黑线姬鼠实验动物化研究进展

自新冠肺炎疫情以来,全球以动物为媒介的传染病不断发生,人们需要更多种类的实验动物作为研究样本。黑线姬鼠(Apodemus agrarius)是一种我国常见的农田害鼠,繁殖期短、适应能力强,在我国分布广泛,是影响我国农业生产的主要害鼠之一。另外,黑线姬鼠也是汉坦病毒(Hantavirus)、莱姆病伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)和刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的天然携带者,是流行病学研究的重要调查样本,同时在构建疾病模型和探究病原体致病机制方面也更具优势,其实验动物化的研究情况应该受到重视。本文总结了黑线姬鼠分类及其分布、繁殖学研究、生理学研究、分子生物学研究、携带病原体概况,并对黑线姬鼠的繁殖研究、多组学应用、病原探究和发展前景进行展望,以期为黑线姬鼠后续实验动物资源开发提供帮助。

黑线姬鼠睾丸实时荧光定量PCR内参基因的筛选及验证

为筛选出不同季节黑线姬鼠睾丸的最适内参基因,基于黑线姬鼠睾丸转录组数据,初步筛选出12个候选内参基因,即ALDOA、GLUL、RABAC1、TEGT、EID3、SYF2、MRPL20、GAPDH、HPRT、18s、B2M、NWD1。以不同季节(春季、夏季、秋季)成年黑线姬鼠的睾丸作为试验材料,进行RNA的提取并反转录成cDNA,再通过实时荧光定量PCR技术(Real-time Quantitative PCR,RT-qPCR)检测上述候选内参基因的表达水平。将所得到的循环阈值(Cyclethreshold,Ct)通过GeNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder等分析软件进行基因稳定性的综合分析。结果表明,不同季节黑线姬鼠睾丸中12个候选内参基因表达稳定性由高到低排序为STF2>B2M>GAPDH>MRPL20>18s>HPRT>ALDOA>EID3>RABAC1>TEGT>NWD1>GLUL,其中SYF2是最稳定的内参基因,GLUL是最不稳定的基因。综上,本研究确定了不同季节下黑线姬鼠睾丸的内参基因,为黑线姬鼠功能基因的开发及基因表达的研究提供基础,并为后续黑线姬鼠基因组学的研究提供参考。

性别与生境因素对黑线姬鼠肠道菌群多样性的影响

为探究黑线姬鼠(Apodemus agrarius)肠道菌群的组成以及多样性,讨论性别差异和生境差异对黑线姬鼠肠道菌群的影响,采用高通量测序技术对黑线姬鼠肠道菌群的16S rRNA V3-V4区进行PCR扩增并进行分析。结果显示:农田黑线姬鼠雌雄2组样品间在门、目、属水平上排名前3的优势菌群种类大致相同,但各菌群所占比例不同;灌丛黑线姬鼠雌雄2组样品间在门、目、属水平上的前3种优势菌群不同。Alpha多样性分析表明:农田组黑线姬鼠雌雄间肠道菌群差异不显著;灌丛组黑线姬鼠雌雄间肠道菌群多样性差异显著,丰富度差异不显著;不同生境黑线姬鼠肠道菌群无显著差异。ANOSIM分析表明:农田黑线姬鼠雌雄2组样品间肠道菌群差异不显著;灌丛黑线姬鼠雌雄2组样品间肠道菌群差异极显著;2种生境黑线姬鼠组间肠道菌群差异不显著。综上所述,性别和生境对黑线姬鼠的肠道菌群的组成及多样性有影响。

奉贤区害鼠优势种黑线姬鼠的发生规律及防控技术

通过介绍上海市奉贤区害鼠优势种黑线姬鼠的发生规律,包括其形态特征、生活习性、年龄组成与消长、种群繁殖等,提出了黑线姬鼠的具体防控目标、防控指标、防控范围、防控适期以及防控方法等,以期为奉贤区农作物的安全生产以及农田鼠害的有效防控提供理论依据和可操作措施。

