百草枯对小鼠黑质纹状体多巴胺能系统的影响

目的 探讨百草枯对小鼠黑质纹状体通路的影响。方法 将 39只新生C5 7BL小鼠随机分为 5组 ,分别于出生后第 10、11天每天喂食单剂量MPTP、百草枯和生理盐水。 (1)MPTP 0 .3mg/kg组 ,n =8;(2 )MPTP2 0mg/kg组 ,n =8;(3)百草枯 0 .0 7mg/kg组 ,n =8;(4 )百草枯 0 .36mg/kg组 ,n =8;(5 )等量生理盐水 /kg组 ,n =7。正常饲养至 4月龄观察小鼠自发性行为的变化 ,采用HPLC测定各组小鼠纹状体中多巴胺 (DA)、5 羟色胺 (5 HT)及其代谢产物含量 ,免疫组化方法检测中脑黑质细胞数量的变化。结果 MPTP 2 0mg/kg组及百草枯 0 .36mg/kg组C5 7BL小鼠的自发性活动减少 ,纹状体中DA及其代谢产物含量降低 ,中脑黑质细胞数量减少。结论 新生期的C5 7BL小鼠暴露于大剂量的百草枯可产生类似于帕金森病 (PD)的行为 。

磁共振扩散张量成像用于多系统萎缩患者黑质纹状体投射的初步研究

目的探讨MR扩散张量成像(DTI)部分各向异性分数值(FA)在多系统萎缩(MSA)诊断中的价值。方法对12例临床确诊的MSA患者和10例正常人行头颅常规MRI和DTI扫描,使用3.0T MR机和自旋回波-回波平面成像序列,b值为1000s/mm2,扩散敏感梯度方向为25。测量所有受试对象的双侧苍白球、壳核、尾状核头及黑质外1/3处的FA值,并作统计学分析。结果常规MRI见4例在T2像上壳核显示裂隙状高信号,其中1例合并T2像上壳核和尾状核弥漫信号增高。3例示桥脑及小脑严重萎缩,1例合并桥脑类“十”字形的T2像上高信号改变,另2例示小脑蚓部及半球中度萎缩。4例可见轻-中度额叶及颞叶萎缩。病变组FA值在苍白球及黑质外1/3处均明显低于对照组,而在尾状核头部的FA值与对照组无显著差异,在壳核高于对照组。结论常规MRI对MSA的诊断价值有限。MSA患者在黑质纹状体投射局部的FA值较正常人下降,提示其存在的病理改变。DTI可在活体无创地评价黑质纹状体投射的病变,有较高的应用价值和潜能。

脂多糖注入黑质对大鼠黑质纹状体单胺类递质和行为的影响

目的 探讨脂多糖 (L ipopolysaccharide,L PS)对大鼠行为学和黑质纹状体单胺类递质的影响。方法 采用立体定位注射 5μg L PS入大鼠脑黑质 ,在不同时间点观察大鼠注射阿朴吗啡后的旋转行为学 ,及采用HPL C测定黑质纹状体单胺类递质的含量变化。结果 L PS注射后 14、2 1、3 0 d,大鼠出现向注射侧的旋转行为 ,在黑质和纹状体 ,DA及其代谢产物随时间改变呈不同程度下降 (P<0 .0 5) ,而 5-HT仅有短暂下降 ,NA无变化。结论 L PS注入黑质特异性损害 DA能神经元 ,可降低黑质纹状体 DA及其代谢产物含量 。

人参再造丸联合美多巴对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响

目的 :观察人参再造丸联合美多巴对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响。方法 :PD鼠 80只 ,随机分为 4组 :对照组、美多巴组、人参再造丸组、人参再造丸联合美多巴组。于喂养 4个月后取黑质纹状体组织免疫组化染色 ,检测TH阳性神经元的分布、密度。结果 :美多巴组黑质TH阳性神经细胞及纹状体TH阳性终末较生理盐水组明显减少 ,而人参再造丸组略有增多达5 %～ 8% ,联合组增多较显著达 2 0 %～ 2 5 %。结论 :人参再造丸对PD大鼠黑质纹状体毒性作用较轻 ,人参再造丸联合美多巴可改善TH阳性神经元的病理改变。

