双峰驼精清诱导排卵活性因子的阴离子交换柱Q Hyper D层析分离及生物活性鉴定

利用阴离子交换柱QHyperD对双峰驼精清进行分离 ,大鼠垂体组织培养及母驼肌注活性组分 ,RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。实验结果表明 ,驼精清经QHyperD柱层析后 ,共得到 6个组分 (F1～F6 ) ,其中F3和F5在大鼠垂体组织培养实验中具有生物活性 ,可引起LH的明显释放 (P <0 .0 5 )。在体实验时给卵巢上有成熟卵泡的母驼分别肌注F3或F5 ,肌注后 5～ 7h ,LH的释放也明显增加 (P <0 .0 5 )。F3可引起母驼发生排卵 ,F5则不能 ,说明F3可能就是驼精清中的诱导排卵活性因子或其成分之一。另外 ,无论是F3或是F5 。

Q Sepharose^(TM)-XL强阴离子交换色谱快速纯化精氨酸激酶及其多克隆抗体的研究

利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱从虾的精氨酸激酶粗提液中纯化出精氨酸激酶,以其免疫大白兔,然后利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱从高免疫兔血清中纯化精氨酸激酶的多克隆抗体。采用SDS-PAGE检测精氨酸激酶及其抗体的纯度,并进行了活性测定。结果表明,利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱纯化出的精氨酸激酶及其多克隆抗体纯度高、活性强。建立了快速高效、操作方便而又适合实际应用的制备精氨酸激酶及其多克隆抗体的方法,可为精氨酸激酶及食品过敏的相关研究提供帮助。

Q Sepharose^(TM) XL强阴离子交换色谱快速纯化猪心中肌红蛋白和细胞色素C

以Q SepharoseTM XL强阴离子交换色谱结合Sephadex G-75分子排阻色谱快速提取纯化猪心中肌红蛋白(Myoglobin,Mb)和细胞色素C(Cyt C)。在pH值为7.6~8.5范围内,Cyt C吸附在Q SepharoseTMXL强阴离子交换柱上,而Mb会缓慢通过。所以选择QSepharoseTMXL强阴离子交换柱的上样pH值为7.9,洗脱pH值为7.2。电泳检测证明,经过QSepharoseTMXL柱初步纯化所得Mb和Cyt C的产率分别为89.7%和93.2%;再经过Sephadex G-75分子排阻色谱可得到纯的Mb和Cyt C,其产量分别为77.43mg.(kg猪心)-1和86.42mg.(kg猪心)-1。使用QSepha-roseTMXL强阴离子交换色谱能从猪心中快速制备纯的Mb和Cyt C。

用阴离子交换色谱法制备寡聚核苷酸

建立了用Source 15Q强阴离子交换柱分离纯化寡聚核苷酸的方法.在pH 9.0,以20 mmol/L Tris-HCl缓冲液+2.0 mol/L NaCl为流动相,线性浓度梯度洗脱,紫外检测波长为260 nm,流速为1 mL/min的分离条件下,能很好地分离18-78 mer的合成寡聚脱氧核苷酸和PCR的单双链产物,探讨了流速和盐浓度对分离的影响,并测得24mer OligoDNA的回收率为90%左右.该方法简便、快捷、分辨率高,可用于寡聚核苷酸、反义核酸药物的分离、纯化、鉴定和制备.

高效阴离子交换色谱法分离不对称PCR产物

目的为分离制备高纯度的DNA单双链提供新的技术方法.方法利用SOURCE15Q强阴离子交换柱分离纯化DNA单双链,并测定回收率.结果SOURCE 15Q柱在紫外检测波长为260nm,流速为1ml/min,流动相为pH9.0时,以20mmol/L Tris-HCl缓冲液+2.0mol/LNaCl,线性浓度梯度洗脱的分离条件下,能很好地对85个碱基长度不对称PCR产物的单双链进行分离;对24mer单链样品进行回收率测试,回收率为92.46%.结论利用SOURCE 15Q强阴离子交换柱分离纯化DNA单双链的方法简便、快捷、稳定、分辨率高、纯度高,适合核酸单链和双链样品的分离、纯化、鉴定和制备.

