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枸杞子、淫羊藿对衰老-年轻2BS融合细胞DNA合成的影响 被引量:5
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作者 吴白燕 邹俊华 +1 位作者 孟书聪 郑振 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期926-928,共3页
目的 :研究枸杞子、淫羊藿水提液对衰老 -年轻 2BS融合细胞DNA合成的影响。方法 :以人胚肺二倍体成纤维细胞国内标准株 2BS为衰老模型 ,用细胞脱核和细胞融合技术 ,观察枸杞子、淫羊藿对衰老-年轻 2BS融合细胞的DNA合成的影响。结果 :2B... 目的 :研究枸杞子、淫羊藿水提液对衰老 -年轻 2BS融合细胞DNA合成的影响。方法 :以人胚肺二倍体成纤维细胞国内标准株 2BS为衰老模型 ,用细胞脱核和细胞融合技术 ,观察枸杞子、淫羊藿对衰老-年轻 2BS融合细胞的DNA合成的影响。结果 :2BS细胞分别在含 0 0 2 5 (V/V)枸杞子、淫羊藿水提液的DMEM培养液中 ,可连续培养至 6 1 0± 2 9、5 6 0± 2 6代 ,对照组为 4 9 0± 2 6代 (P <0 0 1) ;衰老的 2BS细胞分别用枸杞子、淫羊藿水提液处理 2h后 ,进行细胞脱核并与年轻 2BS细胞融合 ,其〔3H〕TdR掺入百分率明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论 :枸杞子、淫羊藿均能促进衰老 -年轻 2BS融合细胞的DNA的合成速率 ,延长 2BS细胞寿命。 展开更多
关键词 枸杞子 淫羊藿 融合细胞 DNA合成 细胞衰老 衰老-年轻2bs融合细胞 人胚肺二倍体成纤维细胞 实验
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年轻与衰老2BS细胞中差异表达基因片段的筛选及特征分析 被引量:3
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作者 杨东丽 刘新文 +1 位作者 童坦君 张宗玉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期456-460,共5页
为探索人衰老机制 ,采用差异显示法分别从年轻和衰老 2BS细胞中筛选出特异的cDNA片段 .衰老相关细胞cDNA片段长 2 86bp ,命名为orc ,GenBank登录号为AI35 30 6 5 ;年轻相关的cDNA片段长 2 35bp ,命名为yrc ,GenBank登录号为AI35 30 6 4.... 为探索人衰老机制 ,采用差异显示法分别从年轻和衰老 2BS细胞中筛选出特异的cDNA片段 .衰老相关细胞cDNA片段长 2 86bp ,命名为orc ,GenBank登录号为AI35 30 6 5 ;年轻相关的cDNA片段长 2 35bp ,命名为yrc ,GenBank登录号为AI35 30 6 4.Southernblot分析表明 ,yrc在衰老和年轻2BS细胞、BGC 82 3细胞中的BamHⅠ酶切图谱均出现约 3 0kb杂交带 .Northern印迹分析显示 ,yrc在年轻和衰老 2BS细胞中均有 1 0kb和 0 5kb杂交带 ,其中 1 0kb带在两种细胞间差异不大 ,而0 5kb带则在年轻细胞中明显高于衰老细胞 .在胎儿心、肺、肝中也可见 0 5kb和 1 0kb两条杂交带 ;而在胎盘及胎儿肌肉、肾、脑、皮肤中 ,则只可见 0 5kb杂交带 ,无 1 0kb带 .orc基因转录本长约 2 0kb ,在衰老 2BS细胞中的表达高于年轻细胞 .结果表明 ,orc和yrc分别与细胞衰老和年轻相关 ,yrc 0 展开更多
关键词 衰老2bs细胞 差异表达基因片段 筛选 特征分析 年轻细胞
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消减杂交筛选2BS细胞衰老过程中差异表达基因 被引量:1
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作者 赵亮 童坦君 张宗玉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期311-318,共8页
细胞的复制性衰老最终导致不可逆的G1 期阻滞 ,研究此过程中差异表达基因对于阐明衰老发生机制有重要意义 .分别构建年轻和衰老 2BS细胞高表达基因的消减文库 ,经点杂交筛选后共得5 3个差异表达基因 .对其中部分基因的VirtualNorthern... 细胞的复制性衰老最终导致不可逆的G1 期阻滞 ,研究此过程中差异表达基因对于阐明衰老发生机制有重要意义 .分别构建年轻和衰老 2BS细胞高表达基因的消减文库 ,经点杂交筛选后共得5 3个差异表达基因 .对其中部分基因的VirtualNorthern印迹分析证实差异表达确实存在 .选择Y1 1 4和S1 1 1片段 ,以Northern印迹分析确证其表达变化 ;并通过对新生儿和老年人白细胞中二者的表达分析 ,显示二者在体内也存在与体外衰老过程相一致的随增龄表达变化 .结果在一定程度上体现了 2BS细胞衰老过程中基因表达谱的变化 ;首次报道了TSSC3(tumorsuppressingsubtransferablecandidate 3)、hnRNPK (heterogeneousnuclearribonucleoproteinK)等基因在成纤维细胞衰老时发生差异表达 ;通过对Y1 1 4和S1 1 1在体内衰老时的表达分析 。 展开更多
