川芎嗪调控Wnt/β-连环蛋白信号通路对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的:探讨川芎嗪调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路对冠心病(CHD)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:选择成年雄性SD大鼠50只,分为对照组、模型组、川芎嗪低、中、高剂量组,各10只。采用高脂饲料喂养加脂肪乳剂灌胃建立CHD大鼠模型,对照组和模型组大鼠尾静脉注射等体积生理盐水,川芎嗪低、中、高剂量腹腔注射川芎嗪,各组均连续治疗3周。干预后检测各组大鼠心功能和血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,采用HE染色观察心肌组织结构,TUNEL检测心肌细胞凋亡情况,RT-qPCR、Western blot法检测心肌组织Wnt3a、β-cateninmRNA及蛋白表达。结果:模型组大鼠心功能低于对照组和川芎嗪低、中、高剂量组(均P<0.05)。模型组大鼠血清LDH、CK、CK-MB水平高于对照组和川芎嗪低、中、高剂量组(均P<0.05)。对照组心肌细胞大小均等,心肌纤维无肿胀、排列紧密,模型组心肌纤维呈现明显肿胀、断裂,细胞排列无规则,并有大量炎症细胞浸润,川芎嗪低、中、高剂量组心肌损伤逐渐改善,细胞水肿变性减少,仅少量炎性细胞浸润。川芎嗪高剂量组心肌组织中Wnt3a、β-cateninmRNA和蛋白表达低于低、中剂量组(均P<0.05)。结论:川芎嗪能改善大鼠心肌细胞的凋亡,减轻细胞损伤,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达有关。

基于CT征象和血清巨噬细胞集落刺激因子、β-连环蛋白构建的联合模型对孤立性肺结节的评估价值

目的探讨基于CT征象和血清巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、β-连环蛋白(β-Catenin)构建的联合模型对孤立性肺结节的评估价值。方法选取2020年2月至2023年2月萍乡市人民医院病理结果显示孤立性肺结节的105例患者作为研究对象,以孤立性肺结节性质为结局指标,软件计算建模组所需样本量为75例,故随机抽取75例作为建模组、其余30例作为验证组,分析建模组孤立性肺结节不同性质患者一般资料、CT征象、生化指标,多因素logistic回归分析法筛选影响孤立性肺结节性质的独立影响因子,并建立预测模型。用验证组临床资料进行验证并将验证组临床资料代入预测模型,根据预测概率绘制ROC曲线评估该预测模型的效能。结果建模组75例病例中,良性肺结节43例(57.33%)、恶性肺结节32例(42.67)。单因素分析结果显示,良性、恶性肺结节患者毛刺征、分叶征、血管集束征、胸膜凹陷征、磨玻璃密度、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、癌胚抗原(CEA)、神经特异性烯醇化酶(NSE)、M-CSF、β-Catenin水平与建模组孤立性肺结节性质有关,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示:毛刺征(β=1.572,OR=1.612,95%CI=1.475~2.159)、分叶征(β=1.484,OR=1.650,95%CI=1.408~2.184)、血管集束征(β=1.292,OR=1.674,95%CI=1.466~2.198)、磨玻璃密度(β=1.307,OR=1.785,95%CI=1.501~2.263)、CEA(β=0.915,OR=1.797,95%CI=1.505~2.199)、NSE(β=0.920,OR=1.824,95%CI=1.618~2.218)、M-CSF(β=0.859,OR=1.765,95%CI=1.506~2.301)、β-Catenin(β=0.867,OR=1.806,95%CI=1.542~2.325)是影响建模组孤立性肺结节性质的独立危险因素(P<0.05),据此建立的联合模型ROC曲线结果显示:该模型评估孤立性肺结节良恶性的灵敏度为90.50%、特异度为75.26%、AUC为0.880(95%CI=0.802~0.935)、阳性似然比为4.05、阴性似然比为0.12、阳性预测值为82.80%、阴性预测值为89.90%。结论毛刺征、分叶征、血管集束征、磨玻璃密度及CEA、NSE、M-CSF、β-Catenin水平升高是影响孤立性肺结节良恶性的独立影响因素,据此构建的联合模型评估孤立性肺结节良恶性的效能较高。

