B细胞受体信号及其靶向抑制剂在恶性淋巴瘤中的作用

淋巴瘤是来源于成熟淋巴细胞的恶性肿瘤,B细胞受体(B cell receptor,BCR)信号通路在B细胞的发育和维持中起重要作用。恶性B细胞的生长和存活由BCR及其信号通路介导。目前,已相继研发了针对通路的各种靶酶如Syk、Btk及PI3K的抑制剂。该文对BCR信号通路及其靶向抑制剂在恶性淋巴瘤中作用的研究进展做一综述。

关键分子SYK和BTK活性的动态调节控制B细胞受体信号转导过程

目的建立B细胞受体信号途径的动力学模型,通过模型仿真揭示B细胞受体信号途径各分子间的动态调控过程。方法根据数据库KEGG及相关中英文文献,提取B细胞受体信号转导各条通路相关分子作用的方式及数量关系,利用Matlab7.0的Simulink工具箱构建信号途径的动力学模型并仿真。结果模型仿真结果能够从数量上反映B细胞受体信号途径中各分子间复杂的调控关系,并能通过模型仿真发现和验证该信号途径中的关键分子。结论关键分子SYK和BTK活性的动态调节机制控制着B细胞受体信号途径的动力学过程。

气虚小鼠脾脏B细胞受体信号通路基因差异表达特征

目的:揭示昆明种气虚小鼠脾脏免疫相关通路基因差异转录的特征。方法:运用小鼠计量化四诊及辨证方法,采用Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,在正常昆明种小鼠中筛选气虚证者,与正常无气虚证小鼠对照,检测其脾脏B细胞受体信号传导通路基因表达差异。结果:气虚证小鼠脾脏B细胞受体信号传导通路相关基因出现了不同程度的紊乱与下调。结论:气虚证小鼠,B细胞受体信号传导通路相对表达量整体呈下调趋势,提示该通路总体处于机能低下的状态。

靶向B细胞受体信号传导通路新药研究进展

近年来,在B细胞淋巴瘤治疗领域围绕B细胞受体信号传导通路涌现出众多生物药物及小分子药物,这些药物在复发/难治B细胞淋巴瘤中取得了很好的疗效。本文对上述药物的最新临床研究结果进行总结,并探索其在初治B细胞淋巴瘤中的应用价值。

前B细胞受体及转录因子在B细胞发育中的作用

B细胞在骨髓中,由造血干细胞发育、成熟是一复杂、分阶段的过程。这一过程是受到高度调控的。PU.1、E2A、EBF和Pax5等转录因子分级控制B细胞系基因的表达,决定了B细胞的定型和进入B细胞发育途径。而重链重排完成后形成的前B细胞受体,传递分化信号,促进B细胞进一步的发育。未完成重链重排的前B细胞不能组成前B细胞受体,通过凋亡被清除,保证了成熟B细胞的功能。

原发性干燥综合征B细胞受体库差异表达

目的利用高通量测序技术对原发性干燥综合征(primary Sjöjren's syndrone,pSS)患者B细胞受体(BCR)上的互补决定区(CDR)3受体库进行测序分析,评估pSS患者在该受体库的组成、多样性、各功能基因亚家族的偏向取用等与健康人群的差异。方法入组20例初治pSS患者和19例性别年龄匹配的健康对照者,通过磁珠从外周血单个核细胞中分选出CD19+B细胞,提取基因组DNA,进行多重聚合酶链反应和测序,然后对数据进行生物学分析,采用独立样本t检验和Manne Whitney U检验对数据进行统计学处理。结果pSS患者CDR3序列平均长度为(53.03±1.68)bp,显著低于健康对照者(55.47±1.52)bp(P<0.001)。对CDR3多样性的比较分析发现:D50指数在pSS患者为(0.217±0.014),显著低于健康对照(0.229±0.020)(P=0.04),表明pSS患者CDR3克隆多样性较健康对照者明显下降。pSS患者和健康对照者V/J基因优势取用分析显示:pSS患者在V功能性家族性基因中,对IGHV1、IGHV4、IGHV5、IGHV6的取用率显著高于健康对照者,对IGHV3的取用率显著低于健康对照者;pSS患者在J功能性家族性基因中,对IGHJ1、IGHJ2、IGHJ3的取用率显著高于健康对照者(P<0.05)。在BCR CDR3受体库基础上筛选出普遍存在于抗SSB抗体阳性pSS患者外周血B细胞BCR H链的优势取用CDR3序列,与健康对照组比较,发现3种与疾病特征性相关的共享克隆型(CARAGMDVW、CARGRYYYYGMDVW、CAKDNKPLNYDILTGQMNYGMDVW)在pSS患者中存在显著富集现象。结论pSS患者BCR CDR3序列长度和多样性显著低于健康对照者,以及其功能基因亚家族V/J基因存在非随机优势取用及共享克隆现象,均提示pSS患者某些B细胞存在特异性克隆扩增可能。对BCR CDR3受体库的进一步深入研究,将有助于发现pSS患者疾病相关B细胞克隆,监测疾病状态下B细胞活化状态,寻找潜在的pSS特异性自身抗原。