MPTP对快速老化小鼠黑质纹状体系统的急性损害及小胶质细胞的激活

目的:探讨MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)对快速老化小鼠(senescence accelerated mouse prone8,SAMP-8)黑质纹状体系统的急性损害及小胶质细胞激活与损害的关系。方法:57只健康雄性12周龄SAMP8小鼠,随机分为生理盐水对照组和MPTP组,每组再分别于第1次给药后6h、24h、3d和8d四个时间点处死小鼠,每个时间点6～9只。SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP20mg·kg-1,1次/2h,注射4次,观察各时间点小鼠的自主活动;免疫组织化学染色检测各时间点黑质TH+神经元数量、纹状体TH免疫反应性及小胶质细胞的状态;HPLC技术检测纹状体DA含量。结果:第3次注射后小鼠出现明显活动减少,并于第1次给药后48h恢复近正常水平。与对照组相比:MPTP组黑质TH+神经元数目于第1次注射后6h、24h、3d、8d分别减少7.06%(P=0.235)、12.79%(P<0.05)、22.49%(P<0.01)、42.39%(P<0.001),两个时间点之间比较3d与8d有统计学差异(P<0.05);与对照组相比,MPTP组纹状体TH免疫反应性(COD值)减低,6h(P<0.05)、24h(P<0.01)、3d(P<0.001)、8d(P<0.001),两个时间点之间比较24h与3d比较差异有统计学意义(P<0.05);纹状体多巴胺含量6h降低79.09%(P<0.001),24h降低80.3%(P<0.001),3d降低86.6%(P<0.001),8d降低81.0%(P<0.001),但24h、3d、8d比较无统计学差异。纹状体小胶质细胞于给药后24h免疫反应性明显增强,3d明显激活,8d激活现象明显回落。结论:MPTP可导致SAMP8小鼠黑质纹状体系统的急性损害,出现自主活动减少、黑质多巴胺能神经元减少及纹状体多巴胺能纤维脱失,多巴胺含量降低;小胶质细胞激活可能与MPTP-SAMP8小鼠的黑质纹状体系统损伤有关。

拟除虫菊酯对大鼠黑质纹状体系统内酪氨酸羟化酶的影响

目的 探讨拟除虫菊酯对大鼠黑质纹状体多巴胺能系统中酪氨酸羟化酶 (TH)的影响。方法 采用不同剂量的溴氰菊酯 (DM)、氯菊酯 (PM)对雄性SD大鼠经口灌胃给药后 ,高效液相色谱 -荧光检测法(HPLC FD)分别检测其黑质、纹状体内多巴胺 (DA)及其主要代谢产物多巴克 (DOPAC)和高香草酸 (HVA)含量 ;HPLC FD方法检测TH活性 ;免疫组化以及RT PCR技术分别检测各组黑质、纹状体内的TH蛋白量及mRNA量。结果 给药各组大鼠纹状体中DA含量都有不同程度的下降 ,且 1 1 0LD50 DM组与对照组相比差异有显著性 ,DOPAC和DA更新率与对照组相比变化不大 ,差异无显著性 ;DM组黑质和纹状体中TH酶活性与mRNA水平与对照组相比 ,均有不同程度的下降 ,且差异有显著性 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 ) ;1 1 0LD50 DM组纹状体内的TH蛋白水平与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1 )。结论 DM暴露可以引起大鼠黑质纹状体系统中TH活性。

帕金森病小鼠和大鼠模型黑质纹状体中胆绿素还原酶B的表达

目的探讨胆绿素还原酶B(biliverdin-Ⅸβreductase,BVRB)在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phe-nyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)帕金森小鼠模型和6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)帕金森大鼠模型黑质-纹状体内的表达。方法通过高效液相色谱的方法检测纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量,通过免疫印迹的方法检测黑质纹状体内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达,以确认模型的成功建立。对黑质纹状体BVRB的表达进行免疫印迹分析。结果与正常对照组相比,MPTP小鼠及6-OHDA大鼠模型纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量均明显下降(P<0.01),黑质纹状体内TH表达水平也明显下降(P<0.05),而黑质纹状体BVRB的表达水平在两种模型中均明显增高(P<0.05)。结论黑质纹状体BVRB的高表达可能与帕金森病的氧化应激机制相关。

