牛结节性皮肤病病毒ORF123基因缺失重组病毒的构建及增殖能力分析

旨在通过缺失牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF123基因,分析其增殖能力,为LSDV ORF123功能研究奠定基础。本研究利用同源重组,以ORF123基因作为靶标,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,采用融合PCR方法,扩增同源左右臂序列以及EGFP基因表达框,克隆至pUC-19T载体,构建基因缺失转移载体pH5-LSDVΔORF123-EGFP质粒。然后将pH5-LSDVΔORF123-EGFP质粒转染至Vero细胞,并感染LSDV/CHA/FJ/2021毒株,利用蚀斑、梯度稀释和挑取绿色荧光单克隆细胞筛选纯化重组毒株,并鉴定其遗传稳定性和增殖能力。结果显示,利用EGFP筛选标记,通过多次挑斑筛选纯化获得ORF123基因缺失的重组病毒株LSDVΔORF123-EGFP。该重组病毒至少在8代细胞传代中能稳定表达绿色荧光蛋白,接种MDBK细胞后绘制一步增殖曲线表明该重组病毒滴度略低于亲本毒株。本研究成功获得ORF123基因缺失的重组病毒株LSDVΔORF123-EGFP,为LSDV ORF123蛋白生物学功能研究以及减毒活疫苗的研制奠定基础。

CD123表达的儿童急性淋巴细胞白血病的临床特征及预后分析

目的研究儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)中CD123的表达情况及其对急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿临床特征及预后的影响。方法回顾性分析2019年12月—2022年6月昆明医科大学附属儿童医院血液肿瘤科收治的251例ALL患儿的临床资料。根据初诊CD123表达情况,分为CD123^(+)组与CD123^(-)组,比较两组的临床特征及疗效,并分析影响预后的因素。结果251例ALL患儿中,CD123^(+)146例(58.2%),B-ALL患儿CD123阳性表达率高于急性T淋巴细胞白血病患儿(P<0.05)。相较于CD123^(-)组,CD123^(+)组初诊时外周血白细胞计数、幼稚细胞百分比更低,更易合并超二倍体染色体核型,1~10岁患儿比例更高,不易合并E2A-PBX1融合基因(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型分析结果显示,相较于>10岁组,1~10岁组B-ALL患儿总生存率更高(P<0.05);相较于高危组,中危组B-ALL患儿无事件生存率更高(P<0.05)。结论CD123在B-ALL患儿中广泛表达,CD123阳性表达可能为儿童B-ALL预后良好的指标,对评估B-ALL患儿诱导缓解治疗及生存预后具有重要意义。

细粒棘球绦虫EgM123基因的原核表达与免疫原性检测

为了验证EgM123表达蛋白的免疫原性功能,建立犬细粒棘球绦虫EgM123基因的原核表达和蛋白纯化体系,为EgM123蛋白单克隆抗体制备与基因重组疫苗的研制提供研究基础。本试验通过构建EgM123基因原核蛋白表达载体及其蛋白表达条件优化、利用亲和层析方法对表达蛋白进行纯化、SDS-PAGE(聚丙烯酰氨凝胶电泳)和Western blotting(蛋白质印迹)试验对表达蛋白的分子量和免疫原性进行检测,并通过间接酶联免疫吸附(ELISA)方法对所表达的EgM123蛋白的抗原功能进行验证。本试验通过菌液聚合酶链式反应(PCR)扩增和双酶切验证成功构建EgM123基因原核蛋白表达载体;优化出最佳诱导条件为37℃、表达时间为7h下表达量最高;Western blotting显示其在28KDa处均有特异性条带;ELISA显示纯化后的蛋白能很好的与EgM123多克隆抗体结合。上述结果表明EgM123表达蛋白极具免疫原性,可用于免疫BALB/c小鼠制备EgM123单克隆抗体。

基于“123”课堂体系的高职定向军士工匠型人才培养模式研究

军士生作为士兵队伍的主体力量,是现代化队伍中的必备的高端技能。为建设现代化工匠型军士队伍,培养“留得住、用得上、打的赢”的高素质军士人才,提高军士生培养质量,以“123课堂体系”为抓手,探索高职定向军士工匠型人才培养模式,为高职院校工匠型军士培养教育提供参考。

