6-Gingerol, asarinin, and deoxyschizandrin improve bronchial epithelium functions in an interleukin-13einduced BEAS-2B cell model

Objective:To explore the effects of 6-gingerol,asarinin,and deoxyschizandrindthe main components of Zingiber officinale(Willd.)Rosc.(Gan Jiang),Asarum heterotropoides f.var.mandshuricum(Maxim.)(Xi Xin),and Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.(Wu Wei Zi),respectivelydon an interleukin(IL)-13einduced BEAS-2B cell model in vitro.Methods:The BEAS-2B cell model was established using 25 ng/mL IL-13 combined with 1%fetal bovine serum(FBS)in vitro.Mitoquinone mesylate(Mito-Q)treatment was used as a positive control group,and different concentrations of 6-gingerol,asarinin,and deoxyschizandrin were used to treat the models.The level of reactive oxygen species(ROS)production was detected by flow cytometry.The expression levels of LC3B,Beclin1,adenosine 50-monophosphate(AMP)eactivated protein kinase(AMPK),phosphory-lated-AMPeactivated protein kinase(P-AMPK),dynamin-related protein 1(DRP1),and mitochondrial fusion protein 2(MFN2)were detected by Western blot.Mitochondrial membrane potential(MMP)assay kit with JC-1 was utilized to detect the level of MMP.Results:The BEAS-2B cells exposed to 25 ng/mL IL-13 with 1%FBS showed an increased ROS level and a decreased MMP.6-Gingerol,asarinin,and deoxyschizandrin were able to downregulate ROS level and upregulate the MMP in the BEAS-2B model.Asarinin and deoxyschizandrin reduced the expression of autophagy protein LC3B,while deoxyschizandrin significantly increased the expression of DRP1 in the BEAS-2B model.Conclusion:6-Gingerol,asarinin,and deoxyschizandrin can reduce ROS generation and increase MMP,but have different regulatory effects on the expression of autophagy protein and mitochondrial mitotic protein.The three components have both synergistic and complementary effects in classic medicine compatibility.This study may provide an innovative strategy to reduce the lung inflammation related to IL-13.

芝麻素与细辛素检测方法及生物活性的研究进展

旨在为芝麻木酚素相关产品、特殊用途油脂等的研发提供参考,对芝麻木酚素中主要的脂溶性活性成分芝麻素及其转化产物细辛素的含量分布、转化条件、检测方法和生物活性进行综述。芝麻素是芝麻中含量最多的脂溶性木酚素,而芝麻中几乎不含细辛素,但芝麻素可在酸性和受热条件下转化为细辛素;芝麻素与细辛素的检测方法有高效液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法等;芝麻素具有抑菌、抗癌、降血脂等生物活性,细辛素具有抗炎、抑菌、抗病毒、抗癌、抗肿瘤、抗氧化等生物活性。

细辛煎煮过程中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的变化研究

目的研究细辛煎煮过程中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的变化。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)柱,甲醇-水系统梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长285 nm,柱温35℃,测定细辛不同时间水煎液中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素。结果细辛水煎液中毒性成分甲基丁香酚、黄樟醚的含有量随着煎煮时间的延长不断下降,而有效成分细辛脂素的含有量不断增加。结论细辛入汤剂时久煎可有效减少毒性成分,亦有利于有效成分的溶出。