菱形结构域蛋白1、肝癌缺失基因1、β-连环蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨菱形结构域蛋白1(RHBDD1)、肝癌缺失基因(1DLC1)、β-连环蛋白在结直肠癌(CRC)与癌旁组织中表达水平的差异,分析三者在CRC组织中表达的相关性及与临床病理特征的关系。方法 以2021—2022年内蒙古包钢医院经外科手术切除且病理类型为腺癌的结直肠癌患者30例为研究对象,采用定量反转录聚合酶链式反应及蛋白质印迹法测定RHBDD1、DLC1和β-连环蛋白在CRC和癌旁组织中的表达情况,并分析三者在CRC中表达的相关性及与临床病理特征的关系。结果 RHBDD1、β-连环蛋白在癌组织中的表达高于癌旁组织,DLC1在癌组织中的表达低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。在CRC中,RHBDD1和β-连环蛋白的表达呈正相关。RHBDD1、β-连环蛋白均与DLC1的表达呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05);RHBDD1、β-连环蛋白的表达量与组织分化程度呈负相关,与TNM分期、淋巴结转移呈正相关;DLC1与组织分化程度呈正相关,与TNM分期、淋巴结转移呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RHBDD1和β-连环蛋白在CRC中高表达,DLC1在CRC中低表达;RHBDD1、β-连环蛋白、DLC1与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,且三者之间具有相关性,提示三者联合检测可能为CRC的诊断提供理论依据。

松果菊苷对动脉粥样硬化血管钙化小鼠Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响

目的探究松果菊苷对动脉粥样硬化血管钙化小鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将48只7周龄雄性ApoE-/-小鼠采用随机数字表法分为6组,每组8只:分别为模型组,松果菊苷(ECH)12.5、25、50 mg/kg组,辛伐他汀片(Sta)组和对照组,依据不同分组建模及给药。观察小鼠主动脉组织形态学变化,检测小鼠血清中生化指标水平,采用实时荧光定量PCR法检测小鼠主动脉组织β-连环蛋白(β-catenin)mRNA的表达水平,采用Western Blot法检测小鼠主动脉组织β-catenin、Wnt3a、LDL受体相关蛋白5(LRP5)及骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达水平,采用免疫组化法检测小鼠主动脉组织LRP5蛋白表达水平。结果ECH 25、50 mg/kg组及Sta组小鼠主动脉中膜较模型组明显变薄,弹力纤维排列整齐,斑块明显缩小。ECH 25、50 mg/kg组和Sta组TG、TC、LDL-C水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。ECH 12.5、25、50 mg/kg组和Sta组HDL-C水平均高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组小鼠主动脉β-cateninmRNA表达水平高于对照组,ECH 12.5、25、50 mg/kg组及Sta组β-cateninmRNA表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组小鼠模型组小鼠主动脉β-catenin、Wnt3a、LRP5及BMP-2蛋白表达水平高于对照组,ECH 25、50 mg/kg组及Sta组小鼠主动脉β-catenin、Wnt3a、LRP5及BMP-2蛋白表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组小鼠主动脉LRP5蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ECH 12.5、25、50 mg/kg组及Sta组LRP5蛋白表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论ECH可以有效改善小鼠动脉粥样硬化血管钙化的发生与发展,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路相关。

PCOS不孕症患者血清Betatrophin、β-连环蛋白水平与脂代谢及妊娠结局的关系

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者血清Betatrophin、β-连环蛋白(β-catenin)水平与脂代谢及妊娠结局的关系。方法选取2021年6月至2023年1月承德市中心医院收治的103例PCOS不孕症患者作为研究对象(PCOS组),另随机选取同期至本院婚检的健康育龄期女性78例为对照组,比较两组受试者血清Betatrophin、β-catenin、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。采用Spearman分析血清Betatrophin、β-catenin水平与TG、TC、LDL-C、HDL-C的相关性。结果两组受试者年龄、体质量指数(BMI)等一般资料比较均无显著差异(P>0.05);PCOS组血清Betatrophin、β-catenin、TG水平显著高于对照组(P<0.05),HDL-C水平显著低于对照组(P<0.05)。在103例PCOS不孕症患者中,妊娠结局良好者68例(66.02%),妊娠结局不良者35例(33.98%),妊娠结局良好者血清Betatrophin、β-catenin水平均显著低于妊娠结局不良者(P<0.05);另外,脂代谢正常者38例(36.89%),脂代谢异常者65例(63.11%),脂代谢正常者血清Betatrophin、β-catenin水平均显著低于脂代谢异常者(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,PCOS组血清Betatrophin、β-catenin水平与TG呈正相关,与HDL-C呈负相关(P<0.05)。结论PCOS不孕症患者血清Betatrophin、β-catenin水平与脂代谢紊乱密切相关,并且Betatrophin、β-catenin对妊娠结局有一定的预测作用。

