阿戈美拉汀缓解APP/PS1转基因小鼠焦虑及抑郁样行为的机制

背景:阿戈美拉汀在临床上用于治疗焦虑、抑郁等相关精神行为异常。前期研究证实,阿戈美拉汀能够有效缓解阿尔茨海默病模型小鼠的认知行为、海马突触可塑性及脑病理特征,然而阿戈美拉汀能否改善阿尔茨海默病模型小鼠的焦虑和抑郁样行为仍不清楚。目的:探究阿戈美拉汀对APP/PS1(阿尔茨海默病)转基因小鼠焦虑和抑郁样行为的改善效应及分子机制。方法:①将18只APP/PS1转基因小鼠随机分为模型对照组(n=9)、模型干预组(n=9),将18只野生型小鼠随机分为对照组(n=9)、干预组(n=9),模型干预组与干预组小鼠腹腔注射阿戈美拉汀10 mg/(kg·d),连续注射31 d后进行高架十字迷宫、强迫游泳行为学实验与海马组织mRNA测序。②取小鼠海马神经元细胞株(HT22)、脑微血管内皮细胞株(bEnd.3),分别分4组培养:空白组不加入任何药物,药物组加入20µmol/L阿戈美拉汀,模型组加入10µmol/Lβ-淀粉样蛋白1-42,实验组加入10µmol/Lβ-淀粉样蛋白1-42+20µmol/L阿戈美拉汀,培养24 h后,免疫印迹检测HT22细胞S416p-tau和S9p-GSK3β的蛋白表达,免疫印迹检测bEnd.3细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白1、糖基化终产物受体的蛋白表达。结果与结论:①在高架十字迷宫实验中,模型对照组小鼠的探索开放臂时间与开放臂进入次数均少于对照组(P<0.05),模型干预组小鼠的探索开放臂时间与开放臂进入次数均多于模型对照组(P<0.05);在强迫游泳测试中,模型对照组小鼠的不动时间长于对照组(P<0.05),模型干预组小鼠的不动时间短于模型对照组(P<0.05);海马组织mRNA测序显示,阿戈美拉汀可以增强APP/PS1小鼠海马区低密度脂蛋白受体相关蛋白1的表达。②免疫印迹检测显示,模型组HT22细胞S416p-tau蛋白表达高于空白组(P<0.05),实验组HT22细胞S416p-tau蛋白表达低于模型组(P<0.05),药物组HT22细胞S9p-GSK3β蛋白表达高于空白组(P<0.05),实验组HT22细胞S9p-GSK3β蛋白表达高于模型组(P<0.05),实验组bEnd.3细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白1蛋白表达高于模型组(P<0.05)。③结果表明,阿戈美拉汀可通过促进脑内β-淀粉样蛋白和tau的清除来缓解阿尔茨海默病小鼠的焦虑和抑郁样行为。

日常饮食中添加摄食甜菜碱对APP/PS1转基因小鼠的影响

目的 研究日常饮食中添加摄食甜菜碱对APP/PS1转基因小鼠的影响。方法 C57BL/6J小鼠作为空白对照组,APP/PS1小鼠分为正常饮食组和甜菜碱补充饮食组(含5 g/kg甜菜碱),每组15只,饮食持续3个月。水迷宫实验评估小鼠的记忆行为;免疫荧光法观察海马和皮质中β-淀粉样蛋白(Aβ)的沉积情况;巢蛋白(Nestin)和双皮质素(DCX)标记法以及神经元核抗原(NeuN)和EdU双标法观察海马神经再生情况;GFP-AAV脑立体注射并用荧光显微镜观察CA1区神经元的棘突情况;电生理记录海马CA1区长时程增强效应(LTP);Western blot法检测海马中突触后致密蛋白-95(PSD-95)、突触小泡蛋白(SYN)、微管相关蛋白(MAP-2)表达。结果 与正常饮食组比较,甜菜碱补充饮食组APP/PS1小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.01),进入平台所在象限的次数增多且滞留时间延长(P<0.01),海马和皮质中Aβ沉积减少(P<0.01),海马齿状回和颗粒下区中Nestin、DCX阳性细胞以及增殖的神经元数均增多(P<0.01),海马CA1区棘突密度增加(P<0.01),fEPSP斜率增高(P<0.01),海马中PSD-95、SYN、MAP-2蛋白表达升高(P<0.01)。结论 甜菜碱可改善APP/PS1小鼠记忆障碍,减少海马和皮层中淀粉样斑块沉积并提高神经发生和突触可塑性。

