Zeste同源物2增强子在桥本甲状腺炎B淋巴细胞亚群中的表达及其抑制剂的治疗机制及效果研究

背景甲状腺自身抗体是诊断桥本甲状腺炎(HT)的标志,B淋巴细胞在HT的发病机制中发挥重要作用。Zeste同源物2增强子(EZH2)是一种表观遗传学蛋白,在淋巴细胞的发育与功能调控中扮演重要角色。目的本研究探讨EZH2在HT甲状腺组浆母细胞及浆细胞中的表达,进一步探讨EZH2抑制剂在实验性自身免疫甲状腺炎(EAT)模型中的治疗作用。方法收集北京大学第一医院2010—2020年6例行甲状腺手术的患者,取肿瘤对侧的甲状腺组织(HT及正常甲状腺组织各3例),通过RNA-seq筛选B淋巴细胞相关基因的表达情况;收集16例HT患者的甲状腺组织和8例健康对照(HD)甲状腺组织,分别利用免疫组化及免疫荧光验证EZH2在HT甲状腺组织中B淋巴细胞中的表达;收集25例HT甲状腺细针穿刺液(FNA)、19例HT外周血以及12例健康人外周血样本应用流式细胞分析检测EZH2在浆母细胞及浆细胞中的表达改变。将15只7周龄NOD.H-2^(h4)小鼠EAT模型分为对照组(n=5)、EAT无注射(n=5)或注射EZH2抑制剂GSK126处理组(10 mg/kg,腹腔注射3次/周,n=5),8周后观察甲状腺炎症程度及甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平的改变。结果RNA-seq结果显示,相较于正常甲状腺组织,HT甲状腺组织中EZH2水平上调,一些与B淋巴细胞表型相关的基因例如CD19、CD27、CD38、CD52相应增加。免疫组化结果显示,16例HT甲状腺组织标本中EZH2免疫组化染色均可在生发中心(GC)见到阳性细胞,呈强阳性,8例正常甲状腺组织染色中未观察到阳性细胞。HT甲状腺组织中EZH2染色高表达在GC区,EZH2特异性地表达在CD_(19)^(+)B淋巴细胞中。流式细胞术检测结果显示HT FNA样本中CD_(19)^(+)B淋巴细胞、浆母细胞及浆细胞比例均高于HD外周血、HT外周血样本(P<0.01),HT FNA样本中EZH2在CD_(19)^(+)B淋巴细胞、浆母细胞中的阳性比例高于HT外周血(P<0.005)。小鼠实验中,EAT组甲状腺的淋巴细胞浸润较对照组增加。GSK126处理组炎症程度评分和TgAb水平高于对照组,低于EAT组(P<0.001)。结论EZH2在HT甲状腺组织CD_(19)^(+)B淋巴细胞中表达异常升高,可能促进了B淋巴细胞分化成浆细胞进而促进自身抗体生成破坏甲状腺,EZH2抑制剂可以减缓EAT模型甲状腺炎症程度。浆母细胞中EZH2表达增加可能参与了HT的发病机制,EZH2可能成为治疗HT的新靶点,相关机制需要进一步深入研究。

