6′-羟基爵床定A对肿瘤细胞的抑制活性及其对肿瘤细胞氧化还原系统的影响

目的筛选对6′-羟基爵床定A(JR6)敏感的肿瘤细胞株并探讨其对细胞氧化还原功能的影响。方法将人膀胱癌细胞株EJ、肝癌细胞Bel、肺癌细胞A549、结肠癌细胞HCT-8和HT-29、胃癌细胞BGC、大肠癌细胞LS180、宫颈癌细胞HeLa、肝癌细胞HepG2以及乳腺癌细胞MCF-7分为正常对照组、阳性药对照顺铂、多柔比星、替尼泊苷、依托泊苷和5-氟尿嘧啶组及JR6组,细胞加入相应的药物培养48h后,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率并计算IC50值。选用对JR6与多柔比星作用敏感的人膀胱癌细胞EJ,加入相应的药物培养48h后,分别检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。EJ细胞分为外源性SOD+多柔比星9.19μmol.L-1组和外源性SOD+JR63.02,9.07,27.2,81.7和245μmol.L-1处理组,其中SOD分别为0,1.9,5.6,16.7,50和150kU.L-1,MTT法检测细胞存活率。多柔比星9.19μmo.lL-1,JR612.3,49.0和196μmo.lL-1加入EJ细胞,24h后用激光共聚焦显微镜检测EJ细胞内活性氧类的含量。结果 EJ细胞对JR6较为敏感,IC50为57.1μmol.L-1,多柔比星对EJ细胞的IC50为4.08μmol.L-1。其余9种肿瘤细胞对JR6的IC50值为71.3～123μmol.L-1。与正常对照组比较,多柔比星9.19μmo.lL-1能明显降低EJ细胞内SOD,GSH-Px和CAT活性,分别降低了(64.3±2.1)%,(66.5±3.5)%和(49.6±1.9)%,而MDA的含量明显升高了(432.0±5.4)%(P<0.01);JR63.02,9.07,27.2,81.7和245μmo.lL-1使EJ细胞内SOD的活性分别降低了(7.28±0.3)%,(57.1±3.2)%,(66.5±4.7)%,(72.1±5.5)%和(77.8±2.4)%;GSH-Px活性分别降低了(20.3±1.6)%,(32.8±2.3)%,(45.3±3.6)%,(59.3±4.5)%和(71.9±4.2)%,CAT活性分别降低了(10.1±0.6)%,(15.9±0.7)%,(25.9±2.3)%,(38.8±3.5)%和(52.4±3.9)%;同时MDA含量分别升高了(24.4±1.3)%,(90.2±8.70)%,(217.0±19.0)%,(356.0±24.0)%和(539.0±32.0)%(P<0.05,P<0.01)。与无外源性SOD组比较,在外源性SOD存在时,多柔比星与JR6对EJ细胞的生长抑制率明显下降(P<0.05)。与正常对照组相比,多柔比星9.19μmol.L-1使EJ细胞活性氧类水平升高了(43.0±2.1)%,JR612.3,49.0和196μmol.L-1使EJ细胞ROS水平分别升高了(40.7±0.7)%,(84.1±6.3)%和(151.0±2.9)%(P<0.01)。结论人膀胱癌细胞株EJ对JR6最敏感;JR6通过干预细胞内氧化还原系统平衡抑制细胞的增殖,外源性SOD可以拮抗JR6对敏感细胞增殖的抑制作用。

LC-MS/MS法测定裸鼠肝脏中6'-羟基爵床定A的浓度

目的建立测定裸鼠肝组织中6'-羟基爵床定A浓度的LC-MS/MS法,并用于裸鼠的组织分布研究。方法色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱;流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速0.5 ml.min-1,柱温为室温。采用ESI源,以多反应监测方式分别监测离子对m/z 410.8→136.9(6'-羟基爵床定A)和m/z 386.1→122.0(内标丁螺环酮)。肝组织匀浆后采用蛋白沉淀法进行预处理。结果 6'-羟基爵床定A在裸鼠肝组织中的线性范围为1.0～2000ng.ml-1,日内精密度RSD小于8.61%;日间精密度RSD小于8.15%,回收率在89.3%～98.3%范围内。结论该方法简单、灵敏、准确,适用于裸鼠肝组织中6'-羟基爵床定A的浓度测定及其组织分布研究。

3-羟基-6-O-甲基红霉素的合成优化与副产物的分析

分别以甲醇和水为溶剂,探讨了克拉霉素脱克拉定糖反应的主要产物,结果发现:以甲醇为溶剂得到的不是3-羟基-6-O-甲基红霉素,而是3-羟基-8,9,10,11-二脱水-9,12-半缩酮-6-O-甲基红霉素.以水为溶剂得到了3-羟基-6-O-甲基红霉素,收率94.7%.

