龙眼肉调节肠道菌群和BDNF-TrkB通路抗AD的作用机制研究

目的:基于肠道菌群和脑源性神经营养因子(BDNF)-酪氨酸激酶受体B (TrkB)信号通路探讨龙眼肉抗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:采用煎煮法制备龙眼肉水提取物,采用D-半乳糖(140 mg·kg–1,ip)/AlCl3(20 mg·kg–1,ig)联合诱导建立小鼠AD模型,Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,16S-rDNA测序检测小鼠粪便菌群多样性,Western blot检测小鼠海马区淀粉样前体蛋白(APP)、磷酸化Tau蛋白(p-Tau)、BDNF、TrkB和p-TrkB表达。结果:龙眼肉缩短了AD小鼠的逃避潜伏期(P<0.01);增加了其平台穿越次数、停留时间和停留时间百分比(P<0.001);降低了AD小鼠海马APP、p-Tau蛋白水平(P<0.05);改变了AD小鼠粪便微生物在界、门、纲、目、科、属、种7个层面上的多样性差异,以属水平为例,使异常升高的拟普雷沃菌属、瘤胃球菌科_UCG-014属、普雷沃氏菌科_UCG-001属、理研菌科RC9_gut_group属、瘤胃梭菌属和瘤胃球菌属_1丰度显著降低(P<0.05),鼠杆菌属和毛螺菌科_UCG-001属丰度显著升高(P<0.01);并且提高了BDNF、p-TrkB及p-TrkB/TrkB相对表达(P<0.05)。结论:龙眼肉可以改善AD小鼠的学习记忆能力,调节菌群多样性、激活BDNF-TrkB信号通路可能是其抗AD的作用机制。

基于超高效液相色谱-串联质谱法的一测多评法同时测定龙眼肉中8种核苷类成分含量

目的 基于超高效液相色谱-串联质谱法,建立一测多评法同时测定龙眼肉中腺苷、鸟嘌呤、尿嘧啶、鸟苷、尿苷、次黄嘌呤、肌苷、胞苷含量的方法 。方法 待测样品经甲醇提取,由Agilent SB-C18色谱柱(150 mm×2.1 mm, 1.8μm)分离,以0.1%甲酸-甲醇溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.2 mL/min,采用电喷雾正电离源模式(electronic spray ion, ESI+)和多反应监测模式(multiple reactions monitoring, MRM)监测,分别采用外标法和一测多评法进行定量。结果 腺苷在0.305~6.100μg/mL、鸟嘌呤在0.435~8.700μg/mL、尿嘧啶在0.340~6.800μg/mL、鸟苷在0.325~6.500μg/mL、尿苷在0.320~6.400μg/mL、次黄嘌呤在0.330~6.600μg/mL、肌苷在0.305~6.100μg/mL、胞苷在0.360~7.200μg/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数大于0.991,检出限为0.1μg/g,回收率为99.5%,相对标准偏差为0.46%(n=9)。采用外标法和一测多评法计算鸟嘌呤、腺苷、尿嘧啶、鸟苷、尿苷、胞苷的含量,两种方法 计算结果 差异极小。结论 一测多评法稳定可靠,可用于龙眼肉中核苷类成分的质量控制。

长期冰冻贮藏对龙眼肉多酚含量及抗氧化活性的影响

以广西产22个品种龙眼肉为研究对象,采用福林酚法测定不同品种龙眼肉的多酚含量,利用1,1‐二苯基‐2‐三硝基苯肼(1,1‐diphenyl‐2‐picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、2,2′‐联氮‐双‐3‐乙基苯并噻唑啉‐6‐磺酸[2,2′‐azinobis(3‐ethylbenzothiazoline‐6‐sulfonic acid),ABTS]阳离子自由基清除能力、铁离子还原能力法测定其抗氧化活性,并研究长期冰冻贮藏前后多酚含量和抗氧化活性的变化。研究结果表明,不同品种龙眼肉之间多酚含量差异明显,鲜品中大乌圆多酚含量最高,畹町多酚含量最低,分别为84.83、6.74 mg/g,两者之比为12.59。冰冻贮藏5个月后,冻品中多酚含量最高和最低的品种分别为龙优和西贡1号。对比研究长期冷冻贮藏前后多酚含量变化发现,灵龙和畹町冷冻前后多酚含量基本不变,均在7 mg/g左右,其余品种均明显下降。其中下降最明显的前3个品种为大乌圆、早熟广眼和泰国热带,分别下降92.17%、91.87%和90.38%。与鲜品早熟广眼、青皮石硖相比,鲜品大乌圆具有更好的抗氧化活性。长期冰冻条件下,龙眼肉对ABTS+自由基清除能力和对铁离子还原能力均下降,对DPPH自由基清除能力增加。综上,龙眼肉鲜品多酚含量高、抗氧化能力强。