“形势与政策”课“123”教学模式探索

“形势与政策”课是高校思想政治理论课的重要组成部分,在教学过程中存在着学生抬头率不高,教学效果不佳,教学形式单一,教师队伍建设水平有待提升等问题。因此,创新“形势与政策”课教学方式,从教学内容、教学方法和教学手段等方面进行积极的探索,形成“123”教学模式,对于提升课程的实效性和针对性具有积极的理论和现实意义。

达沙替尼对靶向CD123的CAR-T治疗AML及不良反应的控制作用1例报告及文献复习

目的 初步探索靶向CD123的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells, CAR-T)治疗复发急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)的效果及达沙替尼对靶向CD123的CAR-T治疗AML引起的不良反应的效果。方法 收集第九二○医院血液科2019年9月收治的1例复发AML患者资料,患者既往多线化疗后复发,入组接受靶向CD123的CAR-T治疗。观察患者治疗后的血象变化,出现粒细胞缺乏时使用达沙替尼(40 mg口服,每8小时1次),粒细胞缺乏缓解即停用达沙替尼。观察患者治疗期间血象变化、CAR-T扩增及疾病控制情况。随访时间超过1年。结果 患者骨髓流式检测微小残留病在CAR-T回输第30天转阴,输注CAR-T细胞后患者无病生存1年。患者回输靶向CD123 CAR-T细胞后观察到CAR-T细胞显著扩增的同时出现粒细胞缺乏及细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome, CRS),在使用达沙替尼后CAR-T细胞扩增受抑制并伴随血象恢复,CRS症状缓解,停止使用达沙替尼后CAR-T细胞再次扩增且血象再次下降。结论 靶向CD123的CAR-T细胞对复发AML有一定疗效,初步显示达沙替尼对CAR-T细胞的扩增和功能具有关闭作用,并可缓解靶向CD123的CAR-T治疗引起的骨髓抑制,避免严重CRS发生。

基于TI TM4C123的激光追踪系统设计

针对激光目标追踪易丢失、实时性差的问题,该文设计基于德州仪器的TM4C123芯片作为主控的激光目标控制系统与自动追踪,V831摄像头模组作为目标位置反馈测量装置,以二维闭环步进电机云台作为运动输出。摄像头模组通过串口与TM4C主控通信实时反馈目标点位置,使用PID控制算法控制电机输出。同时通过磁编码反馈防止步进电机丢步,实现位置闭环控制,实验结果表明,系统追踪精度高,实时性好。

以“积极向学123”模式提升农村小学生学习内驱力的实践研究

农村小学由于办学条件、教学水平等原因,仍面临发展困难。如何提升小学生学习内驱力成为农村小学教育工作者必须面对的紧迫任务。文章结合农村小学教育现状和小学生成长特点,从教学实践出发,立足提升学生内驱力,促进学生核心素养发展,积极探索教育新模式,提出以“积极向学123”模式,探索农村小学生行为习惯养成的新方法、新途径。

高职英语课程敬业价值观“123”培育模式构建探究

以高职英语课程为载体培育敬业价值观,要遵循产教融合这一规律,校企合作,为高职英语敬业价值观培育提供坚强有力的教学指导,引企入教,为高职英语敬业价值观培育提供恰当丰富的教学内容,邀企评教,为高职英语敬业价值观培育提供科学有效的教学评价;要辐射课程两大模块,发挥基础模块的主要作用,释放拓展模块的辅助作用;发挥“三教”改革作用,打造创新型教师团队,落实培育任务,建设数字化教学资源,丰富培育内容,探索实践性教法改革,提升培育实效,形成符合高职英语教学特点、具有高职英语育人特色的“123”培育模式。

“123”教学模式下的大学英语教学探析

大学英语课程是本科类专业的公共基础学科,传统教学模式存在教学分离、学生重视程度不够和学生学习的积极主动性较差等现状,加之近些年来在疫情影响下,大学英语的网课质量就更加没法保障,就以上存在的问题结合自己教学经验,对此提出了“123”新型大学英语的教学模式,即“1”指“一个宗旨”,提高学生主动学习英语的积极性,“2”指“两个依托”,提高大学生四六级、大学生英语竞赛的通过率,“3”指“三个全面”,全面培养学生的英语综合应用能力,全面提升大学英语教学的课堂教学质量,全面提升学生跨文化交际与思辨能力,通过这个新的教学模式,融入课程改革设计,达到提升学生学习英语积极性、加强学生人文素养的培养以及提高学生的自主学习能力和交际能力的目的。