药物干预对6-羟基多巴胺处理大鼠的纹状体细胞外液多巴胺的影响

目的 研究古拉定、川芎嗪、丹参对 6 羟基多巴胺 ( 6 OHDA)处理后大鼠的纹状体细胞外液多巴胺 (DA)及其代谢产物的影响。方法 运用 6 OHDA损毁大鼠黑质 ,设立正常对照组、6 O HDA损毁组、损毁后古拉定治疗组、川芎嗪治疗组和丹参治疗组。损毁后 8周用微透析法采集各组大鼠纹状体细胞外液 ,用高效液相色谱 电化学法 (HPLC ECD)检测DA、DOPAC、HVA。结果 发现四组损伤组的DA及其代谢产物含量明显低于正常对照组 (P <0 .0 0 1) ,而三组治疗组与非治疗组组间比较无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 三种药物不能改变 6

药物干预对6-羟基多巴胺处理后大鼠多巴胺神经元、多巴胺及其代谢产物的影响

目的:研究古拉定、川芎嗪、丹参对6-羟基多巴胺(OHDA)处理后大鼠的黑质多巴胺(DA)神经元及纹状体细胞外液DA的影响。方法;将6-OHDA注射入大鼠黑质,饲养2周后用阿朴吗啡(APO)诱发其旋转行为并计数,饲养2个月时利用微透析法采集大鼠纹状体细胞外液,然后大鼠灌注取脑,酪氨酸羟化酶(TH)单抗染色,观察正常对照组、单纯手术组、古拉定治疗组(古拉定12mg/kg腹腔注射每天1次,共14天)、川芎嗪治疗组(川芎嗪50mg/kg腹腔注射每天1次,共14天)、丹参治疗组(丹参2.5ml/kg腹腔注射每天1次,共14天)的黑质DA神经元的变化,用高效液相色谱电化学法检测细胞外液的DA及代谢产物的含量变化。结果:TH单抗免疫组化染色可见4个手术组的黑质DA神经元计数明显低于正常对照组,差异有极显著性(P<0.001),而4组组间无统计差异;4个手术组纹状体DA的含量低于对照组,差异有显著性(P<0.001),4组的二羟苯乙酸(DOPAC)/DA低于对照组(P<0.001),4组组间均无差异。结论:古拉定、川芎嗪、丹参不能阻止6-OHDA对黑质DA神经元的毒性作用,亦不能增加损伤侧纹状体的DA含量。

RP-HPLC法同时测定爵床药材中6'-羟基-爵床定B、新爵床脂定B和TaiwanE的含量

目的:建立爵床药材中6'-羟基-爵床定B、新爵床脂定B和Taiwan E 3个活性成分的HPLC含量测定方法。方法:采用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱(0～9 min,40%乙腈;9～10 min,40%→45%乙腈;10～40 min,45%乙腈),流速0.8 mL·min-1,检测波长256 nm,柱温30℃。结果:6'-羟基-爵床定B、新爵床脂定B和Tai-wan E的线性范围分别为0.023～0.454μg(r=0.9999)、0.022～0.446μg(r=0.9999)和0.024～0.478μg(r=0.9998);平均回收率分别为101.7%(RSD=1.6%)、95.7%(RSD=0.30%)和99.4%(RSD=1.7%)。结论:本方法可用于爵床药材的质量控制。

Box-behnken响应面法优化爵床中2种成分的提取工艺

目的通过Box-behnken响应面法优化爵床中6'-羟基-爵床定B和爵床定B的提取工艺。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取次数为影响因素,6'-羟基-爵床定B和爵床定B总提取率为评价指标,Box-behnken响应面法优化工艺。结果最佳条件为乙醇体积分数70%,料液比1∶50,提取时间1 h,提取次数2次,6'-羟基-爵床定B和爵床定B总提取率0.926 8 mg/g,与预测值(0.912 3 mg/g)相当。结论该方法稳定可行,可用于提取爵床中6'-羟基-爵床定B和爵床定B。

聚（对羟基苯甲酸／6－羟基萘－2－酸）纤维结晶结构的研究

用Ｘ－射线衍射和热分析的方法对聚（对羟基苯甲酸／６一羟基萘－２．酸）共聚芳酯纤维结构及其在热处理过程中的变化进行了研究，结果表明，尽管沿分子链方向共聚单体呈无规分布，但共聚组分仍能形成共晶，纤维具有一定的空间规整性。经强化热处理后，纤维结晶结构发生了变化。

