基于PET研究针刺足三里治疗AD模型大鼠的机理

目的:基于PET,对针刺AD模型大鼠足三里状态下脑功能成像进行研究,旨在探讨针刺足三里治疗AD的机制。方法:80只SD大鼠先分为假手术组(15只)及造模组(65只);造模组接受腹腔注射D-半乳糖及基底核注射IBO联合方法造模,经Y迷宫检测与假手术组比较后,符合成模标准的45只大鼠按随机数字表原则分为3组:模型组(15只);非穴组(15只);足三里组(15只)。以上3组进行PET检测(假手术组不纳入PET检测);所得图像资料应用SPM2进行分析处理。结果:与模型组相比,非穴组葡萄糖代谢升高的脑区为:右侧边缘系统(隔区),右侧额叶(额眶部皮质);左胼胝体,左伏隔核,左侧边缘系统(隔区),左纹状体。与模型组相关,足三里组示葡萄糖代谢升高的脑区为:右侧边缘系统(黎状皮质),右颞叶(嗅皮质),右杏仁核,右海马区;左边缘系统(梨状皮质),左颞叶(嗅皮质)。与非穴组相比,足三里组示葡萄糖代谢升高的脑区为:右杏仁核,左颞叶(嗅皮质),左杏仁核。结论:针刺非穴及足三里均有脑区的激活;针刺足三里集中在边缘系统及颞叶,其中对颞叶的激活,与治疗AD密切相关。

NGF/GDNF基因修饰神经干细胞植入AD模型鼠脑内的存活、分化及表达

目的 观察NGF GDNF基因修饰神经干细胞 (NGF NSC和GDNF NSC)在AD模型鼠脑内的存活、分化及基因产物的表达。 方法 将BrdU标记的NGF NSC和GDNF NSC单独和联合移植入穹窿海马伞切断的大鼠侧脑室内。移植后 3周 ,用免疫组织化学方法对脑切片进行BrdU、Nestin、GFAP、NF、NGF及GDNF单标或双标染色。 结果 脑室内见到大量BrdU阳性细胞。部分移植细胞向脑实质迁移 ,在切口周围、穹窿海马伞、海马、胼胝体、隔区、室管膜下区及血管壁旁均可见到BrdU阳性细胞。在皮质和切口周围可见较多的BrdU +GFAP双标细胞 ;在海马内可见较多的BrdU +NF双标细胞 ;在脑室内 ,两者均可见到。在脑室、皮质和海马等处均检测出BrdU +NGF和BrdU +GDNF免疫双标阳性细胞。 结论 NGF GDNF基因修饰NSC能在宿主脑内较好地存活 ,并能分化成神经元和星形胶质细胞 。

脑尔康对AD模型小鼠脑内NMDA受体亚单位NR2B表达的影响

目的 :观察复方中药脑尔康对慢性铝中毒AD (Alzheimer’sdisease)模型小鼠学习记忆及脑内NMDA受体亚单位NR2B蛋白表达的影响。方法 :采用跳台法检测AD模型小鼠学习记忆成绩 ,用免疫组织化学方法观察脑尔康对AD模型小鼠脑皮层及海马结构区域NM DA受体亚单位NR2B蛋白表达的影响。结果 :模型组与空白组比较 ,学习记忆成绩明显下降 (P <0 0 1 ) ;各用药组分别与模型组比较 ,学习记忆成绩明显提高 (P <0 0 1 ) ;中药组比脑复康组改善效果更好 ;模型组与空白组比较 ,皮层和海马内NR2B的表达明显减少 (P<0 0 1 ) ,各用药组小鼠脑内NR2B的表达均不同程度增加 (P <0 0 5或P <0 0 1 ) ;中药组与脑复康组比较 ,NR2B的表达增加更明显 (P <0 0 1 )。结论

