层黏连蛋白基质在肿瘤细胞行为及血管生成拟态形成中的机制研究

血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)描述了肿瘤细胞在无内皮细胞参与下形成新的微循环模式的过程。临床上,VM与侵袭性表型和较差的患者生存率有关。以前的许多研究都集中在血管生成因子方面;最近的研究发现,肿瘤细胞周围的细胞外基质对肿瘤发展具有显著调控作用。细胞外基质蛋白质可能授予肿瘤细胞形成血管生成拟态的能力。在本研究中,我们研究了层黏连蛋白(laminin,LN)基质在黑色素瘤和骨肉瘤的肿瘤进程和VM形成中的作用。相较于Control组,高浓度LN基质培养下,肿瘤细胞的黏附、增殖、迁移、干性表达和VM形成能力显著增强;利用免疫荧光染色和实时定量PCR分析其内在的分子机制,结果显示:与对照组相比,层黏连蛋白基质可以显著促进肿瘤细胞CD133的表达,同时E-钙黏着蛋白I的mRNA表达下调(P<0.05),而Integrin、N-cadherin、Vimentin以及Snail、Twist的mRNA表达上调(P<0.05)。以上研究结果表明,层黏连蛋白促进肿瘤细胞的黏附、增殖、迁移和VM形成能力,并揭示了VM形成的潜在机制,为后期抗血管生成拟态的诊疗提供了新的思路。

生长抑素联合奥美拉唑对肝硬化上消化道出血疗效及前胶原Ⅲ型层黏连蛋白和血管紧张素转化酶水平影响

目的 观察生长抑素联合奥美拉唑对肝硬化上消化道出血疗效及对患者前胶原Ⅲ型(PCⅢ)、层黏连蛋白(LN)和血管紧张素转化酶(ACE)水平的影响。方法 前瞻性选取2022年3月至2023年3月我院收治的112例肝硬化上消化道出血患者,根据有无使用生长抑素随机分为生长抑素组和奥美拉唑组,各56例。2组均予西医常规治疗,奥美拉唑组予奥美拉唑肠溶治疗,生长抑素组在奥美拉唑组的基础上加予生长抑素辅助治疗。2组均连续治疗3 d。比较2组患者的凝血功能指标、临床疗效、住院时间、止血时间、出血量、肝功能Child-Pugh评分、血红蛋白(Hb)、PCⅢ、LN和ACE水平。结果 治疗后,2组与治疗前相比,纤维蛋白原(FIB)、血小板(PLT)水平均升高,且生长抑素组低于奥美拉唑组;血浆凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)水平均下降,且生长抑素组低于奥美拉唑组;LN、PCⅢ、ACE、门静脉内径(PVD)、肝功能Child-Pugh评分指标均较本组治疗前降低,且生长抑素组低于奥美拉唑组;出血量、止血时间及住院时间均低于奥美拉唑组;生长抑素组组患者综合评估后总有效率92.9%高于奥美拉唑组76.8%(均P<0.05),说明生长抑素组的治疗效果优于奥美拉唑组。2组不良反应发生率对比,差异无统计学意义(χ^(2)=0.14,P=0.714)。结论 生长抑素联合奥美拉唑能够改善肝功能指标,降低PCⅢ、LN等肝硬化上消化道出血标志物,临床疗效显著。

黏连蛋白REC8在减数分裂中的功能和机制

黏连蛋白(cohesin)是在功能和进化上高度保守的一类多亚基蛋白复合体,在细胞分裂过程中保障姐妹染色单体的黏连及染色质环结构的形成。减数分裂是一种特殊的细胞分裂方式,其经历1次DNA复制后连续进行2次细胞分裂,分别完成同源染色体与姐妹染色单体的分离,这一过程需要黏连蛋白的调控。在减数分裂中,存在1组不同于有丝分裂的特异型黏连蛋白。研究特异型黏连蛋白的功能和机制对于深入认识减数分裂过程中染色体结构与动力学行为具有重要意义。REC8是减数分裂特异型黏连蛋白复合体亚基之一,不但参与姐妹染色单体的黏合,还参与减数分裂染色体特异性事件的调控,对减数分裂的发生不可或缺。本文聚焦于减数分裂特异型黏连蛋白REC8,对其在减数分裂过程中的功能和作用机制进行综述,并从磷酸化修饰、微RNAs(microRNAs,miRNAs)等方面探讨了未来对REC8功能研究的方向。

