β-1,3/α-1,3-葡聚糖与益生菌复配物的润肠通便功能

为探讨β-1,3/α-1,3-葡聚糖与益生菌复配对便秘小鼠通便作用的影响,将小鼠随机分为5组:阴性对照组、模型组、β-1,3/α-1,3-葡聚糖与副干酪乳酸杆菌质量比1∶1组、β-1,3/α-1,3-葡聚糖与鼠李糖乳杆菌质量比1∶1组、β-1,3/α-1,3-葡聚糖与乳双歧杆菌质量比1∶1组。除对照组外,其余组别均采用盐酸洛哌丁胺建立小鼠便秘模型。观察各组小鼠首粒黑便排出时间、6 h黑便粒数、粪便质量、粪便含水量及小肠墨汁推进率。结果表明:与模型组相比,3组处理组均能显著缩短便秘小鼠的首粒黑便排出时间,显著增加粪便质量、粪便粒数、墨汁推进率及粪便含水量。其中β-1,3/α-1,3-葡聚糖与副干酪乳杆菌1∶1组改善便秘效果优于β-1,3/α-1,3-葡聚糖与鼠李糖乳杆菌、乳双歧杆菌质量1∶1组。研究表明,β-1,3/α-1,3-葡聚糖与益生菌复配能有效促进便秘小鼠肠道蠕动,促进排便,具有润肠通便作用。

温阳健脾化痰汤辅助治疗支气管扩张疗效及对HNP1-3、IL-17变化的研究

目的研究温阳健脾化痰汤辅助治疗支气管扩张的疗效及对患者α-防御素1-3(HNP1-3)、白细胞介素-17(IL-17)的变化影响。方法选取诸暨市人民医院2020年10月—2022年4月收治的支气管扩张缓解期患者86例,采用随机数字法分为两组。对照组给予体位引流、盐酸氨溴索片等常规治疗,汤剂组加用温阳健脾化痰汤治疗,连续治疗4周。分析两组治疗4周后的疗效,检测两组肺功能、相关血清因子及圣乔治呼吸问卷(SGOR)评分、6 min步行距离(6MWT)的差异。结果汤剂组治疗4周后中医证候总有效率(90.70%,39/43)高于对照组(74.42%,32/43),差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前肺功能指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。汤剂组治疗4周后第1秒用力呼气量(FEV1)[(2.86±0.42)L]、用力肺活量(FVC)[(2.96±0.33)L]、FEV1/FVC(60.47%±6.89%)水平高于对照组(P<0.05)。两组治疗前HNP1-3、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)、IL-17水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。汤剂组治疗4周后除IL-2水平高于对照组外,其他因子水平低于对照组(P<0.05)。两组治疗前SGOR评分、6MWT比较,差异无统计学意义(P>0.05)。汤剂组治疗4周后6MWT[(394.11±70.14)m]长于对照组,SQRQ评分[(12.41±3.65)分]低于对照组(P<0.05)。结论温阳健脾化痰汤辅助治疗支气管扩张可改善肺功能,减轻炎症反应,提高生活质量及运动耐力。

SIRT1、FAP-α、caspase-3在结直肠癌中的表达及相关性

目的探究沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、成纤维细胞活化蛋白-α(fibroblast activation protein-α,FAP-α)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine aspartase-3,caspase-3)在结直肠癌中的表达及相关性。方法收集2021年4月至2022年4月整理归档较为完整的45例为结直肠癌组织石蜡标本,另外选取45例为距离癌组织边缘5 cm的癌旁组织石蜡标本。采取免疫组化法检测SIRT1、FAP-α、caspase-3水平表达,分析SIRT1、FAP-α、caspase-3在结直肠癌中的表达变化及与预后的相关性。结果与癌旁组织相比,结直肠癌组织中SIRT1、FAP-α、caspase-3表达量均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组织中SIRT1、FAP-α、caspase-3表达与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤位置、远处转移无关,与淋巴结转移、肿瘤的直径、组织学类别、浸润程度、TNM分期、脉管瘤栓、分化程度有关相关,差异有统计学意义(P<0.05)。SIRT1、FAP-α、caspase-3之间Pearson相关性分析显示,SIRT1、FAP-α之间呈正相关(r=0.534,P=0.001);FAP-α、caspase-3之间呈正相关(r=0.556,P=0.001);SIRT1、caspase-3之间呈正相关(r=0.585,P=0.001)。ROC曲线显示,三项联合对结直肠癌的诊断价值高于SIRT1、FAP-α、caspase-3单项诊断(P=0.001)。结论结直肠癌患者机体内SIRT1、FAP-α、caspase-3水平表达上升,可看出其水平变化与结直肠癌患者产生病症有密切的关联,因此三者可作为预测结直肠癌患者治疗的重要依据。

