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Expression of the Capsid Precursor Protein gene of Foot-and-mouth Disease Virus and Green Fluorescent Protein Gene in BHK-21 Cells Mediated by Retroviral Vector
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作者 LI Jiong LIU Yan-hong +4 位作者 AN Fang-lan LIU Jun-lin LIU Xiang-tao SHANG You-jun YIN Hong 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期70-75,共6页
We have constructed a retroviral vector mediated mammalian cell expression system of the capsid precursor protein of foot-and-mouth disease virus(FMDV).The recombinant retroviral vector pBABEpuro-P1-2A-EGFP was constr... We have constructed a retroviral vector mediated mammalian cell expression system of the capsid precursor protein of foot-and-mouth disease virus(FMDV).The recombinant retroviral vector pBABEpuro-P1-2A-EGFP was constructed by sequentially inserting capsid precursor protein gene(P1) of FMDV and enhanced green fluorescent protein gene(EGFP) into pBABEpuro.The recombinant retroviral vector and the pVSV-G plasmid were co-transfected into packaging cells(GP2-293) by liposomemediated transduction to produce the pseudovirus.The pseudovirus was used to infect BHK-21 cells and resistant cells were screened with puromycin.Green fluorescent proteins were observed by fluorescence microscopy and expression of the capsid precursor protein gene of FMDV was detected by indirect immunofluorescence.The recombinant retroviral vector pBABEpuro-P1-2A-EGFP was constructed successfully.The capsid precursor protein of FMDV and green fluorescent protein were expressed in BHK-21 cells.The mammalian cell expression system for the capsid precursor protein of FMDV has been constructed successfully,which lays the foundation of development of a FMDV subunit vaccine. 展开更多
关键词 retroviral vector FMDV capsid precursor protein gene green fluorescent protein gene bhk-21 cell
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Antitumor Effect of Apcin on Endometrial Carcinoma via p21-Mediated Cell Cycle Arrest and Apoptosis
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作者 Ke NI Zi-li LI +1 位作者 Zhi-yong HU Li HONG 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2024年第3期623-632,共10页
Objective Endometrial carcinoma(EC)is a prevalent gynecological malignancy characterized by increasing incidence and mortality rates.This underscores the critical need for novel therapeutic targets.One such potential ... Objective Endometrial carcinoma(EC)is a prevalent gynecological malignancy characterized by increasing incidence and mortality rates.This underscores the critical need for novel therapeutic targets.One such potential target is cell division cycle 20(CDC20),which has been implicated in oncogenesis.This study investigated the effect of the CDC20 inhibitor Apcin on EC and elucidated the underlying mechanism involved.Methods The effects of Apcin on EC cell proliferation,apoptosis,and the cell cycle were evaluated using CCK8 assays and flow cytometry.RNA sequencing(RNA-seq)was subsequently conducted to explore the underlying molecular mechanism,and Western blotting and coimmunoprecipitation were subsequently performed to validate the results.Animal studies were performed to evaluate the antitumor effects in vivo.Bioinformatics analysis was also conducted to identify CDC20 