免疫相关性全血细胞减少症患者骨髓B淋巴细胞数量、功能及凋亡

目的检测免疫相关性全血细胞减少症(IRP)患者骨髓B淋巴细胞的数量、功能及凋亡相关蛋白水平,以探讨B淋巴细胞在IRP发病中的作用。方法采用流式细胞术测定25例初诊患者,15例治疗后血象恢复正常的患者和10例正常人骨髓总B淋巴细胞、CD5^+B淋巴细胞细胞的数量,B淋巴细胞胞浆内免疫球蛋白IgM的表达以及B淋巴细胞膜表面凋亡相关蛋白Fas抗原(CD95)、胞浆内抗凋亡蛋白bcl—2的表达。结果 IRP初诊患者总B淋巴细胞、CD5^+B淋巴细胞比例显著高于治疗后血象恢复组和正常人(P均<0.05),后两组相比无显著性差异(P>0.05);初诊患者骨髓B淋巴细胞免疫球蛋白IgM的表达也明显高于其他两组。三组患者B淋巴细胞Fas抗原的表达率无明显区别(P均>0.05);初诊患者B淋巴细胞胞浆内bcl—2的表达率显著高于其它两组(P均<0.05),治疗后血象恢复组也显著高于正常对照组(P<0.01);各组间B淋巴细胞凋亡相关指数(CD19^+CD95^+/CD19^+Bcl-2^+)比较,初诊组显著低于治疗后血象恢复组和对照组(P均<0.01),治疗后血象恢复组也显著低于对照组(P<0.05);B淋巴细胞的比例与治疗起效时间呈正相关(r=0.69,P<0.01)。结论 IRP患者自身抗体的产生可能与B淋巴细胞及其亚群数量异常、功能亢进及凋亡受抑有关。

SFTSV感染引起B淋巴细胞免疫功能改变的研究进展

发热伴血小板减少综合征病毒(sever fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)是近年发现的新病毒。该病毒感染引起的发热伴血小板减少综合征(sever fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)以高热、血小板和白细胞减少、多脏器功能损伤为主要临床特征,死亡率5%~30%。目前尚无验证有效的抗病毒药物和疫苗。SFTSV感染可引起患者免疫功能紊乱,B淋巴细胞是该病毒感染的重要靶细胞之一,但SFTSV感染对B淋巴细胞功能的影响尚不完全清楚。本文对SFTSV感染引起的B淋巴细胞免疫功能异常及其机制研究进行综述,以期促进SFTSV感染的免疫病理机制研究,为深入认识SFTSV感染对B淋巴细胞的影响,开发相关诊疗技术提供基础。

类风湿关节炎患者心肺功能变化及与B、T淋巴细胞衰减因子及氧化应激的相关性分析

目的观察类风湿关节炎患者的心、肺功能变化及其与外周血BTLA和氧化应激指标变化的相关性,探讨心肺功能下降的机制。方法选取RA患者100例并抽取40例健康人作为正常对照。采用肺功能仪检测患者肺功能参数FVC、FEV1、MVV、PEF、MEF25、MEF50、MEF75。采用超声心动图检测2组心功能参数EF%、SV%、FS%、E、A、E/A。流式细胞术检测BTLA表达频率及活化水平,魏氏法测定ESR,全自动生化仪测定hs-CRP。酶联免疫吸附法检测外周血细胞因子(IL-17、TNF-α、IL-4、IL-35)及氧化应激指标(MDA、ROS、SOD、TAOC)。结果 1)与NC组相比,RA患者肺功能参数均有不同程度降低;心功能参数EF、E峰、E/A明显降低,A峰明显升高,SV无明显差异;外周血IL-17、TNF-α和炎性指标ESR、CRP值显著升高,BTLA、IL-4、IL-35值显著降低,ROS、MDA明显升高,SOD、TAOC明显降低。2)相关性分析显示心功能参数与CD24+细胞、CD19+CD24+细胞、TAOC负相关,与BTLA、CD19+Cell、ROS、MDA、SOD呈正相关;肺功能各参数均与ESR、Hs-CRP、DAS28呈负相关,与BTLA、CD19+CD24+、SOD、TAOC、IL-4、IL-35呈正相关,与CD24+BTLA+、ROS、MDA、IL-17、TNF-α呈负相关。结论 RA患者存在心肺功能降低,并与机体BTLA表达减弱、抗氧化能力下降密切相关。