张广才岭东部地区黑线姬鼠夏秋季植物性食物分析研究

黑线姬鼠(Apodemus agrarius)是农林业典型害鼠,为探究黑线姬鼠对食物资源利用的变化特征,选取张广才岭东部地区三道关针阔叶混交林为研究地点,分别于夏季(2020年6—8月)和秋季(2020年9—11月),采用铗日法和样线法采集黑线姬鼠样本,利用DNA宏条形码技术进行黑线姬鼠食性分析。结果表明:黑线姬鼠的夏季食物主要为草本植物,胃容物包含14科19属21种,其中以稗(Echinochloa crus-galli,87.0%)和堪察加费菜(Phedimus kamtschaticus,7.0%)为主;秋季食物主要为乔木植物果实,胃容物包含15科40属44种,其中以蒙古栎(Quercus mongolica,48.3%)、湿地风毛菊(Saussurea umbrosa,17.0%)、樟子松(Pinus sylvestris var.mongolica,7.9%)和葎草(Humulus scandens,6.2%)为主;夏秋两季均摄食的有14种,以湿地风毛菊为主。通过Shannon-Wiener指数(夏季,H'=0.50;秋季,H'=0.83)、Simpson指数(夏季,D=0.77;秋季,D=0.62)和Chao1指数(夏季,Chao1=12.29;秋季,Chao1=13.50)等多样性指数分析,发现黑线姬鼠的秋季食物组成较夏季更丰富,食物物种多样性更高。研究结果探明了张广才岭三道关林区黑线姬鼠夏秋两季的食物资源利用特征,为科学开展鼠害防治提供基础资料。

凯里市黑线姬鼠种群数量动态分析

为黑线姬鼠预测预报、防控及自然生态环境治理提供依据,探讨其种群数量、种群组成的年度、月份、季节变化规律。在稻田、旱地耕作区采用夹夜法,对贵州省凯里市1984—2022年稻田、旱地耕作区黑线姬鼠捕获率进行年度、月份、季节种群动态进行分析。结果表明:黑线姬鼠在该地区主要分布于稻田区和旱地耕作区,占总鼠数的62.36%,各年度间种群组成比例在50.69%~94.44%,为当地绝对优势鼠种,是主要的监测和防控对象。不同年度黑线姬鼠种群数量存在显著差异,各年度间平均捕获率为0.70%~6.38%,相互间存在9.11倍差异,平均捕获率为3.92%;1984—1992年捕获率较高,平均为4.86%,处于种群密度较高的波动较大状态;2011—2022年捕获率较低,平均为1.20%,处于种群密度较低的稳定状态。不同月份及季节间种群数量存在显著差异,不同月份以7月最高,2月最低,捕获率分别为3.52%、0.95%;不同季节以夏季最高,冬季最低,捕获率分别为3.05%、1.29%。该分析得出黑线姬鼠是凯里市鼠类绝对优势种,近10 a来处于种群密度较低的稳定状态,7月和夏季种群数量最高;该研究为黑线姬鼠列为凯里市主要鼠类监测、防控对象,为准确做出预测预报,制定合理的综合防控措施及自然生态环境治理提供了重要依据。

