1-(2,6-二异丙基苯基)-2-苯基-1H-咪唑的合成

以2,6-二异丙基苯胺为原料,与苯甲酰氯成酰胺,再经三氯氧磷氯代,氨基乙醛缩二乙醇亲核取代后,在磷酸作用下环合得到1-(2,6-二异丙基苯基)-2-苯基-1H-咪唑,4步反应的总收率为47.7%。目标化合物结构经ESI-MS、1H NMR确证。

（4R-cis）-6-[2-[2-（4-氟苯基）-5-（1-异丙基）-3-苯基-4-[苯胺（羰基）]-^1H-吡咯-1-基]乙基]-2，2-二甲基-1，3-二氧己环-4-乙酸叔丁酯的波谱学研究

对 (4R cis) 6 [2 [2 (4 氟苯基 ) 5 (1 异丙基 ) 3 苯基 4 [苯胺 (羰基 ) ] 1 H 吡咯 1 基 ]乙基 ] 2 ,2 二甲基 1 ,3 二氧己环 4 乙酸叔丁酯的傅里叶变换离子回旋共振质谱 (FT ICR MS)、核磁共振氢谱 (1 H NMR)、碳谱(1 3 C NMR)以及1 H同核位移相关谱 (1 H 1 HCOSY)、检出1 H的异核多量子相干谱 (HMQC)和1 H检测的异核多键相关谱 (HMBC)报道并进行解析。确定了1 H谱、1 3 C谱中各谱峰的归属 ,研究了其六元环部分的立体构象 。

铁棍山药多糖对PC12及Hepa1-6细胞在体外增殖的影响

采取闪式提取法从铁棍山药中提取山药多糖,利用胰蛋白酶去除多糖中的杂蛋白,冷冻干燥获得山药多糖制品.分别以10μg/mL、100μg/mL、500μg/mL、1 000μg/mL浓度添加于生长良好的PC12及Hepa1-6细胞中,再分别二次培养12h、24h、36h,研究山药多糖在体外对PC12及Hepa1-6两种细胞增殖的影响.结果显示:在培养24h后,当山药多糖浓度为10μg/mL、100μg/mL时,对PC12细胞增殖的影响没有差异性(P>0.05),但当浓度进一步提高到500μg/mL、1 000μg/mL时,则对PC12细胞的增殖体现出显著影响(P<0.05);对于Hepa1-6,在培养12h且山药多糖浓度在10μg/mL、500μg/mL时,对Hepa1-6细胞增殖的影响差异性显著(P<0.05),同时在100μg/mL浓度下,山药多糖对Hepa1-6细胞的增殖抑制更加明显(P<0.01).但当浓度达到1 000μg/mL时,对Hepa1-6细胞增殖呈现促进作用.在培养24h时,各浓度的山药多糖对Hepa1-6细胞增殖的影响均没有差异性(P>0.05).当培养36h后,在山药多糖浓度为10μg/mL、100μg/mL、500μg/mL下,统计显示对Hepa1-6细胞增殖的影响差异性显著(P<0.05).上述结果说明,山药多糖在一定的浓度范围内具有明显的抗肿瘤作用.

C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学特性

对比分析C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学性质,确定不同部位的椎间盘与相邻椎体是否具有不同的压缩力学性质。人死后1 h内解剖取出死者C1-S1脊柱标本,以线锯切取C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本各13个。在日本岛津电子万能实验机上进行实验。实验速度为5mm/min,以统计分析和t检验的方法处理实验数据。L4-5组椎间盘与相邻椎体最大载荷大于T12-L1和C5-6组,差异显著(P<0.01);C5-6组最大位移大于L4-5组和T12-L1组,差异显著(P<0.01);L4-5组椎间盘与相邻椎体最大应力大于C5-6和T12-L1组,差异显著(P<0.01);C5-6组椎间盘与相邻椎体最大应变大于L4-5和T12-L1组,差异显著(P<0.01)。C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本的压缩力学性质有一定区别。

