家蚕抗菌肽Attacin1对球孢白僵菌的抗菌活性

抗菌肽是宿主在免疫过程中产生的一类重要抗菌物质。通过实时荧光定量PCR检测发现家蚕幼虫在被球孢白僵菌(Beauveria bassiana)感染后抗菌肽Attacin1的编码基因BmAttacin1表达显著上调。克隆获得了BmAttacin1成熟蛋白的编码序列,利用原核表达系统成功表达并获得BmAttacin1蛋白。抑菌圈实验结果表明,BmAttacin1对革兰阴性菌大肠埃希菌(Escherichia coli)和球孢白僵菌有明显的抑菌效果,而对革兰阳性菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)没有抑菌效果;进一步将BmAttacin1与球孢白僵菌分生孢子孵育,间接免疫荧光检测发现BmAttacin1能与球孢白僵菌分生孢子结合。在BmN培养细胞中过表达BmAttacin1基因后,家蚕其他7种抗菌肽基因也都上调表达,其中天蚕素类抗菌肽基因BmCecropinA的表达上调了10倍,BmCecropinB上调了9倍,表明BmAttacin1的表达可能对其他抗菌肽基因的表达具有协同增强作用。试验结果为深入研究BmAttacin1与球孢白僵菌的相互作用以及BmAttacin1在家蚕抵御白僵菌感染过程中发挥的作用奠定了一定的基础。