减数分裂特异性REC8黏连蛋白复合体研究进展

减数分裂是人类及大部分生物生命繁衍的基础,若减数分裂发生异常则会导致先天性疾病或不孕不育症等,故探索减数分裂染色体运动机制尤为重要。黏连蛋白复合体(cohesin complex,CC)在减数分裂中发挥重要功能,在细胞分裂期,黏连蛋白复合体介导姐妹染色单体的黏连(sister chromatid cohesion, SCC),并对染色体正确分离起着决定性作用。REC8作为黏连蛋白复合体的一种亚型,在减数分裂动力学的各个事件中均发挥作用,本文主要综述了REC8黏连蛋白复合体(REC8-Cohesin)的作用,重点总结了其在SCC、联会复合体(synaptonemal complex, SC)的组装及同源重组等事件中的功能。

血清E-钙黏连蛋白及白细胞介素-17与上皮性卵巢癌患者预后的关系研究

目的 探讨血清E-钙黏连蛋白(E-cadherin)及白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)与上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)患者预后的关系。方法 回顾性选取2015年1月至2020年1月河南省焦作市妇幼保健院EOC患者66例,根据术后3年预后分为生存组(23例)和死亡组(43例)。对比两组临床病理资料,检测患者血清E-cadherin、IL-17水平,分析血清E-cadherin、IL-17水平与EOC患者预后的关系。结果 生存组淋巴结转移、国际妇产科联盟分期(Ⅲ~Ⅳ期)、组织学低分化例数比例明显低于死亡组(P<0.05);生存组血清E-cadherin水平明显高于死亡组,而血清IL-17水平则低于死亡组(P<0.05);多因素logistic回归分析显示,淋巴结转移、国际妇产科联盟分期(Ⅲ~Ⅳ期)、组织学分化程度、血清IL-17高表达是影响EOC患者预后的独立危险因素(P<0.05),而血清E-cadherin高表达是其保护因素(P<0.05)。血清E-cadherin、IL-17单项检测及联合检测对EOC患者预后均具有良好预测价值,其中E-cadherin联合IL-17预测EOC患者预后的受试者工作特征曲线下面积最高,其预测特异度显著高于单项检测(P<0.05)。E-cadherin高表达患者3年累积生存率显著高于低表达患者(P<0.05);IL-17高表达患者3年累积生存率明显低于低表达患者(P<0.05)。结论 术前血清E-cadherin、IL-17水平与EOC患者预后密切相关,可作为评估患者预后的参考指标。

乙酰肝素酶、层黏连蛋白及其受体的表达以及在卵巢癌转移中的作用

目的 :探讨乙酰肝素酶mRNA(acetyl heparanasemRNA)、层黏连蛋白 (laminin ,LN)及其受体 (lamininrecepter,LR) ,在 5 0例卵巢癌、33例淋巴结转移卵巢癌及 10例浆液性囊腺瘤中的表达 ,及其在卵巢癌转移中的作用。方法 :应用原位杂交和免疫组化染色方法 ,检测乙酰肝素酶mRNA转录水平及LN和LR的蛋白的表达及定位。结果 :乙酰肝素酶mRNA在卵巢癌病灶及转移淋巴结中的转录水平明显增强 ,原发灶与转移灶之间的表达差异显著 (P <0 .0 5 ) ,恶性肿瘤与良性肿瘤之间表达的差异更为明显 (P <0 .0 1)。LN在癌组织及转移淋巴结中的表达少 ;而LR的表达却明显增强。乙酰肝素酶mRNA与LN表达呈负相关 ,与LR的表达呈正相关。结论 :乙酰肝素酶mRNA的表达与LN和LR的表达之间分别呈正、负相关性 ,提示乙酰肝素酶是参与肿瘤的生长。

