绿茶中21种黄酮醇糖苷类化合物的鉴别及地理溯源

分析6个产地绿茶中黄酮醇糖苷类化合物种类和含量差异,探究黄酮醇糖苷类化合物对绿茶地理溯源的可行性分析。采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)对黄酮醇苷类化合物进行定性鉴别,建立超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)测定绿茶中黄酮醇苷类化合物的定量分析方法。共鉴别出21种黄酮醇苷类化合物,包括5种杨梅素糖苷、8种槲皮素糖苷和8种山奈素糖苷,定量分析结果表明不同产地绿茶中黄酮醇苷类化合物含量存在差异,K-glu-rha-glu含量最高,占总含量的33.1%~57.8%;山奈素糖苷含量最高,杨梅素糖苷含量最低。通过对6个地区绿茶中黄酮醇苷类化合物的差异性及相关性的分析结果可以用于茶叶地理溯源;PCA能有效的区分不同产地的绿茶;BP-ANN识别的准确率为100.0%,且得到2种规范化的重要性为100%的黄酮醇苷类化合物标记物(P<0.05);PLS-DA模型预测能力为78.2%,筛选出了8种标志物(VIP>1);LSD模型的整体判别准确率为100%,交叉验证结果准确率为100%。本研究结果为茶叶地理溯源和化学分类提供了数据参考。

黄酮醇糖苷与茶树品种适制性关系

对不同加工适制性的18个茶树品种春季茶叶中10种黄酮醇糖苷进行了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用检测,并计算了葡萄糖苷化黄酮醇与半乳糖苷化黄酮醇的比值。结果发现相比于适制绿茶的茶树品种,适制红茶品种茶叶中黄酮醇葡萄糖苷化水平较高,而半乳糖苷化水平较低。山柰酚-3-葡萄糖苷含量、山柰酚-3-葡萄糖酰芸香糖苷含量、山柰酚-3-葡萄糖苷/山柰酚-3-半乳糖苷比值、槲皮素-3-葡萄糖苷/槲皮素-3-半乳糖苷比值、杨梅素-3-葡萄糖苷/杨梅素-3-半乳糖苷比值在不同适制性品种间具有显著性差异(P<0.05)。其中山柰酚-3-葡萄糖苷含量和山柰酚-3-葡萄糖苷/山柰酚-3-半乳糖苷比值差异极显著(P<0.001),对于绿茶适制性品种和红茶适制性品种的判断准确率分别为100%和83%,具有作为指导茶树品种适制性生化指标的可能。

几种大量元素对银杏愈伤组织细胞生长及黄酮醇糖苷含量的影响

以MS +NAA 1mg/L +KT 2mg/L为基本培养基 ,研究了不同浓度的 5种大量元素对银杏愈伤组织的细胞生长及其黄酮醇糖苷含量的影响。结果表明 :NH4 NO3和KH2 PO4 浓度与细胞生长率呈负相关 ;KNO3浓度对细胞生长率影响不大 ,但对黄酮醇糖苷含量影响明显 ;随着MgSO4 浓度的增加 ,细胞生长率和黄酮醇糖苷的含量呈现同步变化 ;随CaCl2 浓度的变化 ,细胞生长率和黄酮醇糖苷含量呈负相关。