宽频噪音对大鼠AD模型不同脑区ERK、GDNF表达及ABR阈值的影响

目的 :观察大鼠AD模型颞叶和额叶在 98dB宽频噪音暴露 5min前后不同脑区ERK、GDNF表达及ABR阈值的影响。方法 :取体重 15 0～ 2 2 0 gSD大鼠 ,雌雄不拘 ,经行为训练筛选 ,剔除记忆差 (指“稍有记忆”和“无记忆”)大鼠后 ,随机分 3组 :双侧海马CA1区 (AP3.2～ 3.4 ,L2 .0～ 2 .4 ,H2 .8～ 3.0 )微量注射谷氨酸组 (n =8) ;双侧海马CA1区微量注射生理盐水组 (n =8) ;空白对照组 (n =10 )。采用WesternBlot及图像分析技术 ,结合ABR测定方法。结果 :①空白对照组大鼠额叶ERK表达明显多于其它两组鼠 ,且加噪音后有较显著的上调趋势 ;②各组动物颞区皮质神经元加噪音后ERK表达明显增强 ,且均强于额叶各组 ,也有较显著的上调趋势 ;③空白对照组大鼠额叶GDNF加噪音后表达多于加噪音前的同组鼠 ,有较明显的上调趋势 ;④谷氨酸组加噪音后颞区皮质神经元GDNF表达有较明显的下调趋势 ;⑤颞区空白对照组GDNF表达远弱于额叶。结论 :AD模型大鼠额叶ERK表达较少 ,不受噪音刺激影响 ,颞区则相反 ,且明显上调 ;宽频噪音抑制大鼠AD模型颞叶GDNF表达。

川芎嗪对AD模型小鼠海马胆碱能系统的影响

目的探讨川芎嗪对D-半乳糖(D-gal)所致AD模型小鼠海马胆碱能系统功能的影响。方法C57BL/6J小鼠颈背部皮下注射2%D-gal100mg.Kg-1.d-1,连续40d造模。第3周起各组分别灌胃生理盐水(正常对照组、模型组)、川芎嗪(高、低剂量组)和哈伯因(阳性对照组)。给药结束后进行水迷宫训练,24h后进行学习记忆功能测试和海马胆碱乙酰基转移酶(chAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定以及M受体放射性配基结合分析。结果与正常对照组相比,D-gal模型组小鼠学习记忆能力和M受体含量均明显下降(P<0.05～0.01)。模型组chAT和AchE活性也有轻微下降,但与对照组比较差异无统计学意义。给予川芎嗪可明显改善AD模型小鼠的学习记忆功能,增强海马chAT活性(P<0.01)和AchE活性(P<0.05),上调M受体数目(P<0.005)。结论川芎嗪可明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善海马胆碱能系统功能。

补肾开窍活血解毒中药对AD模型大鼠NGFmRNA表达的影响

目的 :研究补肾开窍活血解毒类中药治疗Alzheimer型痴呆与脑内NGFmRNA表达的关系。方法 :用KA微量注射于nbM造成AD大鼠模型 ,BKHJ中药连续灌胃治疗 90d ;采用RT -PCR技术分析皮层、海马组织中NGFmRNA表达。结果 :与nbM损毁组相比 ,BKHJ中药 +nbM损毁组大鼠海马组织中NGFmRNA表达明显增强 (P <0 .0 5 )。结论 :BKHJ中药治疗AD型老年痴呆与增强胆碱能神经元的靶组织 -海马组织中NGFmRNA的表达密切相关。

调心方对氧化损伤型类AD模型大鼠“有害网络”作用的研究

研究调心方 (主药 :党参、桂枝、茯苓、菖蒲、远志 )防治阿尔茨海默病 (AD)的作用机理。SD雄性大鼠采用二羟延胡索酸 (DHF) +FeCl3+ADP左侧脑室注射法建立氧化损伤型类AD模型。造模前 1周开始以调心方灌胃 ,连续 4周 ,并与西药Donepezil比较。治疗期间及之后 ,观察大鼠空间学习记忆能力、大脑皮质细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基 (COⅡ )mRNA表达、大脑皮质和海马APPmRNA表达、大脑皮质Aβ沉积及脑组织Ca2 + 含量等指标的变化。结果 :与正常组比较 ,氧化损伤型类AD模型大鼠上述各项指标呈现不同程度的异常变化 ,调心方具有明显的纠正作用 ,且效果优于西药。结论 :调心方可以阻断AD鼠的“有害网络”的形成 。

临床医用1.5T磁共振对AD模型大鼠的颅脑MR成像研究

目的使用临床医用1.5TMR成像仪对阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)大鼠模型的颅脑行MR成像研究。材料和方法随机选择健康雌性SD大鼠10只(7-8周),通过多影响因素建立SD大鼠的AD模型,然后使用临床医用1.5TMR成像仪对AD模型大鼠进行T1WI、T2WI、T2*WI、SWI成像。结果 AD模型大鼠大脑的颞顶叶皮质、腹侧海马下皮质区和海马区可以发现一些散在的类圆形的低信号区,并与脑实质Aβ免疫组化、Thioflavine S及铁染色阳性结果相重叠。结论在未有超高场小动物专用磁共振成像仪的情况下,临床医用磁共振对AD模型大鼠颅脑MR成像的研究是可行的。

