中国野生葡萄抗黑痘病基因的RAPD标记

以葡萄种间杂交组合 90 3(毛葡萄商 - 2 4×欧洲葡萄龙眼 )的F1群体为试材 ,运用RAPD技术 ,采用集群分离分析 (BulkedSegregantAnalysis ,BSA)方法进行中国野生葡萄抗黑痘病基因连锁的分子标记研究 ,获得了与抗病基因相连锁的RAPD标记OPV0 2 6 0 0 。

中国野生葡萄抗黑痘病基因的RAPD标记

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术 ,对抗病×感病的葡萄种间杂交组合白河 35 1×佳利酿的亲本及其 2 3株F1代单株进行了抗黑痘病的遗传分析 ,通过对 196个随机引物的筛选获得了 1个与中国野生葡萄抗黑痘病基因连锁的RAPD标记OPS0 3 130 0 ,并在所有供试的中国野生葡萄 7个种的 2 0个株系和欧洲葡萄 8个品种中得到了验证。

葡萄黑痘病研究进展及防治对策

阐述了葡萄黑痘病的传播史、为害特点、为害机理、发生规律及影响因素等,综述了葡萄对黑痘病的生理抗性、不同葡萄品种(系)对黑痘病的抗性差异和葡萄黑痘病菌对杀菌剂活性的研究进展,指出了充分利用我国优质葡萄种质资源进行抗病育种的重要意义,探讨了对葡萄黑痘病的综合防治措施。

10种杀菌剂对葡萄黑痘病菌的抑菌活性及联合毒力研究

在实验室条件下,采用菌丝生长速率法,研究10种杀菌剂对葡萄黑痘病菌的抑菌活性.结果表明,甲基托布津、百菌清的MIC＞1 000 mg·L-1,代森锰锌、退菌特和多菌灵的EC50值分别为6.9723、8.9088和11.1764 mg·L-1,科博、大生M-45的EC50值为3.8875、5.0846 mg·L-1,使百克、世高、福星的EC50值为0.5942、0.6524和0.7213 mg·L-1.使百克、世高和福星对葡萄黑痘病菌的抑菌活性强,科博、大生M-45其次,代森锰锌、退菌特、多菌灵的抑菌活性较弱,甲基托布津、百菌清极弱.联合毒力测定结果表明,使百克与世高1:1、1:2、1:3、1:4比例复配的CTC均大于100,说明使百克与世高各配比复配,对葡萄黑痘病菌具有很强的抑制活性,其中使百克:世高=1:4的比例复配抑菌活性最强,且有较明显的增效作用;使百克与福星1:1、1:2、1:3、1:4比例复配的CTC为70～100,说明使百克与福星各配比复配,对葡萄黑痘病菌具有较强抑菌活性,但无明显增效作用.

中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记的克隆、序列分析及辅助育种应用

对中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记OPS03-1300进行了克隆、测序及序列分析,结果表明该标记实际长度是1354bp,因此更名为OPS03-1354,其GenBank登录号为DQ350885。该标记序列与99条来自欧洲葡萄的EST有同源性,其中与1条来自赤霞珠叶片感染葡萄皮尔斯病病原菌后获得的EST同源性为82%,与2条来自赤霞珠果实在不同发育期获得的EST同源性分别为80%和85%。该序列与1条来自中国野生华东葡萄白河-35-1叶片接种霜霉病病原菌后获得的EST同源性为67%。该序列编码葡萄的一种假定蛋白。此外,应用该标记对中国野生葡萄与欧洲葡萄的种间杂交广西-1×京可晶F1代339株、白河-35-1×佳利酿F2代207株进行了辅助选择。

腺枝葡萄与刺葡萄对葡萄黑痘病和霜霉病的抗性

比较腺枝葡萄和刺葡萄2种野生葡萄与红地球、户太8号2个栽培品种对葡萄黑痘病和霜霉病的抗性差异;腺枝葡萄和刺葡萄嫁接不同栽培品种后,通过调查砧穗组合的抗病性,分析腺枝葡萄与其他野生葡萄资源赋予接穗抗病性的差异。结果表明,腺枝葡萄对黑痘病和霜霉病的抗性均较强,刺葡萄抗黑痘病,但不抗霜霉病;嫁接后,刺葡萄作砧木的组合,抗病性明显增强。由此可以认为,腺枝葡萄和刺葡萄均可作为真菌病害抗性育种的资源,刺葡萄可作为砧木育种材料。