关键词 复制性衰老 2bs 消减杂交 差异表达基因
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比较胰酶/EDTA两种消化液对携带水痘-带疱疹病毒的2BS消化效果分析 被引量:5
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作者 郝鹏博 谢秋红 +1 位作者 杜岩 杨蕾蕾 《中国实用医药》 2011年第21期60-61,共2页
目的比较胰酶和EDTA两种消化液消化感染水痘-带状疱疹病毒的2BS细胞冻融后的病毒滴度(VT)。方法分别配制两种浓度的胰酶和EDTA:0.125%、0.25%的胰酶,0.01%、0.02%的EDTA各1000ml,按比例加入预先培养好的携带水痘-带疱疹病毒的等量2BS细... 目的比较胰酶和EDTA两种消化液消化感染水痘-带状疱疹病毒的2BS细胞冻融后的病毒滴度(VT)。方法分别配制两种浓度的胰酶和EDTA:0.125%、0.25%的胰酶,0.01%、0.02%的EDTA各1000ml,按比例加入预先培养好的携带水痘-带疱疹病毒的等量2BS细胞中,消化后,用显微镜观察细胞形态,消化液离心、浓缩、冻融、检测并比较病毒滴度。结果与0.125%、0.25%的胰酶、0.01%EDTA,0.25%的胰酶与0.02%的EDTA混合消化液相比,用0.02%的EDTA消化液消化感染水痘-带状疱疹病毒的2BS细胞,冻融后的病毒滴度提高了1.3~0.8个log值。结论用0.2%EDTA消化液消化的含有水痘病毒的细胞获得的病毒滴度最好。 展开更多
关键词 胰酶 EDTA 2bs细胞 病毒滴度
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Ceruloplasmin or Fibronectin Synergism with Quartz Dust on Stimulating Collagen Gene Transcription in Human 2BS Fibroblast 被引量:1
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作者 LIU BING-CI YOU BAO-RONG +2 位作者 LIU YU-YING WANG GENG-FU MIAO QIN AND LI YU-RUI (Institute of Occupational Medicine, Chinese Academy of Preventive Medicine,Beijing 100050, China) 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 1995年第3期246-253,共8页
Human α1(Ⅰ), α2(Ⅰ) and α1(Ⅲ) cDNA probes and RNA dot hybridization were employed to quantitate collagen mRNA changes after adding silica dust into the media of human 2BS fibroblasts. At all dosages used (100, 20... Human α1(Ⅰ), α2(Ⅰ) and α1(Ⅲ) cDNA probes and RNA dot hybridization were employed to quantitate collagen mRNA changes after adding silica dust into the media of human 2BS fibroblasts. At all dosages used (100, 200, 500 and 1000μg), the α1(Ⅰ), α2(Ⅰ)and α1(Ⅲ) mRNA levels increased one day after dusting. At the same dosage of silica (100μg), α1(Ⅲ) mRNA increased earlier than type Ⅰ collagen mRNA did. The type Ⅰ and type Ⅲ collagen mRNA contents in the experimental groups were higher than those in control on days 3, 5, 7 and 9. The effect of ceruloplasmin (Cp) and fibronectin (Fn) on collagen mRNA synthesis was also studied, after adding silica dust, Cp or Fn into the media of human 2BS fibroblast. The results showed that Cp and Fn have stimulating effect on collagen mRNA production. When both Cp and silica dust were added into cell culture media, the collagen mRNA level was increased more than those of adding either Cp or silica dust alone. Similar situations were found for Fn. Cp (or Fn) synergism with silica dust on stimulating transcription of human collagen gene was suggested 展开更多