细辛炮制品HPLC指纹图谱定性与有效成分定量分析研究

目的：研究不同炮制方法所得细辛炮制品的HPLC指纹图谱及有效成分甲基丁香酚与细辛脂素含量,为细辛炮制品的质量评价与炮制机理提供依据。方法：采用HPLC法,Agilent Tc-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流速：1.0 m L/min;柱温：30℃;检测波长：285 nm;流动相：乙腈-0.2%冰醋酸梯度洗脱,对细辛10种炮制品进行指纹图谱研究,并测定了甲基丁香酚与细辛脂素的含量。结果：建立了10种细辛炮制品的指纹图谱,以细辛脂素峰为参照峰,共标定了22个共有峰,利用化学对照品指认了其中2个色谱峰;除了姜制、蜜制和炒制外,其他炮制品成分差异变化不大,但含量差异较大。甲基丁香酚的保留率大小顺序为：酒制〉醋制〉甘草制〉碱醋制〉炒焦〉米泔水制〉蜜制〉姜制〉盐制〉碱制,其中酒制能使甲基丁香酚增加10%-20%,醋制时甲基丁香酚的保留率达95%以上;细辛脂素的保留率大小顺序为：米泔水制〉甘草制〉碱醋制〉蜜制〉盐制〉酒制〉姜制〉醋制〉碱制〉炒焦,除碱制与炒焦外,其他炮制方法均能增加细辛脂素的含量,特别是米泔水制、甘草制与碱醋制可使细辛脂素增加35%以上。结论：此方法准确可靠,可用于评价细辛炮制品的质量。

细辛脂素抗心脏移植急性排斥反应的作用及对黏附分子表达的影响

目的:实验筛选细辛免疫抑制作用的有效成分细辛脂素,探讨其抗心脏移植急性排斥反应作用及对黏附分子的影响。方法:提取细辛中的细辛脂素,健康雄性Wistar大鼠(供体)和SD大鼠(受体)各64只,建立大鼠异位心脏移植模型,将接受心脏移植的SD大鼠分成4组:阳性对照组,不给任何处置;环孢霉素A(CsA)组,术前1 d开始灌服CsA;细辛脂素组,术前1 d开始灌服细辛脂素;混合药物组,术前1 d开始灌服半量CsA和半量细辛脂素。每组各8只,术后第7天处死,另外8只用于观察移植物生存天数。移植心常规石蜡包埋、切片,显微镜观察并进行组织病理分级;免疫组化染色法检测移植物局部细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)含量。结果:移植心存活时间,CsA组、细辛脂素组和混合药物组均较阳性对照组显著延长(P<0.01)。与阳性对照组比较,细辛脂素可减轻心肌病理形态学的损伤。CsA组、细辛脂素组和混合药物组移植心局部ICAM-1和VCAM-1含量较阳性对照组明显减少。结论:细辛脂素可延长移植物存活时间并减轻病理形态的损伤,与CsA有相似的免疫抑制作用。ICAM-1和VCAM-1在发生排斥反应时表达增加,细辛脂素可抑制二者的表达。

HPLC法测定4种细辛中马兜铃酸Ⅰ和细辛脂素

目的采用HPLC法测定华细辛、铜钱细辛、毛细辛和辽细辛不同部位马兜铃酸Ⅰ和细辛脂素的量。方法分析在MERCK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)上实施;流动相为乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min,检测波长为260 nm,柱温30℃。结果马兜铃酸Ⅰ和细辛脂素的线性范围分别为0.01～250μg/mL(r=0.999 7)和0.6～200μg/mL(r=0.999 7),其平均回收率分别为98.8%(RSD为1.1%)和99.8%(RSD为0.7%)。结论 4种细辛中均检测到马兜铃酸Ⅰ,叶中含有量均大于根茎。细辛脂素在毛细辛茎中未检测到.细辛脂素在华细辛和辽细辛根及茎中含有量较叶中高。

杜衡的化学成分

Four compounds were isolated from Asarum forbesii, they were identified as asarinin, safrol, kakuol as well as sitesterol.