疫情防控常态化背景下高职院校“123”学生管理机制的创新与研究

在常态化疫情防控的背景下,全国大多数的院校都采取封校管理、线上课程、 暂缓返校、外地学生进校隔离、多轮核酸检测、一天三测、增加消毒环节等多种举措,以减少疫情在校园传播的概率。然而,在严格、繁锁的防疫工作下,高职院校学生管理工作中逐渐出现一些衍生问题,例如学生容易产生焦虑、恐慌等负面情绪,对于日常习惯的教学模式的改变使学生的厌学情绪较高,对校园生活兴趣较低等。面对疫情防控常态化将持续下去,高职院校各相关部门、二级学院及辅导员等一线工作者,在 2022 年度乃至以后学生具体事务管理工作中贯彻执行“一主线,双统筹,三保障”(即以“三全育人”理念为主线,疫情的精准防控与日常管理为统筹,防控方案、应急机制、后续备案为三保障)的学生管理模式,以及在一定程度上为高职院校在疫情防控常态化时期工作的展开提供参考和指引。

土壤及地下水砷污染现状调查与评价——以新疆奎屯123团为例

通过对新疆奎屯123团土壤及地下水中砷含量状况调查分析，研究了土壤及地下水中砷污染状况、砷的主要来源，提出了砷污染的治理措施。研究表明：奎屯123团地下水砷污染严重，自流井水砷浓度范围在0．07～0．83mg／L。土壤中砷的含量范围在8．36-39．63mg／kg，平均值为16．67mg／kg，高于全国的平均水平。土壤中砷的来源主要受自然因素的影响，同时也受到高砷地下水灌溉以及含砷农药、化肥等诸多人为因素的影响。

罗丹明123经大鼠空肠黏膜的体外Ussing chamber渗透研究

目的:检测并评价罗丹明123(R123)经空肠黏膜渗透的特点,分析此法的可行性。方法:配制R123溶液,采用体外Ussing chamber实验法,考察R123经时经大鼠空肠黏膜吸收方向和分泌方向的累计透过量,并计算各自渗透系数。结果:R123吸收和分泌方向的表观渗透系数Papp(×10-5,cm.s-1)分别为(1.9±1.3)和(7.4±5.2),差异具显著性。结论:R123作为P-糖蛋白的底物,其经肠黏膜渗透以分泌方向为主;Ussing chamber实验用于评价药物在肠道内转运具有易操作,简便等特点,值得推广使用。

罗丹明123人工抗原的合成及抗体的酶联免疫检测

为建立罗丹明B(rhodamine B)的免疫分析方法,采用戊二醛法,将半抗原罗丹明123与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原R123-B S A和包被抗原R123-OVA。经动物免疫实验证实人工抗原合成,并制备抗罗丹明123的多克隆抗体,此抗体同时能够检测食品中的罗丹明B,且最低检测限为0.001ng/mL。

CD44、CD87和CD123在急性白血病中的表达及其与细胞免疫的相关性研究

目的:探讨CD44、CD87和CD123在急性白血病(AL)中的表达及其与细胞免疫指标的相关性。方法:选择2014年5月-2017年2月以急性白血病收治的患者166例,纳入急性白血病组(包括急性髓系白血病100例,急性淋巴系白血病50例,B/髓双表型白血病16例);选择同期入院检查的非急性白血病患者50例,纳入对照组。对各组患者均取空腹静脉血5 ml,采用3色流式细胞术测定各组CD44、CD87、CD123细胞百分比;对于确诊的急性白血病患者均给予对症化疗治疗,在2个疗程后评价患者缓解率(CR),记录并统计不同疗效下CD44、CD87、CD123细胞百分比;采用SPSS Pearson相关性分析软件对急性白血病患者预后与CD44、CD87、CD123进行相关性分析。结果:急性白血病组患者CD44、CD87、CD123阳性率均高于对照组(P<0.05)。急性髓系白血病CD44、CD123阳性率均高于急性淋巴白血病和B/髓双表型(P<0.05);急性淋巴系白血病CD44阳性率高于B/髓双表型(P<0.05)。急性白血病组患者均顺利完成治疗,2个疗程后CR患者132例,PR+NR患者34例。CR患者CD44、CD87、CD123阳性率均低于PR+NR患者(P<0.05)。SPSS Pearson相关性分析结果表明:急性白血病患者预后与CD44、CD87呈负相关性(P<0.05)。结论:CD44、CD87、CD123在急性白血病不同表型中表达存在差异性,且与预后具有相关性和加强CD44、CD87、CD123测定能评估患者的预后,指导临床治疗。