出生后早期接触狄氏剂对ICR小鼠黑质纹状体GFAP表达的影响

目的评价出生后早期低剂量狄氏剂(Dieldrin)暴露对青春期和成年期ICR小鼠黑质纹状体胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平的影响。方法仔鼠自出生后(PND)随机分成5个剂量组,即狄氏剂处理组(20、2、0.2μg/kg)、溶剂对照组(DMSO)和生理盐水对照组(NS),于出生后第3天进行腹腔注射染毒,隔天1次,连续6次。分别于青春期和成年期处死一批动物,用Western blot法检测黑质纹状体GFAP的表达情况。结果小鼠出生后早期接触低剂量狄氏剂可引起黑质纹状体GFAP蛋白水平呈剂量依赖性增高,除了0.2μg/kg组和2μg/kg青春期雌鼠组外,其它剂量组均显著升高GFAP蛋白水平,且成年期明显高于青春期。结论出生后早期接触低剂量狄氏剂可引起黑质纹状体GFAP进行性升高。

3.0T磁共振SWI序列对帕金森病黑质纹状体相位值及体积变化的初步研究

帕金森病（Parkinson’s disease,PD）又称震颤麻痹,是一种中老年人常见的进行性中枢神经系统退行性疾病。PD病理学主要以黑质（sustantian-igra,SN）区域多巴胺能（dopamine,DA）神经元变性死亡、缺失从而导致黑质体积的缩小为主要特点,化学病理学研究发现,

百草枯及其与代森锰、鱼藤酮联合暴露对小鼠黑质纹状体多巴胺能系统的影响

目的探讨百草枯(PQ)及PQ与代森锰(MB)、鱼藤酮(R)对小鼠的联合暴露与帕金森病(PD)病因的关系。方法将48只健康清洁级5周龄昆明种小鼠随机分为生理盐水组(Saline组)、助溶对照组(Z组)、PQ(5 mg/kg)组、PQ(5 mg/kg)+MB(15 mg/kg)组、PQ(5 mg/kg)+R(0.8mg/kg)组、PQ(5 mg/kg)+MB(15 mg/kg)+R(0.8 mg/kg)组,每组8只。采用腹腔注射方式进行染毒,染毒剂量为10 ml/kg,每周染毒2次,连续染毒6 w。采用爬杆试验和开阔试验检测小鼠运动行为的变化;对SNc区域进行组织病理学观察和神经元细胞计数;荧光分光光度法检测纹状体(Caudate putamen,CPu)脑区中DA的含量。结果单独PQ暴露的小鼠没有引起黑质-纹状体(SN-CPu)通路的病理性改变;而PQ与MB或R的联合暴露仅导致SNc区域的病理变化,没有引起CPu中DA含量和行为学上的改变;PQ、MB及R三者的联合暴露可引起SN-CPu通路的改变(P<0.05),但是没有导致小鼠产生临床上类PD症状。结论成年小鼠低剂量亚慢性的PQ暴露不会引起SN-CPu通路的损伤,而和其他环境毒物共同作用下会对SN-CPu的DA能系统产生一定的影响。

MPTP处理的SAMP8小鼠黑质纹状体损伤中血红素加氧酶-1的表达变化

目的:研究1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)诱导6月龄快速老化小鼠(SAMP8)黑质纹状体急性损伤,以及血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化,探讨其与MPTP导致的SAMP8小鼠黑质纹状体系统损害的关系。方法:给6月龄健康雄性SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP 20mg/(kg.次),连续注射4次,每次间隔2 h;对照组注射等量生理盐水。在注射后6 h、24 h、3 d和8 d处死小鼠留取脑组织标本,用免疫组织化学技术检测小鼠黑质、纹状体的酪氨酸羟化酶(TH)和HO-1,以计数黑质多巴胺能神经元数量及其投射纤维的改变,及HO-1阳性细胞的变化;用Westernblot方法检测TH和HO-1蛋白表达的变化。结果:MPTP致6月龄SAMP8小鼠各时间点TH阳性神经元分别减少14.23%(P<0.05),23.85%(P<0.01),36.77%(P<0.01),45.9%(P<0.01),24 h与3 d比较有显著性差异(P<0.05),神经元的丢失以24 h至3 d最为显著;MPTP组随时间延长纹状体区酪氨酸羟化酶免疫反应阳性染色逐渐变浅淡,不均匀,于注射后24 h明显,第8天最为浅淡;同时TH蛋白表达具有相同变化。但仅在注射后3 d小鼠纹状体区见到大量HO-1阳性细胞,同时HO-1蛋白表达增高,具有统计学意义,其余各时间点及对照组未见HO-1阳性细胞。中脑区HO-1阳性细胞及蛋白表达在各时间点均未见显著变化。结论:MPTP导致6月龄SAMP8小鼠黑质纹状体系统急性损伤,产生多巴胺能神经元数量减少及蛋白表达降低;其黑质纹状体HO-1的高表达是一过性短暂的,它在PD中的作用是有限的。