离子交换纤维柱分离-电感耦合等离子体原子发射光谱法测定金属镍及其化合物中铬

当镍的共存质量浓度大于铬5 800倍时,对电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICPAES）直接测定铬有明显的负干扰,而且干扰程度随着镍共存质量浓度的增大而增大。试验结果表明：将25.00mL 5.00×102μg/mL Ni（Ⅱ）、1.50mol/L NH4SCN的试液（pH 1.0）,以0.5mL/min的流速通过3.00g强碱性阴离子交换纤维柱（=10mm）,Ni（Ⅱ）能被纤维柱吸附,因铬在此条件下不被吸附而收集在待测流出液中,从而消除了镍基体对测定铬的干扰。方法中铬的测定下限为2.00×10-3μg/mL。按照实验方法对实际样品以及合成样中铬进行测定,合成样测定结果的相对误差绝对值不大于3.2%,实际样品回收率在93%~99%之间,测定总值的相对标准偏差（RSD,n=6）不大于2.9%。

阴离子交换色谱积分脉冲安培法测定鱼粉和玉米粉水解液中氨基酸

将高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培直接检测法应用于鱼粉和玉米粉水解液中的氨基酸的分析测定.该方法使用Dionex AminoPac PA10阴离子交换柱为分析柱,控制柱温为35℃,以NaOH和NaAc的强碱性溶液为淋洗液,在合适的梯度条件下,可以实现对17种常见氨基酸的高效分离.在强碱性条件下,获得良好分离的各个氨基酸可在配有金工作电极的电化学检测器上以积分脉冲安培法获得高灵敏度的检测.在优化的测定条件下,该方法对这17种氨基酸的检出限在0.21～3.38 pmol之间;峰面积校正曲线的线性范围为2～3个数量级;5次平行测定的峰面积的相对标准偏差RSD在0.32%～4.7%之间.该方法应用于玉米粉和鱼粉水解液中氨基酸含量的测定,结果良好.对玉米粉和鱼粉水解液标准加入的回收率分别在81.9%～108.0%和90.0%～108.0%之间.

钼(Ⅵ)和钨(Ⅵ)的阴离子交换性能研究——草酸-盐酸体系

本文在草酸-盐酸体系中,研究钼、钨等元素在强碱性阴离子交换树脂Zerolit FF上的阴离子交换行为,并确定其分离的最佳条件。用高仅2厘米,直径0.9厘米的交换柱可分离大量钨等元素中的微量钼;其分离比率高达1×104:1。应用于试剂级钨酸钠中钼的分离,结果满意。此外,还确定在该体系中,钼与树脂相进行交换的主要形式为MoO_(2)(C_(2)O_(4))_(2)^(2-)。

离子色谱-质谱在碳酸饮料亚氯酸盐、氯酸盐与高氯酸盐检测中的效果

本文主要探讨碳酸饮料中高氯酸盐、亚氯酸盐、氯酸盐检测中离子色谱-质谱联用效果。方法:选用具强亲水性、高容量的阴离子交换柱并分离,淋洗液为KOH溶液,进行梯度洗脱。经抑制器抑制后,淋洗液直接入质谱(ESI-MS),检测碳酸饮料中的高氯酸盐、亚氯酸盐。结果:本检测所用Ion Pac AS19分析柱亲水性强。

氯型强碱性阴离子交换树脂交换容量测定方法国家标准简介

一、概述国家标准 GB11992-89是阴离子交换树脂重要性能的基础测定方法之一。它的测定意义、原理和操作方法都与美国材料与试验协会(ASTM)标准 D 2187-82《粒状离子交换树脂的物理化学特性的试验方法》中。阴离子交换树脂的全交换容量和中性盐分解容量的内容相同。阴离子交换树脂,一般具有强碱性交换基团、弱碱性交换基团。强碱性交换基团通常表示为:式中 X 为可交换的阴离子如:Cl、OH……。弱碱性交换基团通常表示为:

亲水作用色谱法测定甜菊糖主要极性组分

以亲水作用色谱(HILIC)模式,建立一种强碱性阴离子交换分析柱(SAX)分离检测甜菊糖中甜菊糖甙、莱鲍迪甙C、莱鲍迪甙A的方法。根据吸附剂、吸附质的结构特点及物理特性,对分离机理进行初探,推测导致此机理的诱因可能为氢键、偶极作用等。与国标法相比,所建立的检测方法中色谱图杂质峰数目增多,主要物质分离度明显提高。甜菊糖甙、莱鲍迪甙C和莱鲍迪甙A的线性范围分别为0.056～5.600、0.032～3.200mg/mL和0.204～24.000mg/mL,R2分别为0.9991、0.9989和0.9992。3组分低、中、高3个质量浓度水平的加标回收率在95.8%～101.1%之间,相对标准偏差(n=6)均小于1.00%。该方法简单、灵敏、准确、重现性好,为准确分析甜菊糖主要极性组分提供了更加可靠的检测方法。

重组人瘦素的分离纯化

目的 :探索毕赤酵母表达的人瘦素的非亲和层析纯化方法。方法 :采用强阴离子交换柱 (SepharoseQfastflow)和疏水层析柱 (PhenylSepharose 6fastflow)在 pH 7.5的条件下进行纯化。结果 :经Q柱一步纯化后 ,产物纯度由 4 2 .3%到达89 .6 % ,随后通过疏水层析纯化后 ,产物纯度达到 96 .2 %。经SDS -PAGE证实为单一蛋白条带。结论 :通过上述手段已成功分离纯化得到纯度较高的由毕赤酵母表达的重组人瘦素。

全自动SPE-HPLC法测定食品中丙酸钙(钠)和双乙酸钠

主要探讨利用全自动固相萃取法进行食品常规样品前处理的方法研究，与国标方法比较，明显优于现有方法能够实现快速准确高效的测定食品中丙酸钙（钠）和双乙酸钠。结果表明，利用Cleanert SAX强阴离子交换枉的全自动固相萃取法可以作为检测食品中的丙酸钙（钠）和双乙酸钠的有效方法，2mL 10％HCl洗脱效果最佳，方法的检出限为0．03mg／kg，回收率为92．5％，102．5％，测定结果的相对标准偏差分别为1．47和1．32（n=5）。利用强阴离子交换柱及全自动固相萃取仪，可以大幅提高工作效率，降低方法检出限，保证检测结果的准确性及方法的重现性。

电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)测定食品中的六价铬

采用超声浸提和净化的前处理方式,利用电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)测定食品中三价铬的含量,得到食品中六价铬含量(六价铬=总铬-三价铬)。通过单因素分析,分别考察酸的种类、酸的浓度、超声时间、称样量变化、脱脂试剂对方法回收率的影响,并利用正交试验得出最佳前处理条件为:对称样量0.5 g(精确到0.0001g)的样品,用1+99(体积比)的盐酸超声浸提60 min,采用正己烷进行脱脂。选取猪肉、木耳、茶、菠菜等不同基质对该方法的适用性进行考察,分别对上述基质进行3个水平(0.16,0.32和0.48 mg/kg)的加标回收试验,回收率在85%~107%,该方法适用于食品中六价铬的定量检测。

高效液相色谱串联质谱测定粮谷及饲料中玉米赤霉烯酮及其代谢物和伏马毒素B_1、B_2

为建立粮谷及饲料中玉米赤霉烯酮及其代谢物和伏马毒素B1、B2的高效液相色谱串联质谱检测方法,本试验将样品经甲醇:水(3∶1)提取,强阴离子交换柱(MAX)富集净化,利用C18色谱柱分离,电喷雾串联四极杆质谱ESI源,在多反应监测模式(MRM)下采用正负离子同时扫描,对8种真菌毒素进行高效液相色谱串联质谱法测定。结果经方法学验证,8种物质的回收率大于70%,标准偏差均小于10,变异系数均小于10%,表明该检测方法能够满足包括欧盟、日本、美国等国家和地区对玉米赤霉烯酮及其代谢物,伏马毒素B1、B2等毒素的痕量检测的要求。