关键词 Res Gene Ceruloplasmin or Fibronectin Synergism with Quartz Dust on Stimulating Collagen Gene Transcription in Human 2bs Fibroblast Chen length BS FN Figure Li
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2BS-JT10精密蔬菜播种机 被引量:2
6
作者 万勇 《长江蔬菜》 2014年第9期12-13,共2页
蔬菜播种机适合无需移栽的蔬菜品种种植要求,该类型机械适用范围广,从小白菜种子到玉米、黄聂种子都可播种。在播种过程中可按农艺需求调整好株行距,将播种、覆土、压土一次性完成。最大同时可播10行或者13行,减少90%的人工。机械... 蔬菜播种机适合无需移栽的蔬菜品种种植要求,该类型机械适用范围广,从小白菜种子到玉米、黄聂种子都可播种。在播种过程中可按农艺需求调整好株行距,将播种、覆土、压土一次性完成。最大同时可播10行或者13行,减少90%的人工。机械播种能保持行距、株距、深度基本一致,作物生长时通风透光性强,成熟一致,商品性强,可达到增产、增收、增效目的。本节将重点介绍2BS—JT10精密蔬菜播种机。 展开更多
关键词 蔬菜播种机 2bs 白菜种子 机械播种 蔬菜品种 作物生长 株行距 一次性
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EGF对2BS细胞增殖能力的影响及其在化妆品中含量的测定
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作者 贾玉春 《北京日化》 1999年第4期25-29,共5页
关键词 化妆品 EGF 2bs 细胞增殖力 测定
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GENOTOXIC EFFECT OF CIGARETTE SMOKE CONDENSATE (CSC) ON HUMAN DIPLOID CELL 2BS STRAIN
8
作者 谷梅 胡国刚 罗贤懋 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1992年第2期42-45,共4页
A series of bioassays such as sister chromatid exchange frequencies ( SCE.), chromosomal aberration ( CA ), micronuclel rate (MN) and cell-cycle delay have been used to detecting the genotoxic effect of cigarette smok... A series of bioassays such as sister chromatid exchange frequencies ( SCE.), chromosomal aberration ( CA ), micronuclel rate (MN) and cell-cycle delay have been used to detecting the genotoxic effect of cigarette smoke condensate (CSC) on human diploid cell 2BS strain. The results suggested that a higher SCE, ( 17. 0/ cell) was observed In 2BS cells treated with CSC at 100 μg/ml, as compared with 6. 9/cell of the background (P<0. 001). CA rate was significantly increased from 4% to 36% In cells treated with 10 μg/ml CSC (P< 0.001). MN rate varied from 9 -26‰ In cells treated with CSC compared to that of control (6‰). Meanwhile, the cell-cycle of cells was markedly delayed by CSC. The survival rate of 2BS cells declined to 59. 6% for treatment with CSC at 200 μg/ ml. There was a dose-effect response In SCE., CA, MN rate. We proposed that active oxygen might responsible for genotoxiclty of CSC on cells. 展开更多