CD34＋/CD38low/-/CD123＋细胞表达水平对急性髓系白血病预后的意义

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+细胞表达水平,并分析CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+表达水平与预后的相关性。方法:采用流式细胞术检测148例初诊AML患者骨髓单个核细胞中CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+表达水平,分析CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+细胞表达水平与完全缓解率、无病生存率和总体生存率相关性。结果:初诊AML患者骨髓细胞中CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+阳性细胞中位表达率为2.8%(0.01%-67%)。AML患者CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+高表达与NPM1野生型呈正相关(x^2=5.194,P=0.023),而与FLT3-ITD突变阳性无相关性(x^2=0.418,P>0.05)。多变量回归分析显示,CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+高表达与较低的完全缓解率(P=0.035)、较差的无病生存(P<0.001)、较短的总生存(P<0.001)相关。结论:CD34^+/CD38^(low/-)/CD123^+表达率与AML患者治疗的反应及生存密切相关,在临床中可做为快速识别患者治疗失败的风险预后指标。

“123种植模式”经济效益分析

针对近年珠三角地区菜田连作出现的突出问题,采用“123种植模式”(菜-中晚稻-菜”轮作模式)与当地传统的“早稻或晚稻-蔬菜”轮作及蔬菜连作等几种模式进行经济效益比较分析。结果表明,“123种植模式”的经济效益最佳,其中“白瓜-中晚稻-番茄”模式每667 m2的年产值和年纯收益分别达到12 377元和10 931元,实现了在最有利于种植高效作物的高效生产时段优先安排种植高效作物,并较好地发挥了作物间对气候、土壤生态条件利用的互补作用,从而达到耕地综合效益最大化。

几种表面活性剂对P-gp底物罗丹明123经肠黏膜透过性的影响

目的观察低浓度表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油,Labrasol和聚山梨酯80对肠黏膜P-gp的调控作用。方法使用体外扩散池法评价罗丹明123(R123)经空肠、回肠和结肠黏膜的经时经吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数(Papp),并测定不同浓度表面活性剂对R123和荧光素钠(CF)经肠黏膜透过性的影响。R123和CF在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果R123经肠道黏膜的透过性存在部位差,即以空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少。另一方面,R123经肠道分泌方向的透过性显著地高于其吸收方向的透过性。低浓度的CEL和Labrasol可显著增强R123经吸收方向的透过性,减少经分泌方向的透过性;而低浓度的聚山梨酯80可显著增强R123经吸收方向的透过性,但对经分泌方向的透过性无显著影响。但实验浓度的表面活性剂对CF的肠道转运没有影响。结论低浓度的聚氧乙烯蓖麻油、Labrasol和聚山梨酯80可通过对P-gp功能的抑制而用于改善受P-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。

“秀水123”和“上师大3号”水稻农艺性状、产量、食味品质及根系比较研究

相同栽培条件下比较"秀水123"和"上师大3号"两种水稻的农艺性状、产量、食味品质指标和根系特性。结果显示:"上师大3号"比"秀水123"总生育期少2 d;两种水稻总体株型相似,"上师大3号"比"秀水123"约高10 cm,秆茎比"秀水123"粗壮,每穗实粒数也明显高于"秀水123",较"秀水123"增产3.85%;两种水稻食味品质在碱消值、胶稠度和直链淀粉含量指标上基本相同;"上师大3号"根数比"秀水123"明显增加,在水稻生长后期,"上师大3号"侧根结构依然保持完好状态。

维拉帕米对P-糖蛋白底物罗丹明123经空肠黏膜透过性的影响

目的:研究维拉帕米对肠黏膜P-糖蛋白(P-gp)的调控作用。方法:使用体外扩散池测定不同浓度维拉帕米对P-gp底物罗丹明123(R123)和荧光素钠(CF)经肠黏膜透过性的影响。R123和CF在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果:维拉帕米具有增加R123经吸收方向的透过性,并且减少分泌方向的渗透性。但实验浓度的维拉帕米对CF的肠道转运没有影响。结论:维拉帕米可通过对P-gp功能的抑制而用于改善受P-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。