血清α-突触核蛋白、微管相关蛋白1轻链3、载脂蛋白A1与帕金森病认知功能、疾病进展的关系

目的检测α-突触核蛋白(α-synuclein)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、载脂蛋白A1(Apo A1)水平在帕金森病(PD)患者血清中的表达情况,以及三者与PD患者发生认知功能障碍(CI)、疾病进展的相关性。方法选取96例PD患者作为研究组,另外选取同期体检健康者90例为对照组。根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分将患者分为CI组(42例)和认知功能正常组(54例)。根据Hoehn-Yahr(H-Y)分期量表将PD患者分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ期,其中Ⅰ~Ⅱ期PD患者纳入早期PD组(57例),Ⅲ~Ⅴ期PD患者纳入中晚期PD组(39例)。测定PD患者血清中α-synuclein、LC3、Apo A1水平。分析α-synuclein、LC3、Apo A1与H-Y分期的相关性。采用多因素Logistic回归分析筛选PD患者发生CI的影响因素。结果研究组α-synuclein水平高于对照组,LC3、Apo A1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);早期PD组α-synuclein水平低于中晚期PD组,LC3与Apo A1水平高于中晚期PD组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清α-synuclein水平与H-Y分期呈正相关(P<0.05)。三者联合预测PD患者发生CI的曲线下面积(AUC)为0.925,大于α-synuclein、LC3、Apo A1单独预测的AUC(P<0.05)。α-synuclein、LC3、Apo A1、高血压史是PD患者发生CI的影响因素(P<0.05)。结论α-synuclein在PD合并CI患者血清中呈高表达,LC3、Apo A1呈低表达,三者与PD认知功能、疾病进展的关系密切。

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA及血清中TNF-α、IL-1含量表达的影响

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)mRNA及血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)的影响。方法:将60只小鼠随机分为6组,空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组,对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组制备光老化模型,空白对照组正常饲养。空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,阳性对照组(VE组)给予维生素E滴剂,于造模前30 min灌胃。造模完成后,采用Elisa和RT-PCR方法检测血清中TNF-α、IL-1含量和皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA含量的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组血清中TNF-α、IL-1和皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA含量的表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型对照组组比较,中药低、中、高剂量组血清中TNF-α、IL-1和皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:桃红四物汤在皮肤光老化过程中具有保护作用。

N-取代-3-吲哚乙酰胺类α_1-肾上腺素受体拮抗剂的设计、合成及其3D-QSAR研究

结合α1 受体拮抗剂的构效关系和我们应用计算机辅助药物设计方法所构建的药效团模型 ,设计合成了一系列N 取代 3 吲哚乙酰胺类化合物 ,并评价其α1 受体拮抗作用 .初步生物活性测试表明 ,所合成的目标化合物多数具有较好的α1 受体拮抗活性 .并应用SOMFA方法进行分子结构特征和α1 受体生物活性之间的关系研究 .

α-二亚胺钴配合物催化1,3-丁二烯高活性与高顺式-1,4选择性聚合(英文)

合成了一系列α-二亚胺钴配合物[ArN=C(Me)-(Me)C=NAr]CoCl2(Ar = C6H5, 3a; 4-MeC6H4, 3b; 4-MeOC6H4, 3c; 4-FC6H4,3d; 4-ClC6H4, 3e; 2-MeC6H4, 3f; 2-EtC6H4, 3g; 2-iPrC6H4, 3h; 2,4,6-Me3C6H2, 3i; 2,6-Et2C6H3, 3j; 2,6-iPrC6H3, 3k)和作为对比的吡啶双亚胺二氯化钴配合物(4a), 并用X射线单晶衍射方法研究了配合物3i, 3k和4a的分子结构. α-二亚胺钴配合物在倍半乙基氯化铝的作用下对丁二烯聚合有较高的催化活性, 得到的顺式-1,4结构含量达98%, 且有较高分子量(Mn≈ 1×104-1×105)的聚丁二烯. 配体的电子效应影响催化剂的活性及顺式-1,4选择性, 而配体的空间位阻对丁二烯聚合几乎没有影响. 详细研究了聚合时间、聚合温度、烷基铝助催化剂及铝比等条件对丁二烯聚合行为的影响.

