17α-甲基睾酮对棘胸蛙生长发育及性别分化的影响

为研究17α-甲基睾酮(MT)对棘胸蛙生长发育及性别分化的影响,采用乙醇喷雾法处理的含0,10,30,50 mg/kg MT饵料投喂棘胸蛙蝌蚪至60 d,测定体重、体长并记录生长发育情况,继续投喂并记录蝌蚪变态、畸形、死亡数,之后通过组织切片鉴定棘胸蛙性别和性腺发育状况.结果显示:MT对棘胸蛙蝌蚪的生长与正常发育有一定的抑制作用,并可通过影响性腺发育提高棘胸蛙雄性率,对棘胸蛙蝌蚪具有雄性化效应.以上研究对棘胸蛙的高效养殖及单性养殖具有重要意义.

17α─甲基睾酮对珍珠玛丽鱼及红剑尾鱼体色影响的初步研究

将5月龄的珍珠玛丽鱼（MolliensiaVeliferia）和3月龄的红剑尾鱼（Xiphophoroushelleri）各100尾，平均分成二级，设对照组和处理组，在处理组的基础饵料中添加10μg/g的甲基率酮（Meth－yltestosterone），在50多天的养殖实验期间，观察各组试验鱼的性逆转现象，并对试验鱼的体包及肌肉中所沉积的［β─胡萝卜素进行比较研究。结果表明：饵料中添加10μ/g的甲基睾酮不能使该规格的珍珠玛丽鱼发生性逆转，体色无明显的变化，但能使红剑尾鱼全雄化，且红剑尾鱼的群体色调加深。

17α-甲基睾酮对日本沼虾生精细胞体外生长分化的影响

取发育早期日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的精巢,剪碎,分散成细胞悬液,用离体细胞培养法进行体外培养,培养基中不含17α-甲基睾酮(17α-MT)的为对照组,设定3种不同质量浓度水平组,分别为300ng/mL、1500ng/mL和3000ng/mL,测定生精细胞的体外存活率并观察生精细胞体外培养的生长行为和分化情况。结果表明,3种浓度梯度下生精细胞的存活率没有显著差异,17α-MT的质量浓度为1500ng/mL组分化为精子细胞四分体的数量和长出棘突的精细胞数量均比对照组和其他实验组多,差异极显著(P<0.01)。初步确定生精细胞体外培养过程中添加不同质量浓度的17α-MT不影响细胞的存活率,但影响生精细胞的体外分化,17α-MT的适宜质量浓度为1500ng/mL。

性类固醇激素对胡子鲇性分化的影响

研究采用组织学和荧光实时定量PCR方法,检测17α-甲基睾酮(17α-MT)和17β-雌二醇(17β-E2)对胡子鲇(Clarias fuscus)性腺组织学、性别比率以及性分化前后脑型芳香化酶基因(Cyp19a1b)和翼状螺旋/叉头转录因子2(Foxl2)基因表达的影响。结果表明:在出膜后2—30日龄,17α-MT(50、100和200μg/L)浸浴、17β-E2(100、200和300μg/g)投喂处理对成活率无显著影响,但中、高剂量(100和200μg/L)17α-MT显著抑制卵巢发育,促进精巢发育,卵巢腔出现时间分别推迟4d和6d,初级卵母细胞出现时间分别推迟8d和9d,而初级精母细胞出现时间则分别提前3d和5d,且雄性率分别达70%和76%,显著高于50μg/L组和对照组(P<0.05)。相反,中、高剂量17β-E2(200和300μg/g)处理使卵巢腔出现时间分别提前2d和3d,初级卵母细胞出现时间分别提前1d和3d,初级精母细胞出现时间分别推迟3d和7d,而雌性率分别达74%和78%,显著高于100μg/g组和对照组(P<0.05)。此外,在性腺分化期,17α-MT促进Cyp19a1b但抑制Foxl2的表达,而17β-E2促进Cyp19a1b和Foxl2的表达。结果显示Cyp19a1b不是引起胡子鲇性分化的直接因素,但可能通过"下丘脑垂体性腺轴"对胡子鲇性分化过程产生间接影响;而Foxl2直接参与胡子鲇的性分化,即17α-MT和17β-E2分别通过抑制和促进Foxl2的表达来影响雌激素的生物合成,从而调控胡子鲇性分化的方向。