脑尔康对AD模型小鼠脑内一氧化氮合酶活性的影响

目的 观察复方中药脑尔康对 AD小鼠学习记忆障碍的改善作用及对脑细胞一氧化氮合酶 (n NOS)活性的保护作用。方法 通过慢性铝中毒造成 Alzheimer病 (AD)小鼠模型 ,用跳台法测试各组小鼠学习记忆功能 ,用 SP免疫组化法检测皮层及海马的 n NOS阳性细胞数。结果 模型组与对照组比较 ,触电时间延长 ,潜伏期缩短 ,错误次数增多 ,n NOS活性下降 (均 P<0 .0 1 )。各用药组与模型组比较触电时间缩短 ,潜伏期延长 ,(均 P<0 .0 5)。中药中、、小剂量组与模型组比较 n NOS活性升高 (P<0 .0 1 ) ,中药中、小剂量组优于西药组。各用药组间及与模型组比较血清 NO浓度无显著性差异 (均 P>0 .0 5)。结论 脑尔康能改善 AD小鼠学习记忆障碍 ,具有促智作用 ,可通过保护 n NOS活性发挥抗痴呆作用。

宽频噪音对谷氨酸中毒损伤AD模型大鼠不同脑区NMDAR1(ζ1)、NMDAR2A(ε1)亚基表达的影响

目的 :观察AD大鼠模型颞叶和额叶在 98dB宽频噪音暴露 5min后不同脑区NMDAR1(ζ 1)、NMDAR2A(ε1)表达的影响。方法 :采用WesternBlot及RT PCR技术 ,结合ABR测定方法。结果 :①AD模型组大鼠、空白对照组大鼠在 98dB宽频噪音暴露 5min后额叶、颞区、海马及小脑NMDAR1(ζ 1)亚基表达无明显差异 ,但AD模型组表达明显弱于空白对照组 ;②生理盐水组加噪音后NMDAR1(ζ 1)亚基小脑表达最强 ,颞叶最弱 ;NMDAR2A(ε1)表达最强为颞叶 ,海马最弱。③在海马三组大鼠NMDAR1(ζ 1)、NMDAR2A(ε 1)亚基表达有较明显的下调趋势 ;④空白对照组大鼠NMDAR1(ζ 1)、NMDAR2A(ε1)亚基mRNA表达各区无差异。⑤AD模型组大鼠颞叶、海马NMDAR2A(ε 1)表达明显减弱 ,最弱为小脑 ,额叶次之。结论 :噪音刺激抑制AD大鼠模型海马NMDAR1(ζ 1)亚基表达 ,且不在mRNA水平。噪音刺激抑制AD模型大鼠颞叶、海马NMDAR2A(ε 1)亚基表达 ,且有部位差异 ,在mRNA水平已调节。

醒脑增智方对AD模型大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响

目的研究醒脑增智方对AD模型大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响。方法采用AlCl3中毒法制成SD大鼠老年性痴呆模型,连续治疗30d。应用TUNLE法和免疫组化法对所设各组SD大鼠脑组织凋亡细胞的分布及BCL-2免疫阳性细胞进行观察。结果显示模型大鼠有明显的学习记忆障碍,与空白(A)组比较均有显著差异(均P<0.01),治疗后西药(C)组、醒脑增智方(D)组大鼠电击次数较模型(B)组有明显减少(均p<0.05);治疗后,BCL-2免疫阳性细胞数西药(C)组、醒脑增智方(D)组与模型(B)组有显著性差异(均P<0.05);细胞凋亡数目C、D组与B组有显著性差异(均p<0.05)。结论此方可减少老年性痴呆大鼠DNA双键断裂(TUNLE阳性),提高海马皮层BCL-2的含量,抑制细胞凋亡,从而保护脑神经细胞,发挥对老年性痴呆的治疗作用。

电针对AD模型大鼠海马神经干细胞Nestin及学习记忆能力的影响

目的:探讨电针对淀粉样肽(-AP)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑内Nestin表达的影响,并对其保护作用提供理论依据.方法:取健康的SD大鼠40只,随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组.用A 1-40微量注射至大鼠双侧Meynert基底核,建立AD模型,用电针进行治疗.于治疗后用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用免疫组化染色法检测Nestin阳性神经细胞数的表达.结果:①学习记忆观察:电针组的逃避潜伏期较模型组明显缩短,大鼠在原平台象限游泳时间占整个游泳时间的百分比显著升高,穿过原平台所在位置的次数明显增加(<0.01).②Nestin免疫组化检测:电针组大鼠海马Nestin阳性神经元数量在治疗组表达最强,与模型组相比具有显著性差异(<0.01).结论:电针能增强AD模型大鼠海马神经干细胞Nestin的表达,提高AD大鼠的学习记忆能力,其机制尚需讨论.