δ-连环蛋白高表达状态对乳腺癌患者化疗后短期脑认知功能影响的静息态功能MRI研究

目的利用静息态功能MRI探讨δ-连环蛋白(catenin)不同表达状态的乳腺癌患者采用蒽环联合环磷酰胺(anthracyclines cyclophosphamide,AC)化疗方案2个周期后的脑认知功能改变。材料与方法前瞻性收集66例经病理证实乳腺癌并首次进行标准化化疗患者,根据组织血清δ-catenin水平,分为δ-catenin高表达组31例和低表达组35例,同时收集健康对照(healthy control,HC)组36例。所有受试者在化疗前及2个化疗周期后进行神经心理学评分并行脑静息态功能MRI、3D-T1加权成像,分析脑静息态功能MRI指标,包括低频振幅(amplitude of low frequency fluctuation,ALFF)值、分数低频振幅(fractional amplitude of low frequency fluctuation,fALFF)值、局部一致性(regional homogeneity,ReHo)值,并对患者化疗前后神经心理学评分以及脑静息态功能MRI指标进行对比分析。结果化疗前δ-catenin高表达组人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)显著高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者化疗前后神经心理学评分显示,δ-catenin高表达组患者化疗后癌症治疗认知功能评估(Functional Assessment of Cancer Therapy-Cognitive,FACT-Cog)总分、感知认知能力(Perceived Cognitive Abilities,PCA)、简易智力状态检查评分(Mini Mental State Examination,MMSE)、蒙特利尔认知评估评分(Montreal Cognitive Assessment,MOCA)、数字符号转化测验(Digital Symbol Substitution Test,DSST)以及中文听觉词语学习测验(Auditory Verbal Learning Test,AVLT)、数字连线实验B(Line-B)评分较化疗前差异有统计学意义,而低表达组只有AVLT-长时记忆(AVLT-long)评分差异有统计学意义(P均<0.05)。与化疗前相比,化疗2周期后部分脑区ALFF及ReHo值改变差异有统计学意义(P<0.05)。δ-catenin低表达组患者化疗后右侧前扣带和旁扣带脑回ALFF值下降,而δ-catenin高表达组右侧小脑半球4-5区、双侧脑岛、左侧舌回化疗后ALFF值下降。ReHo指标中,δ-catenin低表达组患者化疗后左侧眶部额下回ReHo值下降;而δ-catenin高表达组则左侧缘上回、左侧三角部额下回ReHo值下降(P均<0.05)。结论δ-catenin高表达进一步加重化疗对乳腺癌患者脑认知功能的损伤,主要涉及执行认知功能调控等相关脑区。

5-氟尿嘧啶联合奥沙利铂通过微小RNA-92a/Wnt/β-连环蛋白通路影响非小细胞肺癌细胞的顺铂耐药机制研究

目的探讨5-氟尿嘧啶联合奥沙利铂通过微小RNA-92a(miR-92a)/Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路影响非小细胞肺癌细胞的顺铂耐药机制。方法体外培养人非小细胞肺癌细胞(A549),构建顺铂耐药模型,实验分组如下:A549组为正常A549细胞;A549/顺铂组为顺铂耐药模型细胞;A549+顺铂组为A549组给予顺铂共培养;A549/顺铂+顺铂组为A549/顺铂组给予顺铂共培养;A549/顺铂+miR-92a inhibitor组为A549/顺铂组转染miR-92a inhibitor;5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组为A549/顺铂组给予5-氟尿嘧啶+奥沙利铂共培养;5-氟尿嘧啶+奥沙利铂+miR-92a mimics组为5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组转染miR-92a mimics;5-氟尿嘧啶+奥沙利铂+miR-92a mimics+Wnt/β-catenin inhibitor组为5-氟尿嘧啶+奥沙利铂+miR-92a mimics组转染Wnt/β-catenin inhibitor。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷实验检测细胞增殖率;细胞划痕实验检测细胞迁移率;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;荧光原位杂交法检测miR-92a的表达情况;实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-92a、Wnt4和β-catenin的表达;蛋白质印迹法检测Wnt4、β-catenin和CD44的蛋白表达。结果与A549组相比,A549/顺铂组miR-92a的表达升高(P<0.05)。与A549/顺铂组相比,A549/顺铂+miR-92a inhibitor组细胞迁移率和侵袭个数均降低(均P<0.05)。与A549/顺铂组相比,5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组细胞增殖率和侵袭个数以及miR-92a、Wnt4、β-catenin和CD44表达水平均降低(均P<0.05)。与5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组相比,5-氟尿嘧啶+奥沙利铂+miR-92a mimics组细胞增殖率和侵袭个数以及miR-92a、Wnt4和β-catenin的表达水平均上升(均P<0.05)。与5-氟尿嘧啶+奥沙利铂+miR-92a mimics组相比,5-氟尿嘧啶+奥沙利铂+miR-92a mimics+Wnt/β-catenin inhibitor组细胞增殖率和侵袭个数以及miR-92a[(0.49±0.07)比(0.97±0.14)]、Wnt4[(0.37±0.05)比(1.19±0.16)]和β-catenin[(0.27±0.04)比(1.54±0.20)]的表达水平均下降(均P<0.05)。结论5-氟尿嘧啶联合奥沙利铂能够有效改善A549细胞的顺铂耐药性,抑制细胞增殖和侵袭,可能与下调miR-92a/Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达有关。