甲基睾丸酮在罗非鱼苗种体内的消解规律

研究了养殖场在大规模养殖下,甲基睾丸酮用于尼罗罗非鱼苗雄性化后在苗种体内的消解规律。采用含200mg/kg甲基睾丸酮的饲料持续喂养尼罗罗非鱼苗30d来进行雄性化,随后鱼苗放入池塘来进行甲基睾丸酮的消解实验,应用高效液相色谱法检测不同时间鱼苗体内甲基睾丸酮的残留量,并用SPSS Statistics 17.0统计软件结合EXCEL 2003进行数据处理和分析,来研究甲基睾丸酮的消解规律。结果表明,两次投喂间甲基睾丸酮在罗非鱼体内是缓慢减少的,但是在罗非鱼雄性化期间甲基睾丸酮在罗非鱼体内具有一致性。此外,停药后甲基睾丸酮消解比较缓慢,在停药约115d,鱼苗体重为(14.12±2.12)g时甲基睾丸酮才基本无检出,拟合回归得到指数方程y=1779.6e-0.0369x,R2=0.9332。这说明甲基睾丸酮的消解符合指数递减,后期消解缓慢,建议在养殖过程中不宜使用甲基睾丸酮。

甲基睾酮暴露对鳗鲡精巢发育的影响

在水温(21±1)℃和盐度35下,将体质量(266.45±18.65)g的鳗鲡雄鱼放入直径1.5m、高1.0m、水量1000L的圆形养殖桶中,每桶10尾,水中甲基睾酮质量浓度为50μg/L,对照组加入5mL无水乙醇,不投喂,每5d换水1/2。45d通过组织切片观察性腺组织结构和测定性腺发育相关激素水平,研究甲基睾酮对雄鱼性腺发育的促进作用及可能的机制。试验结果显示,暴露45d后,雄鱼性腺指数为(1.63±0.68)%,显著高于对照组(P<0.05),约为对照组的8倍。试验组雄鱼精巢为乳白色片状,处于第Ⅳ期、精子生成期(S5);对照组精巢为红色细带状,边缘为锯齿状,处于第Ⅱ期、精原细胞增殖期(S1)。试验组血清雌二醇质量浓度为(182.06±30.52)pg/mL,显著高于对照组(P<0.05);11-酮基睾酮质量浓度为(7.30±2.15)pg/mL,与对照组无显著差异。试验结果表明,甲基睾酮可作用于鳗鲡精巢并促进精子的发生。

高效液相色谱法测定鱼饲料中甲基睾丸酮含量的研究

试验建立了鱼饲料中17α-甲基睾丸酮的液相色谱检测方法。该方法以甲醇提取样品中的甲基睾酮,3β-甲基-17β-羟基-5-雄烯-7-酮为内标;梯度洗脱,流动相分别为水-乙腈溶液(80:20,V/V),流速0.5 ml/min;柱温40℃,DAD检测器检测,内标法定量,甲基睾酮的平均保留时间为11.29 min(R.S.D=0.20%),内标为8.68 min(R.S.D=0.19%)。结果表明,在7.5～60.0μg/ml范围内线性关系良好,拟合度为0.999 8,回收率在94%～100%之间,相对标准偏差为1.97%～3.21%。

环境激素对纹沼螺RXR基因表达的影响

维甲酸X受体(RXR)基因在调控软体动物内分泌行为过程中起着关键作用.为揭示环境激素对软体动物RXR基因表达的调控作用,在前期构建纹沼螺转录组基础上,利用RACE技术扩增获得纹沼螺RXR基因cDNA全序列,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对环境激素暴露后纹沼螺RXR基因表达水平进行定量分析.研究结果显示,纹沼螺RXR基因与其他软体动物RXR具有较高的同源性,雌激素处理后RXR基因的表达先被抑制后被促进,雄激素处理后RXR基因的表达先被诱导后被抑制,并且不同暴露浓度组RXR基因表达差异不显著.研究结果表明,环境激素可能对纹沼螺有一定的毒理效应,为从分子水平上深入探究环境激素对软体动物危害机制提供了数据支持及理论基础.