不同干燥方法对黄芩叶中黄酮类成分的影响研究

目的:比较不同干燥方法对黄芩叶有效成分含量的影响,优选黄芩叶的最佳干燥方式。方法:以比色法测定总黄酮含量,HPLC法测定6种主要黄酮成分:野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、芹菜素、黄芩素和汉黄芩素的含量,比较自然晾晒、室内通风阴干、烘箱鼓风干燥、真空干燥和微波干燥等5种干燥方法处理黄芩叶的优劣。结果:采用微波干燥的方式黄芩叶总黄酮含量最高,含量23.00%;野黄芩苷在黄芩叶中含量较高,其中以微波干燥最高(3.62%),真空干燥最低(2.77%);微波连续加热会导致总黄酮和野黄芩苷含量下降。结论:从成本、有效成分含量和实际操作综合分析,黄芩叶应采用自然晒干或自然晾干的方法。

基于LC-MS代谢组学技术的不同采收期黄芩叶化学成分比较研究

目的对一年生和两年生的不同采收月份黄芩叶化学成分差异及其变化规律进行研究,以期为黄芩叶的综合利用提供科学依据。方法基于代谢组学方法探索不同采收期化学成分的变化规律,利用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q Exactive-Orbitrap-MS)对黄芩叶样本数据进行采集,利用PCA、OPLS-DA等多元统计分别比较一年生和两年生黄芩叶不同采收月份的组分差异。结果不同采收月份的黄芩叶化学成分含量存在明显差异,在一年生和两年生样本中指认出的差异代谢物(VIP值>1)各有28个,其相对含量随着生长月份和生长年限的不同而变化,其中黄芩叶中的主要成分红花素-7-O-葡萄糖醛酸苷、野黄芩苷、异红花素-7-O-葡萄糖醛酸苷等在5-6月份含量较高,而L-谷氨酰胺、柠檬酸、黄芩苷、二氢黄芩苷、白杨素等在7-8月份含量较高。相关性分析结果发现,含有4'-OH基团的黄酮类成分相对含量变化趋势相似,无4'-OH基团的黄酮类成分与有4'-OH基团的黄酮类成分相对含量变化趋势相反。结论不同采收期黄芩叶的差异代谢物的相对含量和动态变化趋势与黄芩叶生长月份和年限等因素相关。若以含有4'-OH基团的黄酮类成分为目标成分,则建议采收期为5-6月;若以不含有4'-OH基团的黄酮类成分为目标成分,则建议采收期为7-8月。该研究对黄芩叶的合理采收及应用具有一定指导意义。

黄芩叶及茎叶总黄酮中野黄芩甙的含量测定

黄苓叶申所舍的野黄芩甙,具有扩张冠状动脉和脑血管的作用。黄芩茶是以黄芩叶为主要原料,为了控制黄芩茶中野黄芩甙的含量,用CS—930薄层扫描法对黄苓茎叶中总黄酮和黄芩叶中野黄芩甙进行了含量测定。扫描条件:单波长,反射法,λ=335,锯齿形扫描,狭缝2×2mm,灵敏度‘中”,横轴×1/2,SX=O,平滑次数8。