β-连环蛋白与结直肠癌的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是消化系统中最常见的恶性肿瘤类型之一。CRC的发病率逐年上升,也是癌症相关死亡的第二大常见原因。大多数CRC患者有结直肠息肉病变突变,而剩余1/2的患者有β-连环蛋白(β-catenin)基因突变。并且与癌变相关的Wnt/β-连环蛋白信号通路在CRC中被异常激活。所以靶向Wnt/β-连环蛋白信号通路治疗CRC具有临床价值。目前为止,随着对Wnt/β-连环蛋白信号通路的深入研究,已经开发出了能够抑制或阻碍CRC发展的抑制剂。本文综述β-catenin、Wnt/β-连环蛋白信号通路在结直肠息肉和CRC中的作用,概述Wnt/β-连环蛋白信号通路抑制剂的研究现状,并提出相关抑制该通路的潜在靶点。

利多卡因调控Wnt/β-连环蛋白轴对胃癌细胞化疗敏感性的影响

目的探讨利多卡因调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)轴对胃癌细胞化疗敏感性的影响。方法将对数生长期的人胃癌细胞SGC-7901接种于96孔板中,用不同浓度利多卡因(0、10、50、100、150、200μmol/L)处理24 h,比较不同浓度下的细胞活力。将对数生长期SGC-7901细胞分为对照组(Control组)、顺铂组(Cisplatin组)、利多卡因低浓度组(Lido-L组)、利多卡因中浓度组(Lido-M组)、利多卡因高浓度组(Lido-H组)、利多卡因高浓度+Wnt/β-catenin信号通路激活剂SKL2001组(Lido-H+SKL2001组),通过5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖检测、Transwell法和划痕愈合实验分别比较各组细胞增殖、侵袭和迁移能力,使用TUNEL试剂盒检测各组细胞凋亡情况,并检测各组细胞凋亡、上皮-间质转化、Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达情况。结果与0μmol/L利多卡因相比,50、100、150、200μmol/L利多卡因处理的SGC-7901细胞活力均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与Control组相比,Cisplatin组EdU阳性率、细胞侵袭数、划痕愈合率和波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、B细胞淋巴瘤相关蛋白-2(Bcl-2)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、散乱蛋白2(DVL2)、Wnt家族成员3a(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)表达降低,细胞凋亡率升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、裂解半胱天冬酶-3(Cleaved-Caspase-3)表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);与Cisplatin组相比,Lido-L组、Lido-M组、Lido-H组EdU阳性率、细胞侵袭数、划痕愈合率和Vimentin、N-cadherin、Bcl-2、Cyclin Dl、DVL2、Wnt3a、β-catenin表达逐渐降低,细胞凋亡率逐渐升高,E-cadherin、Bax、Cleaved-caspase-3表达逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);与Lido-H组相比,Lido-H+SKL2001组EdU阳性率、细胞侵袭数、划痕愈合率和Vimentin、N-cadherin、Bcl-2、Cyclin Dl、DVL2、Wnt3a、β-catenin表达升高,细胞凋亡率和E-cadherin、Bax、Cleaved-caspase-3表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利多卡因可能通过抑制Wnt/β-catenin轴的激活而增强胃癌细胞化疗敏感性。