益肾降浊冲剂对慢性肾功能不全患者B淋巴细胞及调节性T细胞的影响

目的探讨益肾降浊冲剂对慢性肾功能不全(chronic renal insufficiency,CRI)患者B淋巴细胞、调节性T细胞(Treg)的影响。方法 53例CRI患者,根据治疗方案,采用随机数字表法分为治疗组(益肾降浊冲剂)和对照组,以流式细胞仪检测治疗前后慢性肾衰竭患者外周血Treg、B淋巴细胞百分率(CD19+)、活化率(CD19+CD69+)、凋亡率(AV)水平;用CBA流式蛋白分析系统检测外周血细胞因子IL-6、IL-10的水平;用散射速率比浊法测定血清高敏C反应蛋白(hs-CRP);用终点法测定同型半胱氨酸(Hcy);采用贝克曼库尔特血细胞分析仪查血红蛋白含量(HGB);由反相高效液相色谱测定方法测定尿肌酐(UCr);钙(Ca)、磷(P)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血浆白蛋白(Alb)由BECKMAN-C800全自动生化分析仪测定;根据血Ca、P浓度计算钙磷乘积(Ca×P);根据SCr、UCr和24h尿量计算内生肌酐清除率(CCr)。结果两组治疗后CD19+、CCr水平上升(P<0.01),AV、SCr水平下降(P<0.01),其中治疗组较对照组变化更明显(P<0.05);两组治疗后CD19+CD69+、Treg、IL-6、IL-10、CRP、BUN、P水平及Ca×P无明显变化(P>0.05)。两组治疗后Ca、HGB、Alb均上升(P<0.05),Hcy均下降(P<0.05),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析:CD19+与AV、Hcy呈负相关;AV与ALB呈负相关;SCr与CCr呈负相关,与CRP、BUN呈正相关;CCr与CRP、BUN呈负相关;Hcy与ALB呈负相关;CRP与BUN呈正相关。结论益肾降浊冲剂具有改善肾功能、延缓肾衰竭进展的作用。益肾降浊冲剂通过降低CD19+AV,提高其百分率而对CKD3、4期患者B淋巴细胞具有调节作用。

淋巴细胞功能相关抗原-3(CD58)在儿童期急性B淋巴细胞白血病近期疗效判断中的应用

本研究评估CD58在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)近期疗效判断中的价值。应用四色流式细胞分析技术观察135例儿童期B-ALL患者CD58分子的表达特点;建立用CD58/CD10/CD34/CD19抗体组合检测B-ALLMRD的方案;结合CD58的表达情况和MRD监测结果分析CD58在B-ALL中的预后价值。结果表明135例B-ALL的平均CD58MFI为113.08±63.33,15例正常骨髓的CD19+CD10+细胞的平均CD58MFI为14.68±5.26,两者差异显著(P<0.01);51.9%(70/135)B-ALL患者的CD58分子强表达,可以用CD58为指标进行MRD检测;CD58/CD10/CD34/CD19抗体组合的有效频率仅次于TdT/CD10/CD34/CD19,为51.9%;CD58高表达组的MRD阳性率显著低于CD58低表达组(P<0.05)。结论CD58可以作为B-ALLMRD检测的指标,此结果丰富了MRD检测的组合;CD58的高表达可以作为B-ALL预后较好的指标。

BAFF/BAFF-R通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路调节B淋巴细胞功能在类风湿关节炎发病机制中的意义

B淋巴细胞活化和生存在类风湿关节炎(RA)病程中起关键作用。肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子(BAFF)是维持B细胞功能的重要细胞因子。BAFF与其受体BAFF-R结合(BAFF/BAFF-R),能够激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,调节B淋巴细胞的增殖、存活和活化。该文就B淋巴细胞、BAFF/BAFF-R以及PI3K/Akt/mTOR信号通路参与RA的发病机制加以综述。

复方中草药“毒菌杀”对感染IBDV雏鸡白细胞数量及淋巴细胞ANAE^+百分率的影响

试验观察了复方中草药“毒菌杀”对感染法氏囊病毒(IBDV)雏鸡的外周血液白细胞及α-醋酸萘酯酶(α-acid naphthyl acetate esterase,ANAE)阳性淋巴细胞百分率的影响。结果发现,“毒菌杀”可以使感染IBD V的雏鸡维持外周血白细胞数量的相对稳定,提高ANAE阳性淋巴细胞的活性水平,具有明显的免疫保护作用。

