龙牙百合褐斑病病原的鉴定、生物学特性及室内药剂筛选

为明确龙牙百合褐斑病病原,采集龙牙百合褐斑病典型症状的叶片,进行病原物分离、纯化和致病性测定,结合病原菌形态学观察及其rDNA-ITS、gapdh、tef1、RPB2和Alt a1等基因的序列分析,确定引起龙牙百合褐斑病的病原菌为枝状链格孢Alternaria arborescens。采用菌丝生长速率法,测定了光照、温度、pH值、碳源、氮源和不同培养基等处理对该病原菌生长的影响,并测定了病原菌对7种杀菌剂的敏感性。结果表明,最适合菌丝生长的条件为温度25℃,pH值5.0,碳源为蔗糖,氮源为牛肉浸膏,培养基为马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基;菌落致死温度为50℃。在7种参试药剂中,木霉菌抑制作用最强,其半数效应浓度(EC_(50))和90%效应浓度(EC_(90))值最低,分别是8.758×10^(-5)和0.198 mg·L^(-1);噁唑菌酮代森锰锌的毒力最低,EC_(50)和EC_(90)值分别为13.713和816.937 mg·L^(-1)。本研究结果为龙牙百合褐斑病菌的精准防控提供了理论依据。

龙牙百合病虫草害综合防控技术规范

针对长期以来生产中龙牙百合抗病性差、病虫害发生率逐年提高、连作障碍严重等问题,本文作者开展了系统研究与实践总结,集成了龙牙百合病虫草害综合防控技术,以期为百合种植者提供参考。

枯草芽孢杆菌Y25对龙牙百合生长及其根际土壤微生物群落的影响

为明确芽孢杆菌Y25灌根对百合连作根际土壤微生物群落结构的影响,为减轻百合连作障碍提供技术和理论依据。以湖南省邵阳市隆回县百合种植基地连作3年以上进行3种不同处理,不种植百合空白处理(BG);种植百合但不用菌剂灌根处理(CK);种植百合且用Y25菌剂灌根处理(Y25)。探究3种不同处理对土壤理化性质和微生物群落结构的影响,同时对百合进行病情调查,统计分析不灌根与灌根处理对百合病情和生长的影响。与对照组(CK)相比,芽孢杆菌灌根处理后龙牙百合的株高、茎粗、鲜重以及产量均有提高,且百合枯萎病防治效果高达65.86%。此外,根际土壤中总磷、铵态氮、硝态氮、速效钾、速效磷、有机磷含量均显著增加。PCoA结果显示,施用芽孢杆菌后细菌群落结构发生显著变化,而真菌群落结构未发生显著变化。Y25菌剂灌根处理后根际土壤微生物的相对丰度也发生变化,其中拟杆菌门、绿弯菌门、放线菌门的相对丰度提高,疣微菌门、壶菌门相对丰度显著降低,γ-变形菌纲(未确定)以及芽孢杆菌属的相对丰度显著增加。枯草芽孢杆菌Y25可以改善土壤理化性质,使得根际土壤有益微生物的相对丰度增加,进而促进龙牙百合生长及有效防治病害。

土壤镉对龙牙百合生长过程中生理生化特性的影响

为探究土壤不同含量Cd对龙牙百合生长及其生理生化指标的影响,设置对照(无Cd)、低(0.86 mg·kg^(-1))、中(2.16 mg·kg^(-1))、高(4.76 mg·kg^(-1))Cd含量的盆栽实验进行研究。结果表明:随着土壤Cd含量的增加,龙牙百合植株的生长量和叶片中叶绿素含量呈上升趋势;龙牙百合各部位Cd含量分布为下盘根>叶>地上茎>地下茎>上盘根>鳞茎,各处理下鳞茎Cd含量最低,最安全。在中浓度Cd处理下,百合下盘根的富集能力大于上盘根。土壤Cd浓度增加显著提高了龙牙百合鳞茎向地下茎的转移系数(P<0.05)。百合叶、地上茎、鳞茎和下盘根的丙二醛含量在高浓度Cd处理下分别显著提高了11.72%、11.31%、133.72%和79.37%(P<0.05),而超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性整体随Cd含量升高呈先上升后下降趋势。研究表明,龙牙百合有较强的耐Cd能力。