黄芩叶总提物对急性醉酒小鼠的解酒护肝作用

目的探讨黄芩叶总提物(Scutellaria Baicalensis leaf extract,SBLE)的解酒护肝作用。方法60只小鼠随机分为空白组、模型组、黄芩叶总提物高、中、低剂量组(生药量分别3.2,1.6,0.8 mg/kg)、水飞蓟宾组(0.06 g/kg),每组10只。空白组小鼠予以蒸馏水灌胃;模型组小鼠灌胃同体积蒸馏水30 min后,按照1.2 ml/10 g的剂量给予56°红星二锅头;给药组药物干预30 min,按照1.2 ml/10 g的剂量给予56°红星二锅头。各实验组灌胃相应受试物共2周。通过检测神经行为学指标(转棒实验、攀爬实验、爬杆实验、步态实验和Morris水迷宫)来观察SBLE对醉酒小鼠平衡运动和学习记忆能力的影响,以此来评价黄芩叶总提物的解酒功能。最后一次灌胃酒精2 h后处死。通过计算小鼠肝脏指数,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)的水平及肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和乙醇脱氢酶(ADH)的含量,考察SBLE的保肝作用。结果行为学结果显示,与模型组比较,黄芩叶总提物低剂量组小鼠的转棒掉落次数和爬杆时间显著减少(P<0.01);中剂量组小鼠的转棒停留时间和平台穿越次数显著增加(P<0.05或P<0.01),而转棒掉落次数、爬杆时间和逃逸潜伏期显著减少(P<0.01或P<0.001);高剂量组小鼠的转棒停留时间、攀爬时间、平均步长和平台穿越次数显著延长(P<0.05或P<0.001),而转棒掉落次数、爬杆时间和爬杆行为障碍的评分等级显著降低(P<0.05~0.001)。保肝实验显示,与模型相比,黄芩叶总提物低剂量组小鼠的MDA水平显著降低(P<0.05);中剂量组小鼠的AST、ALT和MDA显著降低(P<0.001或P<0.01),并且SOD、GSH-Px和ADH显著回调(P<0.05);黄芩叶高剂量组小鼠AST、TG和MDA显著降低(P<0.05或P<0.01),并且GSH-Px显著升高(P<0.05)。此外将肝组织ADH活性与神经行为学进行关联分析,发现ADH活性与乙醇诱导的醉酒行为学指标存在相关性,其中与转棒停留时间呈正相关(r=0.7563,P<0.001),与转棒掉落次数呈负相关(r=-0.6350,P<0.001),与攀爬时间呈正相关(r=0.5010,P<0.05),与爬杆时间呈负相关(r=-0.5376,P<0.01),与逃逸潜伏期呈负相关(r=-0.6702,P<0.001),与穿越平台次数呈正相关(r=0.6330,P<0.001)。结论SBLE可以通过增强ADH活性来改善酒精代谢,从而缓解酒精诱导的小鼠醉酒症状,同时通过逆转氧化应激来保护酒精对小鼠肝脏的急性损伤。

黄芩叶茶生产过程中杀青工艺探究

黄芩叶茶是用黄芩的叶片制作而成的中药保健茶,黄芩叶中富含多种营养成分,具有较好的解热抗炎作用。目前民间黄芩叶茶的加工方式多种多样,致使其质量参差不齐,其中杀青工艺对产品的质量影响很大。目的:旨在探寻杀青工艺的最优条件,在保持其较好的外观和风味口感同时,也能充分保留其营养成分。方法:选取漂烫、蒸汽、微波三种杀青方式,以黄芩叶中过氧化物酶(Peroxidase, POD)活性,化学成分含量以及外观性状作为评价指标,在每一种杀青方式中筛选出各自最优的工艺参数,最后对经过最优工艺条件处理的三种杀青方式之间作比较,筛选出最好的杀青方式。结果:每种杀青方式筛选出的最优工艺条件分别为:1.漂烫杀青:95℃热水漂烫2 min。2.蒸汽杀青:摊放厚度2 cm,熏蒸3 min。3.微波杀青:摊放厚度3 cm,600 W微波输出功率下处理50 s。经化学成分含量比较,确定最佳杀青工艺为微波杀青。结论:良好的杀青工艺能够钝化酶活性,使青草气挥发,香气显露,叶质变软,有利于之后工序的开展以及产品质量的提升。

HPLC法测定黄芩叶、花、种子中褪黑激素的含量

应用高效液相色谱 荧光检测系统测定了昼夜两个时间点黄芩鲜叶中褪黑激素的浓度差别 ,同时也检测了花、种子中褪黑激素的含量。结果表明 ,夜间和白天采集的新鲜叶片昼夜含量不同 ,分别为 1 .65 0 3ng/g和 0 .5 1 63ng/g。在花和种子中也检测到褪黑激素。尽管目前对褪黑激素在植物中的作用尚不完全清楚 ,但是有关植物中褪黑激素含量的研究将对营养、医药和农业等提供有益的信息。