α-分泌酶在自主运动调节APP/PS1转基因小鼠海马APP与Aβ42中的作用研究

目的:探讨α-分泌酶在16周自主跑轮运动调节APP/PS1转基因小鼠海马APP水解与Aβ42生成中的作用。方法:24只C57系APP/PS1转基因小鼠,随机分为自主跑轮运动组(TE,n=12)和对照组(TC,n=12);同时选取C57系野生型小鼠24只,随机分为自主跑轮运动组(E,n=12)和对照组(C,n=12)。TE组和E组小鼠从3月龄开始,除给予正常饮食、饮水外,给予16周的自主跑轮运动,TC组和C组小鼠给予正常饮食、饮水,不运动。采用实时荧光定量RT-PCR实验检测各组小鼠海马α-分泌酶家族的3种主要成员ADAM9、ADAM10和ADAM17mRNA表达水平,采用Western Blot实验检测各组小鼠海马APP、ADAM10和Aβ42蛋白表达水平。结果:1)16周的自主跑轮运动极显著性上调了APP/PS1转基因小鼠海马ADAM10mRNA表达水平(P<0.01),同时显著性上调了转基因小鼠海马ADAM10蛋白表达水平(P<0.05);2)16周的自主跑轮运动显著上调了APP/PS1转基因小鼠海马ADAM17 mRNA表达水平(P<0.05);3)16周的自主跑轮运动显著性下调了APP/PS1转基因小鼠海马APP(P<0.05)和Aβ42(P<0.05)的蛋白表达水平。结论:16周的自主跑轮运动可通过促进APP/PS1转基因小鼠海马α-分泌酶基因表达进而降低转基因小鼠海马APP的水平,并抑制APP水解产生Aβ42的水平。

外源性神经生长因子对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节

目的：探讨外源性神经生长因子（NGF）对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节.方法：鼻腔给予小鼠NGF治疗14周,应用免疫组织化学检测小鼠脑内β淀粉样蛋白（Aβ）老年斑的分布,应用免疫印迹检测小鼠脑内糖原合酶激酶3β（GSK3β）、p-GSK3β、β-连环蛋白（β-catenin）和p-β-catenin的表达.结果：Aβ免疫组织化学显色结果显示,与对照组小鼠大脑内的Aβ老年斑相比较,NGF治疗组转基因小鼠大脑内的Aβ老年斑数量减少了30.22％,沉积减少了35.85％,差异有统计学意义.免疫印迹结果显示,外源性NGF减少APP/PS1转基因小鼠脑内GSK3β的表达,增加β-catenin的表达.结论：外源性NGF可能通过抑制GSK3β的活性和增加β-catenin的活性,激活Wnt/β-catenin信号通路,对神经元起保护作用.

电针对不同月龄APP/PS1转基因小鼠行为学的影响

目的研究电针对不同月龄APP/PS1转基因小鼠行为学的影响,探讨电针治疗阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)的最佳干预时间。方法选择4、6、9月龄APP/PS1双转基因小鼠各20只,随机分为模型组、电针组,以相同月龄C57BL/6野生鼠各10只作为对照组;电针治疗6星期后,采用Morris水迷宫进行空间记忆行为学测试,观察各月龄各组行为学的变化。结果 5月龄各组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05),时间因素(day)具有统计学意义(P<0.01);7月龄各组组间、时间因素及交互作用比较均具有显著性差异(P<0.01);10月龄各组组间、时间因素、交互作用比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各月龄各组空间探索实验穿越平台次数及平台象限游泳距离比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针可以改善APP/PS1双转基因鼠的学习记忆能力,6~7月龄可能是电针早期干预AD的最佳治疗接入点,但仍需进一步实验机制研究讨论。

DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的定位研究

目的研究二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层内的定位分布,探讨DMT1异常表达影响脑铁代谢平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫组织化学方法观察DMT1在9月龄APPsw/PS1小鼠大脑皮层的阳性分布;应用免疫荧光双标技术和共聚焦激光扫描显微镜观察DMT1蛋白和β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的一致性分布和位置关系。结果APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内均有DMT1阳性表达;DMT1和Aβ免疫双标发现DMT1免疫阳性产物与Aβ共存于老年斑,二者分布具有一致性。结论DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内大量表达,其分布与Aβ具有一致性,提示DMT1可能参与AD脑内Aβ沉积和老年斑形成。

EGCG改善APP/PS1转基因小鼠认知功能及减轻海马胰岛素抵抗的机制研究

目的探讨EGCG没食子酸酯(epigaliocatechin—3—gallate,EGCG)减轻APP/PSl转基因小鼠海马胰岛素抵抗并改善认知功能机制。方法 24只12月龄雌性APP/PSl小鼠随机均分为模型组(Tg)、EGCG低剂量组(Tg/EGCG—L)、高剂量组(Tg/EGCG—H),同月龄雌性C 57 BL/6 J小鼠作为对照组(NT)。采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习、记忆能力,Western blot和免疫组织化学方法检测各组小鼠海马TNF—α/JNK信号及IRS—1 pSer 312的表达。结果与NT组比较,Tg组小鼠寻找平台的逃避潜伏期及平均路程显著延长(P<0.05),海马TNF—α/JNK信号异常活化、IRS—1 pSer312表达明显升高(P<0.05).EGCG各治疗组较Tg组各异常指标均显著改善(P<0.05)。结论 EGCG可减轻APP/PS1转基因小鼠海马胰岛素抵抗,改善认知功能,其机制可能与其降低TNF—α/JNK信号通路的活化相关。

ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠老年斑内的定位及相关性

目的研究锌转运体-3(zinc transporter3,ZnT3)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层及海马内的表达,探讨ZnT3与β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)在老年斑内的定位分布及相关性。方法应用免疫荧光和共聚焦激光扫描显微镜观察ZnT3在APP/PS1转基因小鼠大脑内的表达及其与Aβ在老年斑内的位置关系。结果ZnT3主要分布于APP/PS1转基因小鼠大脑皮层和海马的老年斑中,海马苔藓纤维也可见ZnT3的阳性反应产物;ZnT3和Aβ双标的共聚焦激光扫描显微镜观察结果证实几乎所有Aβ老年斑中均有不同程度的ZnT3表达,且主要定位在老年斑周围的变性的神经元及其突起内,围绕老年斑的Aβ核心分布。结论ZnT3与Aβ共同表达于APP/PS1转基因小鼠老年斑内,提示ZnT3可能在老年斑内的锌离子的聚集过程中起着重要的调节作用,进而参与了APP/PS1转基因小鼠大脑内Aβ老年斑的形成。

ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠脑血管及脉络丛的一致性分布

目的研究锌转运蛋白3(Zinc Transporter 3,ZnT3)与β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的定位分布,探讨ZnT3影响脑锌平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫荧光技术和共聚焦激光扫描显微镜观察ZnT3和Aβ在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的共存情况。结果APP/PS1转基因小鼠侧脑室及第三、四脑室的脉络丛上皮细胞均呈ZnT3和Aβ染色阳性,二者共同表达于上皮细胞的胞质内,而细胞核未见任何着色。在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层中,几乎所有Aβ阳性的血管壁上均有ZnT3的表达,二者的分布同样具有一致性。结论ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠大脑血管及脉络丛上皮的一致性分布,提示ZnT3可能参与Aβ在大脑血管及脉络丛上皮的沉积。