超高效液相色谱-二极管阵列检测-串联质谱法测定茶叶中15种黄酮醇糖苷类化合物

采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱,以含0.1%(v/v)甲酸的乙腈-水为流动相,梯度洗脱,建立了超高效液相色谱-二极管阵列检测-串联质谱(UPLC-PDA-MS/MS)联用技术测定茶叶中黄酮醇糖苷类化合物的方法。结合色谱保留时间、紫外光谱、一级和二级质谱参数等信息,在绿茶和红茶中共识别了15种黄酮醇糖苷类化合物,包括3种杨梅素糖苷、6种槲皮素糖苷和6种山柰素糖苷类化合物。定量分析中采用串联四极杆质谱检测,以槲皮素-3-葡萄糖-鼠李糖二糖糖苷(Q-GRh)为标准品,其他黄酮醇糖苷进行相对定量。结果表明,绿茶和红茶中黄酮醇糖苷类化合物的含量和分布差异显著,绿茶中的黄酮醇糖苷总量是红茶的1.7倍,绿茶中的黄酮醇糖苷主要以杨梅素-3-半乳糖糖苷(M-Ga)、杨梅素-3-葡萄糖糖苷(M-G)、槲皮素-3-葡萄糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(Q-GaRhG)、槲皮素-3-半乳糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(Q-GRhG)、山柰素-3-半乳糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(K-GaRhG)和山柰素-3-葡萄糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(K-GRhG)为主,而红茶中主要以Q-GRh、槲皮素-3-葡萄糖糖苷(Q-G)、山柰素-3-葡萄糖-鼠李糖二糖糖苷(K-GRh)和山柰素-3-半乳糖糖苷(K-Ga)为主。本方法简单快速,准确性好,可用于茶叶中黄酮醇糖苷类化合物的分析。

黄酮醇糖苷及其结构类似物的质谱裂解规律研究

目的:研究创新药物3′,4′-二甲氧基黄酮醇-D-葡萄糖苷(GDH)及其结构类似物的质谱裂解规律。方法:在正、负离子检测模式下,对GDH及其结构类似物进行电喷雾离子阱质谱(ESI-MSn)分析,并用Mass Frontier 6.0软件辅助解析其中主要的特征碎片离子,以及可能的裂解途径。结果:在正离子模式下,从3-羟基-3′,4′-二甲氧基黄酮醇(NDH21)获得m/z299、284、266、239、238、165、137等特征离子;从GDH获得m/z483、461、321、299等特征离子;从3-乙酰氧基-3′,4′-二甲氧基黄酮(NDH01)获得m/z363、321、306等特征离子;从3-丙酰氧基-3′,4′-二甲氧基黄酮(NDH02)获得m/z 377、321、306等特征离子;从3,3′,4′-三甲氧基黄酮(甲基化NDH21)获得m/z 335、320、305等特征离子。在负离子模式下,从NDH21、GDH、NDH01、NDH02和甲基化NDH21均获得m/z297、282、267等特征离子。结论:在正离子模式下,除了NDH21显示较强的[M+H]+外,GDH及其他结构类似物均显示较强的[M+Na]+加合离子峰,主要产生丢失C环3-OH上取代基的碎片信息;除GDH外,其他黄酮醇糖苷类似物进一步产生丢失B环甲基的裂解途径。在负离子模式下,NDH21生成[M-H]-,GDH及其他结构类似物主要通过丢失C环3-OH上取代基发生裂解,并且同样出现丢失B环甲基的裂解途径。

微量元素对银杏愈伤组织细胞生长和黄酮醇糖苷含量的影响

研究证实了在银杏愈伤组织培养过程中，7种微量元素对细胞生长率和黄酮醇糖苷含量有明显的影响。MnSO4、ZnSO4、H3BO3三组试验中，当浓度分别为MS培养基原浓度时，细胞生长率最高；黄酮醇糖苷含量随MnSO4浓度增加而下降；在分别缺少Mo（6＋）、Cu（2＋）、Co（2＋）的三个处理中，其细胞生长率和黄酮醇糖苷含量均低于对照。

采收季节银杏叶片黄酮醇糖苷含量和生理变化的研究

对采收季节银杏叶片的分析结果表明：黄酮醇糖苷从９月初开始积累，在９月中旬至１０月初保持较高水平，然后逐步下降。苯丙氨酸转氨酶活性随气温变化而变化，但当寒潮入侵后，其活性则急剧上升，达到高峰。从９月初开始，可溶性糖和可溶性蛋白质浓度呈上升趋势，在落叶期到来前达到最高峰。叶绿素含量总体表现持续下降的趋势，当进入落叶期时，其含量急剧下降。

银杏叶粉针剂中总黄酮醇糖苷的含量测定

报道了用ＨＰＬＣ法测定银杏叶粉针中黄酮醇糖苷含量的方法．测定的三种黄酮醇糖苷元与外标物之间的相对校正系数分别为１．００，１．０５，０．９５；后两者变异系数分别为０．５２％，０．９４％．考察了本方法的重现性，变异系数为２．１％．测定了总黄酮醇糖苷的回收率为１００．３％，变异系数为３．０２％．