层黏连蛋白332在妇科肿瘤中的研究进展

层黏连蛋白332(laminin 332)是上皮组织基底膜的主要组成蛋白之一,具有促进上皮细胞黏附、迁移和细胞分化等功能。Laminin 332是由3个不同基因编码的α3链、β3链和γ2链形成的异源三聚体糖蛋白。上皮细胞内合成的laminin 332是以前体形式存在的,分泌到细胞外基质后α3链和γ2链经蛋白酶水解而成熟。生理状态下,laminin332的主要作用是维持上皮组织中上皮与基底膜的黏合。研究表明laminin 332在多种恶性肿瘤组织中过度表达,与肿瘤的发生、发展密切相关。综述laminin 332的结构、与恶性肿瘤的关系及其在妇科肿瘤中的研究进展。

PrP106-126对星形胶质细胞层黏连蛋白和纤黏连蛋白表达的影响

星形胶质细胞增生是朊病毒病早期的主要病理学特征。PrP106-126(prion protein peptide106-126)具神经毒性,导致星形胶质细胞增生。层黏连蛋白(laminin,LN)和纤黏连蛋白(fibronectin,FN)是星形胶质细胞胞外基质的主要成分。利用PrP106-126和PrP106-126制备的小胶质条件培养基(conditioned medium from microglia,MiCM)分别作用于体外培养的星形胶质细胞,应用RT-PCR和Westernblot技术探讨PrP106-126对星形胶质细胞的增殖及其胞内LN、FN表达的影响。试验分为5个处理(空白对照、Scr对照、PrP106-126、MiCM、MiCMPrP106-126)。结果表明,PrP106-126可促进星形胶质细胞增殖、LN和FN的表达,但促增殖和FN表达作用有赖于活化小胶质细胞细胞因子的共同参与。

层黏连蛋白及其受体在正常绒毛和绒癌组织中的表达及意义

目的探讨层黏连蛋白(LN)及层黏连蛋白受体(LN-R)与滋养细胞侵袭的关系。方法采用免疫组织化学的方法,观察正常早期妊娠绒毛和绒癌组织中LN、LN-R的表达。结果在正常绒毛组织中从绒毛、细胞柱到浸润的绒毛外滋养细胞,随着滋养细胞侵袭力的增加,LN及LN-R的表达呈下降趋势。绒癌组织的LN表达较正常绒毛明显减弱,两组间比较有显著性差异(P<0.05)。结论在滋养细胞侵袭的过程中,LN和LN-R起着重要作用。

红芪有效部位对肺间质纤维化模型大鼠肺组织胶原面积、透明质酸及层黏连蛋白的影响

目的观察红芪对肺间质纤维化模型大鼠肺组织胶原面积、透明质酸(HA)及层黏连蛋白(LN)表达的影响,探讨其作用机制,并筛选红芪最佳有效部位。方法将144只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组,以及红芪多糖、黄酮、皂苷的高、中、低剂量组。采用气管滴注博莱霉素法建立肺纤维化模型,从造模后第2日起,各药物组分别给予相应剂量药物,每日1次,共28 d。Masson染色观察肺组织胶原纤维的变化,放射免疫法检测各组大鼠肺组织匀浆中HA、LN含量。结果与模型组比较,红芪黄酮各剂量组、红芪多糖低剂量组肺泡炎明显减轻。红芪黄酮低剂量组、红芪多糖中剂量组、红芪皂苷低剂量组肺组织胶原面积明显减小。与模型组比较,红芪多糖高剂量组、红芪黄酮各剂量组、红芪皂苷高剂量组HA含量明显下降。红芪多糖高剂量组,红芪黄酮中、低剂量组,红芪皂苷中、低剂量组LN含量明显下降。结论红芪多糖、黄酮、皂苷在适宜剂量下均能减轻肺泡炎症,抑制胶原纤维增生、沉积,降低肺组织中HA、LN含量,其中红芪黄酮效果较佳。

Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白和透明质酸酶在诊断肝纤维化程度中的应用

目的探讨在肝纤维化诊断中采用Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏连蛋白(LN)和透明质酸酶(HA)进行联合诊断的价值。方法选取2015年12月至2017年12月在该院就诊的病毒性肝炎及肝炎后肝硬化患者共80例(观察组)和80例健康献血者(对照组)作为研究对象。对所有研究对象采用化学发光法测定其血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA指标,并与病理检查结果结合分析其与肝纤维化程度之间的关系。结果肝炎患者的血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA指标显著升高,其中最高的为肝硬化患者;慢性肝炎患者的肝纤维化分期程度越严重,则PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA检查结果水平越高,两者呈正相关关系,不同肝纤维化分期之间各指标的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA水平与肝纤维化程度之间呈正相关关系,因此临床上可将血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA指标作为反映肝纤维化严重程度的测量指标,在肝纤维化的早期诊断时作为重要的诊断依据。