as a potential therapeutic target in EC.Results Treatment with Apcin inhibited proliferation and induced apoptosis in EC cells,resulting in cell cycle arrest.Pathways associated with apoptosis and the cell cycle were activated following treatment with Apcin.Notably,Apcin treatment led to the upregulation of the cell cycle regulator p21,which was verified to interact with CDC20 and consequently decrease the expression of downstream cyclins in EC cells.In vivo experiments confirmed that Apcin treatment significantly impeded tumor growth.Higher CDC20 expression was observed in EC tissue than in nonmalignant tissue,and increased CDC20 expression in EC patients was associated with shorter overall survival and progress free interval.Conclusion CDC20 is a novel molecular target in EC,and Apcin could be developed as a candidate antitumor drug for EC treatment. 展开更多
关键词 endometrial carcinoma CDC20 APOPTOSIS cell cycle arrest P21 BBC3
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BHK-21细胞中猪乙型脑炎病毒动态增殖的研究
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作者 张福良 马圣明 +2 位作者 邢月腾 刘芳 曹金泽 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2023年第5期75-79,136,137,共7页
为了研究猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)在仓鼠肾细胞(BHK-21细胞)中的增殖情况,试验首先建立了实时荧光定量PCR方法,并检测该方法的敏感性、特异性和重复性,然后利用建立的实时荧光定量PCR方法和病毒半数组织感染量... 为了研究猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)在仓鼠肾细胞(BHK-21细胞)中的增殖情况,试验首先建立了实时荧光定量PCR方法,并检测该方法的敏感性、特异性和重复性,然后利用建立的实时荧光定量PCR方法和病毒半数组织感染量(TCID_(50))方法测定并比较猪JEV在BHK-21细胞中的增殖规律。结果表明:建立的猪JEV实时荧光定量PCR检测方法的扩增效率为99.3%,敏感性、特异性和重复性良好,检测敏感性可以达到1.0×10^(1)copies/μL;TCID_(50)方法测定的细胞悬液和细胞培养上清液中的病毒含量分别为1.0×10^(5.44)TCID_(50)/0.1 mL和1.0×10^(4.86)TCID_(50)/0.1 mL,实时荧光定量方法测定的病毒粒子数量分别为1.0×10^(7.50)copies/μL和1.0×10^(5.60)copies/μL,两种方法在细胞悬液中出现峰值的时间为感染病毒后60小时,在细胞培养上清液中为72小时。说明猪JEV在BHK-21细胞中增殖的最佳收毒时间是感染病毒后60小时。 展开更多
关键词 猪乙型脑炎病毒 bhk-21细胞 实时荧光定量PCR TCID_(50) 增殖曲线 最佳收毒时间
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miR-21调控TLK2表达对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响
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作者 梁波 尹俊杰 +3 位作者 张胜楠 张超 胡子龙 王怡 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期658-662,共5页
目的:探讨mi R-21调控TLK2表达对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法:选取2019年1月至2022年7月在新乡市中心医院收治的70例AML患者,同时选取30例缺铁性贫血患者作为对照组,使用Ficoll密度梯度离心法获取两组患者的骨髓单... 目的:探讨mi R-21调控TLK2表达对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法:选取2019年1月至2022年7月在新乡市中心医院收治的70例AML患者,同时选取30例缺铁性贫血患者作为对照组,使用Ficoll密度梯度离心法获取两组患者的骨髓单个核细胞。RT-q PCR测定各组骨髓单个核细胞中mi R-21、TLK2 m RNA的表达水平。使用脂质体转染技术将mimics-mi R-21、mimics-NC、inhibitor-mi R-21、inhibitor-NC及NC转染至HL-60细胞。采用CCK-8法测定各组HL-60转染细胞经阿糖胞苷处理后的活性。TUNEL法测定HL-60转染细胞凋亡率。RT-q PCR测定转染inhibitor-mi R-21后HL-60细胞TLK2 m RNA的表达。结果:AML患者骨髓单个核细胞中mi R-21、TLK2 m RNA的相对表达水平均明显高于对照组患者(均P<0.05)。HL-60细胞经阿糖胞苷处理后,inhibitor-mi R-21组和mimics-mi R-21组的细胞活性均随阿糖胞苷浓度升高显著下降(P<0.05),但在每个阿糖胞苷浓度点,inhibitor-mi R-21组的细胞活性均低于对照组(P<0.05),而mimics-mi R-21组的细胞活性均高于对照组(P<0.05)。inhibitor-mi R-21组的细胞凋亡率显著升高(P<0.05),而mimics-mi R-21组的细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。HL-60细胞经inhibitor-mi R-21处理后,TLK2 m RNA的相对表达量明显下降(P<0.05)。结论:mi R-21在AML患者中呈高表达,可能通过抑制TLK2的表达来促使AML细胞凋亡。 展开更多
关键词 MIR-21 急性髓系白血病 TLK2 细胞活性 凋亡
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miR-21低表达对垂体瘤细胞系RC-4BC增殖、凋亡的影响及与PTEN靶向关系