6-羟基多巴胺诱导PC12细胞帕金森病模型中CaBP1表达的研究

目的应用蛋白质组学技术研究6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞帕金森病(PD)模型中钙结合蛋白1(CaBP1)的表达。方法在建立6-OHDA诱导PC12细胞帕金森病模型的基础上,分别提取6-OHDA处理组和对照组细胞总蛋白,应用荧光差异双向凝胶电泳(DIGE)技术获得蛋白点的差异表达信息,运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOFMS)鉴定出差异蛋白质。结果DIGE分析发现6-OHDA组表达明显增高的一个蛋白质点,经质谱分析鉴定确认为CaBP1。结论6-OHDA诱导PC12细胞的帕金森病模型中CaBP1表达增高,提示CaBP1增高可能与PD的发病机制有关。

CoCl2·6H2O协同NaBH4催化还原柠檬烯合成1-甲基-4-异丙基环己-1-烯

在常温条件下,以DMF为溶剂,通过CoCl2·6H2O协同NaBH4催化还原柠檬烯合成1-甲基-4-异丙基环己-1-烯,通过GC-MS对产物结构进行表征,并考察了反应时间、NaBH4与柠檬烯物质的量比对反应的影响。结果表明,CoCl2·6H2O协同NaBH4能够快速催化还原柠檬烯合成目标化合物1-甲基-4-异丙基环己-1-烯,副产物为1-甲基-4-异丙基环己-3-烯和顺-1,8-对孟烷等。当NaBH4与柠檬烯物质的量比为1∶1、反应时间为1.0 h时,柠檬烯的转化率可以达到100%,1-甲基-4-异丙基环己-1-烯的产率可以达到70%。

(3aR,6aS)-1,3-二苄基四氢-4H-呋喃并[3,4-d]咪唑-2,4(1H)-二酮的转化利用

在(+)-生物素的不对称全合成工艺中产生的副产物(3aR,6aS)-1,3-二苄基四氢-4H-呋喃并[3,4-d]咪唑-2,4(1H)-二酮(2),经过开环酯交换、两次氧化和水解即可方便地转化得到合成(+)-生物素的关键中间体顺-1,3-二苄基-4,5-二羧基-2-咪唑烷酮,总收率74%,实现了副产物的循环利用。

(3aS,6aR)-1,3-二苄基-四氢-4H-呋喃并[3,4-d]咪唑-2,4(1H)-二酮的立体选择性合成

以顺-1,3-二苄基-5-[(1S,2S)-(+)-苏式-1-羟甲基-2-(对硝基苯基)-2-羟乙基]-四氢-4H-吡咯并[3,4-d]咪唑-2,4,6-三酮为原料,经单乙酰化、NaBH4还原和酸水解得到标题化合物,与直接还原或是先经双乙酰化再还原的工艺相比,单乙酰化后再还原的选择性高达97.25%。并对单乙酰化物和双乙酰化物结构做了X单晶衍射测定,单乙酰化物的原子空间排布更利于选择性还原。

Necrostatin-1对6-OHDA致PC12细胞氧化应激损伤的影响

目的研究Necrostatin-1(Nec-1)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型线粒体失能的影响,探讨Nec-1在帕金森病发病机制中的作用。方法经不同浓度Nec-1预处理的PC12细胞加入6-OHDA建立多巴胺能神经元损伤模型。用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测PC12细胞活力,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,免疫印迹法检测Cathepsin B与Bcl-2蛋白表达。结果 100μmol/L的6-OHDA处理PC12细胞24h,细胞活力较正常对照组明显降低(P<0.05);与模型组比较,5、10、20、30、60μmol/L的Nec-1可明显减轻6-OHDA的毒性,90μmol/L的Nec-1可加重6-OHDA的毒性。Nec-1可阻抑线粒体膜电位下降。与正常对照组相比,模型组Cathepsin B表达明显增加而Bcl-2的表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,Nec-1与UTI可降低Cathepsin B表达并使Bcl-2的表达逐渐增加(P<0.05)。结论 Nec-1在一定的浓度范围内可提高PC12细胞存活力,通过稳定线粒体膜电位、抑制Cathepsin B的表达、上调Bcl-2的表达而发挥神经细胞保护作用。