龙眼肉多糖对Aβ诱导耐受的小胶质细胞吞噬功能的影响及其机制

目的探究龙眼肉多糖(LAPs)对Aβ诱导耐受的小胶质细胞(BV2)吞噬功能的影响及其机制。方法采用4μmol·L^(-1)Aβ处理(48+24)h诱导细胞成为耐受模型,使用LAPs 0.8、1.6 mg·mL^(-1)进行干预。MTT法检测细胞增殖,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,倒置荧光显微镜观察细胞吞噬功能及mTOR抑制剂(Rapa)和HIF-1α抑制剂(BAY)对LAPs作用的影响,Western blot检测PI3K、Akt、p-Akt及HIF-1α蛋白表达。结果经Aβ处理的BV2细胞增殖率和目的蛋白表达提高,线粒体膜电位和细胞吞噬能力降低(P<0.05,P<0.01);LAPs能逆转上述指标变化,并且其提高吞噬功能的作用可被抑制剂阻断(P<0.05,P<0.01)。结论LAPs能提高Aβ诱导耐受的BV2细胞吞噬功能,作用途径可能与其促进耐受BV2细胞的增殖、提高其线粒体膜电位水平有关,并涉及PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α信号通路的激活。

龙眼肉的食疗价值及其开发利用前景

龙眼是我国南方的特色大宗水果,种植面积大,约有80万公顷。其假种皮-龙眼肉的营养价值高,是历史悠久的知名的滋补食品。随着龙眼果肉中的有效成分及保健机理被人们逐渐认识,龙眼肉的开发利用前景将更为广阔。

龙眼肉提取液抗自由基及免疫增强作用的实验研究

用小鼠肝匀浆体外实验及体内实验研究龙眼肉提取液的抗衰老作用。结果显示,该提取液在试管内可抑制小鼠肝匀浆过氧化脂质(LPO)的生成。体内实验证实,高浓度实验组动物血中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活力有显著升高,LPO及超氧化物歧化酶(SOD)活力未见改变。胸腺及淋巴结组织切片特殊染色(ANAE测定)显示,实验组动物的T细胞检出率显著升高。证明龙眼肉提取液具有一定的抗自由基作用及提高细胞免疫功能的作用。

龙眼肉生理功效和活性成分的研究进展

龙眼肉具有抗衰老、增强免疫力、抗肿瘤、调节内分泌、抑菌等多种生理功效,龙眼多糖是其中起作用的活性成分之一。本文综述了龙眼肉生理功效及龙眼多糖等活性成分的研究进展。

响应面试验优化龙眼肉多糖乙酰化工艺及其抗氧化活性

对龙眼肉多糖进行乙酰化修饰最佳工艺研究,采用乙酸酐法制备乙酰化龙眼肉多糖,以取代度为指标,采用响应面法对工艺条件进行优化,并研究乙酰化龙眼肉多糖的体外抗氧化活性。结果显示,龙眼肉多糖的最佳乙酰化条件为:乙酸酐-多糖物质的量比(投料比)10.2∶1、反应温度42℃、反应时间30 min。该工艺条件下龙眼肉多糖乙酰化取代度达到0.443。乙酰化龙眼肉多糖能够清除羟自由基、抑制脂质过氧化以及H2O2诱导的红细胞溶血,半数抑制浓度(IC50)分别为702.41、646.04μg/m L和380.11μg/m L,表现出比未修饰龙眼肉多糖更强的抗氧化活性。