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作者 宋志远 任洪波 +1 位作者 韩晓正 牛国栋 《山东医药》 CAS 2024年第9期24-28,共5页
目的观察微小RNA-21(miR-21)低表达对垂体瘤细胞系RC-4BC增殖、凋亡的影响,并分析其与第10号染色体丢失的张力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)的靶向关系。方法取对数生长期的RC-4BC细胞分为两组,沉默组转染miR-21抑制物miR-21 inhibitor,阴... 目的观察微小RNA-21(miR-21)低表达对垂体瘤细胞系RC-4BC增殖、凋亡的影响,并分析其与第10号染色体丢失的张力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)的靶向关系。方法取对数生长期的RC-4BC细胞分为两组,沉默组转染miR-21抑制物miR-21 inhibitor,阴性对照组转染抑制物阴性对照NC-inhibitor,采用RT-PCR法检测miR-21、第10号染色体丢失的张力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)mRNA,采用CCK8实验观察两组细胞增殖能力(以OD值表示),采用平板克隆实验观察两组细胞集落形成能力(以集落形成数表示),采用流式细胞术观察两组细胞凋亡率并观察细胞周期分布情况。收集RC-4BC细胞制备单细胞悬液,分别将miR-21 mimics或NC-mimics与PTEN-WT或PTEN-MUT共转染至RC-4BC细胞,转染后细胞标记为miR-21 mimics+PTEN-WT组、NC-mimics+PTEN-WT组、miR-21 mimics+PTEN-MUT组、NC-mimics+PTEN-MUT组,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与PTEN的靶向关系。结果沉默组RC-4BC细胞中miR-21、PTEN mRNA相对表达量分别为0.30±0.08、2.89±0.14,阴性对照组RC-4BC细胞中miR-21、PTEN mRNA相对表达量分别为1.01±0.02、0.99±0.03,两组相比,P均<0.05。沉默组RC-4BC细胞24 h、48 h、72 h时OD值均低于阴性对照组(P均<0.05)。沉默组RC-4BC细胞集落形成数低于阴性对照组(P<0.05)。沉默组RC-4BC细胞凋亡率高于阴性对照组(P<0.05)。沉默组RC-4BC细胞G0/G1期占比65.65%±7.82%、S期占比19.25%±3.70%,阴性对照组RC-4BC细胞G0/G1期占比45.62%±5.03%、S期占比35.72%±4.67%,两组相比,P均<0.05。miR-21 mimics+PTEN-WT组、NC-mimics+PTEN-WT组、miR-21 mimics+PTEN-MUT组、NC-mimics+PTEN-MUT组细胞的相对荧光素酶活性分别为0.39±0.07、1.02±0.03、1.01±0.04、1.00±0.03,其中miR-21 mimics+PTEN-WT组相对荧光素酶活性与其他各组相比,P均<0.05。结论沉默miR-21能够移至垂体瘤细胞系RC-4BC的增殖、促进其凋亡,其机制可能与靶向调控PTEN基因有关。 展开更多
关键词 微小RNA-21 垂体瘤 RC-4BC细胞 第10号染色体丢失的张力蛋白同源磷酸酶基因 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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miR-21在食管鳞状细胞癌中的作用机制研究进展
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作者 杨洋 李丽 《医学综述》 CAS 2024年第3期305-310,共6页
食管癌是一种发病率和死亡率均较高的消化道疾病,且早期难以发现。微RNA(miRNA/miR)-21广泛存在于人体各种细胞和组织中,并与人体的生长和发育、细胞周期及组织分化过程紧密相关,其作为miRNA家族的重要成员,也是一种内源性调控序列,在... 食管癌是一种发病率和死亡率均较高的消化道疾病,且早期难以发现。微RNA(miRNA/miR)-21广泛存在于人体各种细胞和组织中,并与人体的生长和发育、细胞周期及组织分化过程紧密相关,其作为miRNA家族的重要成员,也是一种内源性调控序列,在食管癌组织中的表达量异常升高,但目前miR-21的相关研究成果有限,还不足以将其单独作为靶点用于食管癌治疗。基于此,miR-21的早期准确检测、其各类调控基因的调控机制及其是否可作为新靶点治疗食管癌成为研究热点。 展开更多
关键词 食管癌 鳞状细胞癌 MIR-21
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BHK-21细胞规模化培养鸡新城疫病毒工艺的研究和初步应用 被引量:1
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作者 周欣 丁丽萍 +5 位作者 李庆东 侯乐孜 沈丹丹 李双双 姬星宇 张先锋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期54-61,共8页
为了实现鸡新城疫病毒HN2018株(基因Ⅶ型)在乳仓鼠肾(BHK-21)细胞上的无血清规模化培养,本试验采用悬浮培养技术驯化和筛选了1株能够稳定传代的BHK-21-xh悬浮细胞株;使用该细胞以初始密度为100×10^(4)个/mL接种摇瓶进行培养,并对... 为了实现鸡新城疫病毒HN2018株(基因Ⅶ型)在乳仓鼠肾(BHK-21)细胞上的无血清规模化培养,本试验采用悬浮培养技术驯化和筛选了1株能够稳定传代的BHK-21-xh悬浮细胞株;使用该细胞以初始密度为100×10^(4)个/mL接种摇瓶进行培养,并对摇瓶培养鸡新城疫病毒HN2018株的接毒细胞密度、培养温度、接毒量、收毒时间等工艺参数进行摸索和优化;利用摇瓶优化的病毒培养工艺,在10和100 L生物反应器中逐级放大培养BHK-21-xh悬浮细胞,接种鸡新城疫病毒;采用生物反应器悬浮培养的鸡新城疫病毒HN2018株细胞毒与鸡胚毒分别制备成灭活疫苗,免疫SPF鸡进行免疫效力的比较。结果显示,在摇瓶中培养72 h细胞密度均不低于800×10^(4)个/mL,细胞活率均不低于96%;按照BHK-21-xh细胞密度不低于800×10^(4)个/mL,病毒感染复数(MOI)为0.216进行接毒,同时添加终浓度为20μg/mL的胰蛋白酶,于35℃温度条件下培养64~72 h收获病毒液,鸡新城疫悬浮培养细胞毒红细胞凝集(HA)效价最高能够达到10log 2。在生物反应器中接种鸡新城疫病毒,其HA效价均能达到10log 2。细胞苗与鸡胚苗免疫效力相当,攻毒后均能获得100%保护,且免疫血清红细胞凝集抑制(HI)抗体效价均远高于新城疫国家标准。结果表明,应用细胞无血清全悬浮培养技术规模化培养鸡新城疫病毒HN2018株,生产工艺稳定,获得的抗原效价和纯度高,制备的灭活疫苗免疫效力良好,能够应用于新城疫疫苗的规模化生产。 展开更多
关键词 bhk-21-xh细胞 新城疫病毒 生物反应器 悬浮培养
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miR-21对人口腔癌细胞株HSQ-89增殖、侵袭与迁移的影响实验研究 被引量:1