B淋巴细胞缺乏影响小鼠心脏结构及心肌免疫细胞组成

目的探讨B淋巴细胞对心脏发育过程中心脏结构、功能及心肌免疫细胞的影响。方法使用心动超声、免疫荧光染色及流式细胞术分别评估野生型小鼠(WT小鼠)及B淋巴细胞缺陷小鼠(μMT小鼠)心脏结构、功能及心肌免疫细胞的组成。结果与WT小鼠相比,μMT小鼠心脏质量与小鼠体质量比及左心室质量显著减低(P<0.05),心肌细胞横截面积显著减小(P<0.001),且μMT小鼠的左心室射血分数明显升高(P<0.05)。mRNA测序结果显示,WT小鼠及μMT小鼠差异基因主要富集在心脏发育及肥厚型心肌病信号通路上。流式细胞术结果显示,与WT小鼠相比,μMT小鼠心肌具有更少的Ly6g^(+)中性粒细胞(P<0.001)、CD4^(+)阳性T淋巴细胞(P<0.01)及CD8^(+)T淋巴细胞(P<0.05)。结论B淋巴细胞缺失改变心肌中免疫细胞的组成,降低左心室质量,并增加心肌收缩力。

大豆凝集素对不同种属动物T、B淋巴细胞增殖功能影响的比较研究

用纯品大豆凝集素(SBA)分别对来自猪、狗、羊、兔和鸡等不同种属动物血液中的T、B淋巴细胞进行刺激,通过MTT(四甲基偶氮唑盐)比色法检测其增殖功能,同时用常规的有丝分裂源刀豆素(ConA)和脂多糖(LPS)分别刺激T和B淋巴细胞作为对比,从而研究SBA对不同种属动物免疫功能的影响。结果表明:SBA对狗、鸡和兔T和B淋巴细胞的刺激指数(SI)显著低于ConA和LPS对照组(P<0.05),对猪的SI虽低于对照组,但差异不显著(P>0.05),对羊的SI略高于对照组,差异也不显著(P>0.05)。SBA对不同动物之间T、B淋巴细胞SI的影响也有差异,其中都以鸡的最高、羊的最低为显著特征;SBA对同一种动物T和B淋巴细胞增殖功能的影响存在差异,SBA对兔、狗和猪T淋巴细胞的SI高于B淋巴细胞,而羊和鸡恰好相反。SBA对不同种属动物T、B淋巴细胞的增殖功能均有影响,尤其是对狗、兔和鸡的影响较大,而且除羊之外,其它种属动物T、B淋巴细胞的增殖功能都受到不同程度的抑制,揭示出不同种属动物免疫细胞的糖基化模式、细胞分化过程及信号传导机制不同。

益肾降浊汤对慢性肾功能不全的T细胞及B淋巴细胞水平变化的影响

目的探讨益肾降浊汤治疗慢性肾功能不全时调节性T细胞及B淋巴细胞水平的变化。方法选取慢性肾功能不全患者80例,分为观察组与对照组各40例,均给予西医常规治疗,观察组加用益肾降浊汤口服,治疗2周。检测治疗前后血红蛋白(HB)、同型半胱氨酸(Hcy)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血浆白蛋白(Alb)、内生肌酐清除率(CCr)、CD_4^+、CD_(19)^+、CD_(19)^+、CD_(69)^+、CD_(19)^+AV、调节性T细胞(Treg)的水平。结果两组治疗后Hcy、SCr、CD_4^+、CD_(19)^+AV均较治疗前下降(P<0.05),HB、Alb、CCr、CD_(19)^+较治疗前升高(P<0.05),SCr、CD_(19)^+AV观察组较对照组下降更为明显(P<0.05),CCr、CD_(19)^+观察组较对照组升高更为明显(P<0.05)。结论益肾降浊汤能明显改善慢性肾功能不全患者B淋巴细胞调节作用,对Treg无调节作用。