湿热地区不同葡萄品种对黑痘病的抗性分析

采用田间自然鉴定的方法,研究分析了湿热地区28个葡萄栽培品种、7个毛葡萄野生株系对黑痘病的抗性差异。结果表明,欧亚种品种对黑痘病较感病,大部分品种对黑痘病表现为高感;欧美杂交种品种,大部分表现为抗病,有的甚至高抗;毛葡萄与欧亚种的杂交后代属于高抗病品种;而毛葡萄野生株系对黑痘病均表现为免疫。

葡萄黑痘病无公害防治药剂筛选及控害技术研究

选取咪酰胺EC、福星EC等6种对葡萄黑痘病有效的常用杀菌剂品种进行田间试验。结果表明福星EC、苯醚甲环唑WG、咪酰胺EC等3种药剂对预防和控制黑痘病的发生有较好的效果,其中福星EC、苯醚甲环唑WG效果好且对人体无毒副作用,可推荐使用;另外4种药剂可在控害过程中作为轮换药剂,与其他农药搭配使用,以延缓病原菌抗药性的产生。同时针对病害发生特点对其综合防控技术进行了研究集成。

陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌的分离与鉴定

采用常规组织法对陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌进行分离、纯化,共获得病原菌菌株24个,并对菌株YL018进行形态学鉴定、致病性测定及病原菌DNA同源性分析。利用ITS区域通用引物ITS1-F/ITS4进行病原菌DNA PCR扩增,将获得的病原菌rDNA-ITS区域的DNA序列进行Blast比较分析。结果发现,菌株YL018与GenBank登录号分别为AY826763、AY826762和AY826764的Elsinoe ampelina位于一个分支上。从而证明分离到了陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌。也为进一步研究在病原菌侵染葡萄过程中,植物防御系统中酶类物质的变化及作用做好了前期基础。

葡萄品种黑痘病抗性的调查研究

采用田间自然鉴定方法，研究了３７个栽培品种（欧亚种及其杂种）对黑痘病的抗性。结果表明，欧亚种葡萄及其杂种对黑痘病抗性存在很大差异。欧亚种葡萄品种间对黑痘病的抗性存在抗病和感病两种类型。欧美杂种葡萄品种间对黑痘病的抗性存在抗病程度的差异。

不同补钙方式对葡萄黑痘病抗性的效应

通过叶面喷施、土施、土施结合叶面喷施等补钙措施,研究不同补钙方法及钙含量对葡萄果实养分和黑痘病抗性的效应。结果表明,各补钙处理都不同程度地提高了葡萄果实的钙含量,其中单项叶面补钙措施以1.00%(W/V)Ca(NO3)2处理为好,叶面复合补钙以1.25%(W/V)Ca(NO3)2加1.00%(W/V)CaCl2处理为好。相关性分析表明,葡萄果实中的钙含量与葡萄发病率、病情指数呈负相关,氮钙比与葡萄的发病率和病情指数呈正相关,即葡萄果实中钙含量的增加,能有效地增强对葡萄黑痘病的抗性。

50%施保功WP防治葡萄黑痘病和炭疽病田间药效试验

田间药效试验结果表明 ,5 0 %施保功WP80 0～ 16 0 0倍液对葡萄黑痘病防效在 80 %以上 ,其 80 0～ 12 0 0倍液对葡萄炭疽病防效在 75 %以上。

中国野生葡萄种间杂交F_1代抗黑痘病遗传研究

用原产我国野生葡萄5种11个株系和9个欧洲葡萄品种杂交,组合成抗病×抗病和抗病×感病两类,获F_1代杂种1238株,采用田间自然鉴定的方法研究了亲本抗黑痘病及其在F_1代的遗传表现。结果表明,中国葡萄属野生种抗黑痘病在F_1代表现为极强的显性遗传特性。

中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记的克隆及测序

用 Wizard DNA Clean- up System试剂盒将与中国野生葡萄抗黑痘病基因相连锁的 RAPD遗传标记 OPV0 2 - 6 0 0回收纯化 ,连接于 T- Easy Vector并克隆测序 ,得到了 OPV0 2 - 6 0 0的全序列 ,其长度为 6 16 bp。将两端序列设计特异 PCR扩增引物作为合成中国野生葡萄抗黑痘病检测探针的基础 ,用于检测葡萄抗黑痘病种质和标记辅助育种。

几种杀菌剂对桂北葡萄黑痘病田间药效试验

设置红乳葡萄避雨栽培区和露地栽培区,以戊唑醇等6种杀菌剂为试材,以清水为对照,研究6种杀菌剂在避雨和露地栽培条件下对红乳葡萄黑痘病的防治效果。结果表明,避雨栽培条件下6种杀菌剂对红乳葡萄叶片和果实的黑痘病均有较好的防治效果,其中叶片防效达90.4%以上,果实防效达97.8%以上。露地栽培条件下,6种杀菌剂之间防效差异显著,80%波尔多液、25%戊唑醇、40%氟硅唑对葡萄黑痘病的防治效果显著高于40%高纯多菌灵、75%百菌清和80%代森锰锌的防效。综合病叶(果)率、病情指数及防效,波尔多液、戊唑醇、氟硅唑是控制红乳葡萄黑痘病的理想药剂。