B细胞受体核心岩藻糖基化调节成熟B细胞的信号转导

目的探讨核心岩藻糖基转移酶(Fut8)对成熟B细胞信号转导的影响。方法利用Fut8-siRNA逆转录病毒载体建立Fut8基因沉默成熟B细胞株(3-83-KD细胞),并将PLHCX-Fut8质粒导入3-83-KD细胞建立Fut8基因恢复成熟B细胞株(3-83-KD-Re)。用Real time-PCR、Western blot和HPLC法检测Fut8 mRNA、蛋白表达和Fut8酶活性,流式细胞仪和凝集素免疫印迹检测BCR的表达量和核心岩藻糖基化水平,Western blot技术检测细胞内酪氨酸磷酸化水平。结果与3-83细胞相比,3-83-KD细胞的BCR核心岩藻糖基化水平明显下降,而3-83-KD-Re细胞其表达得到恢复。Fut8基因沉默使3-83-KD细胞BCR介导的信号传导明显减弱,而3-83-KD-Re细胞的信号传导恢复正常。结论 Fut8修饰的核心岩藻糖基化在BCR介导的细胞信号转导过程中发挥重要的调节作用。

B细胞受体信号通路抑制剂治疗慢性淋巴细胞白血病的研究进展

慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)是西方国家最常见的B细胞恶性肿瘤之一。我国虽然缺乏确切的流行病学数据,但随着人口老龄化及诊断水平的提高,CLL发病率有逐年增长趋势。其特征是成熟B淋巴细胞在骨髓、淋巴结、血液、脾脏、肝脏及其他器官聚集。经传统免疫化疗后,部分CLL患者可获得长期无进展生存(progression-free survival,PFS),但对于复发/难治、存在高危细胞遗传学等因素的患者其预后仍较差。近年来层出不穷的新型药物可改善此类患者的预后。该文就依鲁替尼、idelalisib两种B细胞受体(B-cell receptor,BCR)信号通路抑制剂在CLL中应用的临床研究进展作一综述。

B细胞受体(BCR)抗原特异性的研究进展

B细胞受体(BCR)是B细胞特异性识别和结合抗原产生适应性体液免疫应答的关键分子。B细胞分化过程中的基因重排和体细胞高频突变是形成BCR多样化的主要机制。BCR极大的多样性和独特的分子结构决定了抗原识别的多样性和特异性,形成了具有广泛抗原特异性的复杂B细胞库。因此,BCR抗原特异性信息是理解不同疾病适应性免疫特征的关键。随着B细胞相关研究技术的发展,如单细胞分选技术、高通量测序(HTS)技术、 B细胞受体与抗原特异性结合测序(LIBRA-seq)等,提高了将BCR序列与抗原特异性联系起来的能力。这有助于更好地理解体液免疫反应、探索疾病发病机制、监测疾病进展、设计疫苗、研发治疗性抗体和药物。我们主要总结了感染、疫苗接种、自身免疫性疾病及肿瘤的抗原特异性BCR相关研究,并以SLE为例对其自身抗体序列进行分析,其序列特征使自身抗原的识别成为可能。

