骨化三醇、益生菌对帕金森病小鼠模型肠道迷走神经、黑质a-syn的影响

目的以益生菌为对照组,分析骨化三醇对帕金森病(PD)小鼠模型黑质、结肠迷走神经α突触核蛋白的影响。方法选取雄性SPF级健康C57BL/6小鼠45只,随机分为A组(正常对照,n=5)、B1组(PD模型对照,n=10)、B2组(PD模型益生菌干预,n=10)、B3组(PD模型骨化三醇干预,n=10),B4组(PD模型益生菌联合骨化三醇干预,n=10)。每组均连续喂养3个月。喂养结束完成行为学、相关血液学检测后处死实验小鼠取各组n=3,分别取大脑黑质和结肠迷走神经组织,行Western blot检测a-突触核蛋白(a-syn)含量。结果结肠迷走神经中a-syn含量显示:(1)PD模型组(B1组)、益生菌干预组(B2组)、骨化三醇干预组(B3组)明显高于正常组(A组),^(a)P<0.01;(2)益生菌干预组(B2组)、骨化三醇干预组(B3组)、益生菌+骨化三醇联合干预组(B4组)均低于PD模型组(B1组),^(b)P<0.01;(3)骨化三醇干预组(B3组)高于益生菌干预组(B2组),^(c)P<0.01;(4)益生菌+骨化三醇联合干预组(B4组)低于骨化三醇干预组(B3组),^(d)P<0.01;黑质中的a-syn含量显示:(1)PD模型组(B1组)、益生菌干预组(B2组)明显高于正常组(A组),^(a)P<0.01;(2)益生菌干预组(B2组)、骨化三醇干预组(B3组)、益生菌+骨化三醇联合干预(B4组)均低于PD模型组(B1组),^(b)P<0.01;(3)骨化三醇干预组(B3组)、益生菌+骨化三醇联合干预(B4组)均低于益生菌干预组(B2组),^(d)P<0.01。结论(1)益生菌、骨化三醇对于PD小鼠肠道迷走神经中的a-syn的沉积均有抑制作用,而益生菌在此过程中显示更显著的作用;(2)益生菌、骨化三醇可不同程度减少PD小鼠黑质中的a-syn的沉积,其中骨化三醇对于α-syn中枢沉积的干预作用尤显著。

帕金森病患者血铜蓝白水平与黑质铁沉积相关性分析

目的:探讨帕金森病(PD)患者血铜蓝蛋白水平与黑质铁沉积的相关性。方法:回顾性分析收治的107例PD患者临床资料,所有患者均检测血浆铜蓝蛋白(Cp)水平,据其水平分成对照组(Cp≥0.25 g/L)52例与观察组(Cp<0.25 g/L)45例。运用PD统一评分量表第三部分(UPDRS-Ⅲ)、Hoehn Yahr(H-Y)分级评估患者疾病状况,所有患者均接受经磁敏感加权成像检查,观察两组不同脑区相位值变化,并分析Cp水平与H-Y分级及Cp水平与UPDRS-Ⅲ评分、相位值的相关性。结果:观察组SN相位值低于对照组,UPDRS-Ⅲ评分及Cp低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);中晚期H-Y分级患者UPDRS-Ⅲ评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearmna相关性分析,SN相位值与Cp水平、UPDRS-Ⅲ评分均呈正相关(均P<0.05),而Cp、SN相位值与H-Y分级不具有相关性(均P>0.05)。结论:PD患者Cp水平与黑质铁沉积密切相关,PD患者血浆Cp越低,黑质铁沉积越严重。