关键词 CSC CELL GENOTOXIC EFFECT OF CIGARETTE SMOKE CONDENSATE ON HUMAN DIPLOID CELL 2bs STRAIN
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T2BS.2RL小麦-黑麦易位对小麦烘烤品质的影响
9
作者 赵尊练 《国外农学(麦类作物)》 CSCD 1995年第4期8-10,15,共4页
以前的研究已经表明,含有第一组染色体的小麦-黑麦易位对小麦的烘烤品质有不利影响.一个新的小麦-黑麦易位系(T2BS.2RL,Hamlet)应该对由第1-6组染色体控制的小麦贮藏蛋白无影响.这个新易位系含有一个抗麦蝇蚊... 以前的研究已经表明,含有第一组染色体的小麦-黑麦易位对小麦的烘烤品质有不利影响.一个新的小麦-黑麦易位系(T2BS.2RL,Hamlet)应该对由第1-6组染色体控制的小麦贮藏蛋白无影响.这个新易位系含有一个抗麦蝇蚊[Mayetioladestructor(Say)]的单显基因(H21).本研究的目的就是确定T2BS.2RL易位对磨粉和烘烤品质是否有影响。对11个易位系和5个非易位系的几个烘烤品质性状进行了比较。结果表明,易位系的容重、出粉率和籽粒硬度降低了,但通过选择可以克服之;和面时间、烘和时间也有所减短,但与非易位系差异很小,基本上不影响烘烤品质。面粉蛋白质含量、和面耐性、面包体积及面包屑等级与非易位系无明显差异,而面粉颜色和吸水率有了明显的改善。总之,这一易位对磨粉和烘烤品质无多大影响。 展开更多
关键词 小麦 烘烤品质 小麦-黑麦 染色体易位 T2bs 2RL
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慢性纤维空洞型肺结核病人血清促2BS细胞增生的研究
10
作者 马忠森 赫国志 +2 位作者 孙立群 成玉华 朱平 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1995年第5期517-518,共2页
实验采用一组慢性纤维空洞型肺结核(简称慢纤洞肺结核)病人血清,观察了其对2BS细胞促增生的影响。结果证明,加病人血清2BS细胞培养组的cpm值明显高于对照组,而且随着血清浓度的升高,cpm值亦增高,增殖量从1.74到... 实验采用一组慢性纤维空洞型肺结核(简称慢纤洞肺结核)病人血清,观察了其对2BS细胞促增生的影响。结果证明,加病人血清2BS细胞培养组的cpm值明显高于对照组,而且随着血清浓度的升高,cpm值亦增高,增殖量从1.74到9.99倍。提示了慢纤洞肺结核病人血清中含有多种细胞因子,或以纤维化的形式痊愈,或以纤维化导致气体交换面积减少,最后导致呼吸功能衰竭。 展开更多
关键词 慢性纤维空洞型 肺结核 2bs细胞 细胞因子
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2BS型手动人参播种机
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《农业装备技术》 2002年第2期38-38,共1页
关键词 2bs 手动 人参播种机
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2BS型蔬菜育苗播种机
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作者 肖远金 《当代蔬菜》 2004年第6期34-34,共1页
关键词 2bs型蔬菜育苗播种机 南京农机化研究所 研制 技术参数
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人二倍体细胞(2BS株)细胞库的建立及生物学特性鉴定 被引量:6
13
作者 梁本 王佳凤 +9 位作者 侯良玉 麻广 李永忠 李立 哈秀杰 李开军 单玉杰 林崇健 刘晔 黄林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第11期1384-1387,共4页
目的建立人二倍体细胞(2BS株)主细胞库和工作细胞库。方法将人二倍体细胞(2BS株)扩大培养后冻存,建立主细胞库和工作细胞库,采用台盼蓝染色计数细胞,计算细胞活力,并进行染色体、外源病毒因子、微生物污染、致瘤性的检测及鉴别试验... 目的建立人二倍体细胞(2BS株)主细胞库和工作细胞库。方法将人二倍体细胞(2BS株)扩大培养后冻存,建立主细胞库和工作细胞库,采用台盼蓝染色计数细胞,计算细胞活力,并进行染色体、外源病毒因子、微生物污染、致瘤性的检测及鉴别试验。将全面检定合格的工作细胞库细胞分别接种至T75一次性培养瓶、3 L玻璃转瓶和10层细胞工厂,观察细胞形态;将水痘病毒分别按0.010 5、0.012 8、0.018 8 MOI接种至T75一次性培养瓶、3 L玻璃转瓶和10层细胞工厂上的单层细胞,收获病毒原液,检测病毒滴度。结果主细胞库细胞活力为94.1%,工作细胞库细胞活力为94.4%;1 000个处于分裂相时期的细胞的核型分析结果均在《中国药典》三部(2010版)人二倍体细胞染色体分析标准的规定范围内;细胞上清液和裂解液中人外源病毒因子检测结果均为阴性,符合《中国药典》三部(2010版)规程要求;细胞均贴壁,成纤维细胞形态,种属鉴别为人细胞B型;细胞库未被细菌、真菌、病毒及支原体污染,也未出现致瘤性。建立的细胞库在3种培养器皿中均可在工艺要求时间内生长为单层,单位面积活细胞浓度在(2.01~2.59)×105个/cm2之间,收获的病毒滴度在5.0~5.25 lg PFU/ml之间,符合成都生物制品研究所有限责任公司《水痘减毒活疫苗制造及检定规程》要求。结论建立了人二倍体细胞(2BS株)主细胞库和工作细胞库,为2BS细胞应用于水痘减毒活疫苗的研发和生产提供细胞资源和理论依据。 展开更多