复方丹参片早期干预对APP/PS1转基因小鼠学习记忆的影响

目的:探讨复方丹参片早期干预对APP/PS1转基因小鼠学习记忆的影响及作用机制。方法:4月龄野生型小鼠和APP/PS1转基因小鼠分别灌胃给予溶剂或药物8周后,采用新物体识别实验和跳台实验评价复方丹参片对小鼠行为学表现的影响;应用ELISA检测小鼠海马β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)Aβ40、Aβ42的含量;采用Real time PCR和Western blot分别检测胰岛素分解酶(insulin degrading enzyme,IDE)/脑啡肽酶(neprilysin,NEP)m RNA和蛋白水平的变化。结果:新物体识别实验结果显示,复方丹参片720 mg·kg-1显著性增加APP/PS1转基因小鼠对新物体的识别指数。跳台实验结果显示,复方丹参片720、360 mg·kg-1显著性减少APP/PS1转基因小鼠学习次数,此外,复方丹参片720 mg·kg-1明显增加小鼠在平台的停留时间。ELISA结果显示,复方丹参片720、360 mg·kg-1显著性降低APP/PS1转基因小鼠海马Aβ40、Aβ42水平。Real-time PCR结果显示,复方丹参片720 mg·kg-1显著性上调APP/PS1转基因小鼠海马IDE和NEP m RNA的表达。Western blot结果显示,复方丹参片720 mg·kg-1显著性增加小鼠海马IDE蛋白表达。结论:复方丹参片可改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力,可能与减少海马Aβ水平和增加IDE的表达有关。

链脲佐菌素诱导的胰岛素缺乏对APP/PS1转基因小鼠脑内tau蛋白磷酸化的影响

目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导的胰岛素缺乏对APP/PS1转基因小鼠脑内tau蛋白磷酸化的影响。方法采用3月龄APP/PS1转基因小鼠,腹腔内注射STZ,诱导产生胰岛素缺乏的阿尔茨海默病(AD)小鼠动物模型。应用免疫组织化学和Western印迹技术检测AD小鼠脑内tau蛋白的磷酸化。结果 Western印迹结果显示,STZ诱导的胰岛素缺乏使AD小鼠脑内Thr231和Ser396位点上的tau蛋白磷酸化表达水平增高;免疫组化染色显示,胰岛素缺乏的AD小鼠大脑皮层神经元内Thr489位点上的tau蛋白磷酸化表达明显高于对照组。结论 STZ诱导的胰岛素缺乏可加剧APP/PS1转基因小鼠脑内tau蛋白异常磷酸化。

雷帕霉素对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力及海马Aβ_(1-42)表达的影响

目的初探雷帕霉素(RAPA)对APP/PS1转基因小鼠学习记忆及海马β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))表达的影响。方法 APP/PS1转基因小鼠雌雄各半,随机分为模型组、RAPA低剂量组、RAPA中剂量组和RAPA高剂量组,野生型C57BL/6小鼠作为对照组,每组10只。RAPA各组小鼠每天分别灌胃1.12、2.24和4.48 mg/kg的RAPA,连续4周。跳台和Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,Western Blot检测海马神经元Aβ_(1-42)、磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)的表达。结果模型组较对照组小鼠跳台学习成绩下降、潜伏期缩短、错误次数增加;Morris水迷宫逃避潜伏期延长、目标象限停留时间缩短、穿环次数减少;海马Aβ_(1-42)和p-m TOR表达增多、p-PKB表达减少(P<0.05)。与模型组比较,RAPA各组小鼠跳台学习成绩提高、潜伏期延长、错误次数减少;Morris水迷宫逃避潜伏期缩短、目的象限停留时间延长、穿环次数增多;海马Aβ_(1-42)和p-m TOR表达减少、p-PKB表达增多(P﹤0.05)。RAPA各组组间比较,各指标均无统计学差异(P>0.05)。结论 RAPA可降低海马Aβ_(1-42)的表达,对APP/PS1转基因小鼠学习记忆具有改善作用,其机制可能与调节PKB/m TOR信号通路活性有关。

丙戊酸钠对APP/PS1转基因小鼠脑内海马区老年斑形成的影响

目的研究丙戊酸钠(VPA)对APP/PS1转基因小鼠脑内海马区老年斑(SP)形成的影响。方法 APP/PS1转基因小鼠随机分为对照组和VPA治疗组,VPA治疗后应用免疫组化技术检测APP/PS1转基因小鼠脑内海马区SP的数量及大小。ELISA测定脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)的含量变化。结果 VPA治疗组小鼠海马区域出现的阳性SP数目与对照组相比分别显著减少65%,斑块沉积也分别由0.65%降到0.22%(P<0.01)。ELISA结果显示,VPA治疗组小鼠脑内可溶性Aβ的水平(75 pg/mg)较对照组明显下降(92 pg/ml,P<0.05)。结论 VPA可以减少APP/PS1转基因小鼠脑内SP的形成,抑制Aβ的生成。

