HLA-B^(*)15∶02基因型的快速鉴别方法建立及临床应用

目的建立rs144012689位点的焦磷酸测序方法,从多个角度评估其预测芳香族类抗癫痫药物严重皮肤不良反应的性能。方法筛选最优的聚合酶链反应(PCR)扩增体系,评估该研究建立的rs144012689位点焦磷酸测序方法的检测限、灵敏度、特异度,并分析其与Sanger测序、商品化试剂盒的一致性。收集该院2019-2021年确诊为史蒂文斯-约翰逊综合征(SJS)的患者,评价该方法对确诊病例的检出性能。结果该方法检测rs144012689位点筛选出人类白细胞抗原(HLA)-B 15∶02基因型的灵敏度和特异度均为100%,检测限为0.4 ng/μL基因组DNA。60份标本焦磷酸测序结果均与Sanger测序及商品化试剂盒检测结果一致。2份SJS确诊患者标本的焦磷酸测序和HLA-B高分辨分型结果均提示携带HLA-B 15∶02基因型。结论该研究建立的方法具备快速、检测限低、灵敏度高和特异度高的优点,可用于芳香族类抗癫痫药物不良反应高危基因HLA-B 15∶02的筛查。

人白细胞抗原B~*1502基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血同型半胱氨酸浓度的影响

目的探讨具有人白细胞抗原B*1502(HLA-B*15:02)不同基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度的影响,研究患儿血浆Hcy浓度的影响因素,以减少血浆Hcy增高所致的潜在致病风险。方法选取2015年10月至2016年6月间检测HLA-B*15:02基因型的抽搐或癫痫患儿15例,比较不同基因型患儿的血浆Hcy浓度;并将后者对应患儿年龄作线性回归分析。结果血浆Hcy平均浓度在未携带HLA-B*15:02基因患儿中为(8.38±4.23)μmol/L,在携带HLA-B*15:02基因患儿中为(13.03±0.97)μmol/L,携带者明显高于未携带者。随着患儿年龄增加,血浆Hcy浓度有增高趋势(r2=0.29,P<0.05)。结论 HLA-B*15:02基因携带者和较大年龄抽搐或癫痫患儿有发生血Hcy增高的倾向,增加患儿潜在致病风险。HLA-B*15:02基因型和年龄可预测抽搐患儿血浆Hcy浓度变化倾向。

严重药物不良反应分子标志物HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01在山东汉族人群中的分布

目的调查山东汉族人群HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01等位基因携带率和等位基因频率,指导患者临床用药,并评估进行临床基因筛查的必要性。方法调查山东省骨髓库具有HLA-A、HLA-B位点高分辨数据的汉族人群样本,统计HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01等位基因携带率和等位基因频率,并按照志愿者籍贯进行分组,归为14个地市。结果山东汉族人群中,HLA-B*58:01、HLA-B*15:02、HLA-A*31:01等位基因携带率分别为8.65%、3.03%和7.3%。日照、东营、临沂地区HLA-B*58:01等位基因携带率达10%以上;枣庄、滨州和济南地区HLA-A*31:01等位基因携带率达8%以上;聊城、济南、淄博地区HLA-B*15:02等位基因携带率分别为3.96%、3.84%和3.77%。结论山东地区汉族人群患者在使用别嘌醇和卡马西平药物之前进行HLA-B*58:01和HLA-A*31:01基因筛查是有必要的,HLA-B*15:02等位基因携带率虽较低,但有条件的地区可以在开展用药前进行基因筛查,以减少严重药物不良反应的发生。

流动注射——分光光度法快速测定儿童发锌含量

介绍流动注射（ＦＩＡ）—分光光度法快速测定微量锌的方法，并研究了ＦＩＡ—分光光度法测定发锌含量的实验条件，实际测定了１６２名２～６岁学龄前男女儿童头发中锌含量，平均回收率为９９．３％±０．６３，精密度ＲＳＤ＝０．４１％。

多色探针熔解曲线法在卡马西平不良反应相关基因检测中的临床评价

目的对多色探针熔解曲线法(multicolor melting curve analysis,MMCA)用于卡马西平不良反应相关的HLA-B*15:02基因检测进行临床评价。方法收集厦门市中心血站1 147份厦门地区无偿献血者的外周静脉血样本,经基因DNA提取后,按双盲对照试验,分别应用MMCA法和HLA-SBT测序法对各样本进行HLA-B*15:02基因检测,比较2种检测方法的符合率。对于检测结果不一致的标本,采用第三方Sanger测序和电泳验证,计算总符合率。结果采用MMCA法共检出77份HLA-B*15:02阳性标本,1 070份HLA-B*15:02阴性标本。采用HLA-SBT测序法共检出74份HLA-B*15:02阳性标本,1 070份HLA-B*15:02阴性标本,以及3份无明确的分型信息的标本(仅显示为B*15:VG-B*15:CYS型)。该3份标本经Sanger测序以及电泳验证,确认为HLA-B*15:02阳性标本。因此,MMCA法检测HLA-B*15:02基因的阳性检出率为100%(77/77),阴性检出率为100%(1 070/1 070),总符合率为100%(1 147/1 147)。此外,在1 147份临床标本中共检出77份阳性结果,HLA-B*15:02的携带率为6.7%(77/1147),这与文献报道的数据基本一致。结论 MMCA法用于HLA-B*15:02基因的检测,具有简便、快速、灵敏度高、特异性强等优点,可应用于卡马西平不良反应相关的HLA-B*15:02基因的临床辅助检测。