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数控机床用7/24圆锥柄ISO 7388新旧标准的比较
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作者 孟广达 马晓娟 《机械工程师》 2009年第10期131-132,共2页
通过2007年发布的新7/24圆锥柄的三个国际标准与1983年的老国际标准之间的结构对比发现,新标准主要以德国、美国、日本的现行标准为依据,涵盖了目前国际通用的绝大多数7/24圆锥柄结构,其锥度公差有了较大提高,对圆锥柄部圆度和母线直线... 通过2007年发布的新7/24圆锥柄的三个国际标准与1983年的老国际标准之间的结构对比发现,新标准主要以德国、美国、日本的现行标准为依据,涵盖了目前国际通用的绝大多数7/24圆锥柄结构,其锥度公差有了较大提高,对圆锥柄部圆度和母线直线度提出更严格的规定,对磨床和量仪提出了更高的要求。 展开更多
关键词 7/24圆锥柄 拉钉 数据芯片孔 法兰端面冷却孔 内孔贯通
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miR-493-5p、miR-7、miR-24在肝癌组织中的表达及与预后的相关性分析
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作者 刘晓飞 杨大伟 +3 位作者 钱娟娟 刘维伟 王冲 马清艳 《中国医刊》 CAS 2023年第10期1095-1098,共4页
目的 探讨微RNA(microRNA,miRNA)-493-5p、miR-7、miR-24在肝癌组织中的表达情况及其与预后的相关性。方法 选取2017年5月至2018年5月在石家庄市中医院接受手术治疗的54例肝癌患者,采用RT-PCR检测肝癌组织及癌旁组织中miR-493-5p、miR-7... 目的 探讨微RNA(microRNA,miRNA)-493-5p、miR-7、miR-24在肝癌组织中的表达情况及其与预后的相关性。方法 选取2017年5月至2018年5月在石家庄市中医院接受手术治疗的54例肝癌患者,采用RT-PCR检测肝癌组织及癌旁组织中miR-493-5p、miR-7、miR-24的表达水平,并分析其与肝癌患者预后的相关性。结果 与癌旁组织相比,肝癌组织中miR-493-5p、miR-7的表达水平明显降低,miR-24的表达水平明显升高,差异有显著性(P<0.05);与Ⅰ/Ⅱ期、中/高分化、无淋巴结转移的肝癌患者相比,Ⅲ/Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移的肝癌患者癌组织中miR-493-5p、miR-7表达水平明显降低,miR-24表达水平明显升高,差异均有显著性(P<0.05)。相关分析结果显示,miR-493-5p、miR-7与肝癌患者的TNM分期、淋巴结转移呈负相关,与分化程度呈正相关,而miR-24与肝癌患者的TNM分期、淋巴结转移呈正相关,与分化程度呈负相关。死亡组患者miR-493-5p、miR-7表达水平低于生存组,miR-24表达水平高于生存组(P<0.05)。多因素回归分析显示,miR-24为肝癌患者3年内死亡的独立危险因素,而miR-493-5p、miR-7为其独立保护因素(P<0.05)。结论 miR-493-5p、miR-7、miR-24在肝癌组织中呈异常表达,并与肝癌的临床病理特征相关,有望用于肝癌患者的预后评估。 展开更多
关键词 miR-493-5p miR-7 miR-24 肝癌 预后
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24小时城市的国际经验与启示--以伦敦、纽约和东京为例
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作者 蔚丹 胡杨 殷若晨 《上海城市规划》 北大核心 2024年第2期23-30,共8页
在全球化与信息化的背景下,城市的运行和生活呈现出全天候的特征,24小时城市理念应运而生。首先,探讨24小时城市的概念、发展历程及推进策略;通过梳理24小时城市发展的4个阶段,揭示其内涵已由单纯促进夜间消费转向兼顾社会公平。其次,... 在全球化与信息化的背景下,城市的运行和生活呈现出全天候的特征,24小时城市理念应运而生。首先,探讨24小时城市的概念、发展历程及推进策略;通过梳理24小时城市发展的4个阶段,揭示其内涵已由单纯促进夜间消费转向兼顾社会公平。其次,以伦敦、纽约和东京为例,剖析经济、政治、文化3种主要动力在24小时城市中的主要作用和特点,并总结出优化空间利用、加强交通配套、改进夜间照明、完善管理体系等关键举措及挑战。最后,提出我国城市应实施以公平和需求为导向的24小时城市战略,在完善顶层设计、整合时空资源的同时,引入多元主体协同治理,探索灵活的管理方式。 展开更多
关键词 时间城市规划 24小时城市 夜间经济 全天候 经验启示
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mda-7/IL-24对裸鼠肝癌移植瘤的生长抑制和促凋亡作用 被引量:4
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作者 张小峰 殷正丰 +4 位作者 艾莉 康晓燕 徐文 李瑾 施乐华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期45-49,共5页
