华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究

目的评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值,探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA),以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG,比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果共检测了112份华支睾吸虫感染血清,使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92.9%(104/112)及94.6%(106/112);分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例,对于两种抗原,华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同,上述三类血清的阴性率分别为96.5%(54/56)、95%(19/20)及90%(9/10)。结论华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性,与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近,有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。

应用ABC-ELISA诊断实验感染猪旋毛虫病的研究

生物素—亲和素系统(Biotin—Avidin System BAS)是近年来建立的一种新型生物放大系统,它具有高灵敏度,高特异性和高度的稳定性。适用于微量抗体和抗原的检测。本文采用生物素—亲和素与酶联免疫吸附试验相结合的免疫放大作用,将ABC—ELISA技术引入猪旋毛虫病检测,对57头实验感染旋毛虫病猪血清特异抗体及抗体出现的时间进行了检测,其结果如下。

ABC-ELISA法检测华支睾吸虫特异性IgG及其亚类

目的 研究ABC ELISA法检测IgG及IgG亚类用于华支睾吸虫病诊断的价值。 方法 采用ABC ELISA法检测华支睾吸虫感染者 (62例 )和健康人 (3 8例 )血清特异性总IgG及其亚类。 结果 华支睾吸虫感染者血清特异性总IgG及其亚类阳性检出率分别为IgG 10 0 % (62 / 62 ) ,IgG15 4.8% (3 4/ 62 ) ,IgG2 79.0 % (4 9/ 62 ) ,IgG3 40 .3 % (2 5 /62 ) ,IgG498.4% (61/ 62 ) ;其中IgG4平均阳性滴度显著高于总IgG (P <0 .0 1)。健康人血清特异性总IgG假阳性率7.9% (3 / 3 8) ,IgG4假阳性率为 0 ;检测健康对照血清IgG4的A值 (0 .0 0 1)显著低于总IgG检测 (A =0 .0 3 1) (P <0 .0 1)。 结论 ABC ELISA法用于华支睾吸虫病诊断具有较高的敏感性 ;检测特异性IgG4诊断华支睾吸虫病效能与检测总IgG相当 ,同时具有阳性显色强、阴性本底低的优点 ;其余IgG亚类对于华支睾吸虫病诊断价值不大。

ABC-ELISA诊断耕牛日本血吸虫病

生物素—亲和素系统是前几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,不少实验室已把它应用于寄生虫病的免疫诊断,并得到了较为满意的结果。本文对ABC-ELISA法在耕牛日本血吸虫病免疫诊断上的应用价值做了初步探讨。(一)材料与方法1.材料:

ABC-ELISA法诊断肠螨病的研究

目的 探讨生物素 -亲和素酶联免疫吸附试验 (ABC -ELISA)在肠螨病诊断中的应用价值。方法 采集 4 8例肠螨病患者血清 ,用ABC -ELISA法检测血清中螨特异性抗体IgG ,并与葡萄球菌A -蛋白酶联免疫吸附试验 (SPA -ELISA)进行比较。结果 用ABC -ELISA法和SPA -ELISA法检测 4 8例肠螨病患者血清中的螨特异性抗体IgG阳性率分别为89 5 8% (43/ 4 8)和 5 6 2 5 % (2 7/ 4 8) ,两者比较 ,差异具显著性 (χ2 =13 5 0 ,P <0 0 1)。结论 ABC

ABC-ELISA检测粪便华支睾吸虫抗原的初步探讨

本实验用ABC-ELISA双抗体夹心法检测人工感染家兔粪便华支睾吸虫抗原(CsAg)。结果表明,此法能测出CsAg的最低含量为0.045μg/ml PBS,粪便中CsAg含量与感染兔的虫荷呈直线正相关。检测轻、重感染兔粪便各28份,正常兔粪便29份,阳性数分别为7、23和2。3组兔粪便中CsAg含量有显著性差异(P<0.001)。5只感染日本血吸虫家兔粪便CsAg检测均为阴性。

捕捉ABC-ELISA检测肺结核病人特异性CIC方法的建立

利用抗人IgG及抗人IgA捕捉完整的结核特异性IgG型及IgA型循环免疫复合物(CIC),进而用抗结核菌抗体检测的原理,建立起捕捉ABC-ELISA检测肺结核病人特异性CIC方法。对100例肺结核病人检测IgG型及IgA型CIC分别为35％及73％(P<0.001),总阳性率为85％;对40例正常人非特异反应IgG型及IgA型CIC分别为2.5％及7.5％(P>0.05),总特异性为90％。结果既证明结核病人血清中确含完整的结核特异性CIC,又为检测之提供了一套候选方法。