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作者 韦敏 顾春梅 +1 位作者 管燕华 王育新 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第2期157-162,共6页
目的:探讨微小核糖核酸-21(miR-21)介导Smad7调节转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对人口腔癌细胞株HSQ-89增殖、侵袭与迁移的作用。方法:取人口腔癌细胞株HSQ-89培养传代,分为阴性对照组、下调组、上调组和正常组,前三者分别采用... 目的:探讨微小核糖核酸-21(miR-21)介导Smad7调节转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对人口腔癌细胞株HSQ-89增殖、侵袭与迁移的作用。方法:取人口腔癌细胞株HSQ-89培养传代,分为阴性对照组、下调组、上调组和正常组,前三者分别采用脂质体转染法将携带阴性对照(NC inhibitor)、miR-21抑制剂(miR-21 inhibitor)、miR-21模拟物(miR-21 mimics)载体进行转染,正常组仅添加等量无菌蒸馏水。观察各组细胞增殖、侵袭、迁移能力;实时-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-21、TGF-β_(1)、Smad3、Smad7、细胞周期蛋白D1(CCND1)、MYC、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(WB)检测各组细胞TGF-β_(1)、Smad3、Smad7、CCND1、MYC、E-cadherin、Vimentin、MMP-2蛋白表达及p-Smad3水平;双荧光素酶报告基因检测验证miR-21是否靶向Smad7。结果:与正常组和阴性对照组比较,上调组细胞增殖、侵袭、迁移能力上升,下调组细胞增殖活性下降、侵袭细胞数减少、划痕愈合率下降(均P<0.05);与正常组和阴性对照组比较,上调组细胞miR-21表达、TGF-β_(1)、Smad3、CCND1、MYC、Vimentin、MMP-2 mRNA和蛋白表达上升、Smad7和E-cadherin mRNA和表达下降,差异有统计学意义(均P<0.05),下调组细胞miR-21表达、TGF-β_(1)、Smad3、CCND1、MYC、Vimentin、MMP-2 mRNA和蛋白表达下降、Smad7和E-cadherin mRNA和蛋白表达上升(均P<0.05);经双荧光素酶报告基因实验验证miR-21靶向Smad7。结论:miR-21促进口腔癌细胞增殖、侵袭和迁移,可能与调节Smad7、TGF-β/Smad信号通路相关。 展开更多
关键词 口腔癌 微小核糖核酸-21 转化生长因子Β 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移
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雪旺细胞来源的外泌体miR-21通过靶向SPRY2促进大鼠坐骨神经损伤后修复的研究
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作者 田明月 杨溢铎 +3 位作者 覃琬婷 朱晶 国海东 邵水金 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期767-774,共8页
目的:研究高表达miR-21的雪旺细胞(Schwann cells,SC)来源外泌体对坐骨神经损伤(sciatic nerve injury,SNI)的修复作用及机制。方法:分别采用空载慢病毒和高表达miR-21的慢病毒感染SC株,收集SC上清外泌体并进行鉴定。采用神经断端吻合... 目的:研究高表达miR-21的雪旺细胞(Schwann cells,SC)来源外泌体对坐骨神经损伤(sciatic nerve injury,SNI)的修复作用及机制。方法:分别采用空载慢病毒和高表达miR-21的慢病毒感染SC株,收集SC上清外泌体并进行鉴定。采用神经断端吻合术建立SNI大鼠模型,术后随机分为模型组、SC来源外泌体组和高表达miR-21的SC来源外泌体组(n=10)。其中,SC来源外泌体组和高表达miR-21的SC来源外泌体组分别采用体外收集的外泌体局部注射进行治疗,3周后行为学实验检测神经功能恢复,免疫荧光染色评价SNI后轴突髓鞘再生,RT-q PCR检测血清外泌体miR-21及神经组织中miR-21和SPRY2的表达水平,双荧光素酶报告基因实验体外验证miR-21和SPRY2之间的靶向互作。结果:与模型组相比,其余各组大鼠坐骨神经功能和神经再生情况均出现明显改善,RT-q PCR结果显示血清外泌体及神经组织中miR-21的表达水平显著升高,神经组织中SPRY2的表达水平显著降低,其中高表达miR-21的SC细胞来源外泌体组较SC来源外泌体组变化更显著;双荧光素酶报告基因实验表明miR-21靶向调节SPRY2的表达。结论:高表达miR-21的SC来源外泌体通过靶向SPRY2显著促进SNI后修复。 展开更多
关键词 雪旺细胞 外泌体 MIR-21 坐骨神经损伤 功能恢复 神经再生
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牙龈卟啉单胞菌通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进食管鳞癌自噬
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作者 杜玉博 焦叶林 +5 位作者 程月月 程浩东 茹艺 梁高峰 高社干 齐义军 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第9期1621-1628,共8页
目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)促进食管鳞癌(ESCC)细胞自噬发生的分子机制。方法Pg感染siAtg7或氯喹(CQ)预处理的KYSE70细胞和KYSE140细胞,Western blot检测Atg7、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62蛋白,荧光共聚焦显微镜检测mRFP-GFP-LC3标记ESCC细胞... 目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)促进食管鳞癌(ESCC)细胞自噬发生的分子机制。方法Pg感染siAtg7或氯喹(CQ)预处理的KYSE70细胞和KYSE140细胞,Western blot检测Atg7、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62蛋白,荧光共聚焦显微镜检测mRFP-GFP-LC3标记ESCC细胞自噬流,CCK-8法检测ESCC细胞活性,迁移小室检测ESCC细胞迁移及侵袭能力。miR-21-5p inhibitor、RASA1过表达或U0126分别阻断miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路,如上检测自噬相关表型变化。免疫组化检测ESCC组织中Pg丰度和LC3蛋白表达,RT-PCR检测ESCC及其癌旁组织中miR-21-5p的表达,统计分析Pg、LC3和miR-21-5p相关性。结果Pg感染诱导KYSE70细胞和KYSE140细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上调、p62蛋白表达下调,增加了mRFP-GFP-LC3标记细胞中的红色、绿色和黄色荧光斑点数目和荧光强度,同时促进KYSE70细胞和KYSE140细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,上述Pg诱导的ESCC细胞表型改变被CQ或siAtg7预处理逆转。miR-21-5p inhibitor、U0126或RASA1过表达质粒的预处理,也同样逆转了Pg对ESCC细胞自噬的促进作用。Pg丰度与miR-21-5p、LC3蛋白表达呈正相关。结论Pg通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进ESCC自噬发生。 展开更多