目的:探讨mda-7/IL-24对裸鼠肝癌细胞移植瘤的生长抑制和促凋亡作用及其相关机制。方法:构建携带mda-7基因的重组腺病毒载体Ad.mda-7。以HepG2细胞皮下接种建立裸鼠肝癌移植瘤模型,采用瘤内单点注射的方法分别给予Ad.GFP、Ad.mda-7和AL... 目的:探讨mda-7/IL-24对裸鼠肝癌细胞移植瘤的生长抑制和促凋亡作用及其相关机制。方法:构建携带mda-7基因的重组腺病毒载体Ad.mda-7。以HepG2细胞皮下接种建立裸鼠肝癌移植瘤模型,采用瘤内单点注射的方法分别给予Ad.GFP、Ad.mda-7和ALLN(毒胡萝卜素,N-Ac-L-L-norleucinal)+Ad.mda-7,观察瘤质量和瘤体积的变化,通过免疫组化和TUNEL法检测肿瘤组织内凋亡相关蛋白caspase-3活化、细胞增殖相关抗原ki-67和微血管密度、细胞凋亡率,并通过Westernblotting检测caspase-12、caspase-3和Bax的表达。结果:Ad.mda-7治疗组和Ad.GFP对照组肿瘤体积分别为(312.6±30.2)mm3和(520.6±30.0)mm3(P<0.01),两组的肿瘤质量分别为(0.321±0.031)g和(0.534±0.030)g(P<0.01);Ad.mda-7治疗后瘤细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.01);Ad.mda-7可抑制肝癌组织ki-67表达、微血管密度和促进caspase-3的表达。经ALLN处理的裸鼠,明显抑制Ad.mda-7对肝癌细胞的致凋亡作用(P<0.05),并且下调Ad.mda-7诱导的caspase-12、caspase-3和Bax的表达。结论:Ad.mda-7可显著抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长和新生血管的形成,并通过内质网应激通路显著诱导肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 MDA-7 IL-24 肝癌 凋亡 CASPASE
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Mda-7/IL-24对B细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响 被引量:8
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作者 马鸣 杨兴肖 +3 位作者 王雪晓 赵连梅 刘丽华 单保恩 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期137-144,共8页
目的研究Mda-7/IL-24对B细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响并探讨其作用机制。方法构建稳定过表达Mda-7/IL-24的人B表型淋巴瘤Raji和Daudi细胞株,MTS法检测稳定转染Mda-7/IL-24对Raji和Daudi细胞在顺铂、表柔比星及长春新碱作用下化疗敏感性... 目的研究Mda-7/IL-24对B细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响并探讨其作用机制。方法构建稳定过表达Mda-7/IL-24的人B表型淋巴瘤Raji和Daudi细胞株,MTS法检测稳定转染Mda-7/IL-24对Raji和Daudi细胞在顺铂、表柔比星及长春新碱作用下化疗敏感性的影响,并计算IC_(50)值;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡水平及胞内罗丹明-123(rhodamine-123)聚集量;RT-PCR及Western blot技术分别从mRNA及蛋白水平检测转染Mda-7/IL-24对,Raji和Daudi细胞表达耐药相关基因MDR1、MRP1及BMI1水平的影响。Western blot技术检测转染Mda-7/IL-24对Raji和Daudi细胞总ERK1/2及p-ERK1/2表达水平的影响。结果在CDDP、epirubicin及VCR作用下,过表达Mda-7/IL-24的Raji和Daudi细胞株增殖水平明显下降,化疗敏感性明显增高,而化疗药物IC_(50)值明显下降,同时,细胞凋亡水平明显增加;过表达Mda-7/IL-24的Raji和Daudi细胞肿瘤耐药相关基因MDR1、MRP1、BMI1、总ERK1/2及p-ERK1/2的表达水平均明显下降,而胞内Rhodamine-123聚集量明显增加。结论转染Mda-7/IL-24可能通过调节ERK途径的活化改变肿瘤多药耐药相关基因的表达,从而促进B细胞淋巴瘤对化疗药物的敏感性。因此Mda-7/IL-24在B细胞淋巴瘤的治疗中可能具有防治多药耐药的作用。 展开更多
关键词 MDA-7/IL-24 化疗敏感性 B细胞淋巴瘤 多药耐药
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Mda-7/IL-24与C-myb在Burkitt淋巴瘤中的表达及其相关性研究 被引量:6
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作者 马鸣 魏思思 +6 位作者 武一鹏 杨兴肖 赵连梅 王雪晓 张璁 刘丽华 单保恩 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期691-696,共6页