响应面法优化超声辅助乙醇浸提黄芩叶多酚工艺研究

以商洛黄芩为研究对象,采用超声辅助提取,探讨料液比、超声功率、乙醇浓度、提取时间、提取温度等对多酚类含量的影响,采用3因素3水平响应面法对各个因素的显著性和交互作用进行分析。结果表明:在优化提取条件为超声功率140 W、料液比1:15、提取时间51 min前提下,黄芩叶多酚提取率为4.9699 mg·g^(-1)。研究所取得的有关工艺参数可作为黄芩叶多酚提取的技术参考。

商洛黄芩叶部黄芩苷的提取及抑菌效果试验

以采集商洛所产黄芩叶片为原料,在单因素实验的基础上,通过正交试验探讨乙醇回流法提取其黄芩苷的优化工艺,结果表明:在料液比1∶12、乙醇体积分数70%、提取温度80℃、提取时间60 min的最优提取条件下,黄芩苷的得率为2. 03%。选用大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌为供试菌种,用比浊法对纯化后的黄芩苷进行抑菌效果试验,结果表明:菌浊液中添加黄芩苷溶液浓度大于4 mg·m L-1时,能够抑制金黄色葡萄球菌生长;添加黄芩苷溶液浓度大于8 mg·m L-1时,能够抑制大肠埃希氏菌生长。试验结果可以作为制定防腐保鲜产品中黄芩苷的有效浓度的技术参考。

HPLC法同时测定山西不同区域黄芩叶中3种黄酮类成分含量

目的建立同时测定晋产黄芩叶中野黄芩苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷和白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷3种黄酮类成分的HPLC方法。方法黄芩叶粉末经60%乙醇超声40 min提取所得。色谱条件采用Ameritech C 18色谱柱(250 mm×4.6μm,5μm),乙腈-甲醇-0.1%甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱,流速为1 ml/min,检测波长为278 nm,柱温30℃。在此色谱条件下,测定野黄芩苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷和白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷的含量。结果所测3种主要有效成分在测定质量范围内线性关系良好,R 2均为0.9999;精密度、重复性和稳定性良好;平均回收率为99.35%-100.76%,RSD小于2.0%。结论建立的HPLC方法可用于同时测定黄芩中3种成分,该方法准确、简便、灵敏度高、专属性好,可为黄芩叶质量评价提供一定的参考。

响应面法优化超声辅助乙醇浸提黄芩叶多酚工艺研究

以商洛黄芩为研究对象,采用超声辅助提取,探讨料液比、超声功率、乙醇浓度、提取时间、提取温度等对多酚类含量的影响,采用3因素3水平响应面法对各个因素的显著性和交互作用进行分析。结果表明:在优化提取条件为超声功率140 W、料液比1:15、提取时间51 min前提下,黄芩叶多酚提取率为4.9699 mg·g^(-1)。研究所取得的有关工艺参数可作为黄芩叶多酚提取的技术参考。