凯里市黑线姬鼠种群繁殖特征动态分析

【目的】为摸清黑线姬鼠种群繁殖特征动态变化规律,给其种群数量预测预报及防控提供科学依据。【方法】以贵州省凯里市2011—2023年稻田区、旱地耕作区的黑线姬鼠为研究对象,采用夹夜法调查分析其性别比率、怀孕率、睾丸下降率、胎仔数以及繁殖指数时间变化规律。【结果】凯里市黑线姬鼠总体种群性比(♀/♂)为1.08,种群总性比符合1:1的关系,年度间和月份间性比存在一定差异。总体平均怀孕率为23.70%,年度间怀孕率在8.33%~55.56%,一年中种群主要怀孕期在4—5月和8—9月,怀孕率分别为64.00%~70.59%和39.13%~41.67%,呈现典型的双峰型曲线。总体平均胎仔数为5.38只,以5只最多,占总孕鼠数的34.00%。总体平均睾丸下降率为64.62%,年度间睾丸下降率在35.71%~100.00%,3—10月睾丸下降率维持在较高水平,睾丸下降率为68.75%~100.00%,月份间怀孕率与睾丸下降率呈同步变化趋势。总体平均繁殖指数为0.66,年度间繁殖指数在0.24~1.54,月份间繁殖指数在0.15~2.61,在4—5月和8—9月出现2个繁殖高峰,呈现典型的双峰型曲线。【结论】黑线姬鼠应列为凯里市主要监测防控对象,黑线姬鼠种群繁殖特征具有明显的月份变化规律,其防控最佳时期应选择每年4月和8月。

气候因素对黑线姬鼠种群动态影响的非线性效应

受全球气候变化的影响,气候因素与害鼠种群变化之间的关系成为害鼠防治研究中的热点问题。以西安市长安区周边分布的黑线姬鼠为研究对象,通过标志重捕法进行种群动态监测,掌握其种群数量的动态变化规律,并结合非线性的统计方法广义可加模型,对该地区2015—2018年黑线姬鼠种群密度和气候因素数据进行分析,探讨该鼠种群变化与气候因素之间的关系。结果表明,该地区黑线姬鼠种群数量总体显现为下降趋势。黑线姬鼠种群密度存在显著的正向自我调节效应(F_(1.00, 5.77)=27.062,P<0.01),且与上一月种群密度存在线性的正相关。当月平均温度与该鼠种群密度之间存在显著的非线性效应(F_(1.90, 5.77 )=4.696,P<0.05),两者之间显现为钟型关系,当温度<21℃时,两者之间显现为正相关,黑线姬鼠种群密度随温度的升高而升高,反之显现为负相关。当月累计降雨量与其种群密度之间也存在显著的非线性效应(F_(1.87, 5.77)=3.879,P<0.05),同样,两者之间也显现为钟型关系,当降雨量>90 mm时,两者之间显现为负相关,种群密度随降雨量的增加而降低,反之显现为正相关。因此,温度和降雨对黑线姬鼠种群变化具有调节作用,低温干旱和高温多雨均不适合该鼠的繁殖与生长。

洞庭湖不同生态类型区黑线姬鼠消化道重量和长度的季节变化

对洞庭湖3种不同生态类型区(农区、林区、农林交错区)不同季节黑线姬鼠消化道各器官长度、鲜重和干重的测量表明,在3种生态类型区中,黑线姬鼠消化道各器官鲜重和干重季节变化显著。农区和林区消化道各器官的鲜重和干重在春季和冬季显著重于夏季和秋季,农林交错区消化道各器官鲜重和干重在春季显著重于夏季和秋季,这可能与春季和冬季黑线姬鼠能量需求增加、食物缺乏和食物质量下降有关。在同一季节,3种生态类型区之间消化道各器官长度、鲜重和干重均无显著性差异。这与3种生态类型区间黑线姬鼠食物变化较小有关。关于消化道各器官长度变化方面,除了农区的大肠长度有显著季节性差异外,其它指标均无显著季节性差异。以上结果表明黑线姬鼠消化道各器官在外界环境因素的影响下能产生不同的反应,消化道形态的变化是黑线姬鼠面临外界胁迫因子时的一种消化对策。

黑线姬鼠在传播肾综合征出血热中作用的研究

１９６６～１９９３年在安徽、江苏及陕西疫区进行了一系列调查研究。主要结果如下：（１）该鼠是田野中的优势鼠种，鼠密度高（２１．１６％～３８．２１％）或较高（８．１８％～１４．５２％）；（２）其季节消长与当地居民ＨＦＲＳ发病曲线相一致；（３）该鼠携带ＨＦＲＳ病毒（ＨＶ）抗原的阳性率高；（４）ＨＶ抗原阳性鼠的血、尿具有传染性；（５）鼠所带ＨＶ可通过５种途径（皮肤伤口、呼吸道、消化道、革螨或恙螨的叮刺、垂直）传播；（６）通过灭鼠降低鼠密度可有效地控制ＨＦＲＳ的流行。以上结果证明黑线姬鼠是姬鼠型ＨＦＲＳ的主要传染源，其血、尿具有传染性，可通过多种途径传播。