健脾补土法对大鼠脑缺血再灌注后层黏连蛋白降解的影响

目的探讨健脾补土法对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞周围层黏连蛋白(LN)的降解机制及其脑保护作用。方法 38只大鼠随机分为:假手术组8只,模型组10只,健脾补土传统汤剂组10只,健脾补土超微剂型组10只,大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型。进行神经功能症状评分,脑组织病理形态学观察,采用TUNEL法检测凋亡神经元,免疫组织化学法检测LN和基质金属蛋白酶9(MMP-9)阳性表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能症状评分、细胞凋亡指数、MMP-9阳性细胞表达数明显升高,LN表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,健脾补土传统汤剂组和健脾补土超微剂型组神经功能症状评分、细胞凋亡指数、MMP-9阳性细胞表达数明显降低,LN表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论 LN降解在脑缺血再灌注损伤中起重要作用,健脾补土法可能通过抑制MMP-9和减少LN降解减轻缺血再灌注所致神经元损伤。

胃癌组织中层黏连蛋白受体67LR和半乳糖凝集素-3蛋白的表达

目的:了解胃癌组织中67000层黏连蛋白受体(67LR)和半乳糖凝集素-3(Galectin-3)蛋白的表达情况。方法:用免疫组织化学SP法检测82例胃癌组织和20例胃癌手术远端切缘正常胃组织中67LR蛋白和Galectin-3蛋白的表达,并分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果:胃癌组织中67LR蛋白的阳性表达率为59.8%,Galectin-3蛋白的阳性表达率为84.1%,均高于相应的正常胃黏膜组织中的阳性表达率(30.0%和35.0%)。胃癌组织中67LR与Galectin-3蛋白的阳性表达率与患者的年龄、性别、Lauren分型无关;67LR蛋白的阳性表达率与胃癌的组织分化程度有关(P<0.05),Galectin-3蛋白的阳性表达率与胃癌的组织分化程度无关;有淋巴结转移的癌组织中两者的阳性表达率均高于无淋巴结转移组(P<0.05);随着肿瘤浸润深度的增加,两者的阳性表达率均明显增高(P<0.05)。胃癌组织中67LR与Galectin-3的表达呈正相关(P<0.05)。结论:67LR及Galectin-3蛋白阳性表达率与胃癌的侵袭、转移密切相关。

小鼠肾发育中层黏连蛋白表达的实验研究

目的观察层黏连蛋白(LN)在小鼠肾发育过程中的表达规律及层黏连蛋白与细胞极性的关系。方法用免疫组织化学链霉菌素亲和生物素-过氧化物酶连接法测定不同胚龄和日龄小鼠肾层黏连蛋白的表达。结果层黏连蛋白在肾组织中的表达随着胚龄增大和肾成熟程度而增加。在生后肾组织中的单个细胞、多个细胞无腔形成和多个细胞有腔形成时均有表达。在肾发育过程中层黏连蛋白表达于输尿管芽周围、肾小体基膜、肾小管基膜、肾小囊基膜和肾间质,且肾小管基膜着色早于肾小体基膜。结论在肾发生和成熟过程中,层黏连蛋白参与细胞极性的形成,层黏连蛋白的分布具有一定的时空顺序,对基膜的发生、成熟起重要作用。

