,且防病效果达88.97%;通过HPLC分析与标准品对照比较及生物测定,初步验证大黄酚为大黄提取液的活性成分之一,而大黄酸为其非活性成分。

黄瓜白粉病的生防细菌筛选及鉴定

为开发黄瓜白粉病的生防资源,与三七根腐病菌、禾谷镰刀菌和柑橘炭疽病菌进行平板对峙培养,从25株黄瓜根际土细菌和91株烟草内生细菌中筛选出具拮抗功能的菌株;以盆栽试验从拮抗功能菌株中筛选能够防治黄瓜白粉病的生防菌株;用PCR扩增生防菌株的gyr B基因,结合菌株的菌落形态和部分生理生化特征,确定生防菌株分类地位。结果表明,在116株对峙培养细菌中,18株对三七根腐病菌、禾谷镰刀菌和柑橘炭疽病菌有较好拮抗效果。在盆栽试验中,烟草内生菌YN-201490和黄瓜根际菌株WL-1对黄瓜白粉病防效较好,其中YN-201490的1.81×108cfu/m L和WL-1的1.6×108cfu/m L稀释液连续施用3次后的防效分别达64.86%和61.26%。最终YN-201490被鉴定为枯草芽孢杆菌,WL-1被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。

大黄酚对黄瓜白粉病的生物活性及内吸传导性研究

采用喷雾法研究了大黄酚对黄瓜白粉病的生物活性及其在黄瓜组织中的内吸传导性。结果表明,大黄酚对黄瓜白粉病菌具有较高毒力,感染白粉病的叶片经200 mg/L的大黄酚处理2 d后,霉状物变褐色,病斑枯死。扫描电子显微镜观察显示,黄瓜白粉病菌经大黄酚处理后,菌丝和分生孢子梗扭曲、变形,分生孢子塌陷。盆栽试验表明,利用大黄酚防治黄瓜白粉病具有较长的持效期,黄瓜子叶上喷施100 mg/L的大黄酚,20 d后接种病原菌,其防效仍达84.83%,与有效成分500 mg/L的硫磺悬浮剂防效相近。此外,大黄酚在黄瓜组织中具有一定的跨层传导性,其横向传导性较弱,几乎无向顶及向基的传导性。

地锦提取液防治黄瓜白粉病效果及其抑菌物质的初步研究

测试了地锦提取液对黄瓜白粉病菌的抑制活性,并对地锦抑菌活性物质进行了初步的分离纯化。结果表明:地锦粗提液对苗期黄瓜白粉病有明显的预防效果,且防效随着粗提液浓度的增大而增加,浓度为30mg·mL-1时,防效达到了67.45%;地锦中的抑菌生物活性物质为强水溶性,不易溶于石油醚、乙酸乙脂、正丁醇等有机溶剂;通过碱沉淀可以把大部分杂质从水相萃取物中沉淀下来,得到含有生物活性成分更高的上清溶液;LC-MS分析结果显示上清液中含有3种物质,推测它们的分子量分别为506、202和275。

黄瓜白粉病的传播途径和防治方法

由于蔬菜大棚内土壤、空气湿度均显著高于露地,一般连作时间较长,在冬季为一些不能在北方越冬的害虫提供了越冬条件,因此大棚蔬菜病虫明显重于露地。春季大棚黄瓜白粉病是发生较为普遍的一种病害,尤其中后期植株生长衰弱时,容易发生流行。黄瓜白粉病菌除危害黄瓜以外,也危害西葫芦、南瓜、苦瓜、西瓜、甜瓜和某些花卉等。