Ghrelin基因敲除对小鼠黑质区多巴胺能神经元突触后电位的影响

目的探讨胃饥饿素(ghrelin)基因敲除对小鼠黑质多巴胺能神经元突触后电位的影响。方法分别选取10周龄雄性ghrelin基因敲除小鼠(ghrelin^(-/-)组)及其同窝雄性野生型(WT)小鼠(WT组)的黑质组织,采用转录组学测序(RNA-seq)技术筛选差异表达基因(DEGs),通过KEGG通路富集分析DEGs可能参与的神经元突触活动相关信号通路,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法对筛选出的DEGs进行验证,并应用蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测神经元突触活动相关基因的蛋白表达情况。结果与WT组相比,ghrelin^(-/-)组小鼠多巴胺能神经元突触传递信号通路上的23个基因水平发生了显著性变化,其中谷氨酸促离子型受体α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸型亚基3(GluA3)和糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)分别调控神经元突触后膜上的α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸受体和N-甲基-D-天冬氨酸受体;在ghrelin^(-/-)组小鼠黑质组织中,GluA 3和GSK-3β基因表达出现明显的下调。RT-qPCR方法检测结果显示,与WT组相比,ghrelin^(-/-)组小鼠黑质组织当中GluA 3和GSK-3βmRNA水平明显下调(t=2.408、2.740,P<0.05)。Western blotting方法检测结果显示,与WT组相比,ghrelin^(-/-)组小鼠黑质组织中GluA3蛋白的表达水平明显上调(t=2.530,P<0.05),GSK-3β蛋白的表达明显下调(t=3.469,P<0.05)。结论Ghrelin基因敲除可能通过使小鼠黑质多巴胺能神经元突触后电位长时程增强,从而增强兴奋性突触传递活动,参与运动调控。

天智颗粒对帕金森病小鼠模型黑质和脊髓多巴胺能神经元的影响

目的 探讨天智颗粒对帕金森病(PD)小鼠模型脑黑质和脊髓多巴胺(DA)能神经元的影响。方法 2022年9月采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶25 mg/(kg·d)腹腔注射5 d的方法构建PD小鼠模型,采用随机数字表法分为模型组和天智颗粒5、2、1 g/kg组,每组10只,另取10只小鼠作为正常对照组。灌胃给药2周后比较各组小鼠行为学变化、中脑黑质和脊髓DA能神经元存活数量及形态变化、神经元内酪氨酸羟化酶阳性表达情况等。结果 与正常对照组比较,模型组小鼠悬挂能力下降、游泳时间缩短,经天智颗粒干预后可有效提高小鼠悬挂能力,延长游泳时间,黑质和脊髓灰质前角DA能神经元数量和神经元内酪氨酸羟化酶阳性表达均明显减少,经天智颗粒5、2 g/kg干预后小鼠黑质和脊髓DA能神经元检测指标明显改善,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 天智颗粒可改善PD小鼠行为学,提高中脑黑质和脊髓部位DA能神经元及突起的存活数目,增加中枢神经系统内DA的含量,表明天智颗粒对黑质和脊髓灰质前角多巴能神经元具有保护作用。

经颅黑质超声与帕金森病诊断和临床的相关研究

本研究旨在对 PD 患者中脑黑质(SN)高回声区域与临床分期、相关临床症状及病情轻重的相关性进行分析,并探讨经颅黑质超声检查技术(TCS)在帕金森病(PD)诊断中的应用价值。方法 选用 GEVIID7 超声检测仪,通过对 192 例 PD 患者(研究组)和 182 例健康成人(对照组)TCS 扫描结果的比较研究,将 SN 回声强度划分为 I~V 级,测定当回声 ≥ III 级时黑质高回声区域,并将两组 SN 的回声结果进行对比;采用统一帕金森病量表(UPDRS)评分,结合Hamilton抑郁量表(HAMD)和Hamilton焦虑量表(HAMA)测定心理状况,经Hoehn-Yahr(H-Y)分期系统进行评估。同时,借助简易智力状态检查量表(MMSE)和Montreal认知评估量表(MOCA),全面评估受试者的认知功能,深入探索SN回声强度和高回声区域与临床特征的相关性分析。结果 共有181位PD患者被招募作为研究组,以及182位健康个体被招募为对照组。与健康对照组相比,PD患者中脑黑质回声阳性率及其SN高回声区域面积均有显著增加(P<0.05),H-Y分期、UPDRS总分、UPDRS I、UPDRS II、UPDRS III、HAMA、HAMD得分与中脑黑质高回声面积呈正相关(P<0.05);而UPDRS IV、UPDRS III改善率、MMSE量表、MoCA量表得分与黑质高回声面积无关(P>0.05)。结论 TCS方法在PD进行诊断时,已展现出一定的价值。此外,研究还揭示了中脑黑质高回声区域的大小与PD病情的严重程度、临床分期以及运动症状存在显著关联。

手抖别怕,经颅黑质超声来诊“帕”

小林因为母亲近几年手抖明显,带她到神经内科就诊.医生怀疑小林母亲为帕金森病或帕金森综合征,为其开具了“经颅黑质超声”检查,小林第一次听说这种检查项目,带着疑惑到了超声医学科.小林:“医生,您好!我母亲要做‘经颅黑质超声检查’.”