栽培模式对龙牙百合种植地土壤微生物多样性的影响

为了降低龙牙百合栽培过程中农药的使用量,提高龙牙百合的产量和品质,设置空白地、地膜覆盖+一次性施肥种植模式(PM+OTF)与传统露地栽培模式(OFC)3个处理,对不同处理土壤中的细菌、真菌多样性进行比较,分析种植模式的改变对龙牙百合地下部生长微生物环境的影响。结果表明,PM+OTF模式的土壤真菌群落丰富度较OFC模式低,但群落多样性不存在显著差异;2种栽培模式土壤的细菌丰富度及多样性不存在显著差异。PCA主成分分析表明,PM+OTF模式的土壤微生物群落结构组成更接近空白地。土壤真菌与细菌群落组成分析显示,2种栽培模式在门水平上的微生物多样性不存在显著性差异;但细菌的被孢霉属(Aquisphaera)、芽孢杆菌属(Bacillus)、嗜酸栖热菌属(Acidothermus)等存在显著差异(P<0.05),真菌的珊瑚菌属(Clavaria)、踝节菌属(Talaromyces)、莫蒂埃菌属(Mortierella)、绿核菌属(Ustilaginoidea)、镰刀菌属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)等存在显著差异(P<0.05)。从产量来看,与OFC模式相比,PM+OTF模式增产10.5%,优品率提高31.9%,叶面病害显著降低。综合分析,地膜覆盖+一次性施肥种植模式具有控制和减轻龙牙百合病害发生的潜力。

龙牙百合褐斑病菌梨黑斑链格孢生物学特性及室内药剂筛选

目的:明确龙牙百合褐斑病菌梨黑斑链格孢的生物学特性及其对不同杀菌剂的敏感性,为防治该病害提供理论依据。方法:采用菌丝生长速率法,探究龙牙百合褐斑病病原菌梨黑斑链格孢在不同培养环境及不同营养条件下的生物学特性;同时,选用8种常用的杀菌剂,测定对梨黑斑链格孢的抑制活性。结果:梨黑斑链格孢菌丝生长的合适条件为:温度25℃(菌株的致死温度为50℃),pH值为7,自然光光照,PDA培养基,碳源为可溶性淀粉,氮源为胰蛋白胨。供试的8种杀菌剂中,木霉菌对该病原菌的抑菌效果最好,EC_(50)为4.125×10^(-7)mg/L,12.5%烯唑醇的抑菌效果较差,EC_(50)为24.853 mg/L。结论:梨黑斑链格孢在较低温度下能生长,pH适应范围较广,不利于其生长的碳源和氮源分别为乳糖、硝酸钾;木霉菌、异菌脲等对该病原菌的毒力较高,可为龙牙百合褐斑病的田间防治试验提供参考。

龙牙百合鳞茎生长点石蜡切片技术改良研究

为了准确观测龙牙百合鳞茎生长点的生长分化过程,以龙牙百合冷藏期间的鳞茎为试验材料,在传统石蜡制片法的基础上,对脱水、透明等步骤进行优化并筛选了最佳的甲苯胺蓝染色方法。试验获得的百合鳞茎生长点石蜡切片制作改良方法为:将百合鳞茎剥开鳞片至可观察到茎尖生长点,修整为5mm大小的立方体投入FAA固定液中,保存一周;用85%乙醇(2 h)、95%乙醇(2h)、100%乙醇(3h)进行脱水处理,再用二甲苯与乙醇等比例溶液(2h)、纯二甲苯(3h)进行透明处理;将透明好的材料放入石蜡+二甲苯溶液(体积比2∶3)中,在37℃的恒温箱中浸蜡2d,期间多次少量加入石蜡;之后在60℃恒温箱更换纯石蜡2次,每次4 h,浸蜡后的材料在60℃的操作台上包埋,再切成厚10μm的薄片,待蜡片完全伸展,将蜡片粘于均匀涂抹了赫伯特粘片剂的载玻片上,37℃烤片5h,脱蜡复水后用1%甲苯胺蓝染液稀释150倍染色3min。