HPLC法测定黄芩叶中黄芩苷含量

黄芩叶是黄芩地上非药用部位，我区西部山区老乡常用的饮品之一，具有清热泻火，养阴调津作用。对其化学成分、药理作用报道较少。本文对其黄芩苷含量进行测定。

黄芩茎叶发酵黄酮的体外抑菌及抗炎作用研究

试验旨在探究黄芩茎叶发酵黄酮的抗菌抗炎效果,以大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌为试验菌种,测定最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)及抑菌圈大小。50只SPF级昆明小鼠随机分为5组,每组10只,除对照组(Con组)各组小鼠均腹腔注射脂多糖(LPS,4 mg/kg),Con组灌胃相同剂量的生理盐水,阳性药物组(LPS+DM组)灌喂0.5 mg/kg地塞米松,原药组(LPS+SBSL组)和发酵药物组(LPS+FSBSL组)灌喂8 mg/kg原药和发酵黄酮。试验期7 d。结果显示,发酵黄酮MIC、MBC值最低的分别是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌;在250 g/L条件下,发酵黄酮对大肠杆菌、痢疾志贺氏菌和金黄色葡萄球菌具有中等敏感性。与LPS组相比,LPS+FSBSL组小鼠死亡率明显降低;LPS+SBSL组小鼠肝脏指数极显著高于LPS+FSBSL组(P<0.01),LPS组脾脏指数极显著高于Con组(P<0.01)。与LPS组比,LPS+DM组和LPS+SBSL组小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)含量极显著升高(P<0.01);与LPS+DM组比,LPS+SBSL组和LPS+FSBSL组小鼠血清IL-6含量极显著升高(P<0.01)。与Con组比,LPS组小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著升高(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+FSBSL组小鼠肺脏组织中IL-6含量显著升高(P<0.05)。与LPS+SBSL组相比,LPS+FSBSL组小鼠肺脏组织中白细胞介素-1β(IL-1β)含量显著升高(P<0.05)。研究表明,黄芩茎叶发酵黄酮对痢疾志贺氏菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抑菌效果,安全剂量为8 mg/kg,对LPS感染后小鼠的死亡率具有抑制作用,同时可以调节LPS感染后小鼠血清和肺脏中炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-α含量。

黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶提取工艺、酶学性质、实际应用研究

目的研究黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶(sbslGUS)提取工艺、酶学性质、实际应用。方法在单因素试验基础上,以粒度、加水量、提取时间、提取次数为影响因素,酶活性为评价指标,正交试验优化提取工艺。分析底物(黄芩苷)浓度与酶解速度的关系,计算V_(max)、K_(m),考察pH值、温度、金属离子对酶活性的影响,评价pH稳定性、热稳定性。sbslGUS酶解黄芩苷以制备黄芩素,考察pH值、温度、反应时间、底物初始浓度、加酶量对转化率的影响。结果最优提取工艺为粒度40目,加水量10倍,提取时间15 min,提取次数3次。酶解符合酶促反应动力学,K_(m)为0.0063 mol/L,V_(max)为70.42μmol/h,在pH值6.0、温度45℃、金属离子100 mmol/L Cu2+下酶活性最强,sbslGUS在pH值4.0~7.0、温度4~30℃范围内稳定性良好。最优制备工艺为pH值6.0,温度45℃,反应时间12 h以上,底物初始浓度67.2 mmol/L,加酶量1 mL/0.269 mmol黄芩苷,转化率为97.83%。结论sbslGUS酶解效率高,条件温和,可为获取黄芩素提供简便的制备方法,并且拓展了黄芩茎叶应用途径。

微波辅助热水浸提黄芩茎叶多糖的工艺优化

为确定黄芩茎叶多糖的最佳提取工艺,采用单因素逐级优化试验与响应面分析法,以提取液中的多糖含量为指标,优化微波辅助热水浸提黄芩茎叶多糖的提取工艺。试验结果表明:单因素逐级优化试验筛选获得黄芩茎叶多糖的最佳提取条件为:微波预处理时间5 min,微波预处理功率800 W,料液比1∶35(g/mL),水提时间4 h,水提温度100℃,在此条件下黄芩茎叶多糖的提取率为17.39%。通过响应面分析法优化后所得黄芩茎叶多糖的最佳提取条件为:微波预处理时间312 s,微波预处理功率800 W,料液比1∶34(g/mL),水提时间280 min,水提温度100℃,在此条件下黄芩茎叶多糖的提取率为17.49%。优化得到的黄芩茎叶多糖提取工艺操作简单,合理可行。

黄芩茎叶在动物生产中应用的研究进展

黄芩茎叶含有黄酮类、萜类、苷类、挥发油和多糖等多种化学成分,具有抗炎、抗菌、抗氧化应激和调节机体免疫等生物学功能。黄芩茎叶总黄酮可增强机体的免疫力,改变肠壁的通透性,促进营养物质在肠道中的吸收,增加肠道内有益菌群的数量,改善动物生长性能。黄芩茎叶的毒副作用小,不易产生抗药性,可以作为添加剂或直接作为粗饲料广泛应用于动物生产中。文章综述黄芩茎叶药理作用及其在动物生产中的应用,为黄芩茎叶在动物生产中的应用提供参考。