关键词 食管鳞癌 牙龈卟啉单胞菌 自噬 miR-21-5p RASA1 ERK
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miR-21-3p通过下调CCT4抑制食管鳞癌细胞的迁移及侵袭
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作者 周露丹 黄山 +2 位作者 侯维 董瑞阳 何欣蓉 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第12期2196-2202,共7页
目的:探讨miR-21-3p对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:通过数据库检索miR-21-3p的下游靶基因,GEPIA2数据库预测CCT4在食管鳞癌中的表达和对食管鳞癌患者预后的影响,培养食管鳞癌细胞TE-1、KYSE150,将miR-21-3p inhibi... 目的:探讨miR-21-3p对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:通过数据库检索miR-21-3p的下游靶基因,GEPIA2数据库预测CCT4在食管鳞癌中的表达和对食管鳞癌患者预后的影响,培养食管鳞癌细胞TE-1、KYSE150,将miR-21-3p inhibitor、SiCCT4、Plenti-CMV-CCT4-GFP/Puro转染至TE-1和KYSE150细胞中,分为miR-21-3p inhibitor组和inhibitor NC组、SiCCT4组和SiNC组、Plenti-CMV-CCT4组和inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组,采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-21-3p和CCT4 mRNA的表达水平,Transwell迁移侵袭实验检测各组细胞的迁移及侵袭能力,Western blot检测转染后各组细胞CCT4蛋白的表达水平。结果:数据库预测结果显示CCT4在食管鳞癌中过表达,与食管鳞癌患者总体生存期相关,与miR-21-3p呈正相关。qRT-PCR显示miR-21-3p和CCT4在食管癌细胞相较于正常上皮细胞表达显著升高,且在抑制miR-21-3p后CCT4表达水平显著降低(P<0.05)。Transwell实验显示,inhibitor组迁移率及侵袭率显著低于inhibitor NC组(P<0.05);SiCCT4组迁移率及侵袭率显著低于SiNC组(P<0.05);inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组迁移率及侵袭率显著高于inhibitor组(P<0.05);Western blot检测CCT4蛋白发现,inhibitor组蛋白低于inhibitor NC组(P<0.05),inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组蛋白显著高于inhibitor组(P<0.05)。结论:miR-21-3p和CCT4在食管癌中呈现过表达,miR-21-3p通过下调CCT4表达抑制食管癌细胞迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 miR-21-3p CCT4 食管鳞癌 细胞迁移 细胞侵袭
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单月桂酸甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞基因表达的影响
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作者 徐欢欢 王倩 +5 位作者 王宇杰 刘佳乐 王蕾 赵迪 张倩 侯永清 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第15期120-127,共8页
试验旨在研究单月桂酸甘油酯(ML)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染3D4/21巨噬细胞基因表达的影响。通过ML对3D4/21细胞活力试验和PEDV在3D4/21细胞中的生长曲线确定最适浓度和最佳时间后,将3D4/21细胞随机分为3组(control组、PEDV组、PEDV... 试验旨在研究单月桂酸甘油酯(ML)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染3D4/21巨噬细胞基因表达的影响。通过ML对3D4/21细胞活力试验和PEDV在3D4/21细胞中的生长曲线确定最适浓度和最佳时间后,将3D4/21细胞随机分为3组(control组、PEDV组、PEDV+ML组),各组分别以全时添加10µmol/L ML和PEDV感染细胞后添加10µmol/L ML两种方式进行处理,并检测相关基因相对表达量。结果表明:添加10µmol/L的ML对3D4/21细胞生长具有显著的促进作用(P<0.05),病毒感染3D4/21细胞的48 h内PEDV-S、M、N基因相对表达量呈现先增加再降低的趋势,12 h时处于最高;与PEDV组相比,PEDV+ML组全时添加ML处理12 h使PEDV-S、M、N、IL-8、IFN-β、IFITM3基因相对表达量显著下调(P<0.05),处理24 h使PEDV-S、M、N、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1和IFITM1基因相对表达量显著下调(P<0.05),KCNJ13基因相对表达量显著上调(P<0.05)。与PEDV组相比,PEDV+ML组在感染后添加ML处理12 h使MMP13基因相对表达量显著下调(P<0.05),PEDV-M基因相对表达量显著上调(P<0.05),处理24 h使IL-6、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1、IFITM1、IFITM3基因相对表达量显著下调(P<0.05),PEDV-S、M、N、KCNJ13基因相对表达量显著上调(P<0.05)。综上所述,PEDV感染前ML预处理具有一定的抗病毒效果;PEDV感染使细胞处于免疫应激状态,ML有一定的缓解作用。 展开更多
关键词 单月桂酸甘油酯(ML) 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 3D4/21细胞 生长曲线 免疫功能