爵床化学成分、药理作用与临床应用的研究进展及其质量标志物预测分析

爵床主要含有木脂素、黄酮、生物碱等类型的化学成分,临床上常用于辅助治疗疟疾、热病、肺热咳嗽、毒蛇咬伤等疾病。现代药理研究表明其具有抗血小板聚集、镇痛、抗肿瘤和抗炎等多种药理作用。本综述对爵床的本草考证进行了更具体的归纳,并结合国内外研究对爵床的化学成分、药理作用以及临床应用进行了总结,基于“五原则”及网络药理学、传统药性对爵床的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析。初步预测6′-羟基爵床脂定A、6'-羟基爵床脂定B、6'-羟基爵床脂定C、爵床脂定B、金不换甲醚、山奈酚等成分可作为爵床的Q-Marker,以期为更好地开发和利用爵床属植物资源提供借鉴。

HPLC同时测定爵床药材中6′-羟基-爵床定B和6′-羟基-爵床定A的含量

目的:建立爵床药材中6′-羟基-爵床定B和6′-羟基-爵床定A2个活性成分的HPLC含量测定方法。方法:采用RAINBOW Micsphere-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(40∶60),流速:1.0mL.min-1,检测波长256nm,柱温30℃。结果:6′-羟基-爵床定B和6′-羟基-爵床定A的线性范围分别为2.2～22.0μg·mL-1(r=0.9996)和1.7～17.0μg·mL-1(r=0.9999);平均回收率(n=3)分别为98.1%(RSD=2.5%)和99.4%(RSD=1.8%)。结论:本方法稳定,重现性好,操作简单,可用于爵床药材的质量控制。

基于HPLC-QAMS法对清热通淋丸中7种成分的质量控制研究

目的建立高效液相一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定清热通淋丸中三叶豆紫檀苷、苦参醇I、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的含量。方法采用高效液相色谱法,以Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃。以苦参酮为内参物,建立其他6个成分的相对校正因子,计算含量。结果三叶豆紫檀苷、苦参醇Ⅰ、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的质量浓度分别在0.91~22.75μg/ml(r=0.999 5)、1.89~47.25μg/ml (r=0.999 3)、5.67~141.75μg/ml (r=0.999 7)、1.29~32.25μg/ml (r=0.999 5)、1.48~37.00μg/ml (r=0.999 6)、2.56~64.00μg/ml (r=0.999 4)、4.09~102.25μg/ml (r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为97.99%(1.42%)、98.44%(0.85%)、99.47%(0.92%)、96.98%(1.21%)、99.50%(0.74%)、100.00%(1.04%)和98.39%(1.32%),建立的高效液相一测多评法用于测定清热通淋丸中7种指标性成分的含量,一测多评法所得结果与外标法无明显差异。结论所建立的HPLC-QAMS法结果准确,可用于清热通淋丸的质量控制。

右美托咪定对老年患者骨科手术后睡眠质量的影响

目的探讨右美托咪定改善老年骨科患者手术后睡眠质量。方法选择2016年5月至2017年12月骨科老年手术患者120例,男66例,女54例,年龄75~93岁,BMI 18.5~23.9kg/m2,ASAⅡ或Ⅲ级。随机分为两组:右美托咪定组(D组)和对照组(C组),每组60例。所有患者气管插管全麻下行手术治疗,缝皮时停止使用麻醉药物,静注托烷司琼5 mg后接静脉自控镇痛(PCIA)并开启术后镇痛,D组镇痛药物为舒芬太尼1.5~2.5μg/kg+托烷司琼5 mg+右美托咪定2μg/kg。C组镇痛药物为舒芬太尼1.5~2.5μg/kg+托烷司琼5mg,泵注速度1.0~2.5ml/h,单次追加量为0.5ml,锁定时间15min,总容量100ml。术后疼痛视觉模拟评分(VAS评分)>3分时患者行自控镇痛或非甾体抗炎药物辅助。自主呼吸恢复后拔管前给予静注氟马西尼0.3~0.5 mg、新斯的明0.5~1mg、阿托品0.2~0.5mg。于术前1天(T0)、术后第1天(T1)、术后第2天(T2)、术后第3天(T3)和术后第4天(T4)分别收集患者晨起第一次尿液2ml,检测并记录6-羟基硫酸褪黑素(aMT6s)浓度。于术前、术后24、48h和出院前进行匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分,记录术后4、8、12、24和48h的VAS评分。结果 D组T1-T4时aMT6s明显高于C组(P<0.05)。D组术后24、48h和出院前PSQI评分明显低于C组(P<0.05)。两组不同时点VAS评分差异无统计学意义。结论右美托咪定对老年患者骨科手术后睡眠质量有明显的改善。