关键词 人二倍体细胞(2bs株) 细胞库 生物学特性
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低剂量照射诱导A549和2BS细胞适应性反应的研究 被引量:7
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作者 张占春 贾廷珍 朱应葆 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,共4页
目的 观察A5 49细胞 (肺癌细胞 )和 2BS细胞 (人胚胎肺成纤维细胞 )低剂量照射后能否诱导适应性反应 ,探讨肿瘤细胞与正常细胞在诱导适应性反应方面存在的差异 ,并结合细胞周期变化 ,进一步阐明适应性反应形成机理。方法  1 应用克隆... 目的 观察A5 49细胞 (肺癌细胞 )和 2BS细胞 (人胚胎肺成纤维细胞 )低剂量照射后能否诱导适应性反应 ,探讨肿瘤细胞与正常细胞在诱导适应性反应方面存在的差异 ,并结合细胞周期变化 ,进一步阐明适应性反应形成机理。方法  1 应用克隆形成法和苔盼蓝细胞染色计数法 ,分别绘制了A5 49细胞和 2BS细胞的剂量 存活曲线。 2 应用流式细胞技术 ,对不同剂量照射后A5 49和2BS细胞周期进行了分析。结果  1.2BS细胞经低剂量照射诱导出适应性反应 (预先给予低剂量照射组的剂量 存活曲线与未预照射组比较 ,P <0 .0 1)。A5 49细胞经低剂量照射未诱导出适应性反应(P >0 0 5 )。2 .2BS细胞经低剂量加高剂量照射组于照后 30min即出现明显的G2 期阻滞 ,且细胞周期于 2 4h内恢复。结论 低剂量照射A5 49细胞未诱导出适应性反应 ,而 2BS细胞可诱导出适应性反应 。 展开更多
关键词 低剂量照射 适应性反应 细胞周期 A549 2bs细胞 辐射损伤 肿瘤
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疫苗生产用人二倍体细胞2BS和MRC-5中猪圆环病毒的检测 被引量:3
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作者 刘欣玉 黄艳秋 李玉华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第7期732-734,共3页
目的检测疫苗生产用人二倍体细胞2BS和MRC-5是否存在外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type 1,PCVl)和猪圆环病毒2型(PCV2)污染。方法对已建立的PCR方法进行灵敏度验证后,检测人二倍体细胞2BS和MRC-5中PCV1和PCV2污染情况。结... 目的检测疫苗生产用人二倍体细胞2BS和MRC-5是否存在外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type 1,PCVl)和猪圆环病毒2型(PCV2)污染。方法对已建立的PCR方法进行灵敏度验证后,检测人二倍体细胞2BS和MRC-5中PCV1和PCV2污染情况。结果两种细胞上清中最低均可检出1 pg的PCV1和PCV2 DNA,灵敏度较高;两种细胞中PCV检测结果均为阴性。结论在生产用人二倍体细胞2BS和MRC5中,均未检出PCV1和PCV2污染。 展开更多
关键词 人二倍体细胞 2bs细胞 MRC-5细胞 疫苗 猪圆环病毒 聚合酶链反应
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氧化应激状态下2BS细胞DNA损伤与修复能力的增龄性变化 被引量:1
16
作者 王金玲 王培昌 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期459-461,共3页
衰老是发生在分子、细胞及整个机体的多因素协同引起的生命弱化过程。可靠易测的衰老生物学指标的确立,对衰老机制的研究、衰老相关疾病的诊断及亚健康状态的评估、延缓衰老药物的筛选等至关重要。自1995年Chen等提出氧化DNA损伤导致... 衰老是发生在分子、细胞及整个机体的多因素协同引起的生命弱化过程。可靠易测的衰老生物学指标的确立,对衰老机制的研究、衰老相关疾病的诊断及亚健康状态的评估、延缓衰老药物的筛选等至关重要。自1995年Chen等提出氧化DNA损伤导致复制性衰老以来,众多研究提示,DNA损伤修复能力可能具有细胞衰老标志物的潜在条件。然而,以彗星实验观察各代龄细胞DNA损伤水平时发现,在正常状态下年轻与衰老细胞均无明显彗尾,这可能由于尽管DNA损伤水平随代龄升高,修复能力随代龄下降, 展开更多
关键词 细胞DNA损伤 氧化DNA损伤 损伤修复能力 应激状态 增龄性变化 2bs 衰老机制 延缓衰老药物
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Identification of C-geranylated flavonoids from Paulownia catalpifolia Gong Tong fruits by HPLC-DAD-ESI-MS/MS and their anti-aging effects on 2BS cells induced by H2O2 被引量:8