川芎嗪对肺纤维化大鼠Ⅲ型胶原及层黏连蛋白的干预作用

目的研究川芎嗪注射液对博莱霉素A5致肺纤维化大鼠Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)及层黏连蛋白(LN)的干预作用。方法Wistar大鼠70只随机分为空白组、模型组、川芎嗪大剂量组(大剂量组)、川芎嗪中剂量组(中剂量组)、川芎嗪小剂量组(小剂量组)。除空白组外其他4组气管内注入博莱霉素A5造模,造模d2大、中、小剂量组每日开始腹腔注射川芎嗪注射液至28 d,剂量分别为250、150、40 mg/(kg.d)。检测d14、28时大鼠血清Col-Ⅲ、LN及d28时肺组织匀浆中以上指标,同时取肺组织行苏木精-伊红(HE)染色。结果肺纤维化大鼠d14、28时血清及肺组织匀浆Col-Ⅲ及LN水平明显升高,与空白组比较有显著差异(Pa<0.01);川芎嗪大、中剂量组能降低肺纤维化大鼠血清及肺组织匀浆中Col-Ⅲ及LN水平(P<0.01,0.05)。其中以川芎嗪大剂量组效果较为明显,川芎嗪小剂量组疗效较差。结论降低肺纤维化大鼠Col-Ⅲ及LN的水平,可能是川芎嗪注射液发挥治疗作用的机制之一。

老年胃癌化疗前后血清可溶性E-钙黏连蛋白检测的意义

目的探讨血清可溶性E-钙黏连蛋白(sEC)在老年胃癌患者化疗前后的表达的临床意义。方法检测晚期老年胃癌患者化疗前及第8周的血清中sEC、CEA、CA19-9的水平。分析其表达变化与化疗疗效的关系。结果化疗后客观缓解(CR+PR)组化疗后sEC水平较化疗前显著下降,无效组(SD+PD)化疗后sEC水平较化疗前显著升高(P<0.01)。两组化疗前基线sEC水平存在显著差异。结论化疗后血清sEC水平下降与晚期胃癌含奥沙利铂方案化疗有效性相关,化疗前sEC高水平预示较好疗效。

施万细胞的层黏连蛋白表达变化及两者关系的初步研究

目的:观察层黏连蛋白(laminin,LN)在坐骨神经发育过程中的表达情况,以及LN和施万细胞(Schwann cells,SCs)的相互关系。方法:取E14、E17、P1和成年SD大鼠坐骨神经,免疫荧光组织化学染色检测LN表达情况;体外培养大鼠来源的SCs,经过外源性LN处理后,免疫荧光细胞化学染色检测LN、nidogen、type IVcollagen等细胞外基质成分的表达,酸性磷酸酶法检测SCs的黏附能力。结果:E17大鼠坐骨神经SCs有LN阳性免疫反应;经过外源性LN处理后,SCs有LN、nidogen、type IV collagen阳性免疫反应,且黏附能力增加。结论:在E17大鼠中,SCs开始分泌LN;LN具有促进SCs合成细胞外基质成分,并在其黏附过程中发挥作用。

血清E-钙黏连蛋白在肝细胞癌手术前后的表达及术后复发的意义

目的检测肝细胞癌患者手术治疗前后血清可溶性E-钙黏连蛋白(sEC)的表达及其临床意义,并监测其在复发中的价值。方法检测105例肝细胞癌患者手术前后及70例健康人sEC的水平,分析术前sEC水平与临床病理特征的关系,并对手术后复发的47例肝癌患者的sEC水平进行回顾性研究分析。结果肝细胞癌患者术前sEC水平显著高于健康人,手术1周后sEC水平较术前显著下降。术前sEC水平与肝细胞癌TNM分期密切相关(P<0.01),与肿瘤分级、有无门静脉癌栓、有无包膜相关(P<0.05),与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。当确诊为肝癌复发时,sEC水平明显也高于术后(P<0.01)。结论肝细胞癌术前sEC水平与临床分期有关,可作为一种肝细胞癌预后和复发预测因子。

乳腺癌手术前后血清中可溶性E-钙黏连蛋白的表达及临床意义

目的检测乳腺癌患者手术治疗前后血清中可溶性E-钙黏连蛋白(EC)的表达并探讨其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测42例乳腺癌患者手术前后、18例乳腺良性病变患者手术前后以及30例健康人血清中可溶性EC的表达水平。并分析乳腺癌手术前后血清中可溶性EC的水平变化及与其临床病理特征的关系。结果乳腺癌患者术前血清可溶性EC较乳腺良性病变患者和健康人显著升高;乳腺癌患者术后血清可溶性EC水平较术前明显下降;高分期以及伴有淋巴结转移的乳腺癌患者的血清可溶性EC明显高于低分期及无淋巴结转移患者(P<0.05)。结论乳腺癌患者血清可溶性EC在手术前后的表达具有特异性并且与肿瘤病理分期以及淋巴结转移显著相关,可能成为乳腺癌患者预后的预测因素。