磁敏感成像联合经颅黑质超声对帕金森病具有良好诊断价值

目的 探讨磁共振磁敏感成像(SWI)联合经颅黑质超声(TCS)在帕金森病(PD)中的诊断价值。方法 选择2021年1月~2023年12月就诊于佛山市第一人民医院的PD患者42例作为PD组,选取同期43例健康志愿者作为对照组,两组均行SWI及TCS检查,观察中脑黑质部“燕尾征”消失情况,TCS中黑质高回声面积、中脑面积、黑质高回声/中脑面积比(S/M),分析组间差异;将差异有统计学意义的指标纳入多因素Logistic回归分析,筛选PD发生的独立预测因素并构建预测模型,通过列线图进行可视化。采用ROC曲线、校准曲线和决策曲线分析评价模型的区分度、校准度和临床实用价值。结果 PD组与正常组黑质高回声面积(P<0.001)、黑质高回声与中脑面积的比值(P<0.001)的差异有统计学意义。单纯SWI、TCS在鉴别PD组、对照组中的AUC值分为0.80(95%CI:0.716~0.886)、0.857(95%CI:0.774~0.940)。多因素Logistic回归分析显示黑质高回声面积、燕尾征是预测PD发生的独立风险因素。基于上述独立预测因素构建PD风险预测模型,AUC值为0.94(95%CI:0.896~0.984),校正曲线显示预测概率与实际概率具有良好的一致性。决策曲线分析显示预测模型较单一模型,体现出更高的净获益。结论 联合SWI和TCS定量指标的预测模型对PD发生风险具有良好的预测能力,预测效能高于任意单一指标,具有良好的临床实用性。

基于体素形态学分析探讨脑梗死远隔丘脑和黑质损害研究

目的探讨颅脑核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)体素形态学分析(voxel-based mor⁃phometry,VBM)对检测脑梗死患者远隔丘脑和黑质继发性损害的临床价值。方法前瞻性招募19例首次单侧大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)供血区脑梗死患者,在发病后1周、1个月、3个月分别行MRI三维全脑扫描,应用VBM方法分析丘脑和黑质体积的变化。结果VBM结果显示,与发病1周时相比,脑梗死患者在发病1个月和3个月时同侧丘脑体积减小(体素值分别缩小637 mm^(3)、1488 mm^(3),P<0.01),且体积萎缩部位主要位于丘脑背内侧核。同样,与发病1周时相比,脑梗死患者在发病1个月和3个月时同侧黑质体积减小(体素值分别缩小64 mm^(3)、76 mm^(3),P<0.05)。结论VBM技术可在脑梗死后1~3个月检测MCA供血区脑梗死患者同侧丘脑和黑质体积缩小,可用于检测其继发性损害。

黄芪提取物对帕金森病小鼠黑质区白介素-17通路的影响

目的:探究黄芪提取物干预白介素-17(IL-17)信号通路治疗帕金森病(PD)作用机制。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠均分为五组。除对照组之外均采用MPTP诱导PD模型,建模成功后,低、中、高浓度黄芪组分别以50、100、200 mg/kg黄芪提取物持续灌胃14 d,模型组和对照组采用等量0.9%氯化钠溶液灌胃。灌胃后结束后采用转棍实验和爬杆实验评估各组小鼠行为表现。免疫组化法测定各组脑黑质致密区(SNpc)酪氨酸羟化酶(TH)和Th17细胞数目;Western blot测定纹状体区IL-17、抗肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、核因子-κB(NF-κB)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,模型组和各浓度黄芪组小鼠转棍掉落潜伏期明显缩短,爬杆实验头向下时间(T1)、由杆顶爬至杆底所用时间(T-LA)明显延长,SNpc区TH表达水平下降,Th17细胞数目增多,纹状体区IL-17、TRAF-6、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2蛋白相对表达水平明显升高(均P<0.05)。与模型组比较,各浓度黄芪组小鼠转棍掉落潜伏期明显延长,爬杆实验T1和T-LA明显缩短,SNpc区TH表达水平升高,Th17细胞数目减少,纹状体区IL-17、TRAF-6、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2蛋白相对表达水平明显下降(均P<0.05),且与黄芪提取物浓度呈正相关。结论:黄芪提取物能有效改善PD模型小鼠转棍和爬杆活动能力,保护SNpc区TH阳性神经元,其机制可能与抑制IL-17/TRAF-6/NF-κB信号通路,减少多巴胺神经元炎症性损伤凋亡有关。