铜绿假单胞菌脓毒症大鼠肝组织中TLR4/SIGIRR的表达与静脉血中IL-6和IL-12水平的变化

目的探讨铜绿假单胞菌(P-seudomonas aeruginosa,PA)脓毒症肝组织中单免疫球蛋白白细胞介素-1受体相关蛋白(Single immunoglobin IL-1 receptor related protein,SIGIRR)表达对TLR4的表达及IL-6、IL-12合成的影响。方法将60只SD级大鼠随机分为两组,对照组10只不做处理,试验组50只再细分为5组,分别在腹腔内注射PA,构建PA脓毒症模型;对照组、试验组分别于注射PA 1 h、2 h、4 h、8 h、12 h后无菌取肝脏,下腔静脉无菌抽血。采用实时荧光定量PCR仪检测肝组织中TLR4、SIGIRR的mRNA相对含量;采用双抗夹心ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-12浓度。结果试验组TLR4表达均大于对照组(P<0.05),但试验组各组间TLR4表达差异无统计学意义(P>0.05);1 h组、2 h组、4 h组IL-6、IL-12水平均低于对照组(P<0.05),8h组、12 h组IL-6、IL-12水平均高于对照组(P<0.05),组间差异比较具有统计学意义(P<0.05)。结论 SIGIRR的上调表达可抑制大鼠血清IL-6、IL-12的产生,但对TLR4表达无影响,提示SIGIRR对TLR4信号通路的负调节作用不是通过直接抑制TLR4表达实现的。

不同冷却方式对核电GX6CrNiMo12-1钢显微组织和力学性能的影响

将GX6CrNiMo12-1钢加热到980～1000℃后用不同的冷却方式进行调质处理。显微组织和力学性能检验结果表明：该钢铸态下原始组织为马氏体＋12％8铁素体，调质后显微组织为具有马氏体位向的回火索氏体＋（10％～15％）8铁素体。经过油冷工艺处理后的试样综合力学性能最佳，但考虑到生产成本、能源消耗、设备情况和生产操作等因素，实际生产中选择了空冷。

IL-12协同B7-1转基因细胞增强C57BL／6小鼠的抗肿瘤免疫

目的应用逆转录病毒构建了IL-12，B7-1和GM-CSF表达载体，以研究基因修饰的肿瘤细胞的癌疫苗作用。方法将三种表达载体分别转染EL-4胸腺瘤细胞并研究了该基因导入细胞的抗肿瘤免疫效果。结果当接种了EL-4／IL-12细胞后，在C57BL／6同系鼠中其基因导入细胞的肿瘤原性比较EL-4／Wt和EL-4／Neo组明显减少(P<0．01)。在EL-4／IL-12被排斥后，体内试验中实验动物诱发了抗EL-4／Wt的系统性、保护性免疫，^51Cr释放测定中，获得一个较强的抗EL-4/Wt和一个较弱的抗同系Lewis肿瘤细胞的CTL活性，体内淋巴细胞消除分析的结果提示减少的肿瘤原性主要依赖于CD4^+、CD8^+和NK细胞。用EL-4/IL-12细胞进行疫苗治疗比较用EL-4／Neo细胞能有效地延缓已建立的EL-4／Wt肿瘤细胞的生长(P<0．005)，EL-4/IL-12和EL-4／B7-1联合比用单一的转基因细胞增强了治疗效果(P<0．005)。结论应用IL-12进行血液肿瘤的治疗是有效的，IL-12和B7-1联合使用在未来人类癌症的治疗中亦可有一定的应用前景。

(3aS,6aR)-1,3-二苄基-六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-2,4-二酮制备方法的改进

Thioacetamide is made from phosphorus pentasulfide and acetamide,which react with(3aS,6aR)-1,3-dibenzyl-hexahydro-1H-furo[3,4-d]imidazole-2,4-dione as sulfo-reagent to prepare(3aS,6aR)-1,3-dibenzyl-hexahydro-1H-thienoimidazole-2,4-dione in the same system,yield is 91.9%,material get easily and cost reduce by this method,which is suitable for industrial process.