超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定茶叶中黄酮醇糖苷种类及含量

基于超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UPLC-QqQ-MS/MS)联用技术对茶叶中黄酮醇糖苷(FGs)种类及含量进行测定并对提取方式和检测条件进行优化。用75%(体积分数)甲醇水溶液提取目标化合物,再用Waters Acquity HSS T3色谱柱(粒径为1.8μm,长度×内径为100.0 mm×2.1 mm)分离目标化合物,以含有0.1%(体积分数)甲酸的乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正离子源(ESI+)与质谱多反应监测(MRM)方法对成品茶中15种FGs进行定量测定。结果表明,在0.1~20.0μg/ml的质量浓度范围内FGs的基质标准曲线的线性关系良好,其检测限(LOD)为0.08~0.23μg/L,定量限(LOQ)为0.25~0.76μg/L,相对标准偏差(RSD)为1.30%~2.80%,出峰时间为3.60~7.40 min。与现有最优检测技术相比,超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法具有分析速度快、灵敏度高、稳定性好等特点,可为提高茶叶品质成分的检测效率提供参考。

超高效液相色谱-光电二极管阵列检测-串联四级杆质谱法测定红洋葱中黄酮醇及其糖苷类化合物

采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱,以含0.1%甲酸的乙腈-水为流动相,0.3 mL/min梯度洗脱方式辅以光电二极管阵列检测-串联四级杆质谱进行定性与定量分析,建立了种同时测定红洋葱中13种黄酮醇及其糖苷类化合物的方法,其中包含6种槲皮素及其糖苷、4种异槲皮素及其糖苷和3种山奈素及其糖苷。结果表明,红洋葱中主要的黄酮醇及黄酮醇糖苷类化合物是槲皮素-4'-葡萄糖糖苷、槲皮素-3,4'-二葡萄糖糖苷、槲皮素和异槲皮素-4'-葡萄糖糖苷。红洋葱的不同部位黄酮醇及其糖苷的含量和分布并不致,以干燥品计算,在相同质量的各部位中,外两层、第三层和内层中总黄酮醇及其糖苷含量的比例为60.3∶33.0∶6.7,其中各部位槲皮素及槲皮素糖苷占黄酮总量的92.1%以上;外两层中黄酮醇单糖糖苷含量大,第三层中黄酮醇苷元含量大,而内层中黄酮醇二糖糖苷含量大。另外,在红洋葱中还发现了少量的山奈素及其糖苷,主要存在于洋葱外层中。本方法简单快速、准确性好,可用于洋葱产品中黄酮醇及其糖苷类化合物的分析。

葡萄果皮中黄酮醇糖苷的提取及HPLC-MS检测方法的优化

葡萄果皮中黄酮醇以糖苷形式存在,采用正交实验设计,建立了葡萄果皮中黄酮醇糖苷的适宜提取方法,并优化了色谱分析条件。以体积分数50%乙醇和1%乙酸混合液为提取溶剂,室温下超声处理35 min,提取4次,可获得最大提取率;在流动相A为V（乙腈）：V（甲酸）：V（水）=5∶8.5∶86.5,B为V（乙腈）：V（甲醇）：V（甲酸）：V（水）=25∶45∶8.5∶21.5下梯度洗脱,50 min内可将12种黄酮醇糖苷有效分离。糖甘含量在0.94-423 mg/L范围内线性关系良好,相关系数达到0.999,检出限为35μg/L,定量限为106μg/L;加标回收率在80%~120%之间,相对标准偏差均小于6%。研究表明,以槲皮素-3-O-葡萄糖苷为外标,以质谱信息为基础,应用所建立的方法可以满足不同发育期葡萄果皮中黄酮醇糖苷定性和相对定量分析的要求。