RP-HPLC法测定止痛化瘀搽剂中欧前胡素和细辛脂素的含量

目的：建立止痛化瘀搽剂中欧前胡素和细辛脂素的含量测定方法，为其质量标准制定奠定基础。方法：Kromasil C18柱（4．6mm×250mm，5μm），欧前胡素含量测定流动相为：甲醇-水（65：35），流速为1．0mL／min，检测波长为300nm；细辛脂素含量测定流动相为：乙腈-水，梯度洗脱，流速为1．0mL／min，检测波长为287nm.结果：欧前胡素在25．0—375ng范围内呈良好的线性（r=0．9997），加样回收率为98．96％（n=6），RSD为2．28％；细辛脂素在74．0—1110ng范围内呈良好的线性（r=0．9996），加样回收率为96．12％（n=6），RSD为2．20％。结论：该法操作简便，专属性强，重现性好，可为止痛化瘀搽剂质量标准的制定提供科学依据。

HPLC法同时测定辛芩颗粒中细辛脂素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的：建立高效液相色谱法测定辛芩颗粒中细辛脂素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的方法。方法：色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流速为1.0 ml·min^-1;柱温：30℃;流动相：甲醇-水梯度洗脱;检测波长：0-30 min为254 nm,30-55 min为287 nm;进样量：10μl。结果：升麻素苷在浓度为10.210-163.400μg·ml^-1时线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率为100.30%,RSD为1.6%（n=6）;5-O-甲基维斯阿米醇苷在浓度为10.160-162.600μg·ml^-1时线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为101.53%,RSD为1.1%（n=6）;细辛脂素在浓度为5.015-80.240μg·ml^-1时线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为101.12%,RSD为1.2%（n=6）。结论：该方法简单、准确,同时测定3种有效成分的含量,可用于辛芩颗粒的质量控制。

九龙化风丸中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素和细辛脂素的HPLC梯度洗脱法测定

目的 采用高效液相梯度洗脱法测定九龙化风丸（防风、羌活、细辛、大黄、桔梗等）中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素和细辛脂素的量.方法 Hypersil C18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）,体积流量0.9 mL/min,升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的色谱条件,流动相A为甲醇-乙腈（2∶1）,流动相B为0.5％磷酸溶液,检测波长254 nm.羌活醇和异欧前胡素的色谱条件,流动相A为乙腈,流动相B为0.1％醋酸水溶液,检测波长310 nm,细辛脂素的色谱条件,流动相为乙腈-甲醇（85∶15）,检测波长286 nm.结果 升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.0146～0.2920μg （r=0.999 1）、0.0108～0.2160μg （r=0.9993）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.55％、97.73％,RSD （n=6）分别为1.46％、1.18％;羌活醇和异欧前胡素分别在0.017 4 ～0.348 0 μg（r=0.999 3）、0.0128～0.2560 μg （r=0.9997）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.62％、98.11％,RSD （n=6）分别为1.43％、1.39％;细辛脂素在0.012 4～0.2480 μg （r=0.999 2）范围内进样量与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为97.65％,RSD （n=6）为1.24％.结论 该方法测定结果准确、灵敏、重复性好.

北细辛非挥发性化学成分的研究

目的：研究细辛的非挥发性有效成分。方法：对北细辛根和根茎的化学成分进行提取分离，所得化合物用光谱分析（ＩＲ、ＭＳ、１ＨＮＭＲ、１３ＣＮＭＲ）鉴定。结果：从乙醚提取物中分得３个化合物，鉴定为卡枯醇、１－细辛脂素和１－芝麻脂素。结论：１－芝麻脂素为首次从该植物中得到，已知它具有抗病毒、抗气管炎作用，故可认为是细辛的有效成分之一。

高效液相色谱法测定不同部位两面针原植物中L-芝麻脂素和L-细辛脂素的含量

目的 建立两面针原植物中L-芝麻脂素和L-细辛脂素的测定方法,并测定两面针不同部位两者的含量。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）,色谱柱为HYPERSIL BDS C18,流动相为乙腈:水（50:50）,检测波长287nm。结果 L-芝麻脂素和L-细辛脂素的平均回收率和相对标准差分别为100.13％、1.61％和101.24％、1.46％。结论 此法可用于两面针的质量控制。两面针原植物根部的被测成分含量最高。