ABC-ELISA检测鸡新城疫病毒

建立了检测鸡新城疫病毒的ABC-ELISA方法。应用此法测定了Lasota株、Mukt-eswar株和细胞培养的新城疫强毒的效价,结果较满意。比较试验证明,ABC-ELISA的敏感性比常规ELISA高2～16倍,比HA法高4～64倍。检测感染鸡口腔和泄殖腔棉拭材料,检出率分别为83.3％和100％,比常规ELISA分别提高33.3％和16.7％,而HA则检不出。该法特异性好,能被特异性抗体和亲和素所阻断,对传染性支气管炎病毒、鸡痘病毒、鸭瘟病毒均不发生交叉反应。重复性亦好,同一样本先后经多次测定,结果基本一致。

ABC-ELISA诊断实验感染羊肝片吸虫病的研究

生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin System,BAS)是七十年代后期发展起来的一种新型生物反应放大系统的酶免疫检测技术,它具有特异性强,灵敏度高和高度稳定等优点,适用于微量抗原和抗体的检测成为研究免疫反应的有力工具。 我们应用亲和素-生物素化辣根过氧化物酶复合物的酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)对13只实验感染肝片吸虫羊血清特异性抗体进行了检测,并和常规ELISA做了比较,其结果令人满意。

ABC-ELISA法检测牛乳过敏小鼠模型中的特异性IgE

目的:建立并优化一种有效检测特异性IgE的方法,以取代皮内试验快速诊断过敏症。方法:用乳清蛋白皮下注射BALB/c小鼠建立牛奶过敏模型,获得小鼠抗血清进行方法学研究。结果:乳清蛋白的最适包被量为500ng,用pH9.4的碳酸盐缓冲液作为包被液,4℃包被过夜效果最佳,选用0.2%的白明胶/1%的BSA封闭效果最好,生物素化抗鼠IgE抗体的最佳反应浓度为1∶1000。结论:建立了检测特异性IgE的生物素-亲和素系统改良的ABC-ELISA法,该法特异、灵敏、安全、简便,可用于临床诊断过敏症。

ABC-ELISA检测华支睾吸虫抗体的动态研究

本文报道了用ABC-ELISA观察人工感染华支睾吸虫家兔血清特异性抗体的变化。结果表明,抗体最早出现阳性时间在感染后第14d,轻、重感染组抗体高峰时间分别在第10周和第8周,以后呈下降趋势。抗体水平与虫卵计数呈直线正相关,重感染组平均阳性时间提前,平均光密度值(OD)高。实验结果还表明,抗体应答表现与宿主个体反应性有关,但主要取决于感染度。

猪囊尾蚴病特异诊断方法研究 Ⅱ.ABC-ELISA法

对囊尾蚴寄生较少、体液抗体量甚微的病猪,其它方法不容易检测出来,应用ABC-ELISA法,即亲和素-生物素复合物(Aridin Biotin Compiex)酶标法,借助其放大作用,大大提高了灵敏度。经试验测定,其灵敏度高于ELISA法的9～14倍,并且可将EL-ISA法判定的疑似猪得到分化,从而提高了符合率。

快速ABC-ELISA诊断血吸虫病研究

本文介绍一种快速AEC-ELISA方法,抗原包板后其操作全过程可在1小时内完成。该法对90例粪检虫卵阳性的血吸虫病人及54例健康者的检测结果显示,阳性符合率达100％,阴性符合率达96.67％。快速ABC-ELSA的敏感性和特异性与常规方法基本相同,提示改良的快速AEC-ELISA对诊断血吸虫病血清中的抗-SEA抗体更具实用性,建议推广应用。

ABC-ELISA法定量检测红细胞相关抗体及临床应用

目的 :寻求一种温抗体型自身免疫性溶血性贫血 (WAIHA)的诊断方法 ,提高 AIHA的诊断率。方法 :用竞争抑制法原理 ,建立亲和素生物素化酶复合物酶联免疫吸咐测定 (ASC- EL ISA) ,定量检测红细胞相关抗体(EAIg G)。共检测正常人 6 0例 ,WAIHA患者 41例 ,非免疫性溶血性贫血 5 9例。结果 :1正常组 EAIg G值 0 .2 6± 0 .12 fg/ RBC,EAIg G正常上限 0 .5 fg/ RBC(x± 2 s) ;WAIHA组为 2 .85± 1.6 8fg/ RBC,与正常组比较 ,差异极为显著 (P <0 .0 0 1) ;非免疫性贫血组为 0 .5 9± 0 .93fg/ RBC,与正常比较 ,差异不显著性 (P >0 .0 5 )。 2 41例WAIHA患者中 ,37例 Coom bs试验阳性 ,4例 Comm bs试验阴性 ,患者临床表现典型 ,皮质激素治疗反应良好 ,EAIg G值均显著增高 ,可证实为 WAIHA。 3动态观察 EAIg G值 ,随访 10例患者 ,随着病情好转 ,Hb、RBC上升 ,Ret下降 ,EAIg G量减少。结论 :定量检测 EAIg G,可作为 WAIHA的诊断指标之一 ,对 Coombs试验阴性的WAIHA更具有诊断价值 ;EAIg