响应面法优化黄芩茎叶黄酮类成分提取工艺及其含量测定

采用单因素和响应面试验考察乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对黄芩茎叶中黄酮成分提取量的影响;在此基础上,采用HPLC法测定了17个黄芩茎叶中黄酮成分的含量。结果表明,黄芩茎叶中黄酮成分的最佳提取工艺为乙醇浓度55%、料液比1∶50、提取时间60 min、提取温度50℃,应用最佳提取工艺黄酮成分提取量为24.43 mg/g;不同产地黄芩茎叶中黄酮成分的含量存在差异,含量范围为15.839~26.044 mg/g。响应面法优化黄芩茎叶中黄酮成分的提取工艺稳定、准确可靠,所建立的黄酮成分含量测定方法稳定可靠,可为黄芩茎叶的质量评价及深度开发研究提供参考。

基于植物代谢组学和靶标定量分析研究山西不同产地黄芩叶化学成分差异

本研究整合植物代谢组学和靶标定量分析方法,系统分析山西不同产地间黄芩叶化学成分的差异,为合理有效利用黄芩叶资源提供理论依据。基于植物代谢组学的思路,采用UPLC-QTOF-MS对山西省8个不同产地共53批黄芩叶进行液质分析,并通过多元统计分析方法,筛选山西不同产地间的差异化学成分。同时,优化并建立一种可以同时测定黄芩叶中7种黄酮类成分和3种有机酸类成分的含量测定方法,以定量分析山西不同产地黄芩叶化学成分差异。植物代谢组学结果显示,晋北(大同、忻州)、晋中(阳泉、吕梁)和晋南(长治、运城、晋城、临汾)三个区域的黄芩叶化学成分组成具有差异性:晋北和晋中地区间存在14个显著差异化学成分;晋南和晋中之间存在18个显著差异化学成分;晋北和晋南之间存在15个显著差异化学成分。其中,野黄芩苷和异红花素-7-O-葡萄糖醛酸苷是三个地区间的共有差异成分,野黄芩苷在晋南地区含量最高,在晋北地区含量最低;异红花素-7-O-葡萄糖醛酸苷在晋中地区含量最高,在晋北地区含量最低。定量分析结果进一步证实,晋北地区芹菜素、柚皮素和柠檬酸的平均含量最高,晋南地区野黄芩苷、咖啡酸、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、苹果酸和汉黄芩苷的平均含量最高,晋中地区汉黄芩素和黄芩苷的平均含量最高。该研究对于黄芩叶资源的质量控制具有重要意义,为合理有效利用黄芩叶资源提供理论依据。

酶法制备野黄芩素的工艺研究

目的应用黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶(Scutellaria baicalensis stems and leaves glucuronic hydrolase,sbsl GUS)酶解灯盏花中野黄芩苷制备野黄芩素,经分离纯化获得高纯度的野黄芩素提取物。方法采用正交试验优选灯盏花提取工艺参数;以野黄芩苷酶解转化率为指标,对酶用量、酶解pH值、温度、时间、抗氧化剂等进行考察,优选野黄芩素制备工艺参数;采用乙醇提取、活性炭脱色和分步结晶精制纯化粗提物。结果灯盏花提取工艺为灯盏花切段,加10倍水煎煮提取2次,每次1 h。野黄芩素制备工艺为sbsl GUS提取液和灯盏花水煎液加入量(以生药计)比为1∶10,加0.5%偏重亚硫酸钠,酶解pH值约6.0,温度约45℃,时间20 h,得到含量大于60%的野黄芩素粗提物。经分步结晶对粗提物进行纯化,用80%乙醇回流提取,活性炭脱色,浓缩、析晶,得到含量大于85%的野黄芩素提取物。结论该工艺应用sbsl GUS酶解技术制备野黄芩素,生产简便可行,为野黄芩素的生产制备提供了新的途径。