DL0410改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆的作用机制

目的探讨DL0410改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的作用机制。方法将9月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、多奈哌齐(3 mg·kg-1)治疗组、美金刚(2 mg·kg-1)治疗组、DL0410(3,10和30 mg·kg-1)剂量组,并以同背景阴性的C57小鼠作为正常对照组。灌胃给药2个月后采用筑巢实验、新物体识别实验以及Morris水迷宫实验检测转基因小鼠的学习记忆能力,行为学测试结束后,处死小鼠,用Western蛋白印迹法检测皮质和海马组织中淀粉样前体蛋白(APP)糖原合成酶激酶-3(GSK-3β),蛋白激酶B(AKT),脑源性神经生长因子(BDNF),促凋亡蛋白(Bax)以及抗凋亡蛋白(Bcl-2)的表达。结果多项行为学实验结果均表明,DL0410可明显改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力。病理染色结果表明,DL0410不仅可以减轻模型小鼠神经元的肿胀,增加神经元的存活数量,还可以有效清除沉积于皮质和海马区的老年斑及Aβ。同时,DL0410能够增加小鼠皮质和海马脑组织中AKT、BDNF以及bcl-2的表达,减少GSK-3β和Bax的表达。结论 DL0410通过AKT-GSK-3β信号通路改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力。

游泳运动对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响

探讨游泳运动对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响。选择11月龄的雄性APP/PS1转基因小鼠,随机平均分为对照组和游泳组,对照组常规饲养而游泳组进行1个月的游泳运动训练。分别采用刚果红染色、Tunel检测、Western Blot和Morris水迷宫等实验方法观察小鼠大脑皮层Aβ斑形成、神经元凋亡、线粒体生成相关蛋白表达和学习记忆能力的变化情况。结果发现,游泳运动可以减少APP/PS1转基因小鼠大脑皮层Aβ斑的形成、抑制神经元凋亡、促进线粒体生成、增强小鼠的学习记忆能力。由此可见,游泳运动可作为一项防治阿尔茨海默病的行为治疗候选方案。

APP/PS1转基因小鼠海马内少突胶质细胞变化的体视学研究

目的:定量研究APP/PS1转基因小鼠海马内少突胶质细胞(OLG)的改变,探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对OLG的影响。方法:随机选取10月龄雄性APP/PS1转基因小鼠(AD组)和10月龄同窝生雄性野生型小鼠(WT组)各13只,运用Morris水迷宫检测各组小鼠的空间学习和记忆能力;运用体视学方法计数各组小鼠海马CA1、CA2-3和齿状回(DG)内Olig2+细胞和2',3'-环核苷酸3'-磷酸二酯酶(CNPase)阳性细胞总数;体外培养小鼠少突胶质前体细胞(MOPC),给予Aβ1-42,运用real time RT-PCR和Western Blot检测OLG相关蛋白的表达水平和含量。结果:AD小鼠逃避潜伏期显著性长于WT小鼠(P<0.05),穿台次数显著性少于WT小鼠(P<0.05);AD小鼠海马各区Olig2+细胞总数均较WT小鼠显著性增加(P<0.05),且与逃避潜伏期呈正相关,与穿台次数呈负相关,而各区CNPase+细胞总数均较WT小鼠显著性减少(P<0.05),且与逃避潜伏期呈负相关;Aβ1-42干预后MOPC的NG2及CNPase的mRNA水平显著性降低(P<0.05),Olig2含量也显著性降低(P<0.05)。结论:APP/PS1转基因小鼠海马内存在成熟OLG丢失、少突胶质细胞系异常增殖;Aβ可能引起OLG损伤和发育异常;保护海马成熟OLG以及调控OLG发育可能是防治AD的有效策略。

电针对APP/PS1转基因小鼠海马P-糖蛋白和间质液β淀粉样蛋白水平的影响

目的:通过观察电针对于APP/PS1双转基因小鼠海马P-糖蛋白表达和脑间质液Aβ水平的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法:12只4月龄雄性APP/PS1转基因鼠,随机分为电针组和模型组;6只4月龄雄性C57BL鼠为正常对照组。电针"百会""涌泉"2周后,采用脑微透析检测技术取小鼠脑间质液,Elisa法检测小鼠间质液Aβ水平;免疫组化法观察小鼠海马P-糖蛋白表达情况。结果:免疫组化结果显示,与正常对照组比较,模型组P-糖蛋白表达明显减少;与模型组比较,电针组的表达相对增加。ELISA检测显示,与正常对照组比较,模型组的间质液Aβ明显减少;与模型组比较,针刺组Aβ水平明显下降。结论:电针可以降低脑间质液Aβ水平,并可以升高海马内P-糖蛋白的表达。