抗帕颗粒对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响

目的 :观察抗帕颗粒对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响。方法 :帕金森病(PD)大鼠 80只 ,随机分为 4组 :对照组、美多巴组、抗帕颗粒组、抗帕颗粒联合美多巴组。于喂养 4个月后取黑质纹状体组织免疫组化染色 ,检测TH阳性神经元的分布、密度。结果 :美多巴组黑质TH阳性神经细胞及纹状体TH阳性终末较生理盐水组明显减少 ,而抗帕颗粒组增多 2 0 %～ 3 0 % ,联合组增多最显著达 40 %～5 0 %。结论 :抗帕颗粒可改善PD大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的病理改变 ,抗帕颗粒联合美多巴治疗效果明显。

补肾活血颗粒对帕金森病模型大鼠黑质纹状体bcl-2、bax表达的影响

目的探讨补肾活血颗粒对帕金森病模型大鼠黑质纹状体中B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,bcl-2)、bax表达的影响。方法 33只雄性SD大鼠随机分为生理盐水正常组、6-羟基多巴胺模型组和补肾活血颗粒治疗组,应用免疫组织化学染色技术观察大鼠黑质纹状体中bcl-2、bax表达的变化情况。结果模型组bcl-2在黑质和纹状体的细胞阳性表达率增殖指数(proliferation index,PI)分别为0.43±0.022、1.14±0.057,均低于正常组(均P<0.01)和治疗组(均P<0.01)。模型组bax在黑质和纹状体的PI值分别为2.07±0.104、2.86±0.143,均高于正常组(均P<0.01)和治疗组(均P<0.01)。结论补肾活血颗粒治疗帕金森病的疗效机制可能与上调帕金森病大鼠黑质纹状体系统bcl-2蛋白表达及下调bax蛋白表达有关。

扩散峰度成像技术在帕金森患者黑质纹状体区的临床价值

目的探讨扩散峰度成像(DKI)技术在特发性帕金森患者黑质纹状体区的临床价值,分析其与临床进展的相关性。方法选取我院经临床确诊为帕金森病的患者35例为观察组,收集同期我院就诊的健康对照人群20例为对照组,所有受试者均在3.0 T磁共振成像机上进行MRI常规扫描、DKI序列扫描,在后处理的DKI序列上分别测量双侧黑质(SN)区的平均弥散分度值、各向异性分数值、轴向峰度值、径向峰度值。比较两组平均弥散分度、各向异性分数、轴向峰度、径向峰度均值,寻找各脑区存在差异的影像学指标。将观察组患者分为帕金森早期组(n=13)及进展期组(n=22),寻找DKI中平均弥散分度、各向异性分数值与临床病程进展有无相关性。结果观察组双侧黑质平均弥散分度均数值较对照组明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);各向异性分数值较对照组减小,差异具有统计学意义(P<0.05);轴向峰度、径向峰度值差异无统计学意义(P>0.05)。早期帕金森组和进展期帕金森组双侧黑质平均弥散分度及各向异性分数值与临床病程、分级均未发现显著相关性(P>0.05)。结论DKI参数中平均弥散分度值及各向异性分数值可以成为神经退化过程的早期生物标志物。DKI中平均弥散分度、各向异性分数值暂不适用评估帕金森患者病情进展程度。