猪、牛成纤维细胞α-1，3-半乳糖基转移酶基因的敲除以及人白细胞抗原-G1基因的敲入

构建了敲除猪α-1,3-GT并敲入人白细胞抗原HLA-G1基因的打靶载体pZJ,其中以新霉素抗性基因（Neo）为正筛选基因,绿色荧光蛋白基因（GFP）为负筛选基因。采用优化的脂质体转染法将打靶载体pZJ转染于一个长势良好的胎猪成纤维细胞系中,经7天G418（600μg/ml）药物筛选,共获得30个Neo抗性细胞克隆,其中12个为非绿色荧光细胞克隆,7个扩大培养良好,提取阳性克隆细胞的基因组DNA并进行PCR检测。经PCR结果检测,打靶载体转入到胎猪成纤维细胞中,其中3个非荧光阳性单克隆细胞在细胞基因组中进行了定点整合。以同样的脂质体转染条件将pZJ转染牛胎儿成纤维细胞,经筛选并对其进行PCR检测,其中2个均为定点整合阳性。该研究为今后克隆出表达HLA-G1而不表达α-1,3-GT基因的个体猪,从而提供可以真正用于临床的异种器官打下了基础,也为猪牛之间的跨物种敲除提供了一个佐证。

α-羰基烯酮环二硫代缩醛化学(Ⅵ)——β,β-1,3-亚丙二硫基-α,β-不饱和芳酮与烯丙基Grignard试剂加成物脱水反应的研究

提出了由β,β-1,3-亚丙二硫基-α,β-不饱和芳酮类化合物(1)与苄基氯化镁及烯丙基溴化镁加成所得的醇(2)在BF_3·Et_2O催化下脱水生成共轭烯烃(3)新的合成途径,合成了13种新化合物,结构经~1H N-MR、IR、UV及元素分析等确证.并对这一新合成途径的反应机制进行了讨论.

猪α-1,3-半乳糖转移酶基因打靶载体的构建

目的:构建猪α-1,3-半乳糖转移酶(GGTA1)基因的正负筛选打靶载体。方法:以原代猪胚胎成纤维细胞基因组DNA为模板,采用长程PCR方法扩增出GGTA1基因的2条片段;以长约2kb包含部分第9外显子的片段为同源短臂,在XbaⅠ和ClaⅠ位点插入pLoxP质粒正筛选标记neo基因的3'端;以长约5.4kb包括部分第8外显子、全部第8内含子及部分第9外显子的片段为同源长臂,于NotⅠ位点插入该质粒中neo基因的5'端;2.7kb的负筛选标记tk基因位于载体中同源短臂的3'端外侧。结果与结论:酶切、PCR及测序结果表明,同源臂被正确连接至质粒pLoxP,成功构建了猪GGTA1基因正负筛选打靶载体pSL/GT。

白花丹醌对CIA大鼠滑膜细胞增殖及TNF-α、IL-1β和MMP-3表达的影响

目的研究白花丹醌对脂多糖(LPS)诱导的体外培养CIA大鼠成纤维样滑膜细胞(CIA-FLS)的增殖及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的影响。方法采用Ⅱ型胶原蛋白+弗氏完全佐剂建立大鼠关节炎模型(CIA);原代培养CIA-FLS,MTT法检测药物对CIA-FLS增殖的影响;随机设立CIA对照组、LPS对照组、甲氨蝶呤组、白花丹醌1.0μmol/L组、白花丹醌1.5μmol/L组、白花丹醌2.0μmol/L组;各药物与细胞共同孵育48 h后,ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和MMP-3的含量;Western blot检测细胞内MMP-3的蛋白含量。结果 MTT显示,白花丹醌能不同程度抑制CIA-FLS的增殖,呈浓度和时间依赖性;与LPS对照组比较,甲氨蝶呤或白花丹醌均能明显下调细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和MMP-3的含量(P<0.001),明显降低细胞中MMP-3的蛋白含量(P<0.001)。结论白花丹醌能抑制CIA-FLS的增殖,并能通过下调TNF-α、IL-1β和MMP-3的表达而抑制LPS诱导CIA-FLS的炎症反应。