17
作者 TANG Wen-Zhao WANG Ying-Ai +2 位作者 GAO Tian-Yang WANG Xiao-Jing ZHAO Yun-Xue 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2017年第5期384-391,共8页
The fruits of Paulownia catalpifolia Gong Tong are used as a Chinese folk herbal medicine for the treatment of enteritis, tonsillitis, bronchitis, and dysentery, etc. Our previous study has identified new C-geranylate... The fruits of Paulownia catalpifolia Gong Tong are used as a Chinese folk herbal medicine for the treatment of enteritis, tonsillitis, bronchitis, and dysentery, etc. Our previous study has identified new C-geranylated flavanones with obvious anti-proliferative effects in lung cancer A549 cells. In the present study, a new C-geranylated flavone, paucatalinone C(1) and five known C-geranylated flavanones(2-6) were isolated. In addition, a total of 34 C-geranylated flavonoids were detected by HPLC-DAD-ESI-MS/MS coupling techniques from the CH_2Cl_2 extract of P. catalpifolia. Futhermore, anti-aging effects of isolated compounds were evaluated in vitro with premature senescent 2BS cells induced by H_2O_2. Phytochemical results indicated that P. catalpifolia was a natural resource of abundant C-geranylated flavonoids. Diplacone(3) and paucatalinone A(5) were the potent anti-aging agents in the premature senescent 2BS cells induced by H_2O_2 and the C-geranyl substituent may be an important factor because of its lipophilic character. 展开更多
关键词 Paulownia catalpifolia Gong Tong C-geranylated flavonoids Paucatalinone C HPLC-DAD-ESI-MS/MS Anti-aging effects 2bs cells
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两种方法制备的水痘-带状疱疹病毒(Oka株)毒种感染2BS细胞的敏感性 被引量:5
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作者 梁慧颖 隋波 +5 位作者 赫宝双 梁雪 李生军 张宇 杨晓叶 沈红杰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第11期1459-1462,共4页
目的用现有方法及新方法分别制备水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)(Oka株)毒种,比较两种方法制备的毒种对2BS细胞的感染复数及増殖动态差异。方法用现有方法(用含2%小牛血清的病毒维持液于-70℃条件下冻存Oka株毒种... 目的用现有方法及新方法分别制备水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)(Oka株)毒种,比较两种方法制备的毒种对2BS细胞的感染复数及増殖动态差异。方法用现有方法(用含2%小牛血清的病毒维持液于-70℃条件下冻存Oka株毒种)和新方法(用含90%小牛血清的病毒冻存液于-196℃条件下冻存Oka株毒种)制备第47代Oka株VZV毒种,采用不同的MOI(0.000 5、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1)感染第37代2BS细胞,观察细胞病变(CPE)情况,收获不同MOI接种和培养不同时间点病毒制备疫苗,采用噬斑法检测疫苗原液、成品滴度以及37℃稳定性,确定两种方法制备的毒种对2BS细胞感染的最适MOI。结果现有方法制备毒种以0.01~0.1 MOI感染2BS细胞72 h后,病变达到高峰期;新方法制备毒种以0.001~0.01 MOI感染2BS细胞72 h后,病变达到高峰期。两种方法收获的病毒液制备的成品疫苗的病毒滴度为4.4~4.6 lg PFU/ml,37℃放置1周,病毒滴度3.8~4.0 lg PFU/ml;疫苗原液、成品滴度以及37℃稳定性无差异,均达到本公司水痘减毒活疫苗制造与检定规程制定的相关标准。结论现有方法和新方法制备的毒种最适MOI分别为0.01~0.1和0.001~0.01,新方法制备的毒种更适合水痘疫苗的生产。 展开更多