黑线姬鼠(Apodemus agrarius)的种群繁殖参数及其地理分异特征

黑线姬鼠（Apodemus agrarius）是我国广大地区的主要害鼠之一，是余庆县农田害鼠优势种，占总鼠数的94.81%。探讨其种群繁殖参数的变动规律及其地理分异特征，对其种群数量预测预报具有重要意义。通过对1987-2005年贵州省余庆县黑线姬鼠种群繁殖参数分析结果表明：研究期间共解剖标本5497只，其中，雌鼠2698只，雄鼠2799只，黑线姬鼠在当地1-11月份均可繁殖，主要繁殖期在3-10月份，每年4-5月份和8-9月份出现2次妊娠高峰。种群总性比（♀/♂）为0.96，多年平均怀孕率为36.91%±6.79%，平均胎仔数为5.33±1.07只，平均繁殖指数为0.81±0.17，平均睾丸下降率为59.13%±7.89%。不同年龄组种群繁殖力存在显著差异，随着种群年龄的增长繁殖力不断增加，成年Ⅰ组、成年Ⅱ组、老年组是种群繁殖的主体。种群繁殖参数不同年度之间比较稳定，不同月份、不同季节之间变化差异较大，具有明显的季节变化特征。年均种群密度与年均繁殖指数呈极显著正相关，与胎仔数显著正相关，与年均怀孕率、睾丸下降率、性比相关性不显著，繁殖指数是影响黑线姬鼠种群密度的重要因子。比较全国各地黑线姬鼠种群繁殖参数的地理分异特征认为，黑线姬鼠种群繁殖参数具有明显的地理分异现象，胎仔数、生殖强度由南向北逐渐增加，具有随纬度的升高趋向增加的特征;在高纬度地区繁殖时间较短;性比与纬度、经度的变化关系密切;各繁殖参数与海拔的变化相关性不明显，可排除海拔因素的影响。

北京地区黑线姬鼠对杀鼠灵抗药性的测定

目的检测北京市顺义区黑线姬鼠对第一代抗凝血灭鼠剂杀鼠灵的抗药性。方法实验室配制0.02%杀鼠灵玉米粉毒饵,采用6d无选择摄毒法。结果杀鼠灵对33只黑线姬鼠毒杀率为63.64%,死亡鼠平均食毒(76.91±34.76)mg/kg,平均致死时间(7.23±2.51)d;存活鼠平均食毒(106.79±26.68)mg/kg;抗性发生率为36.36%。结论(1)直接使用第二代抗凝血灭鼠剂20年后,北京市顺义地区黑线姬鼠对第一代抗凝血灭鼠剂杀鼠灵也产生了抗性,并形成抗性种群;(2)试鼠对杀鼠灵的敏感区间雌鼠大于雄鼠;幼体鼠与老体鼠抗性发生率显著高于亚成年及成年试鼠。建议推广6d无选择摄毒抗性检测法,以监测害鼠对抗凝血类灭鼠剂的抗性发生情况;采用多种方法综合控制鼠害以减轻对药物的依赖性,延长抗凝血类灭鼠剂使用寿命。