结肠癌组织中β-连环蛋白/转录因子4信号通路相关蛋白表达及其与患者术后复发转移的关系

目的探讨结肠癌组织中β-连环蛋白(β-catenin)/转录因子4(TCF4)信号通路相关蛋白表达及其与患者术后复发转移的关系。方法选择驻马店市中心医院2020年1月至2022年1月收治的结肠癌患者86例为研究对象,患者均接受手术切除。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测患者癌组织及癌旁组织中Wnt-1、β-catenin、TCF4 mRNA的表达,免疫组织化学法检测Wnt-1、β-catenin、TCF4蛋白的表达,Cox比例回归模型分析结肠癌患者术后复发转移的危险因素。结果结肠癌患者癌组织中Wnt-1、β-catenin、TCF4 mRNA相对表达量和蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05)。Wnt-1、β-catenin、TCF4蛋白表达阳性率与肿瘤浸润程度、肿瘤分期以及淋巴结转移有关(P<0.05),Wnt-1、β-catenin、TCF4的蛋白表达阳性率与结肠癌患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05)。Cox回归分析结果显示,有淋巴结转移、Wnt-1、β-catenin、TCF4蛋白表达阳性是结肠癌患者术后复发转移的危险因素(P<0.05)。结论结肠癌组织中Wnt-1、β-catenin、TCF4 mRNA表达及蛋白表达阳性率均较高,Wnt-1、β-catenin、TCF4蛋白表达阳性率与肿瘤浸润程度、肿瘤分期以及淋巴结转移显著相关,是结肠癌术后复发转移的危险因素。

沉默CDC20基因通过抑制Wnt/β-连环蛋白信号通路对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨细胞分裂周期蛋白20 (CDC20)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和细胞周期的影响,并阐明其作用机制。方法:实时荧光定量PCR (RT-qPCR)和Western blotting法检测人子宫内膜基质T-HESC细胞和人EC细胞(KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞)中CDC20 mRNA及蛋白表达水平,选择RL95-2细胞用于后续实验。将CDC20 shRNA干扰慢病毒转染至RL95-2细胞中,分为对照组、sh-NC组(感染阴性对照慢病毒)、sh-CDC20组(感染CDC20 shRNA干扰慢病毒)、sh-NC+SM04690组(感染阴性对照慢病毒后,加入64 nmol·L^(-1) Wnt/β-连环蛋白信号通路抑制剂SM04690干预48h)和sh-CDC20+SM04690组(感染CDC20shRNA干扰慢病毒后,加入64 nmol·L^(-1) SM04690干预48 h)。RT-qPCR法和Western blotting法检测不同细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,BrdU法检测各组细胞中BrdU阳性细胞百分率,流式细胞术检测各组G2/M期细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平。结果:与T-HESC细胞比较,KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),其中RL95-2细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平最高。与sh-NC组比较,sh-CDC20组和sh-NC+SM04690组细胞增殖活性和BrdU阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.05),细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与sh-CDC20组比较,sh-CDC20+SM04690组细胞增殖活性和BrdU阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.05),细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:EC细胞中CDC20呈高表达,沉默CDC20可能通过调控Wnt/β-连环蛋白信号转导诱导RL95-2细胞G2/M期阻滞,抑制细胞增殖。

Wnt/β-连环蛋白信号通路在部分器官缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注损伤是发生在许多器官和疾病中的病理过程,主要包括两个阶段,一是缺血期缺氧诱导的细胞损伤,二是血流恢复后所引起的一系列级联反应。缺血再灌注损伤可加重细胞和组织损伤。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在细胞增殖、分化、凋亡过程中起重要作用,是一个高度保守的信号级联通路。越来越多的研究发现,激活Wnt/β-catenin信号通路可减轻缺血再灌注损伤。本文就Wnt/β-catenin信号通路在部分器官缺血再灌注损伤中的研究进展进行综述。

骨疏康干预Beagle犬磨牙压低过程中转化生长因子β1及β-连环蛋白的表达

背景:骨疏康可以有效促进破骨细胞的凋亡、提高骨密度和骨矿含量、抑制骨吸收。但骨疏康在牙根吸收方面作用的研究匮乏,其调控作用机制尚不清楚。目的:探讨骨疏康在Beagle犬正畸牙根吸收过程中的治疗效果及其对转化生长因子β1、β-连环蛋白表达的影响。方法:将16只Beagle犬随机分为正常对照组(n=4)、蒸馏水组(n=6)与骨疏康组(n=6),正常对照组不进行任何干预,蒸馏水组与骨疏康组建立上颌第一磨牙压低模型,造模后分别每天灌胃蒸馏水与骨疏康(2.1 g/kg)。干预6,9,12周,收集上颌第一磨牙牙根和牙周组织,采用苏木精-伊红染色观察病理变化,免疫组化检测转化生长因子β1、β-连环蛋白的表达水平。结果与结论:(1)第一磨牙随时间推移有明显压低现象出现,在第12周效果最为明显;(2)苏木精-伊红染色显示,蒸馏水组磨牙组织随着加力时间周期的不断延长,破骨细胞数量呈上升趋势,骨吸收现象不断加重;骨疏康组磨牙的根吸收程度轻于蒸馏水组,骨修复能力和牙周组织的改建能力优于蒸馏水组;(3)蒸馏水组磨牙组织转化生长因子β1和β-连环蛋白的表达量显著低于正常对照组(P<0.05);骨疏康组磨牙组织中转化生长因子β1和β-连环蛋白的表达水平随时间推移呈上升趋势,在9周和12周的表达水平显著高于蒸馏水组(P<0.05);(4)结果表明,骨疏康可能通过激活调节转化生长因子β1和β-连环蛋白,促进Beagle犬磨牙骨组织的成骨分化。