开心散对APP/PS1转基因小鼠在体LTP和PSD-95表达的影响

目的考察开心散(远志、人参、茯苓、石菖蒲)对APP/PS1转基因小鼠海马在体长时程增强(LTP)、海马CA1区和大脑皮层突触后致密蛋白-95(PSD-95)的表达的影响。方法 32只APP/PS1雄性小鼠(3月龄)随机均分为模型组、多奈哌齐[0.75 mg/(kg·d)]组、开心散[1.5、3 g/(kg·d)]组,另设C57/BL6小鼠为对照组,连续给药3个月。记录海马区穿通纤维通路(perforant pathway,PP)至齿状回(dentate gyrus,DG)的在体LTP,免疫组化法观察小鼠海马CA1区、大脑皮层PSD-95的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠场兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率明显下降,海马CA1区、大脑皮层中PSD-95阳性细胞的平均光密度明显减少;而多奈哌齐、开心散可明显提高模型组小鼠f EPSP斜率。多奈哌齐能增加海马CA1区PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[1.5 g/(kg·d)]可以增加海马CA1区、大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[3 g/(kg·d)]能增加大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度。结论开心散能促进APP/PS1转基因小鼠LTP形成,增强突触可塑性,可能与调节PSD-95蛋白表达有关。

金钗石斛总生物碱对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响

目的初探贵州省产金钗石斛总碱(DNLA)对APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆的影响。方法雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为模型对照组、模型给药组(DNLA,40 mg/kg),同月龄野生型小鼠作为空白对照组,每组10只。自7月龄始灌胃给药,连续8周。Morris水迷宫及Y迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,尼氏染色观察小鼠海马神经元形态。结果Morris水迷宫定位航行实验显示,模型组逃避潜伏期较空白对照组明显延长(P<0.05);空间探索实验显示,模型组小鼠在原平台象限停留时间及在原平台象限游泳距离的百分比较空白组明显缩短(P<0.05);模型组小鼠在Y迷宫的空间自发性探索行为正确率明显低于空白组。尼氏染色结果显示,模型组小鼠海马神经元排列疏松,神经元数量及尼氏小体减少,胞质呈淡蓝色。与模型组比较,DNLA 40 mg/kg明显缩短小鼠逃避潜伏期(P<0.05);增加小鼠在原平台象限停留时间及原平台象限游泳距离的百分率(P<0.05)、明显增加Y迷宫小鼠自发探索行为正确率(P<0.05),并改善模型小鼠海马CA1区神经元的形态和结构。结论 DNLA对APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆能力具有改善作用。

BDNF在APP/PS1转基因小鼠皮层和海马内的表达及其对学习记忆能力的影响

目的:探究脑源性神经生长因子(BDNF)在野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠大脑内的表达变化及其对学习记忆能力的影响。方法:选择野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,刚果红染色标记Aβ斑,TUNEL法检测细胞凋亡,采用免疫荧光和Western blot方法检测BDNF在野生型和APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马内的表达,Morris水迷宫检测小鼠的空间学习记忆能力。结果:APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区都形成Aβ斑,且12月龄小鼠Aβ斑的数量多于6月龄(P<0.05)。12月龄APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区神经元凋亡的数量多于野生型小鼠(P<0.01)。野生型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量高于APP/PS1双转基因小鼠(P<0.01)。水迷宫检测显示,APP/PS1双转基因小鼠的逃逸潜伏期长于野生型小鼠,而60 s内穿越平台所位象限的次数少于野生型小鼠,且游泳轨迹杂乱无章。结论:APP/PS1双转基因型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量低于野生型小鼠,并伴随着神经元凋亡的增加,且空间学习记忆能力降低。这些结果提示APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的降低可能与BDNF表达减少导致神经元凋亡增加有关,这也许是阿尔茨海默病的病理机制之一。