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中黄酮醇糖苷及其主要代谢物

黄酮醇糖苷是处于临床试验阶段的新药,拟用于治疗高脂血症。本文建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定SD大鼠血浆中的黄酮醇糖苷(M0)及其代谢物苷元(M1)和葡萄糖醛酸结合物(M2):采用d_6-黄酮醇糖苷作为内标,血浆样品经甲醇(含0.2%甲酸)沉淀蛋白后,通过XDB C_(18)(50 mm×4.6 mm,1.8μm)色谱柱分离,以去离子水(含0.2%甲酸)-甲醇为流动相梯度洗脱,色谱运行时间为4.5 min。采用电喷雾电离源(ESI),以多反应监测模式(MRM)检测。用于定量分析M0、M1和M2的离子对分别为m/z 461.3→m/z 299.1、m/z 299.1→m/z 283.1和m/z 475.0→m/z 299.1,用于定量分析内标d_6-黄酮醇糖苷的离子对为m/z 467.3→m/z305.1。本方法经验证后,成功应用于SD大鼠药动学研究。SD大鼠灌胃给予黄酮醇糖苷30 mg·kg^(-1)后,M0的C_(max)为(341±106)ng·m L^(-1)、AUC_(0-t)为(1 960±725)h·ng·m L^(-1),M1在血浆中的含量低于分析方法的定量下限2 ng·m L^(-1),无法测定相应浓度计算C_(max)和AUC_(0-t),M2的C_(max)为(1 720±843)ng·m L^(-1)、AUC_(0-t)为(8 510±2 920)h·ng·m L^(-1),M2的C_(max)约为M0的5.0倍,AUC_(0-t)约为M0的4.3倍。结果表明,SD大鼠灌胃给予黄酮醇糖苷后,在体内主要以原形M0和代谢物M2的形式存在,且M2的暴露量显著高于M0,推测黄酮醇糖苷经口服给药后在体内经肠菌群水解成苷元形式被吸收,经历较强的首过代谢后,M1进一步生成葡萄糖醛酸结合物。本文首次测定了黄酮醇糖苷在大鼠血浆中的主要代谢物,为临床药动学试验设计提供了依据。

基于分子动力学的十二烷基硫酸钠对黄酮醇糖苷增溶作用及对体内药动学的影响

目的通过分子动力学模拟黄酮醇糖苷(DF3G)在十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)水溶液中的增溶行为,通过HPLC-MS/MS法比较DF3G及DF3G的5%SDS水溶液(SDS-DF3G)的药动学差异。方法通过GROMACS软件与GROM OS 54A7联合原子力场进行分子动力学模拟。健康SD大鼠随机分为DF3G(60 mg/kg)和SDSDF3G(DF3G 60 mg/kg)2组,ig给药1次,于给药后0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、24.00、30.00 h从SD大鼠眼眶后静脉丛取血,样品处理后,采用HPLC-MS/MS法测定血浆中DF3G的血药浓度。通过DAS2.0软件拟合计算药动学参数。结果分子动力学模拟结果显示,DF3G分子中苯环部分可以自发地增溶到胶束的疏水栅栏层,而其糖环中的羟基分别与2个SDS的硫酸基中的氧原子形成2个氢键,从而增加DF3G在水中的溶解性。与DF3G组比较,SDS-DF3G组AUC(0-t)、AUC(0-∞)增大,且具有显著性差异(P<0.05);CLz/F显著降低(P<0.05);Cmax升高,tmax、MRT延长,t1/2缩短。结论从理论上证实了添加表面活性剂可以对药物分子在胶束溶液中增溶,以期为该类体系的实验研究提供理论依据。从实验角度证实了加入SDS可以提高DF3G体内生物利用度。

茶叶活性成分的化学和药理作用

介绍了近年来人们普遍关注的茶叶活性成分及其药理作用,主要包括儿茶素、甲基化儿茶素、表没食子儿茶素-3,5-双没食子酸酯、茶黄素、茶红素、聚酯型儿茶素、乌龙茶聚合多酚、茶褐素、茶氨酸、γ-氨基丁酸、咖啡碱、黄酮醇及其糖苷、原花色素和花青素等。

