茵陈有效成分6,7-二甲氧基香豆素在白鼠体内主要代谢产物的研究

目的:研究茵陈有效成分6,7-二甲氧基香豆素在白鼠体内主要代谢产物,寻求机体对此类药物的转化规律。方法:取健康雄性wistar白鼠,收集空白血样,空白尿样,空白粪样,用导管收集空白胆汁之后,灌胃给予茵陈有效成分6,7-二甲氧基香豆素1%吐温溶液,采集0～3h内血样,0～10h尿样、粪样和胆汁样品,进行HPLC分析测定。结果:经对动物服药前后的血样、尿样及胆汁进行色谱分析,发现两个主要代谢产物M1和M2,代谢物M1和M2的含量占生物样品中代谢物总量的80%以上,且代谢物M1和M2化学结构很相似。结论:茵陈有效成分6,7-二甲氧基香豆素在体内的代谢产物主要以Ⅱ相代谢产物(硫酸酯结合物)形式存在。且代谢产物M1和M2为同分异构体。

HPLC同时测定川佛手中的橙皮苷与5,7-二甲氧基香豆素

目的采用HPLC法同时测定川佛手中橙皮苷与5,7-二甲氧基香豆素的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.3%冰乙酸(B),梯度洗脱,流速1 m L·min-1,柱温25℃,检测波长284 nm。结果橙皮苷与5,7-二甲氧基香豆素的线性方程分别为:Y橙皮苷=1.7506×104X+13.27(r=0.9999)、Y5,7-二甲氧基香豆素=9.9260×103X+5.81(r=0.9995),10.30~82.40μg·mL^(-1)橙皮苷、20.18~161.44μg·mL^(-1)5,7-二甲氧基香豆素与峰面积的线性关系良好,平均加样回收率分别为97.07%、97.91%;不同干燥条件下的佛手饮片中橙皮苷与5,7-二甲氧基香豆素的含量分别为0.05%~0.19%、0.23%~0.40%。结论经恒温鼓风干燥(40℃)的佛手饮片中橙皮苷与5,7-二甲氧基香豆素的含量较高。所用方法准确、快速,可用于川佛手中橙皮苷与5,7-二甲氧基香豆素的含量测定。

梯度洗脱HPLC法同时测定冠脉康胶囊中四种主要有效成分的含量

目的：采用高效液相梯度洗脱法建立冠脉康胶囊中24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、橙皮苷和5，7-二甲氧基香豆素含量测定方法。方法：Hypersil C18色谱柱（4．6mm ＆#215;200mm，5μm）；体积流量：0．9mL/min；流动相A为乙腈，流动相B为0．05％冰醋酸溶液；检测波长λ1＝208nm（检测24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B），检测波长λ2＝284nm（检测橙皮苷），检测波长λ3＝326nm（检测5，7-二甲氧基香豆素）。结果：24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、橙皮苷和5，7-二甲氧基香豆素分别在0．0314～0．6280（ r＝0．9997）、0．0682～1．3640μg （ r＝0．9999）、0．0208～0．4160μg （ r ＝0．9995）、0.0544～1．0880μg（r＝0．9994）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为98.6％、97．8％、97．2％、98．4％，RSD（n＝6）分别为0．92％、0．70％、1．20％、1．31％。结论：方法简便、准确、灵敏、重复性好，可作为冠脉康胶囊的含量控制方法。

瑞香狼毒花中香豆素成分及生物活性研究

目的研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme花中的香豆素类化学成分及其抗菌和抗氧化活性。方法综合运用多种色谱分离技术进行分离纯化,并采用现代波谱学分析技术结合文献报道数据进行鉴定。对分离得到的9个香豆素类化合物进行了体内外抗氧化活性和体外抗菌活性研究。首先,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2′-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、铁离子还原/抗氧化能力法(FRAP)法评价单体化合物抗氧化活性。然后用模式生物秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans建立胡桃醌诱导氧化损伤应激模型,通过H2DCFDA荧光染色实验,评价化合物9对氧化应激条件下秀丽隐杆线虫生存能力及体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。此外,采用牛津杯法对单体化合物进行抗大肠杆菌Escherichia coli、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、金黄色葡萄球菌Saphyloccu sepidermidis和酵母菌Saccharomyces cereviviae的活性筛选。结果从瑞香狼毒花甲醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为7-羟基香豆素-8-O-β-D-葡萄糖苷(1)、瑞香苷(2)、瑞香素(3)、7-羟基-8-甲氧基香豆素(4)、东莨菪葶(5)、5,7-二甲氧基香豆素(6)、伞形花内酯(7)、白瑞香素(8)、双白瑞香素(9)、3-O-咖啡酰奎尼酸(10)和腺苷(11)。化合物1、6、8、10、11为首次从该植物中分离得到,化合物11为首次从该属植物中分离得到。结论体外抗氧化活性测试结果显示化合物3和9活性显著。体内抗氧化活性实验证实化合物9(28μmol/L)能显著延长线虫在氧化应激条件下的寿命(P<0.0001),且可显著降低线虫体内ROS水平(P<0.001),增强线虫的抗氧化应激能力。化合物9显示出一定的大肠杆菌抑制活性,其最小抑菌浓度(MIC)值为1.0 mg/mL。