热风微波干燥龙眼肉工艺的优化

针对龙眼肉原料受热不均匀和微波干燥速率过快与局部过焦的问题,尝试在干燥前将原料均匀涂抹经过适度加热的玉米调和油,然后再进行热风微波干燥,旨在通过降低微波干燥的加热速度来提高龙眼肉的生产效率和产品品质。文中建立了具体的感官评价体系,从功率密度、加热方式、初始含水率3个方面分析添加油脂膜的龙眼肉在微波干燥过程中的颜色变化、干燥速率变化、感官评价变化。实验找到了经油脂涂膜处理的龙眼肉在热风微波干燥工艺的优化点:4W/g功率、微波10s间歇40s、初水分含量50%～60%、食用油脂含2%～4%。与未使用任何预处理的热风微波干燥龙眼肉相比较,该工艺可以得到更加良好的品质,且保质期在6m。

气调干制对龙眼肉干燥速度及干制品品质的影响

用CO2,N2气体置换干燥室空气作为干燥介质,采用自行研制的小型气调干燥机实验设备对龙眼肉的干燥进行对比实验,探讨了气调干制对龙眼肉干燥速度及干制品品质的影响。结果表明:龙眼肉采用气调干制,可显著提高干制品的Vc保存率和还原糖质量分数;在气体的O2含量降低状态下,充N2气体气调干燥具有较高的干燥速度,制品质量最好,复水率最高。

龙眼肉及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳法鉴别

目的 :对龙眼肉及其混淆品进行蛋白多肽电泳鉴别。方法 :高效毛细管电泳法。结果 :龙眼肉及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳谱图有明显的差异。结论 :高效毛细管电泳可作为中药龙眼肉的生药鉴别方法。

龙眼肉水提物对东莨菪碱痴呆大鼠学习记忆的影响

目的探讨龙眼肉水提物对东莨菪碱所致学习记忆获得性障碍大鼠学习记忆能力的影响及其可能的作用机制。方法将50只雄性大鼠随机分5组,连续灌胃21 d。第16天开始进行Morris水迷宫行为学测试,测试前20 min,除空白组ip生理盐水(NS)外,其余各组均ip东莨菪碱溶液,第21天采集血清、海马和脑皮质标本,检测各组各标本中抗氧化的能力相关指标。结果与空白组比较,模型组有明显的学习记忆障碍,各标本的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽性氧化物歧化酶(GSH-Px)活性显著下降,丙二醛(MDA)含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,龙眼肉水提物各组均能明显改善痴呆大鼠的学习记忆障碍,显著提高各标本SOD和GSH-Px活性,明显降低MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论龙眼肉水提物对东莨菪碱所致大鼠学习记忆获得性障碍有明显的改善作用,其作用机制可能与其抗氧化作用密切相关。

响应面法优化龙眼肉微波真空干燥工艺

干燥是贮藏龙眼肉最有效的方法,本文采用响应面分析法(RSM)优化龙眼肉微波真空干燥工艺参数。以龙眼果肉为原料,采用中心组合试验设计,考察微波强度(2.0~10.0 W/g)和真空度(-55^-85 kPa)2个主要因子对干燥时间、产品色度、多糖含量和单位能耗4个指标的影响。以最短干燥时间、最大色度、最大多糖含量以及最小单位能耗为目标确定龙眼肉微波真空干燥最优工艺参数。结果表明,龙眼肉微波真空干燥最优工艺为:微波强度4 W/g,真空强度-85 kPa。在此条件下,其干燥时间、产品色度、多糖含量以及单位能耗分别为18 min,28.82,19.09%和16.45 kJ/g。

火焰原子吸收光谱法测定龙眼肉中微量元素

用微波消解龙眼肉样品,火焰原子吸收光谱法测定样品中钙、镁、铁、铜、锌、锰微量元素的含量,该方法的加标回收率在98.40%—100.59%范围,相对标准偏差(RSD)≤1.68%,测定结果准确。为研究龙眼肉的药理、药效提供了有用的数据。