基于液相色谱-质谱代谢组学方法辨别两种泰国籼稻冷榨米糠油（英文）

A newly developed liquid chromatography-mass spectrometry(LC-MS)method for the analysis of cold pressed rice bran oil(RBO)was established and used to discriminate between RBOs produced from two different cultivars of major Thai fragrant rice species.The cold pressed RBO was prepared using the screw compression method.The LC-MS data were preprocessed with MZmine 2.10 program before evaluating with principal component analysis using SIMCA 13 software.The LC-MS method was able to detect and quantify several kinds of valuable constituents such as fatty acids,vitamin E,andγ-oryzanol.The chromatographic condition was feasible;short time for analysis and simple method were achieved.From score plot and loading plot of principle component analysis(PCA),two rice cultivar samples were clearly separated,and it was revealed that Khao-Hom-Pathum was more suitable than Khao-Hom-Mali for cold pressed RBO production since it contained high totalγ-oryzanol and less saturated free fatty acids.As with the fixed price of all the rice brans,this information can be used in order to,if possible,preserve the price of rice brans from different cultivars.

红茶主要多酚类化合物的HPLC分析

以正山小种、坦洋工夫等16种不同产地的典型红茶为供试材料,采用HPLC法分析比较了红茶中主要多酚类物质含量的差异.结果表明,红茶主要多酚类物质含量差异较大,其中儿茶素总量、没食子酸、绿原酸、黄酮醇及其苷类物质的含量分别为4.50-41.65mg/g,1.139 ～ 3.689mg/g,0～ 530mg/kg,0.63 ～ 4.48mg/g,苏红工夫、海南红茶、台湾红茶、越红工夫中的酯型儿茶素较高;英德红茶、台湾红茶中的黄酮醇类物质含量较高;正山小种的多酚类物质含量较低,且种类少.槲皮素、杨梅素苷类物质仅在部分样品中有检出,含量分别不高于3.00mg/g和1.50mg/g,芹菜素未被检测出.根据红茶中主要多酚类化合物含量的差异将16种红茶划分为3个类群.

细雀梅藤的黄酮类成分及其初步活性筛选

从鼠李科雀梅藤属植物细雀梅藤 (Sageretiagracilis)根茎中分离得到 9个化合物 ,经波谱分析鉴定了它们的结构。除十八烷酸、三十羧酸甲酯和胡萝卜苷外还有 6个黄酮类成分 ,其结构分别鉴定为 :maesopsin(1) ,maesopsin 6 O β D glucopyranoside(2 ) ,5 ,7,4′ 三羟基 二氢黄酮醇 (3) ,5 ,7,4′ 三羟基 二氢黄酮醇 3 O α L 阿拉伯呋喃糖苷 (4) ,5 ,7,4′ 三羟基 二氢黄酮醇 3 O α L 鼠李吡喃糖苷 (5 ) ,5 ,7,4′ 三羟基 黄酮醇 (6 ) ,其中化合物 4为一新化合物。分别对其乙醇提取物、水提取物、石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位和化合物 1、5、6进行了抗细菌、抗真菌、抗肿瘤、抗骨质疏松和溶血栓等 6个模型的活性筛选 ,结果表明正丁醇萃取部位具有一定的抗细菌活性 ,其IC50 为 74 .9μg/ml,水提取物具有一定的抗真菌活性 ,其IC50 为 13.8μg/ml。

测定红茶茶红素和茶黄素的快速方法

本文描述了用成本低廉的小型C_(18)药筒快速分离和测定红茶茶汤中茶红素和茶黄素的常规方法。传统方法分析速度慢,而且,由于黄酮醇糖苷的干扰,茶红素的测定结果往往偏高。本文也将药筒法与其它测定茶黄素和茶红素的方法进行了比较。

豌豆嫩豆荚中的保肝成分及紫罗兰酮苷、苯乙基糖苷和黄酮醇寡糖苷的结构

在研究药用食品的化学成分的过程中,从豌豆(Pisum sativum)嫩豆荚中分离出1种紫罗兰酮苷(1)、1种苯乙基糖苷(2)和2种黄酮醇寡糖苷(3、4)。本次对其进行分离和结构确证,并对黄酮醇寡糖苷的保肝作用进行了研究。 材料和方法:豌豆幼豆荚(11.0kg)用甲醇回流提取3次,减压除去溶剂,得到的甲醇提取物在乙酸乙酯-水中分配,溶于乙酸乙酯的部分和水溶部分减压除去溶剂,得到乙酸乙酯提取物和水提取物。