Mdivi-1通过修复黑质网状部线粒体改善肝性脑病小鼠运动功能

目的:探讨急性肝性脑病(AHE)模型小鼠中黑质网状部(SNr)的线粒体变化,以及线粒体分裂抑制剂Mdivi-1对AHE小鼠运动功能和SNr线粒体功能的影响。方法:使用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射构建小鼠的AHE模型并通过腹腔注射给予Mdivi-1处理,利用生化检测试剂盒检测小鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和血氨的变化,并进行旷场实验、转棒疲劳实验以及高架十字迷宫实验观察AHE小鼠的运动功能;电镜下观察SNr的线粒体结构变化,商品化试剂盒检测SNr的线粒体膜电位(MMP)以及细胞的活性氧(ROS)和ATP水平。结果:与对照组相比,AHE小鼠血清中的AST、ALT和血氨含量均增加;小鼠在旷场中的总运动距离减少,转棒疲劳实验以及高架十字迷宫实验中的运动时间均缩短;SNr的线粒体变小变圆、线粒体分裂增加,MMP降低,细胞ROS增加,ATP产生减少。使用Mdivi-1干预后,AHE小鼠血清中的AST、ALT和血氨含量均降低;小鼠在旷场中的总运动距离增加,转棒疲劳实验以及高架十字迷宫实验的运动时间均增多,SNr的线粒体变大、圆率降低,线粒体分裂减少,MMP增加,细胞ROS降低,ATP产生增多。结论:Mdivi-1可以通过修复AHE小鼠SNr的线粒体从而改善运动功能。

CB_(2)受体激活对慢性PD模型小鼠运动功能和黑质胶质细胞活化影响

目的通过行为学、免疫印迹技术及免疫组织化学技术探讨大麻素Ⅱ型(CB_(2))受体对1-甲基-4-苯基吡啶(MPTP)诱导的慢性帕金森病(PD)模型小鼠运动功能、黑质(SN)区酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达及小胶质细胞和星形胶质细胞活化的影响。方法将30只8周龄雄性C57BL/6野生型(WT)小鼠随机分为WT对照组(A组)、WT MPTP组(B组)、WTCB_(2)受体激动剂(JWH133)组(C组)、WT MPTP+JWH133组(D组)和WT MPTP+JWH133+CB_(2)受体拮抗剂(AM630)组(E组),12只8周龄雄性CB_(2)受体敲除(CB2-KO)C57BL/6小鼠随机分为CB_(2)-KO对照组(F组)和CB_(2)-KOMPTP组(G组)。模型组小鼠首先腹腔注射20μg/(kg·d)AM630和(或)10μg/(kg·d)JWH133,每天1次,连续注射30d;然后腹腔注射30mg/(kg·d)的MPTP,每周2次,持续4周。对照组小鼠腹腔注射等量的生理盐水。应用行为学实验检测各组小鼠爬杆与转棒时间,免疫印迹技术检测SN区TH蛋白的表达,免疫组织化学染色检测SN区小胶质细胞和星形胶质细胞数量和形态变化。结果与A组相比,B组小鼠爬杆时间增加,转棒时间减少;与B组相比,D组小鼠爬杆时间减少,转棒时间增加;与D组相比,E组小鼠爬杆时间增加,转棒时间减少;与F组相比,G组小鼠爬杆时间增加,转棒时间减少。上述差异具有统计学意义(F=29.70、45.45,q=4.87~18.09,P<0.05)。与A组相比,B组小鼠SN区TH蛋白表达水平下降;与B组相比,D组小鼠SN区TH蛋白表达水平上调;与D组相比,E组小鼠SN区TH蛋白表达水平下降;与F组相比,G组小鼠SN区TH蛋白表达水平下降。上述差异具有统计学意义(F=24.88,q=5.09~8.88,P<0.001)。小鼠SN区活化的小胶质细胞和星形胶质细胞计数显示,与A组相比,B组明显增加;与B组相比,D组明显减少;与D组相比,E组明显增加;与F组相比,G组明显增加。上述差异具有统计学意义(F=269.80、708.50,q=13.29~54.78,P<0.01)。结论激活CB_(2)受体能够改善MPTP诱导的慢性PD模型小鼠的运动功能障碍,抑制小鼠SN区小胶质细胞和星形胶质细胞的活化。