DTI观察帕金森病患者黑质纹状体改变应用研究

目的:采用DTI研究帕金森病(Parkinson disease,PD)患者与对照组多个脑区各向异性分数(FA值)的差异。方法:收集2010年6月至2013年5月37例PD,其中男24例,女13例;随机选取22例健康志愿者作为对照组。PD患者采用Hoehn-Yahr分级,分为Ⅰ和Ⅱ级20例,Ⅲ和Ⅳ级17例;均行常规MRI扫描及DTI序列扫描,在所得FA图像上测量黑质纹状体各核团(双侧尾状核头、壳核、黑质)的FA值,确定各组有差异的FA值脑区。结果:PD组与对照组双侧尾状核头、壳核、黑质FA值差异有统计学意义(P<0.05);其中早期PD患者黑质FA值与中晚期PD组差异有统计学意义(P<0.05);早期PD患者尾状核头、壳核FA值与中晚期PD组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DTI技术作为一种无创研究PD患者黑质纹状体生理改变的方法,提示黑质纹状体部位的FA值改变可能是诊断PD的线索。

脑血管病变对黑质纹状体通路的损伤和机制

帕金森综合征（Parkinsonism）是由以运动迟缓为主的一组临床症候群，主要表现为震颤、肌僵直、运动迟缓和姿势不稳等，其病理生理基础是黑质纹状体通路异常。帕金森综合征病因复杂多样，近年来，脑血管病变对帕金森综合征发病的影响逐渐受到重视。本文将对脑血管病变对黑质纹状体通路的损伤和机制进行综述，以便理解脑血管病变与帕金森综合征的之间的关系。

过表达Nurr1人羊膜间充质干细胞对帕金森病大鼠黑质纹状体的保护作用研究

目的探讨过表达核相关受体因子1(Nurr1)人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)对帕金森病(PD)大鼠黑质纹状体的保护作用。方法构建Nurr1真核过表达载体,选取20只PD大鼠并分为Nurr1组(转染过表达Nurr1的hAD-MSCs)和阴性对照组(转染含阴性对照质粒的hAD-MSCs),每组各10只。另外选取10只正常大鼠作为生理盐水组。观察各组大鼠行为学变化;qRT-PCR和Western blot检测黑质纹状体Nurr1、多巴胺转运体(DAT)、α-突触共核蛋白(α-syn)表达;免疫组化检测黑质纹状体酪氨酸羟化酶(TH)表达;HE染色观察黑质纹状体病理形态;Tunel染色检测黑质纹状体细胞凋亡。结果与生理盐水组相比,Nurr1组与阴性对照组各时间段旋转次数及持续时间增加,黑质纹状体Nurr1、DAT mRNA及蛋白表达均降低,TH蛋白表达降低但α-syn表达上调,病理特征明显且细胞凋亡率升高(P<0.05)。与阴性对照组比较,Nurr1组大鼠各时间段旋转次数及持续时间显著减少,黑质纹状体Nurr1、DAT mRNA及蛋白表达均上调、TH蛋白表达上调但α-syn表达降低、病理状况改善且细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论过表达Nurr1人羊膜间充质干细胞治疗PD大鼠,能够改善其病理症状,同时提高黑质纹状体DAT及TH含量,减少细胞凋亡。

针刺调节大鼠在脑卒中痉挛状态下黑质纹状体内相关神经兴奋-抑制因子受体的研究

目的:探究针刺对脑卒中痉挛状态(SCA)大鼠大脑黑质纹状体中神经兴奋-抑制因子(Glu-GABA)含量与表达的调节作用,从而论证针刺对SCA的治疗作用。方法:32只SD大鼠被随机分为针刺组、空白组、假手术组、模型组。运用线栓法制作大脑中动脉缺血模型,造模成功后第1天开始治疗,连续3d。以Zealonga评分评价模型和针刺疗效,首先通过酶联免疫法检测大鼠大脑黑质中Glu、GABA的含量,然后运用RT-PCR法检测黑质中mGluR1a、GABABR1 mRNA的表达。结果:治疗前,与空白组、假手术组比较,模型组、针刺组Zealonga评分显著升高(P<0.01);治疗后,与模型组比较,针刺组较评分显著降低(P<0.01)。与空白组、假手术组比较,模型组GABA含量显著降低而Glu含量显著升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,针刺组GABA含量升高而Glu含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。与空白组、假手术组比较,模型组GABABR1 mRNA的表达显著减少而mGluR1a mRNA表达显著增强(P<0.01);与模型组比较,针刺组GABABR1 mRNA表达增强而mGluR1a mRNA表达减弱(P<0.05)。结论:针刺可调节大脑黑质中Glu和GABA的表达使其逐渐接近正常水平,说明了针刺对SCA有良好的治疗效果。