宫颈组织HPV E6/E7 mRNA Atg-12 Tie-1表达情况与鳞状上皮内病变病理分级的相关性

目的探讨宫颈组织人类乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA、自噬相关蛋白-12(Atg-12)、酪氨酸激酶受体-1(Tie-1)表达情况与鳞状上皮内病变(SIL)病理分级的相关性。方法选取2020年5月至2021年10月新乡市中心医院病理科诊断为SIL的患者227例,根据宫颈病变分级分为低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组124例和高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组103例,另选取子宫肌瘤手术患者80例为对照组。所有患者均采用支链DNA信号扩增法检测HPV E6/E7 mRNA,采用免疫组化法及免疫印迹法检测Atg-12、Tie-1蛋白。分析E6/E7 mRNA、Atg-12、Tie-1与病理分级的相关性,绘制受试者特征(ROC)曲线分析各指标对HSIL与LSIL的鉴别诊断价值。结果HSIL组的HPV E6/E7 mRNA、Tie-1蛋白阳性检出率高于LSIL组和对照组(P<0.05),HSIL组的Atg-12蛋白阳性检出率低于LSIL组和对照组(P<0.05),HSIL组的HPV E6/E7 mRNA拷贝数、Tie-1蛋白表达量高于LSIL组和对照组(P<0.05),HSIL组的Atg-12蛋白表达量低于LSIL组和对照组(P<0.05)。HPV E6/E7 mRNA、Tie-1蛋白表达量与SIL病理分级呈正相关(r=0.514,0.488),Atg-12蛋白表达量与SIL病理分级呈负相关(r=-0.433)。HPV E6/E7 mRNA、Atg-12、Tie-1鉴别诊断HSIL与LSIL的灵敏度为88.57%、74.29%、82.86%,特异度为57.14%、66.67%、64.29%。3项指标联合诊断的灵敏度为77.14%,特异度为85.71%(AUC=0.854)。结论HSIL患者HPV E6/E7 mRNA、Tie-1表达较高,Atg-12表达较低。HPV E6/E7 mRNA、Atg-12、Tie-1表达与SIL病理分级有一定相关性,联合诊断可为HSIL与LSIL的鉴别诊断提供参考。

2,10,12-三甲基-6-氧-12H-双苯并基[d,g][1,3,2]-二氧硫杂八环合成和表征

以三乙胺为缚酸剂,1,1-双(2-羟基-5-甲基苯基)乙烷和二氯亚砜为原料,合成了双酚的亚硫酸酯的化合物2,10,12-三甲基-6-氧-12H-双苯并[d,g][1,3,2]-二氧硫杂八环,最佳合成的物质的量比为:双酚∶二氯亚砜∶三乙胺=1∶2.0∶2.2,反应时间为2 h,产品收率为72%(以双酚计)。标题化合物经元素分析、IR、1H NMR对产物进行了结构鉴定,并用X射线单晶衍射法确定其单晶结构。

Synthesis and Crystal Structure of N-[(3aR,4R,4aR,5aS,6S,6aS)-1,3-Dioxooctahydro-4,6-ethenocyclopropa[f]isoindol-2(1H)-yl]-3-(trifluoromethyl)phenylmethanimine