冬青膏局部膏摩配合推拿对膝骨性关节炎患者关节滑液TNF-α、IL-1及MMP-3的影响

目的:观察中药冬青膏局部膏摩配合推拿治疗膝骨性关节炎的临床疗效并探讨其作用机制。方法:80例膝骨性关节炎患者,按数字表法随机分为两组,每组40例,对照组采用扶他林乳膏外涂,治疗组采用膝部涂抹冬青膏推拿疗法,对比观察治疗后Lysholm评分、Womac骨关节炎指数评分以及膝关节滑液TNF-α、IL-1以及MMP-3的含量。结果:治疗组有效率为92.50%,显著高于对照组(75.00%),治疗后治疗组的Lysholm评分、Womac骨关节炎指数评分显著优于对照组(P﹤0.01),治疗后膝关节滑液的TNF-α、IL-1以及MMP-3含量均显著降低(P﹤0.01),且治疗组显著优于对照组(P﹤0.01)。结论:冬青膏局部膏摩配合推拿治疗膝骨性关节炎能显著改善临床症状,降低膝关节滑液TNF-α、IL-1以及MMP-3的含量是其部分作用机制。

hTERT启动子调控的异种抗原基因α-1,3GT表达载体的构建及其在肺癌细胞中的靶向表达

目的:构建人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控的异种移植抗原α-1,3半乳糖基转移酶(α-1,3galactosyltransferase,α-1,3GT)基因真核表达载体,研究其调控的α-1,3GT在肿瘤细胞中的靶向表达。方法:将前期克隆并测序正确的猪α-1,3GT基因定向克隆到pEGFP-hTERTp质粒中,构建α-1,3GT真核表达载体pEGFP-hTERTp-GT。分别将pEGFP-hTERTp-GT和CMV启动子调控的α-1,3GT真核表达质粒pEGFP-N1-GT转染端粒酶阳性的人肺癌细胞A549及端粒酶阴性的正常人胚肺成纤维细胞MRC-5。RT-PCR检测转染细胞中α-1,3GTmRNA的表达,免疫荧光法和流式细胞仪检测α-gal抗原的表达。结果:成功构建了pEGFP-hTERTp-GT真核表达载体。转染pEGFP-N1-GT的A549和MRC-5中均有α-1,3GTmRNA的表达;转染pEGFP-hTERTp-GT的A549中有α-1,3GTmRNA的表达,而端粒酶阴性的MRC-5细胞中无α-1,3GTmRNA的表达。转染pEGFP-N1-GT的A549和MRC-5中均可表达异种移植抗原α-gal;转染pEGFP-hTER-Tp-GT质粒的A549中有α-gal的表达,而MRC-5细胞中无α-gal的表达(P<0.01)。结论:hTERT启动子调控的α-1,3GT基因能靶向性表达在端粒酶阳性的肺癌细胞中,并合成异种移植抗原α-gal。

RP-HPLC法测定茜草中1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-[3-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]的含量

首次采用反相高效液相色谱法测定茜草根中1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-[3-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]的含量。色谱柱为Purospher star RP C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水:四氢呋喃(65:34.7:0.3),流速为1.0mL/min,检测波长为276nm,柱温为25℃。该方法的线性范围为0.020~0.160μg,r=0.9998,平均回收率为101.5%,RSD为2.0%(n=6)。该方法测定1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-[3-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]含量灵敏、准确、重现性好。

1-(3-甲基-1-氨基)丁烷基硼酸频哪醇酯盐酸盐的合成研究

The hydrochloride of 1-(1-amino-3-methyl)butyl borate pinacol is prepared by using the isobutylbromide to form the Grignard agent.The product is protected with the pinacol,then reacted with the lithium diisopropylamide and the anhydrous zinc chloride.Finally,the product is synthesized in the existence of the LHMDS.All the compounds are confirmed by MS and 1H-NMR.