子宫腺肌病患者子宫内膜组织中环氧合酶2和β-连环蛋白表达水平及其与痛经的关系

目的:探讨子宫腺肌病(AM)患者在位子宫内膜和病灶组织及血清中环氧合酶2(COX-2)和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平,并阐明其与痛经的关系。方法:选取90例经腹子宫切除的临床和术后病理确诊AM的痛经患者作为AM组,30例无痛经子宫肌瘤(UM)患者作为UM组。采用视觉模拟评分(VAS)法检测AM患者痛经程度,并将90例AM组患者分为轻度痛经组、中度痛经组和重度痛经组(n=30)。采用免疫组织化学(IHC)法检测2组患者子宫内膜组织中COX-2和β-catenin蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组患者血清中COX-2和β-catenin水平,Spearman相关分析法分析2组患者子宫内膜组织中COX-2和β-catenin蛋白表达水平与患者痛经程度的关系。结果:COX-2蛋白主要表达于子宫内膜组织细胞浆中,β-catenin蛋白主要表达于子宫内膜组织细胞膜或细胞浆中。与UM组比较,AM组患者病灶和在位子宫内膜组织中COX-2蛋白表达水平升高(P<0.05),β-catenin蛋白表达水平降低(P<0.05);与AM组患者在位子宫内膜组织比较,AM组患者病灶组织中COX-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。与轻度痛经组比较,中度痛经组AM患者病灶组织和重度痛经组AM患者在位子宫内膜及病灶组织中COX-2蛋白表达水平升高(P<0.05);与中度痛经组比较,重度痛经组AM患者在位子宫内膜和病灶组织中COX-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。不同程度痛经组AM患者在位子宫内膜和病灶组织中β-catenin蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。与UM组比较,AM组患者血清中COX-2水平升高(P<0.05),β-catenin水平降低(P<0.05)。与轻度痛经组比较,中度痛经组和重度痛经组患者血清中COX-2水平升高(P<0.05)。不同程度痛经组患者血清中β-catenin水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。AM患者病灶组织中COX-2蛋白表达水平与β-catenin蛋白表达水平呈负相关关系(r=-0.364,P<0.05);AM患者在位子宫内膜和病灶组织中COX-2蛋白表达水平与痛经程度呈正相关关系(r=0.511,P<0.05;r=0.696,P<0.05),β-catenin蛋白表达水平与痛经程度无相关性(P>0.05)。AM患者术前血清中COX-2水平与β-catenin水平呈负相关关系(r=-0.534,P<0.05),COX-2水平与痛经程度呈正相关关系(r=0.613,P<0.05)。结论:AM患者子宫内膜组织中COX-2蛋白表达水平升高和β-catenin蛋白表达水平降低及二者的关联性均可诱导AM发生和子宫内膜异位侵袭,COX-2高表达可能促进了痛经,可作为治疗AM及相关痛经的潜在分子靶点。

E-钙黏蛋白和β-连环蛋白在乳房外Paget病中的表达

目的:检测E-钙黏蛋白及β-连环蛋白在乳房外Paget病(extramammary Paget s disease,EMPD)中的表达情况,分析其在EMPD中侵袭及转移的作用。方法:收集2010年1月至2018年10月确诊的EMPD患者皮损组织标本,对照标本为包皮环切术切除的正常包皮,应用免疫组织化学方法检测两组标本中E-钙黏蛋白和β-连环蛋白的表达,以染色强度和染色百分率的评分之积进行结果判定。结果:共收集33例EMPD皮损组织标本及25块对照标本。免疫组化结果示E-钙黏蛋白与β-连环蛋白阳性表达主要位于细胞膜上。EMPD患者病理组织中E-钙黏蛋白和β-连环蛋白的强阳性表达率分别为0%和3.0%,阳性表达率分别为36.4%和54.5%,弱阳性表达率分别为51.5%和24.2%,阴性表达率分别为12.1%和18.2%,正常组织E-钙黏蛋白与β-连环蛋白表达全部为强阳性表达。两组标本间E-钙黏蛋白和β-连环蛋白表达差异均具有统计学意义(均P<0.05);E-钙黏蛋白的表达与EMPD患者的年龄、性别、发病部位及淋巴结转移无显著相关性(均P>0.05),与发生真皮浸润有显著相关性(P<0.05);E-钙黏蛋白与β-连环蛋白表达呈正相关(r=0.490,P<0.01)。结论:E-钙粘蛋白及β-连环蛋白在EMPD中的表达是协同作用。E-钙黏蛋白表达的下调可能与EMPD肿瘤发生侵袭具有相关性,但与EMPD肿瘤转移可能无关。