The crystal structure of the title compound（C19H15F3N2O2,Mr = 360.33） was determined by single-crystal X-ray diffraction.The crystal belongs to triclinic,space group P1,with a = 6.5604（7）,b = 13.9614（16）,c = 18.1790（18） ,α = 102.749（7）,β = 97.542（6）,γ = 94.355（4）°,V = 1600.5（3） 3,Z = 4,Dc = 1.495 g/cm3,λ（MoKα） = 0.71070,F（000） = 744,μ（MoKα） = 0.122 mm-1,R = 0.0434 and wR = 0.1051.A total of 7590 unique reflections were collected,of which 5429 with ｜F｜2 ≥ 2σ｜F｜2 were observed.The two cyclohexene rings in the molecule adopt boat-boat conformations with the deviations of ring atoms C（9） and C10 from the C（5）/C（6）/C（7）/C（8） plane（Ⅰ） by 1.1204（0.0023） and 1.1132（0.0023） ,respectively,whereas from the C（2）/C（3）/C（5）/C（8） plane（Ⅱ） by 1.1627（0.0022） and 1.1818（0.0021） ,respectively.In the cyclopropane and lactam rings,atoms C（11） and N（1） point towards the double bond of C（9）-C（10） and the dihedral angle between the ring plane（Ⅲ） containing C（1）,C（2）,C（3） and C（4） and plane（IV） consisting of C（6）,C（7） and C（11） is 55.76（0.07）°.The dihedral angles between planes Ⅳ and Ⅰ and Ⅱ and Ⅲare 63.58（0.07）° and 58.10（0.06）°,respectively.The dihedral angle between the benzene ring C（13）～ C（18） and plane Ⅳ is 42.41（0.06）°.

(3aS,6aR)-1,3-二苄基-四氢-4H-噻吩并[3,4-d]咪唑-2,4-二酮(1H)制备工艺优化

d-生物素的重要中间体:(3aS,6aR)-1,3-二苄基-四氢-4H-噻吩并[3,4-d]咪唑-2,4-二酮(1H)(以下简称硫代内酯)由(3aS,6aR)-1,3-二苄基-四氢-4H-呋喃并[3,4-d]咪唑-2,4-二酮(1H)(以下简称内酯)中呋喃环上的氧用硫取代而成。目前常用的硫代工艺均有一些明显的弊端,本文对硫代工艺进行改进,可以提高硫代反应的收率和产物的质量。

超超临界汽轮机转子X12CrMoWVNbN10-1-1钢的早期断裂分析

对进口的2个X12CrMoWVNbNl0-1-1钢汽轮机转子的T3部位进行了强度考核,并采用光学显微镜(OM)、场发射扫描电镜(FESEM)和透射电子显微镜(TEM)对发生早期断裂和满足强度要求的试样进行了对比研究,分析了试样早期断裂的原因.结果表明:在锻造或热处理过程中,未溶的富Fe、Cr和Nb的第二相大颗粒(Cr16.81Fe76.01Nb5.63Mo1.09W0.36)分布在早期断裂试样的孔洞边缘,是形成孔洞的主要原因,这些孔洞在高温和高应力作用下加速扩展,导致试样早期断裂;M23C6碳化物的粗化导致材料性能下降,是试验钢早期断裂的另一主要原因.