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Exosomes derived from tendon stem/progenitor cells enhance tendon-bone interface healing after rotator cuff repair in a rat model 被引量:1
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作者 Yanwei He Shihao Lu +12 位作者 Wenbo Chen Li Yang Fangqi Li Peng Zhou Zan Chen Renwen Wan Zifan Zhang Yaying Sun Jinrong Lin Yisheng Chen Zhiwen Luo Chen Xu Shiyi Chen 《Bioactive Materials》 SCIE CSCD 2024年第10期484-502,共19页
The rate of retear after surgical repair remains high.Mesenchymal stem cells(MSCs)have been extensively employed in regenerative medicine for several decades.However,safety and ethical concerns constrain their clinica... The rate of retear after surgical repair remains high.Mesenchymal stem cells(MSCs)have been extensively employed in regenerative medicine for several decades.However,safety and ethical concerns constrain their clinical application.Tendon Stem/Progenitor Cells(TSPCs)-derived exosomes have emerged as promising cellfree therapeutic agents.Therefore,urgent studies are needed to investigate whether TSPC-Exos could enhance tendon-bone healing and elucidate the underlying mechanisms.In this study,TSPC-Exos were found to promote the proliferation,migration,and expression of fibrogenesis markers in BMSCs.Furthermore,TSPC-Exos demonstrated an ability to suppress the polarization of M1 macrophages while promoting M2 macrophage polarization.In a rat model of rotator cuff repair,TSPC-Exos modulated inflammation and improved the histological structure of the tendon-bone interface,the biomechanical properties of the repaired tendon,and the function of the joint.Mechanistically,TSPC-Exos exhibited high expression of miR-21a-5p,which regulated the expression of PDCD4.The PDCD4/AKT/mTOR axis was implicated in the therapeutic effects of TSPC-Exos on proliferation,migration,and fibrogenesis in BMSCs.This study introduces a novel approach utilizing TSPC-Exos therapy as a promising strategy for cell-free therapies,potentially benefiting patients with rotator cuff tear in the future. 展开更多
关键词 Tendon stem cells EXOSOME Macrophages MicroRNA-21a-5p Rotator cuff tear Tendon-to-bone healing
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达可替尼与吉非替尼一线治疗EGFR Exon19/21突变型晚期非小细胞肺癌的疗效对比
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作者 康鹤耀 何凌 王瑞 《实用癌症杂志》 2024年第10期1675-1679,共5页
目的对比达可替尼与吉非替尼一线治疗EGFR Exon19/21突变型晚期非小细胞肺癌的疗效。方法收集108例表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGER)突变型晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者资料,依据... 目的对比达可替尼与吉非替尼一线治疗EGFR Exon19/21突变型晚期非小细胞肺癌的疗效。方法收集108例表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGER)突变型晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者资料,依据治疗方法的不同将患者分为2组,达可替尼组58例,吉非替尼50例。统计2组疗效。结果2组基线特征比较差异均无统计学意义(P>0.05)。达可替尼组与吉非替尼组近期疗效比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。随访截止2023年6月,2组患者均完成随访,无脱落病例。达可替尼组中位PFS长于吉非替尼组(12.6 vs 8.5个月,χ^(2)=34.009,P<0.001)。达可替尼组患者中位OS为23.1个月,吉非替尼组患者中位OS为16.3个月,2组间OS差异无统计学意义(χ^(2)=2.123,P=0.158)。2组患者不良反应发生情况比较,差异均无统计学意义(P<0.05),但是达可替尼组Ⅰ度、Ⅱ度胃肠道反应以及Ⅲ度、Ⅳ度痤疮发生率略高。结论达可替尼与吉非替尼一线治疗EGFR Exon19/21突变型晚期非小细胞肺癌的疗效相似,但是达可替尼组PFS更具优势,而吉非替尼相较达可替尼安全性略高。 展开更多
关键词 达可替尼 吉非替尼 EGFR Exon19/21突变型 晚期非小细胞肺癌 安全性 临床疗效
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非小细胞肺癌组织三结构域蛋白21和白细胞分化抗原147表达及意义
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作者 米婷 庞亚梅 王雅宁 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第12期1704-1708,共5页