广东英德引种广佛手与道地产地广佛手质量的比较研究

目的评价广东英德引种广佛手的质量。方法选取广东英德与传统道地产地的广佛手样品,采用高效液相色谱(HPLC)法测定其橙皮苷和5,7-二甲氧基香豆素的含量,色谱柱为Thermo BDS HYPERSIL C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相分别为甲醇-水-冰醋酸(33∶63∶2)和甲醇-水(65∶35),流速为1.0mL·min-1,检测波长分别为284 nm和326 nm。结果英德产广佛手符合《中国药典》标准,且橙皮苷和5,7-二甲氧基香豆素的平均含量均高于广佛手道地产区。结论广东英德产广佛手橙皮苷含量符合2010版《中国药典》规定,研究结果初步显示在英德引种广佛手是可行的。

应用均匀设计法优化佛手蜜炙工艺的研究

目的优化佛手蜜炙工艺。方法将佛手烘烤法蜜炙,用高效液相色谱法测定橙皮苷、5,7-二甲氧基香豆素含量作为指标,结合颜色和口感,评价处理效果。结果优化的条件是在100℃蜜炙80min,所得蜜炙的佛手呈黄色、口感好、有效成分含量大。结论优化后的蜜炙方法对佛手的加工制作有参考价值。

HPLC法测定护肝片中茵陈的含量

目的建立护肝片中茵陈的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,用Kromasil C_(18)色谱柱(250mm×4．6mm,5μm),以0．025mol·L^(-1)磷酸溶液(用三乙胺调pH值至3．0)-甲醇-乙腈(75:26:15)为流动相,流速:1．0ml·min^(-1),检测波长:345nm;柱温为室温。结果该方法线性关系良好;两组分平均加样回收率分别为98．31%;97．98%RSD为0．73%和0．86%(n=6)。结论本方法操作简便、结果准确、分离效果好,可用于该制剂的质量控制。

凹叶厚朴叶的化学成分研究

目的研究凹叶厚朴Magnoliaofficinalisvar．biloba叶的化学成分。方法采用硅胶、凝胶及MCI等柱色谱进行分离纯化，经波谱解析确定化合物结构。结果从凹叶厚朴叶75％7,醇提取物分离得到12个化合物，分别鉴定为鹅掌揪树脂醇A（1）、6，7-二甲氧基香豆素（2）、吲哚-3-甲醛（3）、D-（＋）-去氢催吐萝芙叶醇（4）、黑麦草内酯（5）、厚朴酚（6）、反式对羟基桂皮醛（7）、和厚朴酚（8）、对烯丙基苯酚（9）、正二十九烷酸（10）、蚱蜢酮（11）、紫丁香苷（12）。结论化合物1～5、7、9～1l为首次从凹叶厚朴和木兰属植物中分离得到。

小驳骨的化学成分研究

目的研究小驳骨Gendarussavulgaris地上部分的化学成分。方法采用反复硅胶柱色谱、ODS开放柱、凝胶柱色谱以及反相半制备型HPLC等各种现代色谱分离技术对其化学成分进行分离纯化,通过HR-ESI-MS、NMR等光谱数据及X-ray单晶衍射鉴定化合物结构。结果从小驳骨地上部分95%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取物中分离得到了17个化合物,分别鉴定为24-降胆-5-烯-3β-醇(1)、dihydrobetulic acid(2)、桦木酸(3)、3-羟基-30-去甲基-20-酮基-28-羽扇豆酸(4)、6-羟基-7,8-二甲氧基香豆素(5)、6,7-二甲氧基香豆素(6)、5,6,7-三甲氧基香豆素(7)、6,7,8-三甲氧基香豆素(8)、左旋香树脂酚葡萄糖苷(9)、4-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(10)、N-反式阿魏酸酪胺(11)、N-(2-羟基-3-苯丙基)乙酰胺(12)、3-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(13)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(14)、对-E-香豆素奎宁酸甲酯(15)、3,4,5-O-三咖啡酰基奎尼酸甲酯(16)、1′S*,4′R*-8-(4′-hydroxy-2′,6′,6′-trimethylcyclohex-2-enyl)-6-methyloct-3E,5E,7E-trien-2-one(17)。结论化合物1、2为新天然产物,除化合物6以外,其他化合物均为首次从该植物中分离得到。对分离得到的17个化合物进行抗炎活性筛选,其中,化合物2、3、11、13、17具有抑制LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞释放NO的作用,其半数抑制浓度(IC50)值分别为(30.91±0.50)、(4.66±0.56)、(17.67±0.57)、(28.45±0.67)、(20.79±0.24)μmol/L。