骨化三醇通过B细胞受体/PI3K/AKT/NF-κB通路抑制大鼠高原肺水肿的发生

目的 :探讨骨化三醇通过B细胞受体/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/核因子κB(NF-κB)通路抑制大鼠高原肺水肿的发生及其机制。方法 :雄性SD大鼠随机分为常氧组、低氧组、低氧+骨化三醇组(0.252μg/kg),连续灌胃给药5 d后,除常氧组外,其余2组均置于模拟海拔6 000 m的低压氧舱内低氧胁迫48h,建立高原肺水肿大鼠模型。干湿比重法测定肺含水量;H-E染色观察大鼠肺组织病理变化,并进行炎症评分;TUNEL法检测肺组织细胞凋亡率;ELISA检测肺组织B细胞激活因子(BAFF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)含量;免疫荧光染色观察肺组织CD21和核因子κB抑制蛋白α(IκBα)的表达;免疫印迹检测肺组织PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、IκBα、磷酸化IκBα(p-IκBα)的表达。结果 :与常氧组比较,低氧组大鼠肺组织见轻微肺泡隔增宽,炎症细胞浸润;肺含水量升高,肺组织细胞凋亡率、BAFF、TNF-α、IL-6、IFN-γ含量及CD21、p-PI3K、p-AKT表达明显升高;肺组织IL-4、IL-10含量及IκBα、p-IκBα表达明显降低。与低氧组比较,低氧+骨化三醇组炎症细胞浸润减轻;肺含水量降低、肺组织细胞凋亡率、BAFF、TNF-α、IL-6、IFN-γ含量及CD21、p-PI3K、p-AKT表达明显降低;肺组织IL-4、IL-10含量及IκBα、p-IκBα表达明显升高。结论 :骨化三醇可抑制高原肺水肿炎症反应,其作用机制可能与抑制B细胞受体/PI3K/AKT/NF-κB信号通路有关。

慢性淋巴细胞白血病中B细胞受体同型模式的生物学特征和临床意义

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是西方成人最常见的白血病,尽管CLL在亚洲人种中发病率偏低,但随着人口老龄化,CLL发病率在我国呈上升趋势。CLL细胞与微环境的交互中,B细胞受体免疫球蛋白(B-cell receptor immunoglobulin,BCR IG)对抗原的识别起重要作用,免疫球蛋白重链可变区(IG heavy variable region,IGHV)的突变状态更是判断CLL预后的经典标志物。超过40%的CLL患者间存在IGHV的偏向性使用和高度相似的重链可变区互补决定区3(heavy complementarity-determining region 3,HCDR3)氨基酸片段,此现象称为同型模式BCR。不同亚群的同型模式BCR存在独特的生物学和临床特征。其中IGHV有突变但预后差的#2亚群和发生Richter转化风险高的#8亚群被欧洲CLL研究启动组推荐纳入IGHV突变状态的临床报告之中。本文综述CLL中同型模式BCR的定义、分布、生物学特征和临床意义。

含靶向B细胞受体相关蛋白CD19的嵌合抗原受体T细胞治疗产品国内临床试验现状

近年来,嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗产品在血液肿瘤治疗中显示出良好的疗效,在实体瘤和自身免疫性疾病治疗中也有所突破。为深入了解CAR-T产品的临床研发进展,本文主要以国家药品监督管理局药品审评中心药物临床试验登记与信息公示平台为信息来源,重点对国内含靶向B细胞受体相关蛋白CD19的CAR-T细胞治疗产品的临床试验进展进行统计分析,希望能进一步提升CAR-T细胞治疗产品的临床研发质量和效率,强化申办者主体责任意识,及时更新试验信息,以保障临床试验期间受试者的权益。

113例含靶向B细胞受体相关蛋白CD19的嵌合抗原受体T细胞治疗产品的临床试验个例安全性快速报告分析及风险管理

已批准上市以及在研的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗产品的靶点主要以靶向B细胞受体相关蛋白CD19居多,本文以国家药品监督管理局药品审评中心临床试验期间药物警戒数据库应用系统为依托,对2021-01-01至2024-05-20收到的国内含靶向B细胞受体相关蛋白CD19的CAR-T细胞治疗产品的113例临床试验期间可疑且非预期严重不良反应个例安全性快速报告进行回顾性分析,结合产品特性加强风险管理。期待通过本文能促使申办者健全药物警戒制度及体系,按要求及时进行快速报告,加强与监管机构的风险沟通交流,与监管形成合力,共同做好临床试验期间风险管理工作。

生腺布液汤对干燥综合征NOD小鼠B细胞活化因子及B细胞活化因子受体表达的影响

目的:观察生腺布液汤对干燥综合征(SS)NOD模型小鼠颌下腺及血清中B细胞活化因子(BAFF)及B细胞活化因子受体(BAFFR)的影响,探索生腺布液汤治疗SS的作用机制。方法:将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为模型组、硫酸羟氯喹组及生腺布液汤组,每组8只,另取8只同周龄雌性BALB/c小鼠设为正常对照组。给药组分别予生腺布液汤1.75 g/ml灌胃及硫酸羟氯喹溶液0.0026 g/ml灌胃,模型组及正常组予等量蒸馏水,连续8周。实验期间记录小鼠的一般情况及每日饮水量;HE染色观察各组小鼠颌下腺组织病理变化;免疫组化法检测颌下腺组织BAFF、BAFFR表达;ELISA法检测血清BAFF含量。结果:与模型组相比,生腺布液汤组和硫酸羟氯喹组小鼠饮水量下降(均P<0.05),血清BAFF及颌下腺组织BAFF、BAFFR表达降低(均P<0.05),颌下腺组织中淋巴细胞浸润减少,未见明显浸润灶等组织结构破坏。结论:生腺布液汤能够改善干燥综合征NOD小鼠口干症状,减轻颌下腺淋巴细胞浸润程度,其作用机制可能与降低颌下腺及血清BAFF、BAFFR表达相关。