目的:探究非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌及癌旁组织标本中三结构域蛋白21(TRIM21)和白细胞分化抗原147(CD147)表达及意义。方法:选取接受手术治疗的NSCLC患者126例,采集癌及癌旁组织,分别定义为NSCLC组和癌旁组。分析TRIM21、CD147在癌和... 目的:探究非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌及癌旁组织标本中三结构域蛋白21(TRIM21)和白细胞分化抗原147(CD147)表达及意义。方法:选取接受手术治疗的NSCLC患者126例,采集癌及癌旁组织,分别定义为NSCLC组和癌旁组。分析TRIM21、CD147在癌和癌旁组织中的表达情况,探究两者与临床病理特征的关系。随访1年,分析存活组与病死组TRIM21、CD147的表达差异。结果:NSCLC组TRIM21阳性表达率低于癌旁组,CD147阳性表达率高于癌旁组(均P<0.05)。在组织分化、淋巴结转移及TNM分期等临床病理特征方面,TRIM21和CD147阳性率比较差异有统计学意义(均P<0.05)。在NSCLC患者中,TRIM21表达与CD147表达呈现负相关,且两者与淋巴结转移、TNM分期及组织分化具有相关性(均P<0.05)。随访结果显示,126例NSCLC患者中,有55例患者病死(病死组),71例患者存活(存活组)。存活组TRIM21阳性表达率高于病死组,CD147阳性表达率低于病死组(均P<0.05)。结论:NSCLC患者癌组织TRIM21表达降低而CD147表达升高,均与组织分化、淋巴结转移、TNM分期及预后相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 三结构域蛋白21 白细胞分化抗原147 临床病理特征 预后
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食管鳞状细胞癌病人血清miR-21-5p和miR-100-5p水平与临床特征和预后的相关分析
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作者 项飞 代元飞 +3 位作者 姚春飞 赵微 江海峰 魏洁 《临床外科杂志》 2024年第10期1034-1039,共6页
目的 分析食管鳞状细胞癌(ESCC)病人血清miR-21-5p和miR-100-5p的表达对ESCC鉴别诊断、临床特征和预后的影响。方法 2018年1月~2022年1月于我院放疗科接受放射治疗的158例晚期ESCC病人为实验组,150例健康体检志愿者为对照组。实时定量PC... 目的 分析食管鳞状细胞癌(ESCC)病人血清miR-21-5p和miR-100-5p的表达对ESCC鉴别诊断、临床特征和预后的影响。方法 2018年1月~2022年1月于我院放疗科接受放射治疗的158例晚期ESCC病人为实验组,150例健康体检志愿者为对照组。实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-21-5p和miR-100-5p表达水平。利用t检验比较miR-21-5p和miR-100-5p在实验组和健康对照组间的表达差异,采用ROC曲线分析其诊断价值。利用Kaplan-Meier法Log-Rank检验进行预后生存分析。多因素Cox回归分析ESCC病人预后的影响因素。结果 与对照组比较,ESCC病人血清miR-21-5p和miR-100-5p表达水平显著升高(P<0.001)。ROC曲线分析提示,二者联合诊断ESCC的AUC为0.918,灵敏度为93.2%,特异度为87.1%。ESCC病人血清miR-21-5p和miR-100-5p表达升高与更晚的TNM分期和更差的无进展生存期和总体生存期显著相关(P<0.05)。多因素Cox分析显示,TNM分期为Ⅲ期、血清中miR-21-5p高表达和miR-100-5p低表达是ESCC病人无进展生存期和总体生存期的独立危险因素(P均<0.05)。结论 血清miR-21-5p和miR-100-5p表达水平在ESCC病人中显著升高,且提示更差的预后。血清miR-21-5p和miR-100-5p,有望成为ESCC诊断和预后预测的生物标志物。 展开更多
关键词 食管鳞癌 miR-21-5p miR-100-5p 临床特征 预后
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非小细胞肺癌患者血清中CYFRA21-1、NSE表达及临床意义
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作者 胡媛春 蔡晓玉 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第4期472-476,共5页
目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA 21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达及临床意义。方法 选取NSCLC患者132例纳入NSCLC组,另择同期良性肺疾病者90例、健康体检者90名分别纳入肺良性疾病组、健康... 目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA 21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达及临床意义。方法 选取NSCLC患者132例纳入NSCLC组,另择同期良性肺疾病者90例、健康体检者90名分别纳入肺良性疾病组、健康对照组;通过化学发光法检测3组研究者血清CYFRA 21-1、NSE表达水平,分析血清指标表达与NSCLC患者的临床病理关系;依照患者随访2 a预后情况分为生存组与死亡组,通过受试者工作曲线(ROC)分析患者血清CYFRA 21-1、NSE水平对NSCLC疾病诊断和预后评估的应用价值。结果 NSCLC组患者血清CYFRA 21-1、NSE水平高于肺良性疾病组、健康对照组(P<0.05);血清CYFRA 21-1水平评估NSCLC的发生ROC曲线下面积为0.792,高于血清NSE评估曲线下面积0.671(P<0.05);NSCLC患者中,不同性别、年龄患者血清CYFRA 21-1、NSE水平比较差异无统计学意义(P>0.05);临床分期Ⅲ/Ⅳ期、发生淋巴结转移者血清CYFRA 21-1、NSE水平高于Ⅰ/Ⅱ期、无淋巴结转移者(P<0.05);肺鳞癌患者血清CYFRA 21-1表达水平高于肺腺癌患者(P<0.05);随访2 a, NSCLC患者中失访4例,死亡组(34例)患者血清CYFRA 21-1、NSE水平高于生存组(94例)(P<0.05);血清CYFRA 21-1、NSE水平联合检测预测NSCLC患者2 a预后的ROC曲线下面积为0.798,高于两项指标单独检测曲线下面积0.689、0.665(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清CYFRA 21-1、NSE水平呈现高表达,且CYFRA 21-1对NSCLC的评估价值更高,二者高表达可预示NSCLC患者不良预后。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 细胞角蛋白19片段抗原21-1 神经元特异性烯醇化酶 临床病理 预后
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CYFRA21-1、CA199、SCC、CRP联合检测在肺癌诊断中的应用价值 被引量:2
