基于Wnt/β-catenin通路探讨拔毒生肌散对糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合的促进作用

目的探讨拔毒生肌散通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路对糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合的促进作用。方法随机将60只Wistar雄性大鼠分为正常对照组和糖尿病组。采用腹腔注射链脲佐菌素结合喂食高脂高糖饲料方法制备糖尿病模型。28 d后,对比正常对照组和糖尿病组大鼠的体质量和血糖,然后制备背部皮肤溃疡模型。造模成功的糖尿病大鼠分为模型组、拔毒生肌散组、一效膏组、清创胶组。各组用药14 d。在第7、14天,采用Image-pro plus 6.0软件测量各组大鼠创面愈合率,采用苏木素-伊红(HE)染色法检测肉芽组织病理变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肉芽组织晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)、晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)、Wnt1、β-catenin、糖原合成酶激-3β(glycogen synthase exciter-3β,GSK-3β)蛋白含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肉芽组织RAGE、Wnt、β-catenin、GSK-3βmRNA表达水平。结果与正常对照组比较,糖尿病组大鼠的体质量下降(P<0.01),血糖升高(P<0.01)。与正常对照组比较,模型组第7、14天创面愈合率均较低(P<0.01);肉芽组织中炎症细胞较多,成纤维细胞、胶原纤维和毛细血管数量较少;肉芽组织Wnt1、β-catenin mRNA表达水平较低(P<0.01),AGEs蛋白、RAGE、GSK-3β蛋白和mRNA含量较高(P<0.01)。与模型组比较,拔毒生肌散组第7、14天创面愈合率较高(P<0.01);肉芽组织AGEs蛋白、RAGE、GSK-3β蛋白和mRNA含量较低(P<0.05,P<0.01),Wnt1、β-catenin mRNA表达水平较高(P<0.01)。结论拔毒生肌散通过调节Wnt/β-catenin通路促进糖尿病大鼠皮肤溃疡的愈合。AGEs的沉积导致Wnt/β-catenin通路的抑制。