经颅超声检查黑质强回声结合血流动力学对帕金森病的临床诊断价值

目的探讨经颅超声(TCS)结合血流动力学对帕金森病(PD)的诊断价值。方法选取我院神经内科收治的68例PD患者(PD组)以及同期80例健康体检者(NC组),采用经颅超声联合经颅彩色多普勒超声检查,比较两组中脑黑质回声增强面积以及血流动力学特点的差异。结果PD组的单侧、双侧中脑黑质强回声面积以及黑质阳性率均高于NC组,差异无统计学意义(P>0.05)。经颅彩色多普勒测定的大脑中动脉(MCA)、基底动脉(BA)的舒张期血流速度(Vd)值小于NC组,大脑后动脉(PCA)和椎动脉(VA)的收缩期血流速度(Vs)值也小于NC组,而MCA、BA、VA的搏动指数(PI)、阻力指数(RI)均高于NC组。结论经颅超声可以对中脑黑质以及颅脑血管的血流动力学进行全面评估,进而为患者的早期诊断提供参考。

D-AP5对PD小鼠黑质多巴胺能神经元簇状放电影响

目的探究侧脑室注射D(-)-2-氨基-5-磷戊酸(D-AP5)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电的影响。方法将小鼠随机分为对照组、D-AP5组、MPTP组和D-AP5+MPTP组。采用电生理实验记录小鼠黑质区多巴胺能神经元的簇状放电百分比。结果析因设计方差分析显示,D-AP5和MPTP两者存在交互作用(FMPTP=4.601,P<0.05;FD-AP5=2.399,P>0.05;FMPTP×D-AP5=12.020,P<0.01)。单独效应分析显示,在未注射MPTP的两组小鼠中,D-AP5组小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电百分比与对照组小鼠相比差异无显著性(F=1.916,P>0.05);在注射MPTP的两组小鼠中,D-AP5+MPTP组小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电百分比较MPTP组明显降低(F=12.094,P<0.01)。结论侧脑室注射D-AP5可降低MPTP模型小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电百分比。

靶向抑制黑质网状部GABA能神经元的DRP1改善肝性脑病小鼠运动功能

目的:探讨黑质网状部(SNr)的GABA能神经元中线粒体分裂对急性肝性脑病(AHE)小鼠运动障碍的影响。方法:利用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射制备AHE小鼠模型,通过苏木精-伊红(HE)染色观察AHE小鼠肝小叶的变化,利用生化检测试剂盒检测AHE小鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和血氨的变化。接下来通过转棒疲劳实验、高架十字迷宫实验、旷场实验观察AHE小鼠运动功能。进一步利用透射电镜观察分析AHE小鼠SNr的线粒体面积、周长、圆率等形态学指标的变化,Western Blot观察AHE小鼠SNr的线粒体分裂融合相关分子的表达变化。接下来,利用重组腺相关病毒(AAV)靶向调控AHE小鼠SNr的线粒体动力相关蛋白1(DRP1)的表达,在荧光酶标仪上检测SNr的线粒体膜电位(MMP)、细胞的ATP和活性氧(ROS),并观察小鼠运动功能的变化。结果:较对照组,AHE小鼠运动功能明显降低,SNr的线粒体分裂明显增强,线粒体分裂相关蛋白表达显著升高;AHE小鼠SNr的MMP显著下降,细胞的ATP下降,ROS升高。靶向抑制AHE小鼠SNr的DRP1表达后,运动改善;进一步观察发现,AHE小鼠SNr的线粒体分裂被抑制后,MMP显著升高,细胞的ATP升高,ROS下降,证明线粒体功能明显改善。结论:靶向抑制AHE小鼠黑质网状部GABA能神经元的线粒体分裂,可以改善线粒体形态和功能,从而缓解其运动障碍。