调心方对AD模型鼠脑组织呼吸链氧化酶活性和氨基酸递质含量的影响

为研究调心方 (主药 :党参、桂枝、茯苓、菖蒲、远志 )治疗阿尔茨海默病 (AD)的机理 ,将SD雄性大鼠脑室内注射DHF FeCl3 ADP ,造成氧化损伤型类AD模型 (造模前 1周起以调心方灌胃 ,每日 1次 ,连续 4周 ) ;采用Clark氧电极法观察鼠脑线粒体呼吸链氧化酶活性 ;HPLC 荧光法观察鼠脑氨基酸递质含量 ;RT PCR法观察大脑皮质NMDAR(NR1a和NR2 a)mRNA表达 ,以及调心方对AD大鼠上述指标变化的影响 ,并与Donepezil治疗组比较。结果 :模型大鼠脑组织氨基酸递质含量和NMDAR(NR1a和NR2 a)mRNA表达高于正常对照组 ,而线粒体呼吸链细胞色素氧化酶活性则显著下降 ;调心方对上述各项指标有不同程度的纠正作用。提示调心方可以通过纠正AD模型鼠脑组织呼吸链氧化酶活性和氨基酸递质的异常变化 ,这可能是该方防治AD的机理之一。

虫草素在Aβ1-42寡聚体诱导AD模型大鼠神经元损伤中的作用

虫草素为天然中药材冬虫夏草和人工培养蛹虫草的有效成分。近年来研究表明,虫草素具有抗肿瘤,抗衰老,抗白血病等药理作用。阿尔茨海默病是一种神经系统退行性疾病。可溶性Aβ1-42寡聚体具有神经细胞毒性且是阿尔茨海默病发病的关键因素。本文探讨了虫草素在Aβ1-42寡聚体诱导AD模型大鼠神经元损伤中的作用。

川芎嗪对AD模型小鼠脑内APP和NEP表达的影响

目的:探讨川芎嗪(TMP)对AD模型小鼠学习记忆及脑内β淀粉样前体蛋白(APP)和脑啡肽酶(NEP)表达的影响。方法:腹腔注射D-半乳糖和灌胃三氯化铝制备AD模型小鼠。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;免疫组化法检测脑内APP和NEP蛋白的表达。结果:低、高剂量TMP组均能改善AD小鼠的学习记忆能力(P<0.01),下调小鼠海马APP蛋白表达(P<0.01),上调NEP蛋白的表达(P<0.01)。低、高剂量TMP组相比无明显差异。结论:TMP可改善AD小鼠学习记忆能力,可能与降低APP及增加NEP蛋白表达有关。

电针对AD模型大鼠海马神经干细胞bFGF及学习记忆能力的影响

目的探讨电针对β淀粉样肽(β-AP)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的脑内bFGF蛋白表达的影响。方法取健康的SD大鼠40只,随机分为正常组,假手术组,模型组和电针组。采用Aβ1-40微量注射至大鼠双侧Meynert基底核,建立AD模型,用电针进行治疗,于治疗后用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用免疫组化染色法检测bFGF阳性神经细胞数的表达。结果①学习记忆观察:电针组的逃避潜伏期较模型组明显缩短,大鼠在原平台象限游泳时间占整个游泳时间的百分比显著升高,穿过原平台所在位置的次数明显增加(P<0.01)。②bFGF免疫组化检测:电针组大鼠海马bFGF阳性神经元数量表达最强,与模型组相比具有显著性差异(P<0.01)。结论电针疗法能增强AD模型大鼠海马神经干细胞bFGF的表达,提高AD大鼠的学习记忆能力。