盐酸-三氯化铁催化芝麻素差向异构化合成细辛素及机理探讨

分别以盐酸、三氯化铁、盐酸-三氯化铁作为催化剂,研究芝麻素差向异构化合成细辛素的条件并探讨差向异构化机理,采用NMR、MS方法对合成物进行结构鉴定。结果显示:单独使用盐酸作为催化剂,盐酸体积分数为20%时催化反应达到平衡;单独使用三氯化铁作为催化剂,会发生水解反应,致使催化反应终止;以盐酸-三氯化铁作为联合催化剂,使用较少的量(质量分数0.05%~0.5%),反应温度控制在体系中乙醇沸点之上,10min内就能够达到很好的催化效果。联合催化剂可降低反应体系的活化能,加快了芝麻素异构化为细辛素的进程。

芝麻油生产工艺对细辛素形成的影响

对28个芝麻油样的芝麻木酚素组分含量进行检测分析。结果发现:2个浸出精炼芝麻油样中细辛素含量(mg/100 g)平均119.45,其他26个油样中仅有3个检测出很少的细辛素(分别为17.25、7.43、0.58),冷榨芝麻油中未检出细辛素。对冷榨芝麻油进行水化脱胶、碱炼脱酸、吸附脱色、蒸馏脱臭等精炼处理,并对处理后的芝麻油进行细辛素含量检测。结果表明:磷酸水化脱胶和活性白土吸附脱色能造成芝麻油中细辛素形成.且含量随磷酸用量和白土用量的增加而增加(磷酸用量1%时为131.22,白土用量5%时为50.73);其他处理过程没有细辛素形成。据此,细辛素可作为区别冷榨芝麻油和浸出精炼芝麻油的特征指标。

HPLC法同时测定当归四逆汤中3种有效成分

目的建立同时测定当归四逆汤（当归、桂枝、芍药、通草等）中甘草苷、细辛脂素和桂皮醛含有量的高效液相色谱（HPLC）法。方法分析采用Symmetry（R）Shield C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0μm）;0.05%磷酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长分别为甘草苷237 nm、细辛脂素和桂皮醛287 nm;柱温35℃。结果甘草苷、细辛脂素和桂皮醛分别在4.042~40.42μg/m L、0.196 0~19.60μg/m L和10.08~100.8μg/m L范围内线性关系良好（r≥0.999 8）,平均回收率在96.7%~97.0%之间。结论该方法专属性强,准确可靠,可用于完善当归四逆汤的质量标准。

HPLC法测定北细辛中芝麻脂素和细辛脂素的含量

目的：建立北细辛中Ｌ－芝麻脂素和Ｌ－细辛脂素的含量测定方法，为该药材提供质量控制标准。方法：以醋酸乙酯为溶剂，加热回流１２０ｍｉｎ提取；用ＨＰＬＣ法测定：使用ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８色谱柱（２５０ｍｍ×４６ｍｍ，５μｍ），流动相：乙腈－水（５０∶５０），流速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长：２８７ｎｍ，纸速：２ｍｍ·ｍｉｎ－１，进样量：１０μＬ，外标法定量。结果：两组分的平均回收率分别为芝麻脂素１００４％（ＲＳＤ＝１９％）和细辛脂素１００２％（ＲＳＤ＝１６％）。结论：方法快速简便，结果准确，可用于细辛药材质量控制。

LC-MS/MS同时测定消喘膏中3种化学成分

目的：建立同时测定消喘膏中芥子碱硫氰酸盐、延胡索乙素和细辛脂素含量的方法。方法：采用液相色谱-串联质谱联用技术。色谱柱为Waters Symmetry C18（150 mm×2.10 mm,5μm）,流动相为甲醇（0.2%甲酸和2 mmol/L甲酸铵）和水（0.2%甲酸和2 mmol/L甲酸铵）,梯度洗脱;质谱条件：采用电喷雾离子源正离子模式,通过多反应监测（MRM）模式同时监测复方中3种成分。结果：3种成分线性回归方程的r值均≥0.9990。平均加样回收率为71.4%～88.7%,RSD范围为7.3%～11.1%（n均为6）。结论：本法简便、快速、灵敏度高、专属性好,可用于消喘膏中芥子碱硫氰酸盐、延胡索乙素和细辛脂素的含量测定。