目的深入探讨Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平、相关性及其临床意义。方法收集65例Burkitt淋巴瘤患者的瘤组织及33例正常淋巴结组织;通过免疫组化及Western blot技术检测各组织中Mda-7/IL-24与C-myb蛋白的表达水... 目的深入探讨Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平、相关性及其临床意义。方法收集65例Burkitt淋巴瘤患者的瘤组织及33例正常淋巴结组织;通过免疫组化及Western blot技术检测各组织中Mda-7/IL-24与C-myb蛋白的表达水平,并对Mda-7/IL-24与C-myb表达水平进行相关性分析;收集患者临床资料,分析瘤组织Mda-7/IL-24及C-myb蛋白表达水平与患者年龄、性别、临床分期、是否骨髓浸润、Ecog评分及IPI指数之间的关系;分析瘤组织Mda-7/IL-24及C-myb蛋白表达水平与患者生存期之间的关系,并制作生存曲线。结果与正常淋巴结组织相比,Burkitt淋巴瘤组织中Mda-7/IL-24的表达水平明显降低,而C-myb的表达水平则明显增高;65例Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平呈明显的负相关(r=-0.474 9);瘤组织低表达Mda-7/IL-24、高表达C-myb的患者其临床分期晚、易骨髓转移、瘤细胞增殖活性强、IPI积分较高,同时患者生存期较短(P<0.05)。结论 Burkitt淋巴瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平呈明显负相关,低表达Mda-7/IL-24或高表达C-myb是Burkitt淋巴瘤患者临床预后较差的指标。 展开更多
关键词 MDA-7/IL-24 C-MYB BURKITT淋巴瘤
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MDA-7/IL-24基因与化疗药物联合应用对食管癌细胞产生协同抑制作用 被引量:3
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作者 吴雅琼 张明增 +3 位作者 刘北辰 周凤灵 高玉环 马光宇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期275-281,共7页
目的:探讨人黑素瘤分化相关基因7(melanoma differentiation-associated gene-7,MDA-7)/白介素-24(IL-24)基因对食管癌细胞的抑制作用及其与化疗药物的协同抗瘤作用。方法:RT-PCR法检测人食管癌细胞株TE-11和YES-5中MDA-7/IL-24受体IL-2... 目的:探讨人黑素瘤分化相关基因7(melanoma differentiation-associated gene-7,MDA-7)/白介素-24(IL-24)基因对食管癌细胞的抑制作用及其与化疗药物的协同抗瘤作用。方法:RT-PCR法检测人食管癌细胞株TE-11和YES-5中MDA-7/IL-24受体IL-20R1、IL-20R2和IL-22R1的表达水平。用携带MDA-7/IL-24基因的重组人复制缺陷腺病毒Ad-MDA-7感染TE-11和YES-5细胞,Ad-LacZ为对照腺病毒,人成纤维细胞株OUMS-24为对照细胞。MTT法检测感染细胞抑制率,Western blotting法检测感染前后细胞中的MDA-7水平。化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(CDDP)、丝裂霉素(MMC)和足叶乙甙(VP-16)分别与Ad-MDA-7联合作用于食管癌细胞株,MTT法检测单独或联合应用对食管癌细胞的抑制作用,流式细胞术检测AdMDA-7与化疗药单独或联合应用后食管癌细胞周期的变化,Western blotting检测Ad-MDA-7与化疗药联合作用后细胞凋亡和增殖的相关分子的变化。结果:TE-11和YES-5细胞均表达3种IL-24受体。Ad-MDA-7感染后,两种食管癌细胞中均有MDA-7蛋白表达,同时细胞均被剂量依赖性地抑制生长,Ad-MDA-7达3×104VP/细胞时TE-11细胞抑制率超过80%、YES-5细胞超过50%;同剂量Ad-LacZ对细胞无抑制作用,成纤维细胞OUMS-24被Ad-MDA-7感染后没有发生明显细胞抑制。AdMDA-7分别与5-FU、CDDP、MMC和VP-16联合应用后,与单独应用相比产生了更强的抗肿瘤协同效应。Ad-MDA-7与5-FU联合应用诱导细胞更多停滞在S和G2/M期,subG1期细胞比例明显增加。与单用5-FU相比,联合应用时Ad-MDA-7诱导了更多的细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-8、-9、-3的表达,增加了Akt的磷酸化,但降低了IκB-α的表达水平。结论:MDA-7/IL-24与化疗药联合应用于食管癌细胞,产生了更强的抗肿瘤协同效应,为临床化疗和基因治疗的联合应用提供新选择。 展开更多
关键词 食管癌 腺病毒 MDA-7 IL-24 基因治疗 化学治疗
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人mda-7/IL-24对淋巴瘤细胞Namalwa的抑制作用 被引量:4
8
作者 段永娟 马小彤 +3 位作者 董成亚 张芳 林永敏 杨宾霞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第5期417-422,共6页