神经节苷脂对帕金森病鼠模型旋转行为的影响

运用６—羟基多巴胺制作帕金森病大鼠模型，并于腹腔内注射混合型神经节苷脂，然后观察其对由阿朴吗啡所诱发的旋转行为的影响。结果，加混合型神经节苷脂组于阿朴吗啡注入后３０分钟内的平均旋转圈数为２０４±１１２，低于蒸馏水对照组的２９７±１６２。提示混合型神经节苷脂可能具有防治帕金森病的作用。

金毛耳草蒽醌的分离和鉴定

金毛耳草[Hydyotis chrysotricha (Palibin) Meer] 为茜草科植物,其全草为常用中药,用于治疗暑热泻痢,湿热黄疸,水肿,有清热利水,散结之效。全草含三萜酸,脂肪酸,甾醇等类化合物。我们从中分到几个微量成分,经鉴定为6-甲氧基-7-羟基香豆素,紫丁香脂素(syrinyaresinol)和命名为金毛耳草蒽醌(Ⅰ)的新化合物。这些成分均系从该植物中首次得到。

羟基积雪草苷对LPS致小鼠痛觉增敏影响研究

目的:观察羟基积雪草苷对小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)诱导痛觉增敏型疼痛的影响,并探讨羟基积雪草苷对髓过氧化物酶(MPO)、白介素-6(IL-6)和α-肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。方法:随机将小鼠分为空白组、模型组、盐酸度冷丁组、羟基积雪草苷10、20、40mg·kg-1六组,通过腹腔注射LPS100μg·kg-1建立痛阈增敏型疼痛模型,采用醋酸扭体法、热板法观察羟基积雪草苷镇痛效应;通过MPO试剂盒检测小鼠脑组织MPO活性、ELISA法检测血浆TNF-α,IL-6含量的变化。结果:羟基积雪草苷10、20、40mg·kg-1各组明显减少醋酸扭体次数,提高小鼠痛阈。降低脑组织MPO活性和血浆TNF-α、IL-6含量。结论:MC具有明显镇痛效应,其镇痛效应可能与降低MPO、IL-6和TNF-α有关。

一测多评法测定五味健脑合剂中7种成分的含量

目的建立能同时测定五味健脑合剂中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、6-姜辣素和8-姜酚含量的一测多评法(QAMS)。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:30℃;以乙腈-1 mL·L^(-1)磷酸为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长分别为320(检测2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)和270 nm(检测朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、6-姜辣素和8-姜酚);以淫羊藿苷为内参物,测定2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、6-姜辣素和8-姜酚的相对校正因子(RCF),利用RCF计算指标性成分的含量,并与外标法(ESM)测定结果进行对比,验证QAMS的可行性。结果 7种成分分别在7.68~192.00,2.86~71.50,4.69~117.25,7.87~196.75,5.46~136.50,1.83~45.75和0.67~16.75μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均回收率(RSD值)分别为99.31%(0.97%),98.50%(1.25%),98.19%(1.35%),100.04%(0.67%),97.99%(1.40%),96.94%(1.29%)和97.26%(0.91%),ESM和QAMS法测定结果无明显差异。结论 QAMS评法操作便捷、结果准确、重复性好,可用于五味健脑合剂中7种成分的同时测定。

神经节苷脂GM1对6-OHDA诱导的PC12细胞氧化应激的保护作用

目的:用6-羟基多巴胺(6-OHDA)作用PC12细胞建立帕金森病细胞模型,观察6-OHDA诱导PC12发生氧化应激以及神经节苷脂GM1对细胞氧化损伤的保护作用。方法:将细胞随机分为正常对照组和实验组,正常对照组于正常培养基生长,实验组以不同浓度6-OHDA、GM1和50μmol·L-1PI3-K抑制剂LY294002处理。用MTT法检测细胞存活率,利用2'7'-二乙酰二氯荧光素检测细胞内活性氧(ROS)水平,测定细胞内脂质过氧化物(MDA)和钠钾ATP酶水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:GM1预处理组与单纯6-OHDA实验组相比,PC12细胞存活率升高,钠钾ATP酶活性恢复,ROS和MDA水平降低,凋亡率下降;以PI3-K抑制剂LY294002预处理阻断PI3-K信号后,GM1对氧化损伤的保护作用减弱。结论:GM1对6-OHDA引起的细胞氧化应激损伤有保护作用,这种保护作用可能是通过启动PI3-K信号通路产生的。