隆回龙牙百合主要病虫发生特点与绿色防控技术

【目的】调查研究龙牙百合病虫害发生种类、主要病虫害的发生规律及绿色防控技术。【方法】经定点调查和大面积不定期普查,研究探索或引进绿色防控技术。【结果】隆回龙牙百合非侵染性病害主要有缺锌、缺铁,常因误诊造成大面积僵苗,侵染性主要有病毒病、疫病、灰霉病、细菌性软腐病等;虫害主要有蚜虫、螨类、金龟子、金针虫。通过多年来的探索发现采用生态控制、施用生物菌剂、结合深耕整地合理轮作、科学合理用药、灌根与喷雾相结合等绿色防控措施,可有效控制病虫害的发生,保障百合品质与产量。

龙牙百合大叶种组织培养再生体系研究

为了保护和繁殖地方百合优势变种,以龙牙百合大叶种的鳞片为研究对象,采用植物组织培养技术,研究外植体不同取材部位和HgCl2处理时间的灭菌效果以及不定芽诱导培养、不定芽增殖培养、小鳞茎生根培养的适宜培养基,探讨并建立植株再生体系。结果表明:龙牙百合大叶种进行组织培养时,外植体取材以鳞茎中层鳞片为宜,适宜的灭菌方法为75%乙醇浸泡30 s+30%NaClO处理10 min+0.1%HgCl2浸泡12 min,污染率为12.83%,成活率为85.50%;不定芽诱导适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L时,诱导率为81.17%,分化系数为6.34;不定芽增殖适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系数为6.11;小鳞茎生根适宜培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L,生根数为11.3条,生根率达到100.00%。

3种药剂防治龙牙百合炭疽病田间药效试验

百合炭疽病等病害的防治难题,一直以来严重影响隆回龙牙百合产业的发展,长期单一用药会导致病菌抗性上升快,在病害的防治中需轮换使用药剂。为筛选理想药剂,探索最佳使用量,该试验选择3种防治药剂,采用不同浓度在湖南隆回县开展田间防治试验。结果显示,各药剂处理对百合炭疽病均具有一定的防治效果,无药害现象,其中450 g/L咪鲜胺水乳剂防治效果较好,每亩制剂用量26.7、35.5 mL,第2次喷施药剂后14天防治效果分别为80%、82.5%。

油茶幼林地套种龙牙百合栽培技术初探

百合具有润肺止咳、宁心安神、亮肤养颜的功效,深受消费者喜爱。油茶幼林地套种龙牙百合栽培模式,百合每667 m^(2)产量1356 kg、产值33900元、净产值18900元;此外,油茶生育期长,种植4年后开始有收益,在此期间种植1茬百合可提高土地利用效率,经济效益显著。该文从茬口安排、播种、田间管理、病虫害防治、采收等方面介绍了油茶幼林地套种龙牙百合技术。

湖南花瑶文化元素在龙牙百合包装设计中的应用

“花瑶挑花”是湖南省隆回县虎形山瑶族女子中流传的一种独特的手工艺,瑶族因女子筒裙上装饰有艳丽的挑花而被人称为“花瑶”。本文以湖南花瑶挑花的审美特征和文化内涵为现实依据,分析花瑶挑花的图案、色彩、文化内涵和寓意,并结合当地瑶族地区的龙牙百合农特产品包装设计现状,论述花瑶挑花图案的价值,进而分析花瑶挑花图案在农特产品包装设计中应用的可行性。笔者在此基础上,提出花瑶挑花图案的活态化应用是在新发展理念之下非物质文化遗产传承的重要方式,凸显地域文化是农特产品包装设计的新发展趋势。

龙牙百合的植株再生与遗传转化

以龙牙百合鳞片叶切块为外植体 ,通过多种培养基的比较试验 ,得出MS +2 ,4 -D 2mg/L +6 -BA0 2mg/L是诱导愈伤的最佳培养基 ,MS +6 -BA 1mg/L +NAA 0 0 5mg/L是不定芽诱导及伸长的适宜培养基。MS +NAA 2mg/L是生根的最佳培养基。本试验已建立了适用于龙牙百合遗传转化的快速高频再生系统。用携带有几丁质酶基因和 β - 1、 3葡聚糖酶基因的工程菌 ,通过农杆菌介导法和基因枪转化法转化龙牙百合 ,经PCR和点杂交检测证明外源基因已经整合到植物染色体中。同时对农杆菌介导法和基因枪法进行比较 ,发现农杆菌介导法的转化率为 16 7% ,基因枪法的转化率为 5 0 % ,因此可能基因枪转化法更适于龙牙百合的遗传转化。