目的:研究黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7,又称IL-24)对淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的抑制作用。方法:用半定量RT-PCR方法检测10个造血系统恶性肿瘤细胞系(Namalwa、Raji、K562、NB4、U937、Ramou... 目的:研究黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7,又称IL-24)对淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的抑制作用。方法:用半定量RT-PCR方法检测10个造血系统恶性肿瘤细胞系(Namalwa、Raji、K562、NB4、U937、Ramous、CEM、KG1a、HL60、J6-1)中mda-7/IL-24的表达情况。用RT-PCR方法从活化的人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆mda-7/IL-24编码区,构建真核表达载体pTarget-IL-24。经测序鉴定后,用脂质体法转染Namalwa细胞,筛选稳定表达细胞株。转染细胞经RT-PCR和Western blotting证实mda-7/IL-24的表达。通过MTF法、集落形成试验、流式细胞术、裸鼠体内成瘤实验来评价mda-7/IL-24对肿瘤细胞增殖、生长特性、集落形成、凋亡情况、体内致瘤能力的作用。结果:10个造血系统恶性肿瘤细胞系中未检测到mda-7/IL-24的表达;转染重组质粒pTarget-IL-24的Namalwa细胞在mRNA与蛋白水平都有mda-7/IL-24的表达;稳定表达mda-7/IL-24的Namalwa细胞增殖活力以及集落形成能力与转染空载体的对照组相比明显下降(P<0.05);但是两者的凋亡率比较无统计学意义。裸鼠体内移植瘤实验结果显示稳定表达mda-7/IL-24的Namalwa细胞株的致瘤性明显低于转染空载体的对照组(P<0.05)。结论:mda-7/IL-24对来源于Burkitt淋巴瘤的Namalwa细胞系具有明显的增殖抑制作用,为Burkitt淋巴瘤的基因治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 黑素瘤分化相关基因-7 IL-24 淋巴瘤 基因治疗
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基于ANSYS的数控机床7∶24锥度工具系统模态分析 被引量:2
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作者 周秦源 周志雄 +1 位作者 汤爱民 肖思来 《制造技术与机床》 CSCD 北大核心 2011年第2期136-138,共3页
为了分析数控机床7:24锥度工具系统在高速旋转的振动特性,基于UG-NX5造型软件平台构建了7:24锥度工具系统三维几何模型,并根据实际工况建立有限元模型,利用ANSYS软件对施加有位移约束的有限元模型进行了前六阶模态分析,得出固有频率和振... 为了分析数控机床7:24锥度工具系统在高速旋转的振动特性,基于UG-NX5造型软件平台构建了7:24锥度工具系统三维几何模型,并根据实际工况建立有限元模型,利用ANSYS软件对施加有位移约束的有限元模型进行了前六阶模态分析,得出固有频率和振型,为数控机床7:24锥度工具系统的动力特性设计和模态实验分析提供了重要的依据。 展开更多
关键词 ANSYS 724锥度 工具系统 模态分析
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高速加工中心7:24主轴/刀柄联接的可行性分析 被引量:2
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作者 谢黎明 施东兴 +1 位作者 靳岚 燕昭阳 《组合机床与自动化加工技术》 北大核心 2012年第2期26-28,共3页
在高速数控机床加工中,由于高速旋转中的离心力作用,传统7:24主轴/刀柄联接的径向位移与两者间的间隙随转速的提高呈平方关系增长。径向间隙的存在导致定位精度和重复定位精度不高、轴向和径向刚度低等问题,严重影响加工精度和质量。论... 在高速数控机床加工中,由于高速旋转中的离心力作用,传统7:24主轴/刀柄联接的径向位移与两者间的间隙随转速的提高呈平方关系增长。径向间隙的存在导致定位精度和重复定位精度不高、轴向和径向刚度低等问题,严重影响加工精度和质量。论文采用有限元分析方法,验证了主轴转速为15000r/min时,加工中心采用7:24主轴/刀柄联接的可行性。并提出改进7:24主轴/刀柄联接性能的方法。 展开更多
关键词 7:24主轴/刀柄联接 离心力 有限元 过盈量
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腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌细胞HepG2的研究 被引量:4
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作者 王从俊 薛新波 +6 位作者 易继林 陈堃 郑建伟 曾建平 许荣华 王炜煜 吴在德 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2006年第11期849-854,共6页