余庆县2001至2005年黑线姬鼠种群动态和繁殖规律研究

目的进一步摸清黑线姬鼠种群数量季节变化规律和种群繁殖特征的变动规律,为其种群数量预测预报和防治提供科学依据。方法2001-2005年每月定期在稻田、旱地2种生境采用夹夜法调查,收集鼠类标本,分类鉴定,计算捕获率及鼠种组成,并解剖观察其繁殖状况,获取性别、怀孕率、胎仔数、睾丸下降率、繁殖指数等有关数据。结果黑线姬鼠主要分布于稻田、旱地耕作区,是余庆县农田害鼠优势种,占总鼠数的89.97%。对其种群性比、雌鼠怀孕率、胎仔数、繁殖指数、雄鼠睾丸下降率的季节变化及种群数量消长动态作了系统分析,5年平均捕获率为4.06%,平均怀孕率为26.97%,平均胎仔数为5.14只,平均繁殖指数为0.66,平均睾丸下降率为62.40%,每年4-5月和8-9月出现2次繁殖高峰,5-6月和10-12月出现2个数量高峰。结论黑线姬鼠是该县监测和防制的主要对象,每年3和8月为最佳策略性防制时期,化学防制仍是农田灭鼠的主要手段之一。

黑线姬鼠贮食行为研究

[目的]探讨黑线姬鼠的贮食行为并研究鼠类和植物的相互关系。[方法]在牡丹江西山及周边的庄稼地内随机选择20个样方,采用挖洞测量法研究了牡丹江城市郊区庄稼地的黑线姬鼠的贮食习性。[结果]11月和12月挖开的31个黑线姬鼠鼠洞的总贮食湿重为10.100 kg,最大贮食量为0.930 kg,最小贮食量为0.140 kg,平均每洞贮食量为0.265 kg。黑线姬鼠的贮食行为属于集中贮食。食物采自以鼠洞口为中心半径5 m的区域,取食高度为10 cm左右。洞口朝向受方向影响较少,受食物源影响较大。黑线姬鼠是杂食性鼠种,以取食农作物为主。黑线姬鼠最大食量为12.70 g,最小食量为0.91 g,平均食量为5.13 g。黑线姬鼠一年四季皆活动,春、秋季活动比较频繁。[结论]该研究为揭示啮齿动物的贮食习性和鼠害防治提供了依据。

黑线姬鼠种群结构与携带汉坦病毒相关性

汉坦病毒(Hantavirus,HV)是肾综合症出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)的主要病原体之一,HV的主要宿主动物为黑线姬鼠(Apodemus agrarius)。针对西安市HFRS的持续高发病率,2010年7月—9月对西安市HFRS疫区捕获的110只黑线姬鼠(阳性62只)进行年龄、性别鉴定。通过病毒RNA提取分析,发现黑线姬鼠雌雄个体携带病毒无显著差异,但是不同年龄段黑线姬鼠携带汉坦病毒却具有显著差异,年龄结构与病毒携带具有极显著的相关性。

用体重和体长鉴定黑线姬鼠年龄方法的商榷

在黑线姬鼠种群数量变动的研究中,年龄鉴定是一项重要的工作。分析种群的年龄组成,有助于了解种群的繁殖、生长、死亡和数量发展的趋势。计算不同年龄组所占的比例,更有助于判断某些自然疫源性疾病的流行动态。因此,探讨黑线姬鼠年龄鉴定的方法,有重要的理论与实践意义。 关于黑线姬鼠年龄鉴定的方法,曾有两种不同的意见。一种意见认为:黑线姬鼠的寿命较短,而且终生能不停地生长,可用体重来分析种群的年龄组成(诸葛阳等,1959)。