龙眼肉乙醇提取物对雌性大鼠垂体-性腺轴的作用

目的 :观察龙眼肉乙醇提取物对大鼠垂体 -性腺轴的作用。方法 :龙眼肉乙醇提取物给大鼠ip。 2 5g·kg- 1 ·d- 1 、5g·kg- 1 ·d- 1 ,共 1 0天 ,颈总动脉取血 ,用放射免疫法测定大鼠血浆中FSH、E2 、P、LH、T、PRL的含量。结果 :龙眼肉乙醇提取物明显降低雌性大鼠血浆中PRL、E2 、T的含量 (P <0 0 1 ) ,增加其FSH、P的含量 (P <0 0 1 )。但是对LH的含量无影响。结论 :龙眼肉乙醇提取物明显影响大鼠垂体 -性腺轴的内分泌机能。

龙眼肉醇提取物对东莨菪碱所致学习记忆获得性障碍大鼠学习记忆的影响

目的:探讨龙眼肉醇提取物(ALE)对东莨菪碱所致学习记忆获得性障碍大鼠学习记忆的影响及其可能的作用机制。方法:将50只雄性大鼠随机分5组,连续灌胃21 d。第16天开始采用Morris水迷宫进行行为学测试,测试前20 min,除空白组腹腔注射生理盐水外,其余各组均腹腔注射东莨菪碱溶液,连续6 d。第21天测试结束后采集血清、海马和脑皮质标本,检测各组各标本中抗氧化能力相关指标。结果:与空白组比较,模型组有明显的学习记忆障碍,各标本超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著下降,丙二醛(MDA)含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,ALE各组均能明显改善大鼠的学习记忆障碍,显著提高各标本SOD和GSH-Px活性,明显降低MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论:ALE对东莨菪碱所致大鼠学习记忆获得性障碍有明显的改善作用,其作用机制可能与其抗氧化作用密切相关。

鲜龙眼肉挥发性化学成分的GC/MS分析

利用GC/MS技术对鲜龙眼肉的挥发性化学成分进行了分析,分离出38个组分,鉴定出苯并噻唑、苯并异噻唑、新戊酸6-苎烯脂等27种化合物。

龙眼肉理化指标与两类贮藏库温度积的动态分析

目的:探究简易库与冷藏库中龙眼肉理化指标的变化及其与温度积的相关性。方法:日光下观察龙眼肉的外观,烘干法测定水分,高效液相色谱(HPLC)法测定5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量。采用温度积分析其对5-HMF含量的影响。结果:简易库的温度积呈缓急交替上升趋势,冷藏库的温度积直线上升。简易库中的龙眼肉从3个月开始析出糖分并质地变硬,冷藏库中的龙眼肉出现轻度的黏软现象,两库中龙眼肉的水分含量呈下降趋势。龙眼肉在0月时5-HMF的含量为0.001031 mg·g^(-1),在之后的27个月内,5-HMF含量均逐渐升高,且简易库中的含量值是冷藏库对应值的2.7~4.6倍。结论:龙眼肉中5-HMF含量的升高与贮藏库的温度积变化趋势具有一致性,首次提出温度积的概念,用于分析中药在贮藏环节中化学成分的变化规律。

龙眼肉干制过程氨基酸组分分析

利用氨基酸自动分析仪分别测定加工前后的龙眼肉中的总氨基酸和游离氨基酸含量。结果,干制前后龙眼肉的氨基酸种类没有差别,但含量有明显差别,多数氨基酸的含量在干制后明显下降。结论:除丙氨酸和甲硫氨酸外,干制后的龙眼肉中的总氨基酸和游离氨基酸含量比干制前有明显下降,其中以碱性、酸性氨基酸含量的下降尤其显著。该差异可能是由于干制过程中发生美拉德反应造成的。

龙眼肉干品中活性物质的提取工艺优化及抗氧化作用研究

采用正交试验研究了影响龙眼肉干品中活性物质提取率的因素,通过DPPH法测定活性物质清除自由基的能力。试验结果表明,以龙眼肉干品(含水量13.62%)为原料,采用80℃热水、料水比1∶12提取2 h,龙眼多糖提取率为40.28%,总可溶性固形物提取率达73.24%;此外,龙眼肉干品提取物具有较强的抗氧化活性,其清除DPPH自由基的IC50为2.2 g/L。