目的观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用,为肝癌的基因治疗提供理论基础。方法将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液... 目的观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用,为肝癌的基因治疗提供理论基础。方法将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法(MTT)及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。结果复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达;MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期,能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达,促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡,选择性地杀伤肝癌细胞HepG2,而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 实验性/治疗 基因疗法 肝癌细胞HepC2 基因MDA-7/IL-24
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腺病毒介导的mda-7/IL-24抑制肝癌VEGF和MMP-9的表达 被引量:6
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作者 于愿 薛新波 +3 位作者 陈堃 郑建伟 吉文伟 王从俊 《临床外科杂志》 2010年第2期95-98,共4页
目的 观察mda-7/IL-24基因对高转移性人肝癌细胞HCCLM6中VEGF和MMP-9的作用,从而探讨mda-7/IL-24基因在抑制肿瘤转移方面的作用.方法 构建Ad.Mda-7并转染至HCCLM6;transwell实验检测侵袭能力的变化;通过RT-PCR和Western Blot分别检测转... 目的 观察mda-7/IL-24基因对高转移性人肝癌细胞HCCLM6中VEGF和MMP-9的作用,从而探讨mda-7/IL-24基因在抑制肿瘤转移方面的作用.方法 构建Ad.Mda-7并转染至HCCLM6;transwell实验检测侵袭能力的变化;通过RT-PCR和Western Blot分别检测转染mda-7/IL-24基因前后VEGF和MMP-9表达mRNA和蛋白的变化;构建HCCLM6高转移型裸鼠模型,采用Ad.Mda-7肿瘤内注射法干预,观察mda-7/IL-24对裸鼠生存状况的影响和肿瘤内VEGF和MMP-9 的变化.结果 复制缺陷型腺病毒能介导外源基因mda-7/IL-24在肝癌细胞中高效表达;mda-7/IL-24能显著下调肝癌细胞中VEGF和MMP-9的表达.Ad.mda-7能延长裸鼠的生存时间,抑制肿瘤的生长,瘤体内VEGF和MMP-9表达明显降低(P〈0.05).结论 mda-7/IL-24基因能明显抑制肝癌细胞的侵袭力,其机制可能与下调VEGF和MMP-9的表达有关. 展开更多
关键词 MDA-7/IL-24 VEGF MMP-9 肝细胞癌 基因治疗
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MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的制备及其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用 被引量:2
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作者 刘新建 徐萍 +1 位作者 钱其军 黄倩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期386-391,共6页
目的:构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒,制备MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白,研究该融合蛋白在肿瘤细胞内的定位及其对肿瘤细胞致凋亡作用。方法:PCR扩增MDA-7/IL-24基因,插入含有HaloTag(HT7)标签的载体中,构建MDA-7/IL-24-HT7原核及... 目的:构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒,制备MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白,研究该融合蛋白在肿瘤细胞内的定位及其对肿瘤细胞致凋亡作用。方法:PCR扩增MDA-7/IL-24基因,插入含有HaloTag(HT7)标签的载体中,构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒;MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白经IPTG诱导表达后纯化。利用带有荧光标记的HT7配基观察MDA-7/IL-24-HT7在肿瘤细胞内的定位。MTT法及AnnexinV-PI染色法检测MDA-7/IL-24-HT7对肿瘤细胞生长和凋亡的影响。结果:成功构建了表达MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的原核及真核表达质粒,MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白主要存在于E.coliBL21的包涵体内。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白定位于肿瘤细胞的内质网上。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞的生长,1mg/mlMDA-7/IL-24-HT7融合蛋白作用大肠癌HCT116细胞、肝癌SMMC7721细胞96h后,细胞凋亡率分别为(34.7±1.3)%和(22.1±0.9)%,显著高于未处理的肿瘤细胞(P<0.01)。结论:带有HaloTag标签的MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 MDA-7/IL-24 HALOTAG 融合蛋白 肝肿瘤 大肠肿瘤 凋亡