COPD患者血清Cav-1及CXCL12水平检测与并发肺动脉高压的相关性研究

目的探讨血清小窝蛋白-1(caveolave-1,Cav-1)及趋化因子C-X-C基元配体12(chemokine C-X-C ligand 12,CXCL12)水平与慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)并发肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)的相关性。方法收集2019年3月~2020年3月期间在咸阳市第一人民医院和商洛市中心医院就诊的115例COPD患者作为研究对象,依据患者是否并发PH分为非PH组(NPH组,70例)和PH组(45例)。另选取43例同期体检健康者作为对照组,采用酶联免疫吸附法测定血清Cav-1和CXCL12水平,所有患者均接受肺功能检测,用肺功能检测仪检测患者治疗前的1s用力呼气容积占预计值的百分比(forced expiratory volume/predicted value,FEV1/Pre),FEV1占用力肺活量(Forced vital capacity,FVC)的百分比(FEV1/FVC)。通过彩色多普勒超声检查获得所有COPD患者的肺动脉收缩压(pulmonary artery systolic pressure,PASP)。收集患者的临床资料,包括二氧化碳分压(PCO2)、氧分压(PO2)、B型脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)以及白介素-6(interleukin-6,IL-6)等,比较分析以上指标的变化与COPD并发PH的相关性。结果在对照组,NPH组和PH组中,血清Cav-1和CXCL12水平分别为10.37±2.28,7.23±1.72,4.81±0.90μg/L和65.74±12.27,175.36±26.19,270.33±43.79pg/ml,与对照组比较,NPH组和PH组的CXCL12水平明显增高,且PH组增高更显著;与对照组比较,NPH组和PH组的Cav-1水平则明显降低,且PH组降低更显著,差异均有统计学意义(F=103.71~130.67,均P=0.000)。相关性分析显示,NPH组和PH组的血清Cav-1及CXCL12水平分别呈负相关性(r=-0.813,-0.827,均P<0.01),NPH组的CXCL12水平分别与PCO2,PASP,IL-6及BNP水平呈正相关性,而与FEV1/Pre,FEV1/FVC及PO2呈负相关性。NPH组的Cav-1分别与PCO2,PASP,IL-6及BNP水平呈负相关性,而与FEV1/Pre,FEV1/FVC及PO2呈正相关性(rCXCL12=0.845,0.810,0.807,0.783,-0.799,-0.775和-0.793,均P<0.01;rCav-1=-0.853,-0.828,-0.816,-0.792,0.763,0.803,0.822,均P<0.01)。PH组的CXCL12水平分别与PCO2,PASP,IL-6及BNP水平呈正相关性,而与FEV1/Pre,FEV1/FVC及PO2呈负相关性。PH组的Cav-1水平分别与PCO2,PASP,IL-6及BNP水平呈负相关性,而与FEV1/Pre,FEV1/FVC及PO2呈正相关性(rCXCL12=0.839,0.816,0.817,0.806,-0.782,-0.785,-0.809,均P<0.01;rCav-1=-0.862,-0.821,-0.819,-0.797,0.782,0.811,0.829,均P<0.01)。结论血清Cav-1及CXCL12水平的差异性变化可能与COPD患者PH的形成有关,调节Cav-1及CXCL12水平能抑制炎症因子释放,缓解COPD病情进展,改善患者的临床症状。

环状RNA circLRP6介导的miR-5590-5p改善肝衰竭机制研究

目的探究环状RNA circLRP6、miR-5590-5p和C5aR1在肝衰竭中的保护作用及调控机制。方法通过D-半乳糖胺和脂多糖(D-galactosamine and LPS,D-GalN/LPS)诱导来构建体外肝衰竭细胞模型,流式细胞术检测L02细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测circLRP6和miR-5590-5p的表达,Western blot法检测C5aR1蛋白的表达,RNA免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因实验检测circLRP6和miR-5590-5p之间的结合作用,同时利用双荧光素酶报告基因实验检测C5aR1和miR-5590-5p的结合作用。结果与对照组比较,D-GalN/LPS诱导L02细胞凋亡率上升(P<0.05),circLRP6和C5aR1表达上调,miR-5590-5p表达下调(P<0.05)。同时,与D-GalN/LPS+miRNA-NC组比较,D-GalN/LPS+miR-5590-5p模拟物组的L02细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。另外,双荧光素酶报告基因实验显示,circLRP6能够直接与miR-5590-5p结合,并且miR-5590-5p直接调控C5aR1。检测结果还发现,与D-GalN/LPS+shRNA组比较,D-GalN/LPS+sh-circLRP6组circLRP6基因和C5aR1蛋白表达下调。然而,与D-GalN/LPS+shRNA组比较,D-GalN/LPS+sh-circLRP6组L02细胞凋亡率显著下降。结论环状RNA circLRP6介导的miR-5590-5p具有改善肝衰竭的作用,其作用机制可能是通过靶向C5aR1来实现的。