Aβ_(25～35)诱导大鼠AD模型及HSP_(70)的表达

目的 :探讨 β 淀粉样蛋白 (β amyloid ,Aβ2 5～ 3 5毒性作用能否诱导大鼠AD模型 ,以及热休克蛋白 70(heatshockproteins ,HSP70 )在海马神经元损伤中的表达。方法 :将 4 8只大鼠 ,随机分为 3组 (每组 16只 ) :AD模型组、溶媒体组、假手术组 ,前两组在双侧海马分别注射 2 μ1(10 μg2 )Aβ2 5～ 3 5、2 μl生理盐水 ,假手术组不注射任何溶液 ;于手术后 1、7、14及 2 1d采用免疫组织化学、积分光密度分析等手段对各组大鼠脑HSP70 的表达进行研究。结果 :AD模型组手术 7d后大鼠记忆明显减退 (P <0 .0 5 ) ,且HSP70 在海马神经元内表达ld时最高 ,7d锐减 ,14d和2 1d则逐渐减少。结论 :Aβ2 5～ 3 5可诱导大鼠AD模型 ,并对热休克蛋白 70在海马神经元损伤中的表达产生显著影响 ,HSP70 的表达是阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)大鼠脑内神经元存活的重要标志。

葛根异黄酮对AD模型大鼠抗衰老作用研究

目的研究葛根异黄酮对D-半乳糖致衰老大鼠的抗衰老作用。方法 wistar大鼠68只,随机分为对照组、模型组、药物组低、高剂量组,每组17只。造模成功后,第二天开始灌胃给药,药物低、高剂量组每天分别给予40 mg/kg、160 mg/kg葛根异黄酮灌胃,模型组、对照组每天给予80 mg/kg生理盐水灌胃,连续8周后取血液,并将大鼠断头处死后取肝脏及脑组织,制作海马10%组织匀浆,分别检测丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、单胺氧化酶(MAO)水平的变化情况。结果模型组大鼠血液、肝脏、海马中SOD、GSH-Px的活性明显降低,MDA的含量明显增加,与对照组相比有明显差异(P<0.01);与模型组相比,药物低、高剂量组大鼠,除MAO外各项指标明显好转(P<0.05),且高剂量组比低剂量组的作用更明显(P<0.01);血液、肝脏组织中MAO的活力用药后,低、高剂量组均未见显著性改变,而在海马组织中有显著性降低(P<0.05)。结论葛根异黄酮能增加血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力,降低血液、肝脏和脑组织中MDA的含量,具有一定的抗衰老作用。

AD模型海马结构中iNOS表达及作用

目的 建立Alzheimer病 (AD)大鼠动物模型 ,探讨iNOS在AD动物模型脑组织海马中的表达情况及其作用。方法 海人藻酸 (KA)毁损Meynert基底核建立AD大鼠模型 ,通过Y型迷宫实验及 β -APP的表达判断AD动物模型是否建立成功 ,检测动物模型海马中iNOS的表达情况。结果 迷宫实验发现 ,KA毁损NBM后大鼠短期学习记忆能力和手术前 (P <0 .0 0 1)和对照组 (P <0 .0 0 1)相比明显下降。免疫组化发现 ,β -APP和iNOS的表达明显增多 (P <0 .0 0 1) ,两者均以CA1和齿状回区最多。结论 海人藻酸毁损Meynert基底核可建立简便可靠的AD动物模型 ;AD动物模型中 ,iNOS高表达 。

灵草液对AD模型大鼠脑组织NO、MAO及蛋白质含量的影响

目的 :观察灵草液对阿尔茨海默病 (AD)大鼠脑中NO、NOS和MAO的影响。方法 :健康雄性SD大鼠 ,随机分成 7组。Ⅰ组为正常对照组 ,Ⅱ组为AD模型组 ,Ⅲ组为AD模型 +生理盐水组 ,Ⅳ组为AD模型 +脑复康治疗组 ,Ⅴ组为AD模型 +低浓度灵草液治疗组 ,Ⅵ组为AD模型 +中浓度灵草液治疗组 ,Ⅶ组为AD模型 +高浓度灵草液治疗组。采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术 ,用IBO损毁大鼠双侧nbM。手术后灵草液连续灌胃共 2 0天 ,每天 1次 ,每次2ml。灌胃期满后即将大鼠断头处死 ,并立即在冰盘中开颅取脑做组织匀浆 ,取其上清液测各项生化指标。结果 :①与正常组比较 ,模型组脑组织中的一氧化氮 (NO)、单胺氧化酶 (MAO)均明显升高 (P <0 0 1) ,蛋白质含量显著降低 (P <0 0 1)。②与模型组比较 ,生理盐水组脑组织中的NO、MAO及蛋白质含量均无明显改变 (P >0 0 5 )。③与模型组比较 ,脑复康组及灵草液各浓度组脑组织中NO显著降低 (P <0 0 1) ,蛋白质含量显著升高 (P <0 0 1) ,MAO无明显改变 (P >0 0 5 )。