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人mda-7/IL-24对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用 被引量:3
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作者 杨宾霞 马小彤 +3 位作者 董成亚 张芳 林永敏 段永娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期422-427,共6页
目的:探索人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用。方法:用RT-PCR法检测11个造血系统恶性肿瘤细胞系mda-7受体的转录情况。用脂质体转染法将构建... 目的:探索人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用。方法:用RT-PCR法检测11个造血系统恶性肿瘤细胞系mda-7受体的转录情况。用脂质体转染法将构建的重组真核表达载体pTarget-IL-24转染K562细胞。以RT-PCR和Western blotting方法检测转染的K562细胞mda-7的表达情况;通过MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Annexin-Ⅴ/PI检测mda-7/IL-24对K562细胞增殖、集落形成、细胞周期和凋亡的影响;以裸鼠移植瘤模型观察mda-7对K562细胞移植瘤的治疗作用。结果:在11个造血系统恶性肿瘤细胞系(NB4、HL60、CEM、Namalwa、Jurkat、KG1a、U937、K562、Ramos、J6-1、HEL细胞)中没有检测到完整mda-7受体的表达。转染mda-7的K562细胞能显著表达mda-7mRNA及其蛋白;其与转染空载体和未转染的K562细胞相比,细胞增殖活力以及集落形成能力明显下降(P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05),但细胞凋亡率没有明显变化。裸鼠体内实验证实了mda-7/IL-24明显抑制K562细胞移植瘤生长(P<0.01)。结论:mda-7/IL-24对白血病细胞系K562具有明显的体内外抑制作用,该作用与mda-7/IL-24引起细胞周期G0/G1期阻滞有关。 展开更多
关键词 黑素瘤分化相关基因(mda-7/IL-24) 基因治疗 慢性粒细胞白血病 细胞周期
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人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达 被引量:12
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作者 陈雄艳 盛伟华 +3 位作者 谢宇锋 缪竞诚 白艳艳 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期672-676,共5页
目的 :克隆人IL 2 4基因 ,构建真核表达载体 ,在COS 7细胞中进行表达 ,并检测重组表达蛋白hIL 2 4的抗肿瘤活性。方法 :分离人外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,采用RT PCR技术克隆人IL 2 4基因 ,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测... 目的 :克隆人IL 2 4基因 ,构建真核表达载体 ,在COS 7细胞中进行表达 ,并检测重组表达蛋白hIL 2 4的抗肿瘤活性。方法 :分离人外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,采用RT PCR技术克隆人IL 2 4基因 ,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列 ,构建真核重组表达载体pcDNA3 hIL 2 4 ,进行双酶切和PCR鉴定 ,以质粒pcDNA3 hIL 2 4转染COS 7细胞进行瞬时表达 ,用RT PCR检测mRNA表达 ,并用MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性。结果 :成功获得 6 2 1bp的人IL 2 4基因 ,测序正确 ,经双酶切和PCR鉴定真核表达质粒构建正确 ,以脂质体转染COS 7细胞后 ,用RT PCR法、MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测表明COS 7细胞可表达hIL 2 4 ,且所表达的人IL 2 4具有较强的诱导A5 4 9肺腺癌细胞凋亡的作用。结论 :人IL 2 4基因的瞬时表达和凋亡效应的初步研究已获成功 ,为研究人IL 2 展开更多
关键词 人IL-24 克隆 表达 COS-7细胞 凋亡