黑线姬鼠和布氏田鼠对一些食物的实验室适口性试验

目的筛选适用于防治黑线姬鼠和布氏田鼠的配制毒饵和捕鼠诱饵。方法用玉米粉(黑线姬鼠)和兔料(布氏田鼠)作标准饵,大米、小麦、花生米、黄豆、高粱米、荞麦、小米、玉米(整粒或渣)、黄米和莜麦作候选食物,对试鼠进行实验室单笼饲养有选择摄食试验。结果黑线姬鼠对被筛食物的适口性,以花生米最好,摄食系数为1.62,其次是高粱米(1.19)、大米(1.13)、小米(1.11)、小麦(1.10)、玉米粉(0.39),黄豆和荞麦最低,摄食系数分别为0.19和0.17。布氏田鼠对食物的适口性,也以花生米最好(1.80),其他依次为莜麦(1.54)、黄米(1.12)、小麦(1.07)、小米(1.00)、荞麦(0.95)、玉米渣(0.87)、大米(0.79)、高粱米(0.74),黄豆最低(0.30)。结论防治黑线姬鼠,可用大米、小麦、高粱米或小米作基饵配制毒饵;防治布氏田鼠则可用莜麦、小麦、黄米、小米或玉米渣作基饵配制毒饵。捕鼠器捕鼠,花生米是2种鼠的最佳诱饵。

哈尔滨地区黑线姬鼠对溴敌隆的敏感性测定

目的测定黑线姬鼠对抗凝血灭鼠剂溴敌隆的敏感性，为检验该鼠的抗药性提供参数。方法实验室做单个笼养无选择摄食试验：雌雄分开，随机分组，按7个不同食毒期供给浓度为0．0005％的溴敌隆毒饵。用Bliss计算机程序，计算不同食毒期与对应死亡率之间的关系。结果黑线姬鼠对溴敌隆的敏感性，性别之间差异无统计学意义（Pb〉0．05，PLFP50〉0．05）；雌雄数据合并计算，得毒力回归线y=3．54＋2．90x，LFP50和LFP99及其95％置信限分别是3．18（2．44～4．14）d和20．12（8．42～48．06）d。结论按世界卫生组织推荐的以致死99％敏感靶标鼠种的食毒期（LFP99）取整天数作为抗药性检验标准，哈尔滨地区黑线姬鼠摄食浓度为0．0005％溴敌隆毒饵21d存活即为抗性鼠。

贵州省2011年黑线姬鼠钩端螺旋体分离株16S rRNA基因序列分析及基因种鉴定(英文)

目的了解贵州省钩端螺旋体病(简称钩体)病原学特征,分析2011年贵州省钩体病疫区黑线姬鼠钩体分离株16SRNA基因序列并对其进行基因种鉴定,为贵州省钩体病的有效预防和控制提供科学依据。方法应用PCR扩增几乎全长的钩体16SrRNA基因片段,并将扩增产物进行双向序列测定,从NCBI数据库下载钩体17个基因种代表菌株及伊尼利螺旋体和短小螺旋体16SrRNA基因序列,采用生物信息软件比较分离株和各基因种代表株间的核苷酸序列,分析其亲缘进化关系,确定分离株基因种。结果通过PCR扩增和基因测序技术获得4株钩体分离株16SrRNA基因核苷酸序列(1492bp),4株钩体分离株的核苷酸同源性为100%,与17个钩体基因种中的问号钩体(L.interrogans)基因种黄疸出血群代表菌株的同源性最高(99.9%),系统进化树分析显示,钩体分离株与17个基因种代表菌株及伊尼利螺旋体和短小螺旋体形成致病性、非致病性、未知致病性和其它分支,贵州4株分离株分属于致病性基因种分支,其中与致病性钩体8个基因种中的问号钩体基因种亲缘关系最近。结论贵州省2011年钩体病疫区黑线姬鼠钩体分离株均属致病性钩体的L.interrogans基因种,该基因种菌株可能为当地流行菌株,该结果将为贵州省钩体病的预防和控制提供科学依据。

安义农区黑线姬鼠种群繁殖生态研究

1985～1988年作者等在赣北安义农区研究了黑线姬鼠种群繁殖生态,对其雌雄性比、妊娠率、胎仔数和繁殖指数等进行了分析,结果表明:雄雌总性比(/)为1.14,年度间无差异,但随姬鼠年龄和季节不同而发生变化;雌鼠周年均可繁殖,一年中有两个繁殖高峰:即春季高峰和秋季高峰;多数个体胎仔数为4～6只;一年中繁殖指数最高的月份为9～10月,最低的月份为1～2月。