急性冠脉综合征患者外周血B淋巴细胞与冠状动脉病变严重程度的相关性

目的 观察急性冠状动脉(冠脉)综合征(ACS)患者外周血B淋巴细胞亚群与冠脉病变严重程度的相关性。方法 前瞻性选取海南西部中心医院2018年1月至2020年1月收治的197例ACS患者作为研究对象,均于治疗前收集资料,检测外周血B淋巴细胞亚群(CD19+、B10、B1b、B1a)水平,均接受经皮冠脉介入(PCI)治疗,于患者脱离生命危险后评估冠脉病变严重程度并分组,分析ACS患者入院时外周血B淋巴细胞亚群水平与冠脉病变严重程度的关系。结果 ACS患者治疗后左室舒张末期内径(LVEDD)较治疗前显著降低,左室射血分数(LVEF)较治疗前明显升高(P<0.05);ACS患者治疗前后CD19+、B10、B1b、B1a比较,差异无统计学意义(P>0.05);197例ACS患者中,有91例冠脉轻度病变,68例中度病变,38例重度病变,冠脉中重度病变患者占53.81%;经回归分析检验结果显示,ACS患者心功能Killip分级Ⅳ级、三支病变、LVEDD高、LVEF低、CD19+表达上调、B10及B1a表达下调均与ACS患者PCI治疗后冠脉病变程度有关,均可能是治疗后中重度冠脉病变的风险因子(P<0.05);绘制受试者工作特征(ROC)曲线发现,ACS患者治疗前LVEDD、LVEF、CD19+、B10、B1a预测冠脉中重度病变的曲线下面积(AUC)均>0.80,有一定预测价值。结论 ACS患者治疗后冠脉病变严重程度与治疗前心功能、病变范围、外周血B淋巴细胞亚群水平密切相关,其中心功能、外周血B淋巴细胞亚群水平均可用于冠脉病变严重程度预测。

脑出血患者血清B淋巴细胞瘤-2水平与功能预后的相关性

目的探讨脑出血患者血清B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)水平与功能预后的相关性。方法选取2018年10月至2021年3月四川省广元市中心医院收治的脑出血患者216例,随访3个月,观察患者功能预后情况,根据改良版Rankin量表(mRS)评分分为预后良好组(mRS<2分)和预后不良组(mRS≥2分)。收集两组一般资料、实验室指标、血清Bcl-2水平等,采用多因素Logistic回归分析影响脑出血患者功能预后的相关因素,采用限制性立方条图拟合血清Bcl-2水平与脑出血患者功能预后间的非线性关系。结果截止2021年6月1日,预后不良组78例(36.11%),预后良好组138例(63.89%)。两组入院时收缩压、中线移位、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、超敏心肌肌钙蛋白(hs-cTn)、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、Bcl-2水平对比差异具有统计学意义(t=2.048、12.282、5.971、6.120、5.183、4.837,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示:中线移位、hs-cTn、NIHSS评分、hs-CRP、Bcl-2水平为脑出血患者功能预后的危险因素[OR(95%CI)=31.846(11.913~85.134)、1.149(1.038~1.270)、1.160(1.026~1.312)、1.156(1.028~1.299)、1.160(1.065~1.265),P<0.05];限制性立方条图显示,血清Bcl-2水平与脑出血患者功能预后风险呈显著非线性关系(χ^(2)=11.950,P<0.05)。结论血清Bcl-2水平与脑出血患者功能预后相关。