龙牙百合的研究进展

龙牙百合(Lilium brownii var.viridulum Baker)是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生草本植物,是野百合(Lilium brownii)的变种,为我国三大食用百合之一,具有重要的食用、药用和观赏价值。从资源分布与栽培、药食用价值、繁殖技术、病虫害发生与防控等方面对龙牙百合的研究进展进行综述,同时,对龙牙百合抗病育种、病虫害生物防治及深加工等方面的研究进行了展望。

应用细胞工程技术选育四倍体龙牙百合的研究

用二倍体龙牙百合鳞片为外植体，培养在添加２，４Ｄ，６ＢＡ的ＭＳ培养基上，诱导愈伤组织、不定牙与小鳞茎分化，建立了二倍体的体细胞无性系。用浓度００２％～００５％的秋水仙碱或再加２％～４％的二甲基亚砜溶液处理二倍体小鳞茎、鳞片与愈伤组织均诱导出变异试管苗，通过多代筛选与增殖培养首次获得了变异苗无性系，选育出同源四倍体龙牙百合，其染色体数目为４８（２ｎ＝４ｘ＝４８）。同源四倍体苗粗壮，叶片宽而厚，小鳞茎增殖速度快，小鳞茎所含核酸、蛋白质、氨基酸、淀粉、脂肪。

龙牙百合茎尖脱毒快繁及种球培育技术

当龙牙百合鳞茎在58℃下处理10-20min，再在40℃下处理72h；茎尖大小为0．2～0.4mm时的诱导成活率达60％～66．7％。继代增殖培养基为MS＋1．0mg／LBA＋0．1mg／LNAA时，其增殖系数是3．36。培养基中4．5％～5．5％的食用糖和60d的培养时间利于鳞茎数量和质量的增加。移栽后的小鳞茎培育8个月可达鲜重22g／个以上的脱毒种球。

龙牙百合内生拮抗灰葡萄孢菌细菌的筛选与鉴定及发酵条件优化

采用平板分离法、平板对峙法从龙牙百合内生菌中筛选获得了具有抑制灰葡萄孢菌活性的98号菌,其抑菌率为74%;对98号菌进行生理生化测定及16SrDNA序列分析,鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德菌(Burkholderia gladioli)。通过单因素和正交试验优化该菌株的发酵条件和最适发酵培养基配方,结果表明,pH值为7、培养温度为32℃、接种量为发酵液体积的6%、250 mL三角瓶装100 mL牛肉膏蛋白胨液体发酵培养基、180 r/min的摇床培养5 d,其抑菌活性最大;优化后的最适培养基配方为硫酸亚铁0.15 g、玉米粉20 g、牛肉膏15 g,水1 L。

龙牙百合体细胞胚的诱导及植株再生

以龙牙百合鳞片为外植体,以MS为基本培养,通过添加不同浓度的6-BA,2,4-D,研究了其体细胞胚发生的最佳培养条件,并对体细胞胚的发生过程进行了形态学观察。结果表明:影响龙牙百合体细胞胚发生方式的因素是2,4-D。当2,4-D浓度低于0.5 mg/L时,体细胞胚以直接方式发生,起源于鳞片表皮下数层细胞或深层的细胞,依次经过多细胞原胚,球形胚,心形胚,成熟胚等阶段,其形态学发育过程与合子胚相似。当2,4-D浓度适中时,体细胞胚以间接方式发生,起源于愈伤组织内部的胚性细胞团,其形态学发育过程也与合子胚相似;诱导胚性愈伤组织的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,在分化形成体细胞胚时,需降低或去除2,4-D。

龙牙百合多糖的纯化及其分子量的测定

本研究用DEAE-sepharose Fast Flow柱从百合水提物中分离纯化得到两种多糖LLP1、LLP2,经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定LLP1为单一组分、LLP2为糖蛋白,将这两种多糖进行气相色谱分析。结果如下:LLP1由甘露糖、葡萄糖和阿拉伯糖组成,分子量为11756D,LLP2由半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖组成,分子量1038773D。