ABC-ELISA检测AIHA患者EAIgG的结果分析

目的 探讨亲和生物素化酶复合物 酶联免疫吸附试验 (ABC ELISA)法定量检测红细胞结合IgG(EAIgG)在自身免疫性溶血性贫血 (AIHA)中的诊断价值。 方法 采用ABC ELISA法定量检测EAIgG。共检测 36名正常对照、38例AIHA患者 (其中 6例Coombs′试验阴性的AIHA患者 )的EAIgG值 ,并同时与直接抗人球蛋白试验 (DAT)结果比较。结果 AIHA患者的EAIgG值显著增高 ,与正常对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1) ;6例Coombs′试验阴性的AIHA患者EAIgG均值 (3.93± 1.77)fg/RBC ,Coombs′试验阳性的AIHA患者EAIgG均值 (2 .89± 1.72 )fg/RBC ,两者相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 结论 ABC ELISA法定量检测EAIgG有助于AIHA的诊断 ,特别对Coombs′试验阴性的AIHA患者更具确诊价值。

夹心ABC-ELISA检测包虫病人体内循环抗原方法的评价

本文评价了夹心 ABC-ELISA 对包虫病人体内循环抗原(HcAg)的检测方法。实验证实,用半饱和硫酸铵盐析的羊源细粒棘球蚴囊液(EgCF)免疫兔产生的抗血清测 HcAg 基木无非特异性反应。用生物素标记抗血清时,其抗体滴度不降,而使夹心 ABC-ELISA 比常规夹心 ELISA 更为优越。在对50例囊型包虫病人体内 HcAg 检测时发现,用酸解血清中循环免疫复合物比末解血清的 HcAg 检出率高一倍(分别为32%、16％)。酸解组及未解组分别检测的 HcAg 为结合型及游离型,二组综合检出率达40％。在对25例猪囊虫病人检测 HcAg 时全为阴性,说明两种蠕虫病间在测抗体时的严重交叉反应在测循环抗原时可完全排除。

用自制全细胞抗原检测肺炎支原体抗体ABC-ELISA方法的建立及应用

用自制全细胞抗原建立了ABC－ELISA检测MP－IgG抗体方法，其敏感性高于常规ELISA和以美国产抗原建立的CF方法，特异性和重复性也好。应用该方法检测了62例来自广州市两家医院儿科肺炎住院儿童的血清和79例广州市某高校健康大学生体检血清．结果显示肺炎儿童组8例抗体阳性，占病例总数的12．9％，抗体最高滴度为1∶800，一般为1∶200～1∶400，其中有2例双份血清抗体滴度增高4倍或以上，且随着年龄的增长，抗体阳性例数和P／N比值均增高（有显著性差异，t检验分完。1为P＜0．005和P＜0．01）；大学生组50例抗体阳性，抗体最高滴度为1∶12800，一般为1∶1600～1∶3200。提示，在广州市儿童和大学生中存在MP感染；支原体过儿童肺炎占儿童肺炎病因一定比例。MP感染率和抗MPIgG抗体水平在儿童中有随年龄增长而逐渐增加的趋向。

用改良ABC-ELISA方法检测人体液中凝集素受体的研究

应用改良ABC- ELISA 方法检测90 例正常人唾液中的刀豆凝集素(Con A) 和花生凝集素(PNA) 受体。结果表明,正常人唾液中Con A、PNA受体含量较丰富,且性别、年龄组间无明显差别。检测其中部分人血清中Con A、PNA受体,发现血清中Con A 受体含量较唾液中更为丰富,其比值为2 .6∶1 ,而血清中PNA 受体为阴性。本研究的目的在于阐明凝集素受体在人体液中的分布情况以及它们与细胞间的关系,为进一步研究疾病状态下。

ABC-ELISA检测小鹅瘟的研究

生物素一亲和素系统(Biotin-Aritin system)在免疫学检测的特异性和敏感性已被公认和广为应用。本文应用ABC—ELISA法检测人工感染的雏鹅,并以ELISA法和常规琼脂扩散(AGP)法进行平行检测实验提示。