补肺养阴方联合利奈唑胺对复治肺结核患者呼吸功能、炎性因子及B、T淋巴细胞衰减子的影响

目的分析利奈唑胺联合补肺养阴汤用于治疗复治肺结核对改善患者呼吸功能、血清炎性因子和肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的作用。方法选择进行肺结核再次治疗的86例患者,采取随机数字排列表法将86例患者分成常规组及观察组,每组43例,常规组予以利奈唑胺治疗,观察组予以利奈唑胺联合补肺养阴汤治疗。比较治疗前后两组氧分压、二氧化碳分压、第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)以及FEV1/FVC水平;白细胞介素(IL)-6、IL-8以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8+比值。对比每组治疗效果以及不良反应发生情况。结果常规组与观察组治疗前氧分压、二氧化碳分压、FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组氧分压指标高于常规组;二氧化碳分压指标低于常规组;FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标均高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8^+比值方面比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在CD4^+以及CD4^+/CD8^+比值方面均高于常规组,CD8^+水平低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组总有效率分别是97.67%、81.40%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组不良反应总出现率分别是9.30%、11.63%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论复治肺结核病患采用利奈唑胺以及补肺养阴方治疗可有效提升患者呼吸功能,改善机体炎症水平,提升机体免疫功能,促进患者生活质量提高。

慢性特发性血小板减少性紫癜B淋巴细胞数量及凋亡蛋白表达的研究

目的探讨B淋巴细胞数量在慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)发病中的作用。方法用流式细胞仪对30例CITP患者及20位健康对照者外周血总B淋巴细胞、CD5+B淋巴细胞的数量及B淋巴细胞膜表面凋亡相关蛋白Fas抗原(CD95),胞浆内凋亡蛋白Bcl-2表达水平进行测定。结果CITP初诊患者外周血总B淋巴细胞数及CD5+B淋巴细胞数均明显高于治疗后和对照组,差异有显著性(P均<0.01),后两组相比,差异无显著性(P均>0.05);三组间B淋巴细胞Fas蛋白的表达率无显著性差异(P均>0.05);初诊患者B淋巴细胞胞浆内Bcl-2的表达率显著高于其他两组(P均<0.01),治疗后血小板恢复正常组也显著高于对照组(P<0.01);各组间B淋巴细胞凋亡相关指数(CD19+CD95+/CD19+Bcl-2+)比较,初诊组显著低于治疗后血小板恢复正常组和对照组(P<0.05或<0.01),治疗后血小板升至恢复正常组也显著低于对照组(P<0.01)。结论CITP患者自身抗体的产生可能与B淋巴细胞及其亚群数量异常、凋亡受抑有关。

高迁移率族蛋白B1对人T淋巴细胞功能性极化的调节作用

目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对人外周血T淋巴细胞功能性极化的影响，并对其作用机制进行初步探讨。方法分离健康人外周血单个核细胞后接种于24孔培养板（2×10^6／ml），以植物血凝素激活T淋巴细胞体外增殖后，给予不同剂量重组人HMGB1（0、1、10、100和1000ng／m1）进行刺激12、24或48h。采用四色流式细胞术分析CD3^＋淋巴细胞CD4表达和胞内细胞因子干扰素（IFN）-γ、白细胞介素4-（IL-4）阳性（Th1、Th2）的比例。结果不同HMGB1刺激时间和作用剂量对CD4^＋T淋巴细胞和Th1亚群比例未造成明显改变，但1000ng／ml HMGB1刺激48h后CD4^＋／CD3^＋比值显著低于刺激12h组（P〈0．05）。较大剂量HMGB1（100、1000ng／m1）能显著增加Th2亚群比例（P〈0．05或P〈0．01），并因此降低Th1／Th2比值，出现Th1优势向Th2优势偏移。结论HMGB1剂量蓄积和持续刺激可诱导T细胞功能亚群从促炎反应向抗炎优势转化。HMGB1的这一免疫调控效应可能是机体免疫应答陷人抑制状态，并最终出现免疫麻痹的重要原因之一。