CD24、β-连环蛋白在卵巢癌及癌前病变患者组织中的表达及临床意义

目的:探究卵巢癌及癌前病变患者组织标本中CD24、β-连环蛋白(β-catenin)的表达状况及其与患者临床特征的关联性。方法:选取就诊并进行治疗的40例良性卵巢肿瘤患者(A组),40例交界性卵巢肿瘤患者(B组),60例卵巢癌患者(C组),同期60例体检健康的女性患者(N组)为研究对象。观察CD24、β-catenin与相关蛋白唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-10(Siglec-10)、Engrailed-2(EN2)在各组研究对象组织中的表达情况,同时分析CD24、β-catenin表达与卵巢癌患者临床特征间的关联性;并对CD24与Siglec-10、β-catenin与EN2表达的相关性进行分析。结果:A组、B组、C组、N组四组研究对象中,CD24阳性表达率分别为22.50%、57.50%、85.00%、6.67%;β-catenin阳性表达率分别为27.50%、67.50%、81.67%、10.00%;Siglec-10阳性表达率分别为25.00%、65.00%、88.33%、8.33%,EN2阳性表达率分别为35.00%、62.50%、78.33%、10.00%,且组间比较差异有统计学意义(均P<0.05)。在卵巢癌患者组织中,CD24、β-catenin表达与患者年龄、病理类型不存在显著关联(均P>0.05),CD24表达与患者临床分期、淋巴结转移、组织分化均存在显著关联(均P<0.05),β-catenin表达与患者组织分化存在显著相关性(P<0.05),且CD24与Siglec-10、β-catenin与EN2表达均呈现正相关性(r=0.865,r=0.901,均P=0.000)。结论:对于卵巢癌患者而言,随着患者病变程度的加深,CD24、β-catenin的表达呈现上调趋势,CD24相关蛋白Siglec-10、EN2的表达也呈现上调趋势;同时CD24的表达与患者临床分期、组织分化及淋巴结转移均存在显著关联,β-catenin的表达与患者组织分化存在显著关联。此外,卵巢癌患者组织中CD24与Siglec-10、β-catenin与EN2表达均呈现正相关性,为临床诊疗提供了参考价值。

基于Wnt/β-连环蛋白信号通路和炎症反应探讨通络益肾温阳方对糖尿病肾病大鼠的干预机制

目的基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路及炎症反应探讨通络益肾温阳方对糖尿病肾病大鼠的干预机制。方法(1)将60只大鼠随机分为对照组、模型组和观察组,每组20只。模型组和观察组采用单次腹腔注射大剂量链脲佐菌素的方法构建糖尿病肾病大鼠模型。建模成功后,观察组给予通络益肾温阳方灌胃处理,模型组和对照组给予生理盐水灌胃处理。干预4周后,测量3组大鼠体重及肾重,检测血清尿素氮、血清肌酐、空腹血糖、24 h尿蛋白、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血清转化生长因子β1(TGF-β1)水平,以及肾组织Wnt4、β-catenin的mRNA和蛋白表达水平。(2)通过中药系统药理学数据库与分析平台检索通络益肾温阳方主要中药(山茱萸、山药、炙黄芪、熟地黄)的活性成分,根据口服生物利用度及药物相似性筛选出主要活性成分。选取β-catenin作为受体,选取山茱萸、山药、炙黄芪、熟地黄主要活性成分中口服生物利用度最大的成分(远华蟾蜍精、薯蓣皂苷元、异黄烷酮、豆甾醇)作为配体,运用PyMOL、AutoDock Vina等软件进行分子对接,测定结合能。结果(1)对照组、观察组和模型组大鼠体重依次降低,肾重及血清尿素氮、血清肌酐、空腹血糖、24 h尿蛋白、血清TNF-α、血清TGF-β1水平依次升高,肾组织Wnt4、β-catenin mRNA和蛋白的表达水平也依次升高(均P<0.05)。(2)通络益肾温阳方中,山茱萸的主要活性成分有20个、山药的主要活性成分有16个、炙黄芪的主要活性成分有15个、熟地黄的主要活性成分有2个。分子对接分析结果显示,远华蟾蜍精、异黄烷酮、豆甾醇、薯蓣皂苷元与β-catenin的结合能分别为-5.28、-6.40、-5.67、-5.33。结论通络益肾温阳方可有效改善糖尿病肾病大鼠的肾功能,其可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路及炎症反应,从而减轻肾损伤。