葡萄黑痘病病原菌生长特性研究

【目的】探索葡萄黑痘病病原菌在不同培养条件下的生长情况,优化其培养条件,以缩短培养该菌纯培养物的周期,提高培养效率。【方法】通过常规培养手段,从患黑痘病黑巴拉多病叶上分离葡萄黑痘病病原菌,PCR扩增该菌ITS片段,经测序后在NCBI比较该片段序列。用同一规格培养皿培养病原菌,每隔7 d观察并统计该病原菌在4种不同培养基组分、5个不同温度梯度、4个不同蔗糖浓度梯度、4种光照时间、5个不同p H条件下共计21 d的生长情况。【结果】分离到病原菌并扩增获得其ITS片段,经比对,该片段序列与NCBI已公布葡萄痂囊腔菌序列AY826763的相似度达99.9%,证实所分离病原菌为葡萄痂囊腔菌(Elsinoe ampelina)。葡萄痂囊腔菌的生长最适培养基为PSA,其次是YEB;最适培养温度为25℃、最适蔗糖浓度为4.5 g/L、最适p H为8,在最适培养温度、蔗糖浓度和p H下病原菌的生长速度分别为0.07、0.03和0.01 cm/d;光照时间对葡萄痂囊腔菌生长影响不明显。【结论】葡萄痂圆孢菌生长受环境条件影响,通过培养条件优化能显著加快其生长速度,提高培养效率。

欧亚种葡萄对霜霉病和黑痘病的抗性及关系

利用配对设计方法,田间自然鉴定及室内离体叶圆片接种鉴定,系统地研究了8个欧亚种葡萄品种(系)及1个欧山杂种对葡萄霜霉病及黑痘病的抗性,同时对其中的7个欧亚种葡萄品种对两病的抗性关系进行了研究.结果表明,供试品种(系)对霜霉病与黑痘病的抗性存在负相关,但相关性不显著,由此可以推断,控制两病的微效多基因不是同一基因组或它们是连锁强度不大的2个基因组,即抗霜霉病的品种不太抗黑痘病,抗黑痘病的品种不太抗霜霉病,同一品种对两病的抗性表现交错现象.

葡萄黑痘病的药剂防治试验

葡萄黑痘病的药剂防治试验邱益三，范亦刚，于树璋（南京农业专科学校２１００３８）据报道，代森锰锌、退菌特、托福灵等药剂对葡萄黑痘病有良好的防治效果。为了进一步开发防治黑痘病的药剂，方便果农选用，我们对果病灵、灭黑灵、拌种双、多菌灵、托市津、粉锈宁等药剂...

葡萄抗黑痘病与几个生理生化指标的关系

研究以维多利亚、早紫、9307、研选5号、新华1号等5个欧亚种葡萄品种为试验材料,通过测定健康叶片与感病叶片叶绿素含量、丙二醛含量、可溶性糖含量、组织含水量,分析各品种感病后对应指标的变化趋势,比较供试品种健康和感病叶片中相应指标的差异,探讨各指标与葡萄抗黑痘病的关系,旨在为病害防治及抗病育种提供参考。结果表明,随感病程度的加深,高感品种9307叶绿素含量呈极显著下降趋势,早紫叶绿素含量呈显著下降趋势,中感品种维多利亚和抗病品种研选5号、新华1号叶绿素含量也呈极显著下降趋势;叶片感病后,组织含水量除中感品种维多利亚和高感品种9307是先升高后降低外,其他品种随着叶片感病程度的加深而降低;叶片感病后,丙二醛含量总趋势升高,其中高感品种早紫的丙二醛含量先是极显著升高,然后略有下降,中感品种维多利亚丙二醛含量先略有下降,然后极显著升高,抗病品种研选5号、新华1号和高感品种9307丙二醛含量均有不同程度的极显著升高;叶片感病后,高感品种9307、中感品种维多利亚和抗病品种新华1号可溶性糖含量呈极显著下降趋势,高感品种早紫和抗病品种研选5号可溶性糖含量稍有下降,但总趋势为降低。总之,不论品种抗感性如何,叶片感染黑痘病后叶绿素含量、组织含水量和可溶性糖含量总体呈下降趋势,而丙二醛含量总体呈升高趋势。