基于SyMRI弛豫定量分析和QSM预测早期帕金森病患者脑黑质微结构变化的临床价值研究

目的探讨合成磁共振成像(synthetic magnetic resonance imaging,SyMRI)和定量磁化率成像(quantitative susceptibility mapping,QSM)在预测早期帕金森病(Parkinson's disease,PD)脑黑质(substantia nigra,SN)微结构变化的临床应用价值。材料与方法前瞻性纳入于我院就诊的Hoehn-Yahr分级为1~2.5级的30例早期PD受试者并作为PD组,同时选取30例健康受试者作为健康对照(healthy control,HC)组。所有受试者均行颅脑SyMRI和QSM扫描。提取SyMRI弛豫定量图和QSM图,测量各定量图SN的T1值、T2值、质子密度(proton density,PrD)值和QSM值。采用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验比较PD组与HC组SN的T1值、T2值、PrD值、QSM值的组间差异;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析各定量参数及联合诊断模型的诊断效能;采用DeLong检验比较曲线下面积(area under the curve,AUC)的差异;采用Spearman相关系数分析PD组SN的各个弛豫定量值与QSM值的相关性。结果PD组与HC组SN的组间T1值、T2值、PrD值、QSM值差异有统计学意义(P<0.001)。T1值、T2值、PrD值、QSM值以及T1-T2-PrD-QSM联合诊断模型鉴别PD组和HC组的AUC值分别为0.872、0.788、0.749、0.838和0.930。T2值与联合诊断模型、PrD值与联合诊断模型、QSM值与联合诊断模型的AUC值差异有统计学意义(P值分别为0.007、0.004、0.034);T1值与QSM值呈正相关(r=0.436,P=0.016),T2值与QSM值呈负相关(r=-0.364,P=0.048),PrD值与QSM值呈负相关(r=-0.393,P=0.032)。结论基于SyMRI和QSM在SN的定量分析对诊断早期PD具有良好的诊断价值,能够为早期PD SN微结构变化提供不同的定量反馈,并且弛豫定量值和QSM值的联合诊断模型能够使诊断效能进一步提升,可为早期PD的诊断提供客观、定量的影像学指标。

芍药甘草汤对帕金森病模型大鼠脑黑质多巴胺能神经元保护机制的研究

目的 研究芍药甘草汤对帕金森病(PD)模型大鼠脑黑质多巴胺能神经元凋亡的影响及调控机制。方法 大鼠分为正常组、假手术组、PD模型组、PD+芍药甘草汤组和PD+美多芭组。采用6-OHDA诱导构建PD大鼠模型,造模成功后,PD+芍药甘草汤组大鼠灌胃芍药甘草汤(12 g/kg)、PD+美多芭组大鼠灌胃美多芭(20 mg/kg),连续治疗28 d。采用APO诱发的旋转行为实验和平衡杆实验分析芍药甘草汤对大鼠行为的影响;采用HE染色分析对脑黑质区组织形态的影响;采用免疫组化检测Th、Bcl-2和Bax的表达;采用荧光定量PCR和Western blot检测IL-1β、TNF-α、NFκB p65的表达变化。结果 与正常组比较,PD模型组大鼠的旋转次数、潜伏时间和通过平衡杆的时间显著增加(P<0.05),脑黑质形态异常,多巴胺能神经元的标志物Th的表达显著降低(P<0.05),炎症因子IL-1β、TNF-α的表达显著提高(P<0.05),转录因子NFκB的核转移显著增多(P<0.05),脑黑质中Bax的表达显著提高(P<0.05),脑黑质中Bcl-2的表达显著降低(P<0.05)。与PD模型组比较,PD+芍药甘草汤组干预治疗可显著减少大鼠的旋转次数,缩短潜伏时间并减少通过平衡杆的时间(P<0.05),改善PD诱发的脑黑质形态异常,增加多巴胺能神经元的标志物Th的表达(P<0.05),抑制炎症因子IL-1β、TNF-α的表达,减少转录因子NFκB的核转移(P<0.05),减弱脑黑质中Bax的表达(P<0.05),增强脑黑质中Bcl-2的表达(P<0.05)。结论 芍药甘草汤对PD大鼠脑黑质多巴胺能神经元具有保护作用,其机制可能是通过抑制黑质区炎症反应,减少多巴胺能神经元的凋亡。