B淋巴细胞刺激因子及其受体在狼疮性肾炎中的研究现状

狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)是系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)最常见的并发症,同时也是引起患者死亡的重要原因之一。B淋巴细胞刺激因子(B-cell activating factor,BAFF)在B细胞生长、发育和分化中具有重要的免疫调节作用,BAFF过度表达与SLE、类风湿性关节炎、干燥综合征等自身免疫性疾病的发生发展密切相关;BAFF会导致自身抗体产生和免疫复合物在肾脏沉积,参与LN的发病过程。近年来针对血清BAFF在LN临床诊断、病情评估及相关治疗方面显示出可喜的应用前景,现就BAFF在LN中的相关研究现状做一综述。

复方双黄连制剂对单核巨噬细胞(RAW264.7)Fc/C3b受体活性和分泌功能的影响

【目的】探究复方双黄连制剂对巨噬细胞吞噬能力和分泌功能的影响,为复方双黄连的深度开发及畜禽用药的合理选择提供科学依据。【方法】将金银花、黄芩、连翘、穿心莲干燥粉碎后分别制备浸膏,按照比例制备双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘=1∶1∶2)、复方双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘∶穿心莲=1∶1∶2∶2)及穿心莲口服液,调节pH为7.0,生药浓度为1 g/mL。3种药物作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,采用CCK-8法检测细胞活力,确定3种药物安全浓度,将药物最大安全浓度以二倍稀释法稀释为3个浓度;采用脂多糖(LPS)和氢化考的松琥珀酸钠(HCSS)作用于RAW264.7细胞模拟机体炎症和免疫抑制状态,3种药物作用于这2种状态的细胞和正常细胞,采用YC、EA玫瑰花环法及中性红吞噬法检测巨噬细胞Fc/C3b受体活性和吞噬能力,采用ELISA法检测巨噬细胞分泌能力。【结果】复方双黄连、双黄连、穿心莲的安全浓度分别为0.625~2.5、3.125~12.5和0.625~2.5 mg/mL。不同浓度复方双黄连、双黄连、穿心莲作用于巨噬细胞,细胞吞噬能力均显著高于空白对照组(P<0.05)。复方双黄连可降低LPS巨噬细胞RAW264.7活跃的吞噬能力,增强HCSS巨噬细胞RAW264.7吞噬能力;不同浓度复方双黄连可使活化的巨噬细胞Fc/C3b受体活性下降,低下的Fc/C3b受体活性增强;不同浓度复方双黄连具有促进巨噬细胞分泌一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及溶菌酶(LZM)的作用,抑制LPS巨噬细胞NO、TNF-α、IFN-γ及白细胞介素-6(IL-6)的分泌。【结论】复方双黄连可通过活化巨噬细胞Fc/C3b受体活性以增强机体免疫力和抗炎能力,同时对已活化的巨噬细胞分泌功能起到抑制作用,以减少由于免疫功能亢进造成的机体损伤。研究结果为中兽药复方双黄连的深度开发提供了参考依据。

慢性淋巴细胞白血病患者典型模式B细胞受体的表达及临床预后意义

目的 探讨我国慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者典型模式B细胞受体（stereotyped BCR）的表达情况及其预后价值.方法 应用多重PCR方法检测1992年4月至2010年4月中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所116例CLL患者免疫球蛋白重链可变区（IGHV）片段使用情况及突变状态,应用多序列比对软件ClustalW2明确我国典型模式BCR的表达情况,并与CLL患者IGHV突变状态、细胞遗传学异常、生存和预后进行相关性分析.结果 共检测初诊CLL患者116例,102例成功测序,检出率87.9％.测序反应共得到73例患者的IGHV互补决定区3（CDR3）序列,19.2％（14例）CLL患者BCR为典型模式.与IGHV突变组相比,未突变组患者中典型模式BCR的发生率更高（40.9％比11.8％,P=0.005）.BCR为典型模式的CLL患者中17q-的发生率更高（33.3％比10.7％,P=0.045）.BCR为典型模式的CLL患者的中位无进展生存时间（PFS）较其他组为短（39个月比84个月,p =0.002）.结论 BCR为典型模式的CLL患者预后较差.典型模式BCR的存在表明肿瘤细胞曾面临同样的抗原选择过程,提示抗原选择与CLL的发生密切相关.