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作者 吴海霞 许雪琴 黄衍运 《中国现代药物应用》 2024年第4期59-61,共3页
目的分析诊断肺癌中糖类抗原199(CA199)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、C反应蛋白(CRP)、鳞状细胞癌抗原(SCC)联合检测的价值。方法选取30例肺癌患者作为肺癌组,并纳入50例健康体检者作为健康组。两组均进行CYFRA21-1、SCC、CR... 目的分析诊断肺癌中糖类抗原199(CA199)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、C反应蛋白(CRP)、鳞状细胞癌抗原(SCC)联合检测的价值。方法选取30例肺癌患者作为肺癌组,并纳入50例健康体检者作为健康组。两组均进行CYFRA21-1、SCC、CRP、CA199检查。对比两组CA199、CYFRA21-1、SCC、CRP水平;对比CA199、CYFRA21-1、SCC、CRP单独检测与联合检测对肺癌的诊断效能。结果肺癌组CA199(9.31±0.19)U/ml、CRP(23.49±1.36)mg/L、CYFRA21-1(4.43±0.09)ng/ml、SCC(29.50±0.16)ng/ml明显高于健康组的(3.27±0.11)U/ml、(5.48±1.15)mg/L、(1.20±0.16)ng/ml、(0.56±0.04)ng/ml,差异具有统计学意义(P<0.05)。CA199单独检测的诊断准确度、灵敏度和特异度分别为67.50%、46.67%、80.00%,CRP分别为73.75%、60.00%、82.00%,SCC分别为63.75%、40.00%、78.00%,CYFRA21-1分别为76.25%、66.67%、82.00%,联合检测分别为87.50%、90.00%、86.00%;CA199、CYFRA21-1、SCC、CRP联合检测的诊断准确度、特异度和灵敏度均高于单独检测。结论CA199、CYFRA21-1、SCC、CRP对肺癌诊断具有重要参考价值,通过联合检测能提高诊断特异度、准确度、敏感度。 展开更多
关键词 肺癌 细胞角蛋白19片段抗原21-1 糖类抗原199 C反应蛋白 鳞状细胞癌抗原
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血清癌胚抗原、胃泌素释放肽前体、细胞角质蛋白19片段抗原21-1及鳞状细胞癌抗原对早期肺癌的诊断价值
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作者 彭飞 张轩斌 +1 位作者 代岩 赵江 《癌症进展》 2024年第20期2266-2269,共4页
目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)对早期肺癌的诊断价值。方法选取117例早期肺癌患者和93例肺部良性疾病患者,分别作为观察组和对照组。检测并... 目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)对早期肺癌的诊断价值。方法选取117例早期肺癌患者和93例肺部良性疾病患者,分别作为观察组和对照组。检测并比较两组患者的血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag水平,采用Logistic回归模型分析早期肺癌发生的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag对早期肺癌的诊断价值。结果观察组患者的血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag阳性表达均是早期肺癌发生的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag诊断早期肺癌的AUC分别为0.800、0.664、0.763、0.799。结论早期肺癌患者血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag水平均升高,且上述指标对早期肺癌均具有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 癌胚抗原 胃泌素释放肽前体 细胞角质蛋白19片段抗原21-1 鳞状细胞癌抗原 早期肺癌 诊断价值
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PBMCs中miR-21、miR-223表达与HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗效果的相关性
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作者 匡宁 刘超 +2 位作者 计然然 蒋华春 许翼 《中国性科学》 2024年第1期153-156,共4页
目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者抗逆转录病毒治疗效果与外周血单个核细胞(PBMCs)中微小RNA(miR)-21、miR-223表达水平的关系。方法选取2020年3月至2022年3月期间南通市第三人民医院门诊就诊行抗逆转录... 目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者抗逆转录病毒治疗效果与外周血单个核细胞(PBMCs)中微小RNA(miR)-21、miR-223表达水平的关系。方法选取2020年3月至2022年3月期间南通市第三人民医院门诊就诊行抗逆转录病毒治疗的142例HIV/AIDS患者为观察组,根据其治疗效果分为有效组(n=110)和无效组(n=32);选取同期体检健康者139例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测PBMCs中miR-21、miR-223表达水平;采用多因素Logistic回归分析HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗无效的影响因素。结果观察组PBMCs中miR-21、miR-223表达水平高于对照组(P<0.05)。无效组治疗后3个月、治疗后6个月、治疗后12个月的PBMCs中miR-21、miR-223表达水平均高于有效组(P<0.05)。有效组随治疗时间延长,PBMCs中miR-21、miR-223表达水平逐渐降低(P<0.05)。无效组治疗前世界卫生组织(WHO)分期3期患者比例高于有效组(P<0.05)。miR-21、miR-223、治疗前WHO分期3期是影响HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗无效的独立危险因素(P<0.05)。结论miR-21、miR-223在一定程度上可反映HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗效果,治疗无效患者PBMCs中miR-21、miR-223表达水平相对较高。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征 抗逆转录病毒治疗 外周血单个核细胞 微小RNA-21 微小RNA-223
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