冠心病患者血清ox-LDL、SAA、IL-6、25(OH)D3表达及临床意义

目的探究冠心病患者血清氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、淀粉样蛋白A(SAA)、白介素-6(IL-6)、25羟基维生素D3[25(OH)D3]水平及临床意义。方法选取2023年3月至2023年8月期间200例冠心病患者作为研究对象,根据SYNTAX积分将患者分为高危组、中危组、低危组,采用Rentrop法评估患者的侧支循环情况并分为侧支循环良好组、侧支循环不良组,比较不同分组患者临床指标[低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)]及血清ox-LDL、SAA、IL-6、25(OH)D3水平,分析血清ox-LDL、SAA、IL-6、25(OH)D3水平与临床指标的相关性,分析侧支循环不良的独立相关因素,建立预测模型,采用受试者工作特征曲线(ROC)验证模型的预测效能。结果低危组、中危组、高危组SYNTAX积分、LDL-C、TC、TG及血清ox-LDL、SAA、IL-6水平均呈升高趋势,HDL-C及血清25(OH)D3水平均呈下降趋势(P<0.05);侧支循环不良组血清ox-LDL、SAA、IL-6水平高于侧支循环良好组(P<0.05),25(OH)D3水平低于侧支循环良好组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,血清ox-LDL、SAA、IL-6水平与SYNTAX积分、TC、TG均呈正相关(P<0.05),与Rentrop分级均呈负相关(P<0.05),ox-LDL、SAA、IL-6水平与HDL-C呈负相关(P<0.05),25(OH)D3水平与SYNTAX积分、TC、TG均呈负相关(P<0.05),与Rentrop分级、HDL-C呈正相关(P<0.05);logistic多因素回归分析显示,ox-LDL、SAA、IL-6、25(OH)D3均为冠心病患者侧支循环不良的独立相关因素(P<0.05);构建侧支循环不良的预测模型:Y=-5.525+0.054 X1+0.353 X2+0.205X3-0.091 X4,Y代表侧支循环不良的回归系数,X1~X4分别表示ox-LDL、SAA、IL-6、25(OH)D3;ROC曲线显示,该模型预测侧支循环不良的ROC曲线下面积为0.879(95%CI:0.832~0.925,P<0.001),最佳截断值对应的敏感度、特异度、约登指数分别为90.2%、69.5%、0.597,拟合优度检验显示,χ^(2)=3.955,P=0.961。结论冠心病患者血清ox-LDL、SAA、IL-6水平升高,25(OH)D3水平降低,这些指标与冠脉病变程度、侧支循环情况及血脂异常有一定相关性,四者均为侧支循环不良的独立影响因素,联合构建的预测模型对于侧支循环不良具有较高的预测价值。

血满草化学成分的研究

首次对采自峨眉山的接骨木属植物血满草进行了化学成分的研究,从氯仿部分及总浸膏的水悬浮液中分离得到5个化合物:分别是1-(3-羟基-4-甲氧基)乙烷-1′,2′-二醇(1-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-1′,2′-ethane-diol,1),熊果酸(ursolic acid,2),1-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙烷-1′,2′-二醇(1-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-1′,2′-ethanediol,3),落叶松脂醇(lariciresinol,4),5,7,3′,4′-四羟基黄酮-3-O-吡喃鼠李糖(1→6)吡喃葡萄糖苷(5,7,3′,4′-tetramethoxyflavone-3-O-rhamnopyranosyl-(1→6)-glucopyranoside,5)。其中1、3、4、5为首次从该植物中分离得到。

基于UFLC-IT-TOF-MS技术的牡荆子中2个木脂素在大鼠体内代谢研究

目的对牡荆子中2个木脂素单体化合物6-羟基-4-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-7-甲氧基-3,4-二氢-2-萘醛(VB-1)和vitedoin A(VB-2)在大鼠体内的代谢情况进行研究。方法采用超快速液相色谱-离子阱飞行时间质谱(UFLC-IT-TOF-MS)技术,鉴定大鼠分别ig给予2个木脂素单体化合物后,粪便、尿液、胆汁、血浆中的代谢产物。结果发现并确证了2个木脂素原型及其11个代谢产物在大鼠体内的存在。通过代谢产物鉴定分析了其主要代谢途径,发现在大鼠体内这2个木脂素成分发生了葡萄糖醛酸化、硫酸化、羟化、羟化硫酸化、还原葡萄糖醛酸化和还原硫酸化等代谢反应。结论通过对2个木脂素单体化合物代谢产物的分析,基本阐明了其在体内的代谢过程,为进一步的药理活性及其机制研究提供了依据。