微RNA及B细胞受体信号通路在慢性淋巴细胞白血病中的研究进展

微RNA（miRNA）的异常表达可参与部分癌基因或抑癌基因的表达调控,影响造血细胞的发育和分化,导致血液肿瘤的发生.慢性淋巴细胞白血病（CLL）是一种B淋巴细胞恶性克隆增殖性疾病,在发病个体、疾病进展、治疗反应、临床预后等方面存在很大的异质性.越来越多的研究显示,miRNA的突变或异常表达与CLL的发生、进展、预后、药物疗效等密切相关,某些miRNA还可参与CLL细胞中B细胞受体（BCR）及其信号通路的异常调控.文章就近年来相关miRNA分子在调控BCR信号通路及参与CLL发生和发展的研究进展作一综述.

杀伤细胞凝集素样受体B1对类风湿关节炎外周血CD8^(+)T细胞功能的影响

目的研究杀伤细胞凝集素样受体B1(CD161)对类风湿关节炎(RA)病人外周血CD8^(+)T细胞及其亚群功能的影响。方法自2023年5―8月,整合基因组学数据库(GEO)不同数据集中对照组及RA组病人的外周血单细胞数据、Bulk转录组测序数据及临床相关数据,观察CD161在对照组及RA组中的表达差异情况。通过相关性分析指出CD161与RA病人临床炎症指标及治疗反应预后的相关性。运用单细胞无监督聚类、细胞注释方法观察CD161主要表达的细胞亚群及不同细胞亚群在对照组及RA组中的变化趋势。利用单细胞生物学评分功能计算不同亚群细胞的生物学功能评分,结合基因差异表达分析和功能富集分析,探索RA病人CD8^(+)T细胞及其亚群关键生物学功能与CD161基因表达的潜在关系。结果在人体外周全血中,与对照组相比,RA组中CD161高表达(8.779±0.657)(P<0.05),且CD161的表达与RA病人炎症因子C反应蛋白(CRP,r=−0.21)及血沉(ESR,r=−0.25)呈负相关(P<0.05)。CD161主要表达于NK细胞1.35±0.87、CD4^(+)T细胞0.62±0.82及CD8^(+)T细胞0.85±1.01,但在CD8^(+)T细胞中表达异质性最显著(标准差1.01大于平均数0.85),且CD161在CD8^(+)记忆T细胞中表达丰度最高1.38±0.34。与对照组相比,RA组中CD8^(+)T及CD8^(+)记忆T细胞频率均下降。与对照组相比,在RA病人外周血CD8^(+)记忆T细胞中,CD161表达降低(1.46±0.33比0.97±0.37,P<0.05),CD161与CD8^(+)记忆T细胞迁移(0.24±0.12比0.16±0.11)、细胞毒作用(0.52±0.27比0.45±0.38)呈正相关(均P<0.05),与趋化及促炎能力(0.15±0.04比0.17±0.02)呈负相关(P<0.05),与细胞增殖(0.02±0.04比0.03±0.04)或凋亡(0.12±0.22比0.18±0.18)相关性差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD161介导CD8^(+)记忆T细胞细胞毒作用及促炎功能改变促进RA发生、发展。

高通量测序对原发性胆汁性胆管炎患者个体水平外周血B细胞受体免疫球蛋白重链互补决定区3免疫组库特征的初步研究

目的分析原发性胆汁性胆管炎（PBC）患者个体水平外周血B细胞受体免疫球蛋白重链互补决定区3（IGH-CDR3）免疫组库特征，了解其免疫系统多样性的特点。方法采用扩增子救援多重PCR（arm-PCR）技术特异性扩增一例PBC患者外周血B细胞受体，即膜表面免疫球蛋白重链IGH-CDR3区核苷酸序列，通过第二代高通量测序技术进行测序，结合生物信息学分析其免疫组库特征。结果共测得序列数329219个，总CDR3序列为325540个，独特CDR3序列为72774个，D50为7．7；IGH-CDR3区长度主要为45个核苷酸（nt）（9．6％），N区添加的核苷酸数量频率最高的为13-14nt（5．25％），J基因片段末端去除的核昔酸数主要是0（12．7％）；V基因使用频率最高的前3个等位基因是V4-59（9．5％），其次为V3-23（8．1％）和V1-69（6．4％）。结论该PBC患者IGH-CDR3免疫组库多样性程度较低，存在个别克隆异常增殖情况，该特异性有待扩大样本量进一步验证。