水中α,β-不饱和酮与3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮的加成反应

在水溶剂中有三乙基苄基氯化铵 (TEBA)存在下 ,α ,β 不饱和酮与 3 甲基 1 苯基 2 吡唑啉 5 酮发生迈克尔加成反应 ,以良好的产率生成相应的 1,3 二芳基 3 (3′ 甲基 1′ 苯基 5′ 羟基 2′ 吡唑啉 4′ 基 ) 1 丙酮 .

N-取代-3-吲哚乙酰胺类α_1-肾上腺素受体拮抗剂的合成及生物活性

目的设计合成新型吲哚乙酰胺类α1 肾上腺素受体拮抗剂 ,评价其α1 肾上腺素受体拮抗活性。方法结合α1 肾上腺素受体拮抗剂的构效关系和计算机辅助药物设计方法所构建的药效团模型 ,设计合成了 19个N 取代 3 吲哚乙酰胺类化合物 ,并测定拮抗参数 pA2 值。结果 18个化合物未见文献报道 ,其结构均经1H NMR、IR及ESI MS(HRMS)确证。结论初步生物活性测试表明 :所合成的目标化合物多数具有较好的α1

风湿3号膏方对类风湿关节炎患者外周血清中IL-1及TNF-α的影响

目的观察风湿3号膏方治疗类风湿关节炎(RA)的临床疗效及对外周血清中IL-1和TNF-α的影响。方法 100例活动期RA患者随机分为两组,对照组(50例)常规使用甲氨蝶呤+羟氯喹+美洛昔康治疗,观察组(50例)在对照组基础上加用风湿3号膏方治疗,观察2组治疗前后各项临床和实验室指标的变化。结果观察组各项临床和实验室指标(包括关节肿胀数、关节压痛数、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)及IL-1和TNF-α)的改善程度明显优于对照组(均P<0.05)。结论在常规治疗的基础上加用风湿3号膏方治疗RA具有较好的临床疗效,对改善关节功能及降低活动期炎症指标具有较好的作用,且能明显降低外周血清中IL-1和TNF-α的表达水平。

HIF-1α、Caspase-3、Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的表达及相关性分析

目的研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α.)、Caspase-3、Survivin在食管癌的发生、发展、浸润、转移过程中的作用及有无相互关系,为进一步寻找抑制食管鳞癌发生、发展的途径提供理论依据。方法应用免疫组化S-P法检测49例食管鳞癌组织中HIF-1α、Caspase-3、Survivin蛋白的表达并进行相关性分析。结果HIF-1α蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率为51.0%(25/49),显著高于正常食管黏膜0%(0/32)(P<0.05);HIF-1α蛋白的阳性表达与Caspase-3蛋白表达呈负相关关系,与Survivin蛋白表达呈正相关关系,提示HIF-1α蛋白的阳性表达下调了Caspase-3蛋白的表达,使Survivin蛋白的表达率增加,食管癌细胞凋亡受阻。结论HIF-1α蛋白在食管鳞癌组织中的表达显著增高,联合检测HIF-1α、Caspase-3与Survivin可作为判断食管癌生物学行为的客观指标,对判断食管癌的预后具有重要意义。

禹州漏芦药材中α-三联噻吩和5-(丁烯-3炔-1)-2,2’联噻吩的含量分析研究

目的:建立禹州漏芦药材中α-三联噻吩和5-(丁烯-3炔-1)-2,2’联噻吩含量测定方法。方法:采用Agilent Extent C18(4.6mm i.d.,5μm)柱;流动相:甲醇-0.1%的醋酸水溶液(80∶20);流速:0.8mL.min-1;检测波长:352nm;柱温30℃。结果:α-三联噻吩和5-(丁烯-3炔-1)-2,2’联噻吩的线性范围分别为在0.171～0.855μg(r=0.9999)和0.207～1.035μg(r=0.9999);加样回收率分别为98.2%(RSD=1.27%)和101.1%(RSD=1.48%)。结论:该方法为该药材质量标准的制定提供参考依据。