基于网络药理学和分子对接技术的2,3-吲哚醌抗少弱精症机制研究

为研究2,3-吲哚醌(isatin, ISA)治疗少弱精症的可能作用靶点和作用机制,基于公共数据库分别获取ISA作用靶点和少弱精症相关疾病靶点,确定交集靶点,采用Cytoscape软件获取核心靶点。通过GO功能富集和KEGG通路分析交集靶点,采用分子对接预测ISA与靶点蛋白的结合能力。研究结果显示,ISA干预少弱精症主要涉及氧化应激、细胞凋亡和炎症等生物学过程,并与p53信号通路、细胞衰老通路和IL-17信号通路密切相关;经筛选确定8个核心靶点,ISA与其中6个核心靶点稳定结合。这表明,ISA可能通过作用于核心靶点CASP3、TP53、ESR1、PTGS2、TNF和ANXA5,调控p53信号通路和IL-17信号通路发挥抗少弱精症作用。

2,3-吲哚醌对大鼠离体胸主动脉舒缩功能的影响

2,3-吲哚醌（2,3-indolinedione,isatin,ISA）为吲哚类衍生物,又名靛红,是近年发现存在于人和动物体内的一种内源性活性物质,且广泛存在于海洋生物如龙虾和十字花科植物中[1-2]。基础及临床研究表明,ISA 在人体不同器官和体液中均有分布[3-5]。研究表明,ISA使动物产生类似焦虑的行为,并且在焦虑和紧张的状态下,心脏、脑、血浆中其水平会升高[6-8]。然而,目前ISA对胸主动脉舒缩功能的调控作用及机制尚不十分清楚。因此,本研究利用离体血管环实验模型,探讨ISA对大鼠离体胸主动脉舒收缩功能的影响及机制,为心血管疾病的防治提供新的理论依据。

2,3-吲哚醌对乳腺癌BT549细胞生长的抑制作用及其机制

目的探讨2,3-吲哚醌对乳腺癌BT549细胞生长的抑制作用及其机制。方法体外培养乳腺癌BT549细胞,通过CCK8实验筛选2,3-吲哚醌药物浓度并检测其对BT549细胞增殖的抑制作用;乳腺癌BT549细胞经2,3-吲哚醌加药处理72 h后,通过Transwell、划痕实验检测2,3-吲哚醌对BT549细胞侵袭和迁移的抑制作用;2,3-吲哚醌加药处理BT549细胞72 h后,采用实时定量PCR(qPCR)方法检测BT549细胞中p53基因(p53)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白基因(Bax)以及MDM2基因(MDM2)mRNA相对表达量的变化;2,3-吲哚醌加药处理BT549细胞72 h后,采用Western blot方法检测细胞中P53、Bcl-2、Bax和MDM2蛋白的相对表达情况。结果CCK8实验结果显示,与0μmol/L组相比,随着2,3-吲哚醌浓度的升高,BT549细胞的增殖水平逐渐下降(F=74.64,P<0.01)。Transwell实验和划痕实验结果显示,与0μmol/L组相比,加入2,3-吲哚醌的浓度越高,细胞的侵袭和迁移能力越低(F=751.48、314.67,P<0.01)。qPCR方法检测结果显示,与0μmol/L组相比较,随着2,3-吲哚醌浓度的增加,细胞中p53和Bax mRNA相对表达量逐渐增高(F=62.82、20.86,P<0.01),Bcl-2、MDM2 mRNA相对表达量逐渐下降(F=21.53、30.31,P<0.01)。Western blot检测结果显示,与0μmol/L组比较,随着2,3-吲哚醌浓度的增高,细胞中P53、Bax蛋白的相对表达水平逐渐增高(F=29.59、53.12,P<0.01),Bcl-2、MDM2蛋白相对表达水平逐渐下降(F=14.85、159.81,P<0.01)。结论2,3-吲哚醌通过P53信号通路抑制乳腺癌BT549细胞的增殖、侵袭和迁移。

2,3-吲哚醌对帕金森病模型小鼠抗氧化酶活性的影响研究

目的:探讨2,3-吲哚醌(ISA)神经保护作用的可能机制。方法:40只C57BL/6J小鼠分为空白对照组、模型组、ISA(200mg.kg-1灌胃)组和司来吉兰(0.5mg.kg-1腹腔注射)组。各组给予相应药物10d,后3组腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备帕金森病(PD)模型,随后处死小鼠测定各组小鼠血浆和脑组织中单胺氧化酶B(MAO-B)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的活性。结果:与空白对照组比较,模型组MAO-B活性略有升高,SOD、GSH-px活性降低(P<0.01);与模型组比较,ISA、司来吉兰组MAO-B活性明显降低,SOD、GSH-px活性明显升高(P<0.01或P<0.05)。结论:ISA对MPTP造成多巴胺能神经元损伤的保护作用可能与其抑制MAO-B活性,减少毒性产物量,提高自由基清除能力,减少氧化性应激损伤有关。