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腺病毒介导的MDA-7/IL-24基因对裸鼠胆囊癌移植瘤的生长抑制和促凋亡作用 被引量:1
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作者 贾建光 郭晨旭 +4 位作者 李靖 张立功 王益民 全志伟 钱军 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第11期1221-1226,共6页
目的:构建胆囊癌荷瘤鼠模型,利用构建的携带人MDA-7/IL-24基因的复制缺陷型腺病毒Ad.mda-7作为载体,观察MDA-7/IL-24基因对胆囊癌荷瘤鼠的作用,为胆囊癌的基因治疗提供理论基础。方法:构建荷瘤鼠模型,将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad... 目的:构建胆囊癌荷瘤鼠模型,利用构建的携带人MDA-7/IL-24基因的复制缺陷型腺病毒Ad.mda-7作为载体,观察MDA-7/IL-24基因对胆囊癌荷瘤鼠的作用,为胆囊癌的基因治疗提供理论基础。方法:构建荷瘤鼠模型,将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7作用于荷瘤鼠。通过观察肿瘤大小的变化来了解MDA7/IL-24基因作用后的效果。观察荷瘤鼠的生存时间,绘制生存曲线,比较各组的治疗效果。取出肿瘤通过免疫组化和TUNEL法检测肿瘤组织内凋亡相关蛋白、细胞增殖相关抗原Ki-67蛋白的表达。结果:Ad.mda-7组裸鼠胆囊癌生长抑制率明显高于PBS组和Ad.GFP组(P<0.01);Ad.mda-7组裸鼠长期生存率为62.5%,明显高于PBS组和Ad.GFP组的35%(P<0.01);Ad.mda-7组治疗后瘤细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.01);Ad.mda-7能够明显抑制Ki-67的表达(P<0.01)。结论:复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda7能介导MDA-7/IL-24基因在人胆囊癌荷瘤鼠抑制肿瘤的生长,延长荷瘤鼠的生存时间,促进肿瘤细胞的凋亡,减少Ki-67的表达,从而提示MDA-7/IL-24基因能够减少肿瘤的复发和转移。 展开更多
关键词 胆囊癌 MDA-7/IL-24 基因治疗 KI-67
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MDA-7/IL-24——肿瘤基因治疗的新武器 被引量:2
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作者 郑鹏生 顾婷婷 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期651-658,663,共9页
通过消减杂交法从人黑色素瘤细胞中分离出来的黑色素瘤分化相关基因(melonoma differentiation associatedgene 7,MDA-7),因其分子生物学特性与IL-10相似,故将其归入IL-10家族,并重新命名为IL-24。位于人染色体1q32的MDA-7/IL-24基因在... 通过消减杂交法从人黑色素瘤细胞中分离出来的黑色素瘤分化相关基因(melonoma differentiation associatedgene 7,MDA-7),因其分子生物学特性与IL-10相似,故将其归入IL-10家族,并重新命名为IL-24。位于人染色体1q32的MDA-7/IL-24基因在原始黑色素瘤细胞及人免疫相关组织中表达。MDA-7/IL-24的膜受体IL-20R1、IL-20R2和IL-22R1在不同组织、细胞中的分布存在差异。MDA-7/IL-24具有广泛的抗肿瘤生物学作用。它能够通过膜受体或非受体介导的凋亡途径对多种肿瘤细胞产生杀伤作用,而不影响正常细胞。此外,MDA-7/IL-24还具有抑制肿瘤新生血管形成、增强放疗敏感性和免疫调节作用。作为一种具有多种抗肿瘤功能的细胞因子,MDA-7/IL-24在临床Ⅰ期试验中已显示出良好的治疗效果,将成为肿瘤基因治疗的新武器。 展开更多
关键词 MDA-7/IL-24 肿瘤 凋亡
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MDA-7/IL-24对Burkitt淋巴瘤细胞的诱导分化作用 被引量:1
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作者 马鸣 杨兴肖 +4 位作者 赵连梅 王雪晓 张璁 刘丽华 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期856-863,共8页
目的:研究黑色素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene 7,MDA-7)/IL-24对Burkitt淋巴瘤细胞的促分化作用并探讨其作用机制。方法:构建稳定过表达MDA-7/IL-24的人Burkitt淋巴瘤Raji和Daudi细胞株,MTS法检测稳定转... 目的:研究黑色素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene 7,MDA-7)/IL-24对Burkitt淋巴瘤细胞的促分化作用并探讨其作用机制。