不同产地细辛中有效成分与马兜铃酸Ⅰ含量差异比较

目的:测定不同产地细辛及其不同入药部位中的肾毒性成分和有效成分的含量,优选出肾毒性成分含量低、有效成分含量高的细辛药材品种及产地。方法:HPLC法测定马兜铃酸Ⅰ及细辛脂素的含量;GC法测定甲基丁香酚含量。结果:不同产地细辛中,马兜铃酸Ⅰ含量以陕西宁强(华细辛)地下部分最高,为0.4528mg/g,以吉林通化(北细辛)地上部分最低,为0.0083mg/g;甲基丁香酚含量以吉林合龙(汉城细辛)地下部分含量最高,为1.35%,细辛脂素含量以吉林合龙(汉城细辛)地下部分含量最高,为3.92mg/g。结论:不同产地细辛马兜铃酸Ⅰ、细辛脂素、甲基丁香酚含量差异较大。

细辛脂素+供鼠脾/骨髓细胞诱导的免疫耐受对大鼠心脏移植存活的影响

目的:探讨心脏移植前1周,输注供鼠脾/骨髓细胞于接受鼠胸腺内,同时灌服细辛脂素诱导免疫耐受对移植物的影响。方法:提取中药细辛中的细辛脂素成分。以健康雄性Wistar大鼠为供者和SD大鼠为受者,建立大鼠腹部异位心脏移植模型。将接受心脏移植的80只SD大鼠分成5组,每组16只。阳性对照组:施行腹部异位心脏移植,不给任何处置;环孢霉素A(CsA)组:术前7d开始灌服CsA;细辛脂素组:术前7d开始灌服细辛脂素25mg/(kg.d);脾细胞诱导组:术前7d开始输注供者脾细胞于受者胸腺内,术前7d开始灌服细辛脂素25mg/(kg.d);骨髓细胞诱导组:术前7d开始输注供者骨髓细胞于受体胸腺内,术前7d开始灌服细辛脂素25mg/(kg.d)。于术后7d,每组各处死8只,另外8只用于观察移植物生存的天数。用MTT比色法检测供受体鼠混合淋巴细胞反应;应用ELISA法检测受体鼠血清中IL-2,IFN-γ,IL-4和IL-10的水平。结果:CsA组和免疫诱导组移植心的存活时间较阳性对照组显著延长(P<0.01)。供受体鼠的混合淋巴细胞反应免疫诱导组较阳性对照组差异显著(P<0.01)。免疫诱导组血清IL-4和IL-10的含量较CsA组显著升高(P<0.01)。CsA组和免疫诱导组血清IL-2和IFN-γ的含量较阳性对照组显著降低(P<0.01)。结论:细辛脂素联合供者的脾细胞和骨髓细胞可成功地诱导受体鼠对心脏移植物的免疫耐受。输注供体鼠的脾细胞和骨髓细胞可起到相似的诱导免疫耐受的作用。

贮存时间对北细辛中细辛脂素含量的影响

为了探究贮存时间对北细辛药材质量的影响,建立HPLC法测定北细辛中细辛脂素含量,在温度(15±2)℃的条件下放置12个月,分析北细辛中细辛脂素含量变化规律。研究结果表明,运用本文建立的含量测定方法,细辛脂素浓度在0.1~50μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为98.76%,RSD值为1.81%。放置12个月内细辛脂素具有良好的稳定性,含量并无明显的降低或增加,为北细辛贮藏条件的深入研究提供参考。