关键词 水痘-带状疱疹病毒 2bs细胞 感染复数 病毒滴度
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新生牛血清的质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响 被引量:5
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作者 付永其 金珏艳 +6 位作者 张颖欣 刘辉 陆晨 宋艳梅 杨琦 陆梦溪 王为 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第11期1182-1187,1191,共7页
目的考察新生牛血清质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响。方法选择来源可追溯性、工艺质量稳定,且检定合格的新生牛血清样品配制细胞生长液,用于SPF鸡胚细胞和2BS细胞的培养。待细胞生长成致密成纤维单层细胞,记录细... 目的考察新生牛血清质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响。方法选择来源可追溯性、工艺质量稳定,且检定合格的新生牛血清样品配制细胞生长液,用于SPF鸡胚细胞和2BS细胞的培养。待细胞生长成致密成纤维单层细胞,记录细胞成单层的时间,用胰酶消化细胞,通过全自动细胞计数仪对细胞悬液进行测定,观察总细胞数、活细胞数,计算细胞存活率。根据活细胞数计算MOI,分别用腮腺炎及风疹病毒接种SPF鸡胚细胞和2BS细胞,检测收获病毒液的滴度。结果SPF鸡胚细胞总细胞数不低于3.5×10~6个/mL,活细胞数不低于2.1×10~6个/mL,细胞存活率不低于60%;2BS细胞总细胞数不低于7.0×10~5个/mL,活细胞数不低于4.2×10~5个/mL,细胞存活率不低于60%。腮腺炎病毒原液滴度在6.1~6.6 lgCCID_(50)/mL之间,平均值为6.28 lgCCID_(50)/mL,SD为0.11,生产过程加工能力指数(process capability index,Cpk)为1.51,批间质量趋于一致;风疹病毒原液滴度均在5.5~6.2 lgCCID_(50)/mL之间,平均值为5.8 lgCCID_(50)/mL,SD为0.17,Cpk值为1.40,批间质量趋于一致。结论新生牛血清的质量良好,用其培养SPF鸡胚细胞和2BS细胞的活细胞比率可控,收获的病毒液滴度较均一,差异性较小。 展开更多
关键词 新生牛血清 质量控制 SPF鸡胚细胞 人二倍体(2bs)细胞 细胞存活率 病毒滴度
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带状疱疹疫苗生产中2BS细胞细胞工厂培养工艺的建立 被引量:4
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作者 梁雪 刘延威 +4 位作者 张宇 石磊 杨晓叶 李生军 沈红杰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第11期1485-1487,1492,共4页
目的建立带状疱疹疫苗生产中2BS细胞在细胞工厂中的培养工艺。方法将2BS细胞复苏(28代)后,连续传代至35、36代,再分别按1∶4、1∶2比例传至10层细胞工厂中,采用不同的加液量(200、300、400 ml/层)进行培养,显微镜下观察细胞形态,并进行... 目的建立带状疱疹疫苗生产中2BS细胞在细胞工厂中的培养工艺。方法将2BS细胞复苏(28代)后,连续传代至35、36代,再分别按1∶4、1∶2比例传至10层细胞工厂中,采用不同的加液量(200、300、400 ml/层)进行培养,显微镜下观察细胞形态,并进行细胞计数。取细胞工厂,按MOI 0.008接种水痘-带状疱疹病毒,制备成带状疱疹减毒活疫苗,检测疫苗原液及成品的滴度;疫苗成品进行37℃稳定性试验;采用酶联免疫法检测抗生素残留量和牛血清白蛋白残留量;凝胶法检测内毒素含量;水分容量滴定法检测水分含量。结果 2BS细胞按1∶2比例传代,细胞工厂单层加液量为300 ml,可制备单层致密、优质的细胞,细胞工厂收获时细胞病变达80%以上,且病变细胞圆润、典型、广泛,细胞形态保持较好;传代比例为1∶4的细胞制备的疫苗原液及成品的滴度明显低于传代比例为1∶2的细胞制备的疫苗,且1∶4传代的细胞制备的疫苗成品37℃稳定性滴度不符合带状疱疹疫苗放置1周病毒滴度不小于4.6 lg PFU/ml的质量标准;其他各项质量指标均符合要求。结论建立了带状疱疹疫苗生产中2BS细胞在细胞工厂中的培养工艺,利用细胞工厂可制备出质量均一、致密优质的2BS细胞。 展开更多
关键词 带状疱疹疫苗 2bs细胞 细胞工厂
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