MDRV和H9AIV共感染对B淋巴细胞增殖功能的影响

以番鸭呼肠孤病毒(MDRV)或/和H9亚型水禽流感病毒(AIV)人工感染8日龄健康雏番鸭,应用MTT法测定感染后7、14和21d番鸭血液、脾脏和法氏囊中的B淋巴细胞增殖功能的变化动态,探讨MDRV或/和H9亚型AIV对B淋巴细胞增殖功能的影响。结果显示8日龄番鸭人工感染后,MDRV感染、AIV感染和共感染组番鸭血液、法氏囊和脾脏的B淋巴细胞刺激指数均明显低于健康对照组,而且共感染组番鸭B淋巴细胞刺激指数低于MDRV感染和AIV感染组,表明MDRV和H9AIV病毒感染均能抑制番鸭外周血液及体液免疫器官(法氏囊、脾脏)中B淋巴细胞增殖功能,MDRV与H9AIV共感染加重B细胞免疫抑制程度。

T、B淋巴细胞亚群监测对造血干细胞移植后患者免疫功能重建的评价的临床研究

目的探讨造血干细胞移植(HSCT)患者外周血T、B淋巴细胞亚群监测对患者免疫功能重建的评价的临床价值。方法选择20例接受造血干细胞移植患者为研究对象,同时选择我院同期健康体检者20名作为正常对照。20例患者采移植前及移植后2周血常规白细胞数>1×109/L外周静脉血3～5mL,分离出T、B淋巴细胞,通过RT-PCR方法检测各细胞亚群的表达水平。结果移植前患者机体的淋巴细胞各亚群均明显低于正常人(P<0.01),原因可能与疾病本身及后续治疗尤其联合化疗密切相关。T、B细胞各亚群均于移植后2周降低至较低水平,随后逐渐升高。其中B细胞在移植后9个月内逐渐恢复至正常水平,随后至18个月内基本平稳。T细胞亚群恢复稍慢,于18个月内基本恢复正常水平,其中CD8+T细胞分别在1个月至3个月时较明显高于正常水平,随后逐渐下降,在12个月时逐渐恢复至正常水平,至18个月时基本平稳。CD4+T细胞恢复迟于CD8+T细胞。结论血液病患者造血干细胞移植前即存在淋巴细胞亚群的异常,于移植后12～18个月内基本恢复正常水平,其中植后B细胞较先恢复,T细胞亚群恢复稍慢。提示大部分患者免疫功能于移植后12～18个月内基本恢复正常水平,这与临床实践经验基本相符:造血干细胞移植约1年后机体发生严重感染的几率明显下降。

人B淋巴细胞刺激因子的可溶性功能区（hsBLys）的克隆、表达及分离纯化

在已有的pET30a/hs表达载体的基础上，构建了原核表达载体pET30a/hsBLYS(His6)、经双酶切分析和DNA测序后，转化入表达宿主大肠杆菌M15，IPTG诱导后得到高效表达(目的蛋白约占总菌蛋白的35％)；表达产物大部分以包含体形式存在。采用本室自行研制的Ni^2+亲和层析胶(Ni^2+—IDA)纯化可溶部分的重组融合蛋白，经SDS—PAGE鉴定为单一条带。

外周血淋巴细胞和单核细胞数量比值对弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后的预测价值分析

目的分析外周血淋巴细胞和单核细胞数量比值(LMR)对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者预后的预测价值。方法回顾102例DLBCL者发病时外周血LMR与临床资料。以患者LMR中位数3.5为界,将患者分为高LMR组(LMR>3.5)与低LMR组(LMR≤3.5),各51例,观察并比较两组患者临床特征、生存情况,分析LMR预测DLBCL患者预后的价值。结果两组患者性别、年龄、外周血WBC比较差异均无统计学意义(均P<0.05)。高LMR组外周血淋巴细胞计数、淋巴瘤国际预后评估指数(IPI)低危与低ECOG行为评分比例均高于低LMR组(均P<0.05),单核细胞计数、乳酸脱氢酶水平与B症状、结外受累及临床分期III～IV期比例均低于低LMR组(均P<0.05)。高LMR组患者3年生存率高于低LMR组患者(81.0%vs 50.0%,P<0.05)。在校正IPI的影响后,外周血LMR是影响DLBCL患者预后的因素。结论 LMR可作为预测DLBCL患者预后的临床指标。