Wnt/β-连环蛋白通路在免疫检查点抑制剂耐药中作用的研究进展

Wnt/β-连环蛋白信号通路是癌症领域最热门的分子靶点之一,与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关.Wnt/β-连环蛋白信号通路还广泛应用于肿瘤免疫调节,异常活化的Wnt/β-连环蛋白与肿瘤免疫抑制微环境密切相关.目前,免疫检查点抑制剂的研究和应用已相当广泛,但是以靶向程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1,PD-1)/程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4(cytotoxic T lymphocyte antigen-4,CTLA-4)为代表的免疫检查点抑制剂存在患者响应率低和耐药的问题.Wnt/β-连环蛋白的激活会抑制肿瘤微环境CD8^(+)T细胞的浸润,抑制抗肿瘤免疫反应并诱导免疫检查点抑制剂耐药.重点讨论了Wnt/β-连环蛋白信号通路与免疫检查点的关系,并对Wnt/β-连环蛋白抑制剂联合免疫检查点抑制剂治疗恶性肿瘤的研究进展进行综述.

APC不同功能区域对结肠癌细胞株HT-29中β-连环蛋白表达的影响

目的:探讨含有APC蛋白不同功能区域的pEGFP-N3-APC重组质粒对结肠癌细胞株HT-29中β-连环蛋白表达的影响。方法:脂质体介导重组质粒pEGFP-N3-APC1～5转染HT-29,采用绿色荧光及RT-PCR验证重组质粒在细胞中的表达。以Western免疫印迹检测转染后HT-29细胞中β-连环蛋白的表达,以SPSS13.0软件分析电泳条带的灰度值。结果:重组质粒转染HT-29细胞后,绿色荧光及RT-PCR结果显示5个APC蛋白不同功能区域多肽可在细胞中表达。Western免疫印迹结果显示,重组质粒pEGFP-N3-APC1,pEGFP-N3-APC2和pEGFP-N3-APC3对β-连环蛋白表达无影响,而pEGFP-N3-APC4和pEGFP-N3-APC5均可降低结肠癌细胞株HT-29中β-连环蛋白的表达水平,其中以pEGFP-N3-APC5的抑制程度最强。结论:含有APC蛋白中15氨基重复序列+SAMP重复序列的APC5基因片段既可有效降低β-连环蛋白的表达,同时又是相对长度较短的可用于基因治疗的最优片段。

丙泊酚对肿瘤细胞肺转移及E钙粘蛋白、β-连环蛋白表达的影响

目的探讨不同剂量丙泊酚对大鼠MADB106细胞肺转移和肿瘤组织中E钙粘蛋白(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)的影响。方法 Fischer344雄性大鼠40只,随机分为4组(每组10只):生理盐水组(S组)、脂肪乳剂组(F组)、丙泊酚30℉/℉组(P1组)和50 mg/kg组(P2组)。1%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔注射后行股静脉置管,分别泵入等容量的生理盐水、脂肪乳剂和丙泊酚,1 h后静注0.5 ml MADB106肿瘤细胞(2×105个)。3周后处死,计数肺表面转移瘤数目及转移抑制率;采用免疫组化法检测肿瘤组织中E-cadherin和β-catenin的表达,用IPP图像分析系统对结果进行半定量分析。结果 S组与F组肺转移瘤数目、转移抑制率和肿瘤组织中E-cadherin、β-catenin的表达均无显著差异(P>0.05)。与S组和F组相比,P1组和P2组的肺转移瘤数目减少(P<0.01),转移抑制率增加(P<0.01),E-cadherin和β-catenin蛋白的表达减少(P<0.05);肺转移瘤数目及E-cadherin和β-catenin蛋白的表达与丙泊酚剂量负相关,Pearson相关系数分别为-0.879、-0.755、-0.693(P<0.01)。结论丙泊酚可通过抑制Wnt/β-catenin通路,下调转移瘤组织中E-cadherin和β-catenin的表达,从而抑制MADB106细胞肺转移,呈剂量依赖性。