分枝杆菌HGMS2中类固醇C20-羟基脱氢酶的鉴定

分枝杆菌常被用作甾体药物中间体生产菌种,然而当前人们对其具体的甾醇降解机制仍然不是很清楚。为了获得C20-羟基甾药中间体,文章直接以RS为底物进行了转化,并通过对转化产物进行TLC、HPLC、LS-MS和核磁分析,初步确定分枝杆菌中存在类固醇C20-羟基脱氢酶(1DHC)参与的代谢途径。同时,基于生物信息学和结构生物学,通过序列和结构比对分析,最终从分枝杆菌中鉴定出了一个与类固醇C20-羟基脱氢酶同源性很高的基因。将该基因在大肠杆菌中异源表达,并对其功能活性进行分析,证明该基因所编码的酶和类固醇C20-羟基脱氢酶具有相同的功能活性。文章首次从分枝杆菌中鉴定出一种类固醇C20-羟基脱氢酶,使研究者对分枝杆菌甾醇代谢机制有了更深入的理解,同时也为新型甾药中间体的制备以及分枝杆菌的改造奠定了理论基础。

13α-去氢表雄酮的皮质甾类侧链及其13β-差向异构体的合成

17-酮基甾体化合物在催化量乙二胺的存在下与硝基甲烷反应得到相应硝基烯衍生物。本文以13β醋酸去氢表雄酮为原料经三步反应转变成13α-去氢表雄酮(3)。化合物(3)经缩合,乙酰化,还原等反应合成了3β,21-二乙酰氧基-13α-孕甾-5,16-二烯-20-酮(8)。同时还合成了这些化合物13β-差向异构体,以比较反应性及波谱差异。并发现乙二胺用量的改变会得到一个副产物,其结构为13α-去氢表雄酮肟(9)。

安宫黄体酮母液中两个新化合物的分离与结构鉴定

目的研究药物安宫黄体酮中所含的杂质。方法应用柱色谱方法进行分离和纯化,NMR和MS等波谱方法确定结构。结果从安宫黄体酮母液中分离得到2个化合物。结论化合物1和2为新差向异构体,其结构分别鉴定为:17α氧乙酰基2β,6α二甲基孕甾4烯3,20二酮;17α氧乙酰基2α,6α二甲基孕甾4烯3,20二酮。

醋酸氟孕酮原料药相关物质分析

目的:鉴定醋酸氟孕酮原料药中的含量大于0.1%的相关物质。方法:运用液相色谱-光电二极管阵列检测-电喷雾离子阱质谱联用技术对醋酸氟孕酮原料药中的相关物质进行分离检测,然后比较相关物质与醋酸氟孕酮类似物的紫外光谱特征和二级质谱的裂解特征,确定相关物质的结构。结果:在醋酸氟孕酮原料药中检测到5个相关物质,其中17-乙酰氧基-9-氟-11,17-二羟基-孕甾4,6-二烯-3,20-二酮(P5,t_R=13.13 min)的含量大于0.1%,综合使用 LC/MS^n 和 DAD技术确定了其结构。结论:所鉴定的相关物质为醋酸氟孕酮的新副反应产物。

多种光谱综合确证孕甾双烯醇酮醋酸酯中微量杂质的结构

目的对孕甾双烯醇酮醋酸酯中含量>0.1%的杂质进行分离和结构鉴定。方法采用柱层析和制备液相色谱对杂质进行分离,用IR、2D-NMR及MS综合确证其化学结构。结果该杂质的结构为:孕甾-4、6、16-三烯-3、20-二酮。结论该法能够精确定位1个微量杂质各个原子的归属。

基于中试规模条件分枝杆菌降解甾醇侧链的初步研究

微生物降解甾醇侧链得到的产物雄甾4-烯-3,20-二酮(AD)和雄甾l,4-二烯-3,l7-二酮(ADD),是多数甾类药物的中间体,有着广阔的发展前景。本文在500L发酵罐的中试规模上,对分枝杆菌降解(Mycobacterium SP MB 3683)大豆甾醇侧链至AD的种子pH、移种时机及发酵过程pH控制进行了初步研究,结果表明:在投料浓度2%,转化时间96h的条件下,AD的含量达1.153%,转化率为57.6%。

矢镞叶蟹甲草中1个新的8-O-3′型新木脂素

目的研究矢镞叶蟹甲草Parasenecio rubescens全草的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、MCI小孔树脂柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱法对矢镞叶蟹甲草全草化学成分进行分离纯化,并通过NMR等波谱学技术鉴定所分离得到的单体化合物的结构;运用MTT法测试细胞毒活性。结果从矢镞叶蟹甲草90%丙酮提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为7R,8S-3-(3,4-methylenedioxybenzyl)-7,9-diangeloyloxy-5’-methoxy-9’-hydroxy-8-O-3’-neolignan (1)、黄体酮(2)、孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮(3)、β-谷甾醇(4)、胡萝卜苷(5)、珊瑚菜内酯(6)、异茴芹素(7)、咖啡酸乙酯(8)、(+)-annuionone D (9)、(-)-asperentin (10)。结论化合物1~10均为首次从该植物中分离得到。化合物1为1种新的8-O-3’型新木脂素,命名为矢镞叶蟹甲草素W。化合物2和3为植物来源的较少见的孕甾烷类成分。化合物1在给药浓度为100μmol/L时,对小鼠黑色素瘤B16细胞、人肝癌HepG2细胞、人乳腺癌MCF7细胞均无明显细胞毒活性。

抗肿瘤中药青龙衣化学成分的研究

目的研究抗肿瘤中药青龙衣的化学成分。方法近年大量的药理实验及临床研究表明青龙衣CHCl3及EtOAc部分具有显著的抗肿瘤作用，且毒性较小。本实验利用硅胶柱色谱和大孔吸附树脂分离化合物，并利用1D-NMR及2D-NMR光谱数据确定了化合物的结构。结果从青龙衣的CHCl3活性部位中分得8个化合物，并分别确定为20（S）-原人参二醇-3-酮（1）、达玛烷-20，24-二烯-3β-醇（2）、茸毛香杨梅酮（galeon）（3）、胡桃宁A（juglanin A）（4）、2a，3β，23-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸（5）、2a，3β—23-三羟基-12-烯-28-熊果酸（6）、齐墩果酸（7）、熊果酸（8）。结论化合物1为首次从天然资源中分离得到的新天然产物；化合物2及5～8均为首次从胡桃属植物中分离得到，此前未见该属三萜类化合物的报道；化合物3为首次从青龙衣中分离得到。

地塞米松新工艺

天津天药药业股份有限公司的王福军等人的发明专利：“地塞米松及其系列产品的制备方法”，专利号：CN101397320，于2009年4月公开。该发明提供了一条全新的合成地塞米松及其系列产品的工艺路线，选择1，4，9，16-四烯一孕甾-3，20-二酮为起始物，经过9，11位、16，17位和21位改造，可以得到地塞米松及其系列产品，如醋酸地塞米松，地塞米松磷酸钠等等。