经颅黑质超声检查及MRI在帕金森病诊断评估中的价值分析

目的 探讨经颅黑质超声检查及MRI在帕金森病诊断评估中的价值。方法 选取我院帕金森病患者121例设为观察组、同期健康体检者121例设为对照组,均接受经颅黑质超声检查及MRI检查,统计观察组与对照组、观察组不同Hoehn-Yahr分级患者经颅黑质超声参数[黑质高回声总面积和中脑总面积比值(S/M)、黑质高回声面积]及MRI参数[中脑直径、黑质致密带宽度(WPCSN)、WPCSN/中脑直径],分析经颅黑质超声检查及MRI参数与Hoehn-Yahr分级的相关性。结果 观察组S/M、黑质高回声面积高于对照组,WPCSN、WPCSN/中脑直径低于对照组(P<0.05)。观察组不同Hoehn-Yahr分级患者S/M、黑质高回声面积、WPCSN、WPCSN/中脑直径间差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman检验证实S/M、黑质高回声面积与Hoehn-Yahr分级呈正相关性,WPCSN、WPCSN/中脑直径与Hoehn-Yahr分级呈负相关性(P<0.05)。结论 通过经颅黑质超声检查及MRI检查可明确帕金森病患者颅脑特征,且不同Hoehn-Yahr分级帕金森病类型患者经颅黑质超声检查及MRI参数存在差异。

外侧下丘脑与黑质致密部多巴胺能神经元的纤维投射

目的 研究黑质致密部(SNpc)多巴胺能神经元是否接受外侧下丘脑(LH)的纤维投射。方法 使用逆行示踪剂、转基因小鼠和顺向病毒示踪技术探究LH与SNpc的投射关系。在C57BL/6雄性小鼠(8周龄)的SNpc区注射逆行示踪剂霍乱毒素亚基-B结合荧光素488(CTB-488),1周后制备冷冻脑切片,应用Olympus VS120荧光显微镜观察LH脑区CTB-488阳性神经元。在TH-Cre转基因雄性小鼠(8周龄)的LH注射顺向跨突触病毒AAV-hSyn-Flp-WPRE-hGH,在SNpc注射AAV-hSyn-Con/Fon-EYFP-WPRE-hGH,3周后灌注取脑并切片,观察SNpc和纹状体(Str)区EYFP阳性细胞及纤维。结果 逆行示踪实验表明,CTB-488注射后可在LH区观察到CTB-488阳性神经元,提示LH可能是SNpc的上游脑区。顺向病毒追踪实验结果显示,在小鼠SNpc观察到明显的EYFP阳性神经元且在Str可观察到EYFP阳性纤维,提示LH支配SNpc的多巴胺能神经元。结论 LH是SNpc的上游脑区,并支配SNpc的多巴胺能神经元。

Exendin-4对小鼠黑质网状部神经元自发放电影响

目的探究胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂Exendin-4对小鼠黑质网状部神经元自发放电的影响。方法采用免疫荧光染色观察GLP-1受体(GLP-1R)在小鼠黑质网状部的表达。使用在体电生理微电极注射10μmol/L的Exendin-4到小鼠黑质网状部神经元表面,观察黑质网状部非多巴胺能(假定为γ-氨基丁酸能)神经元的自发放电变化。结果免疫荧光染色结果显示,小鼠黑质网状部有GLP-1R的高表达。在所记录到的13个黑质网状部神经元中,Exendin-4可显著降低其中9个神经元的自发放电,其放电频率由加药前(18.62±3.19)Hz降低到(14.615±3.06)Hz,差异有显著性(t=7.257,P<0.05);其放电频率平均降低(21.85±7.72)%,较生理盐水组的(1.15±9.67)%显著升高(Z=2.282,P<0.05)。在另外的4个黑质网状部神经元中,Exendin-4对放电频率无明显影响,其放电频率由(13.49±7.16)Hz变为(13.54±7.45)Hz,差异无显著性。结论Exendin-4能降低部分黑质网状部神经元的自发放电频率。

脂多糖注入黑质对大鼠黑质纹状体单胺类递质和行为的影响

目的 探讨脂多糖 (L ipopolysaccharide,L PS)对大鼠行为学和黑质纹状体单胺类递质的影响。方法 采用立体定位注射 5μg L PS入大鼠脑黑质 ,在不同时间点观察大鼠注射阿朴吗啡后的旋转行为学 ,及采用HPL C测定黑质纹状体单胺类递质的含量变化。结果 L PS注射后 14、2 1、3 0 d,大鼠出现向注射侧的旋转行为 ,在黑质和纹状体 ,DA及其代谢产物随时间改变呈不同程度下降 (P<0 .0 5) ,而 5-HT仅有短暂下降 ,NA无变化。结论 L PS注入黑质特异性损害 DA能神经元 ,可降低黑质纹状体 DA及其代谢产物含量 。