方法:构建稳定过表达MDA-7/IL-24的人Burkitt淋巴瘤Raji和Daudi细胞株,MTS法检测稳定转染MDA-7/IL-24对Raji和Daudi细胞活力的影响;Transwell小室实验检测转染MDA-7/IL-24对Raji和Daudi细胞侵袭和迁移能力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡水平及免疫表型;Western blotting技术检测转染MDA-7/IL-24对Raji和Daudi细胞表达分化相关蛋白Myb、BLIMP1及BCL-6的影响;建立裸鼠Raji细胞移植瘤模型,检测在体内环境中稳定转染MDA-7/IL-24对Raji细胞生物活性的影响。结果:过表达MDA-7/IL-24的Raji和Daudi细胞其增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.01)及迁移(P<0.01)能力均明显下降,但凋亡细胞无明显增加(P>0.05),表达CD45及CD138的水平均明显增加(P<0.01),而表达CD10的水平明显下降(P<0.01)。过表达MDA-7/IL-24的Raji和Daudi细胞表达BLIMP1的水平明显增加(P<0.01),而表达Myb及BCL-6的水平均明显减低(P<0.01)。MDA-7/IL-24过表达组裸鼠模型Raji细胞移植瘤质量明显低于对照组[(1.23±0.21)vs(1.96±0.24)g,P<0.01]。结论:转染MDA-7/IL-24可能通过诱导分化作用抑制Burkitt淋巴瘤细胞的生物活性。 展开更多
关键词 黑色素瘤分化相关基因-7/白介素-24 诱导分化 BURKITT淋巴瘤 MYB
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黑素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24抑制肺癌细胞增殖 被引量:2
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作者 马群风 江红 +2 位作者 刘锟 朱捷 郑晓飞 《医学研究生学报》 CAS 2005年第9期779-783,共5页
目的:探讨黑素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24(mda-7/IL-24)对非小细胞肺癌细胞系H460增殖的影响。方法:将mda-7/IL-24插入真核表达载体pcDNA3中,构建重组表达载体pcDNA 3-mda-7/IL-24。按照DNA和脂质体(L ipofectam ine)的不同比例,... 目的:探讨黑素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24(mda-7/IL-24)对非小细胞肺癌细胞系H460增殖的影响。方法:将mda-7/IL-24插入真核表达载体pcDNA3中,构建重组表达载体pcDNA 3-mda-7/IL-24。按照DNA和脂质体(L ipofectam ine)的不同比例,将重组表达载体瞬时转染H460细胞,用RT-PCR检测mda-7/IL-24在不同转染条件下的表达,用MTT法检测转染重组表达载体后对H460细胞增殖的影响。结果:成功构建了mda-7/IL-24的重组表达载体,用SP6引物和mda-7/IL-24上游引物进行RT-PCR分析,在DNA和L ipofectam ine的比例为1μg∶2μl^1μg∶4μl时有目的基因表达。按照1μg∶2μl的比例瞬时转染重组表达质粒72 h后进行MTT分析,结果表明,与未转染细胞和转染空质粒细胞相比,重组质粒pcDNA3-mda-7/IL-24对肺癌细胞H460的增殖有明显抑制作用,抑制率为18.4%。结论:mda-7/IL-24对非小细胞肺癌细胞系H460增殖具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-24 黑素瘤分化相关基因-7 细胞增殖 肺癌 基因表达
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MDA 7/IL-24抗肿瘤作用研究进展 被引量:1
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作者 曹红丹 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第2期321-324,共4页
黑色素瘤分化相关基因(melonoma differentiation associated gene 7,MDA 7)是通过消减杂交法从人黑色素瘤细胞中分离出来的,因其分子生物学特性与IL-10相似,故将其归入IL-10家族,并命名为IL-24。MDA 7/IL-24具有广泛的抗肿瘤生物学作用... 黑色素瘤分化相关基因(melonoma differentiation associated gene 7,MDA 7)是通过消减杂交法从人黑色素瘤细胞中分离出来的,因其分子生物学特性与IL-10相似,故将其归入IL-10家族,并命名为IL-24。MDA 7/IL-24具有广泛的抗肿瘤生物学作用,它能够通过多种途径对肿瘤细胞产生生长抑制作用,其作用机理与凋亡诱导、细胞自噬、抑制肿瘤新生血管形成和侵袭转移、免疫调节作用等有关。作为一种具有多种途径抗肿瘤作用的细胞因子,MDA 7/IL-24在临床Ⅰ期试验中已显示出良好的治疗效果,被誉为治疗癌症的"魔法子弹"。本文就MDA 7/IL-24在肿瘤治疗中的作用及其机制研究作一综述,以期为MDA 7/IL-24在肿瘤基因治疗中研究提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 MDA 7/IL-24 肿瘤 抑制作用
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